首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微循環(huán)的影響及作用機制

宋曉紅，王勝文

（南陽市第一人民醫(yī)院肛腸科，河南 南陽 473002）

微循環(huán)由毛細血管、微動脈以及毛細血管后微靜脈組成,在精細組織血流灌注的調節(jié)中發(fā)揮著主導作用[1]。正常的血液流態(tài)和微循環(huán)灌注是維持機體臟器、組織細胞正常運作的前提，但也會在生理或病理性刺激因子的作用下,發(fā)生紊亂或微循環(huán)障礙，進而導致組織細胞灌注不足引起缺血。微循環(huán)障礙作為許多疾病的基本病理改變和評價指標，與疾病的發(fā)生發(fā)展和轉歸存在密切的關系。首薈通便膠囊由枸杞子、何首烏、決明子、阿膠、人參、蘆薈、枳實、白術八味中藥構成,具有益氣養(yǎng)陰、瀉濁通便、排毒降脂以及改善胃腸功能等效用[2,3]，臨床上主要用于便秘的治療中。本研究通過建立小鼠腸系膜微循環(huán)障礙模型,探究首薈通便膠囊對腸系膜微循環(huán)和腸道功能的影響。

1 材料和方法

1.1 實驗動物 SPF 級昆明小鼠72 只，雌雄各半，8周齡，質量18～22g，購自北京維通利華有限公司[許可證號：SCXK(京)2017-0002]，飼養(yǎng)于室溫23℃～26℃，濕度50%～60%的SPF 級動物房內，自由飲食進水。

1.2 藥物和試劑 利復方血栓通膠囊購自廣東眾生藥業(yè)股份有限公司（國藥準字Z20030017），首薈通便膠囊購自魯南厚普制藥有限公司（國藥準字Z20150041），去甲腎上腺素購自美國Sigma 公司，微循環(huán)活體顯微鏡BH-2 購自日本OLYMPUS。

1.3 動物分組和給藥 昆明小鼠采用隨機數(shù)字表法分為對照組、模型組、復方血栓組、首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組、高劑量組，每組12 只，雌雄各半。首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組、高劑量組小鼠每日給予濃度為0.10g/kg、0.30g/kg和0.90g/kg的首薈通便膠囊灌胃，復方血栓組小鼠每日給予濃度為0.40g/kg的復方血栓灌胃，對照組和模型組給予等體積的生理鹽水灌胃，連續(xù)造模給藥7d。

1.4 小鼠腸系膜微循環(huán)障礙模型制備 實驗前小鼠禁食不禁水16h，末次給藥30min 后，腹腔注射40mg/kg的戊巴比妥鈉麻醉，備皮消毒，于右下腹部剪開2cm的切口，輕輕拉出一段空腸袢回盲部，平鋪在有機玻璃灌流小池上，37℃臺式液緩慢流過腸系膜,顯微鏡下放大并觀察回盲部微動脈和微靜脈,顯微攝錄系統(tǒng)測定各組小鼠給藥前腸系膜微動脈和微靜脈口徑、微靜脈流速，并統(tǒng)計毛細血管開放數(shù)量。模型組、復方血栓組、首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組、高劑量組分別滴加0.01ml 50mg/L的去甲腎上腺素，對照組滴加等劑量的生理鹽水，10min和30min 后再次測量上述指標的變化。Image-pro Plus 圖像分析軟件分析管徑變化,陰極射線管群點掃描法測定微靜脈血流速度。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計學軟件進行分析，計量資料采用平均數(shù)±標準差（）表示，組間比較采用t 檢驗；計數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微動脈管徑的影響 腎上腺素滴加前各組小鼠的腸系膜微動脈管徑無明顯差異（P＞0.05）。除對照組外，與腎上腺素滴加前比較，腎上腺素滴加10min 后各組小鼠的腸系膜微動脈管徑明顯縮?。≒＜0.05）。與對照組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后模型組小鼠腸系膜微動脈管徑縮?。≒＜0.05）；與模型組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的腸系膜微動脈管徑隨著時間的延長呈劑量依賴性增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微動脈管徑的影響（，μm）

表1 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微動脈管徑的影響（，μm）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與首薈通便膠囊低劑量組比較，cP＜0.05；與首薈通便膠囊中劑量組比較，dP＜0.05。

2.2 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈管徑的影響 腎上腺素滴加前各組小鼠的腸系膜微靜脈管徑無明顯差異（P＞0.05）。除對照組外，與腎上腺素滴加前比較，腎上腺素滴加10min 后各組小鼠的腸系膜微靜脈管徑明顯縮?。≒＜0.05）。與對照組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后模型組小鼠腸系膜微靜脈管徑縮小（P＜0.05）；與模型組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的腸系膜微靜脈管徑隨著時間的延長呈劑量依賴性增加，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈管徑的影響（，μm）

表2 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈管徑的影響（，μm）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與首薈通便膠囊低劑量組比較，cP＜0.05；與首薈通便膠囊中劑量組比較，dP＜0.05。

2.3 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈血流速度的影響 腎上腺素滴加前各組小鼠的腸系膜微靜脈血流速度無明顯差異（P＞0.05）。除對照組外,與腎上腺素滴加前比較,腎上腺素滴加10min 后各組小鼠的腸系膜微靜脈血流速度明顯減緩（P＜0.05）。與對照組比較,腎上腺素滴加10min和30min 后模型組小鼠腸系膜微靜脈血流速度減緩（P＜0.05）；與模型組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的腸系膜微靜脈血流速度隨著時間的延長逐漸加快，并呈明顯的劑量依賴效應，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈血流速度的影響（，μm/S）

表3 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜微靜脈血流速度的影響（，μm/S）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與首薈通便膠囊低劑量組比較，cP＜0.05；與首薈通便膠囊中劑量組比較，dP＜0.05。

2.4 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜毛細血管開放數(shù)的影響 腎上腺素滴加前各組小鼠的腸系膜毛細血管開放數(shù)無明顯差異（P＞0.05）。除對照組外，與腎上腺素滴加前比較，腎上腺素滴加10min 后各組小鼠腸系膜毛細血管開放數(shù)明顯下降（P＜0.05）。與對照組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后模型組小鼠腸系膜毛細血管開放數(shù)下降（P＜0.05）；與模型組比較，腎上腺素滴加10min和30min 后首薈通便膠囊低劑量組、中劑量組和高劑量組小鼠的腸系膜毛細血管開放數(shù)隨著時間的延長逐漸增加，并呈明顯的劑量依賴效應，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜毛細血管開放數(shù)的影響（，μm/S）

表4 首薈通便膠囊對小鼠腸系膜毛細血管開放數(shù)的影響（，μm/S）

注：與對照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與首薈通便膠囊低劑量組比較，cP＜0.05；與首薈通便膠囊中劑量組比較，dP＜0.05。

3 討論

微循環(huán)是機體循環(huán)系統(tǒng)最基礎的結構,在向全身臟器和組織運輸營養(yǎng)物質和氧氣、調節(jié)血管內液和組織內液、排泄代謝產物等方面發(fā)揮著至關重要的作用[4,5]。研究表明，微循環(huán)功能異常是誘發(fā)多臟器功能衰竭的關鍵因素[6]。當機體處于重度感染或危重病的狀態(tài)時,往往伴隨著微循環(huán)障礙的發(fā)生，主要表現(xiàn)為微血管閉塞或縮窄，微血流瘀滯或緩慢等[7-9]。腸系膜微循環(huán)系統(tǒng)作為機體最大的血管床之一，是研究臟器微循環(huán)的理想部位。本研究結果顯示，小鼠腸系膜給予腎上腺素刺激后，其微動脈和微靜脈管徑縮小，血流速度明顯減慢，毛細血管關閉增多,表明小鼠腸系膜微循環(huán)障礙模型制備成功，可用于后續(xù)實驗。

目前，對于首薈通便膠囊復方的研究較少，在臨床中的應用也主要集中在功能性便秘的治療中。既往研究表明，枸杞子、決明子、人參、蘆薈、白術可通過抑制腸道中有害菌群的數(shù)量，促進優(yōu)勢菌群的增殖，進而調整腸道內的菌群失調[10,11]。而阿膠、何首烏、枸杞子作為婦科治療卵巢功能障礙的常用藥物，具有抑制細胞凋亡的作用[12,13]。此外，蘆薈可促進胃腸吸收并具有抗癌活性，枸杞多糖對受氧化應激損傷的子宮內膜也具有較為顯著的保護作用[14,15]。由于腸道健康與腸道微循環(huán)正常功能的維持密切相關，首薈通便膠囊在便秘中的應用表明其在改善疏通經絡、胃腸功能障礙、促進胃腸蠕動、抗氧化應激損傷中發(fā)揮著重要作用，因此我們考慮首薈通便膠囊是否也在腸系膜微循環(huán)障礙發(fā)展中起到調節(jié)作用。我們的研究顯示，與腸系膜微循環(huán)障礙小鼠比較，采用不同劑量的首薈通便膠囊進行干預后，小鼠腸系膜微動脈和微靜脈管徑擴大，血流速度和毛細血管開放數(shù)增加，并且隨著首薈通便膠囊劑量的增加，這種改善更為顯著，提示首薈通便膠囊對腸系膜微循環(huán)障礙具有明顯的調節(jié)作用。

綜上所述，首薈通便膠囊可通過擴大腸系膜血管直徑、增加血流流速及毛細血管開放而顯著改善腎上腺素造成的微循環(huán)障礙。