宮頸癌篩查中應(yīng)用液基薄層細(xì)胞學(xué)聯(lián)合DNA倍體細(xì)胞檢測的臨床價(jià)值

潘 超，王晨莊，羅 思，葉玉嬋，梁 聰

（東莞市橫瀝醫(yī)院病理科，廣東東莞 523460）

宮頸癌是比較常見的一種婦科惡性腫瘤，在我國，宮頸癌的發(fā)病率占婦科惡性腫瘤的第2位，由于宮頸的位置和功能的特殊，導(dǎo)致早期宮頸癌患者多會忽視自身癥狀，以至于50%的宮頸癌患者就醫(yī)時(shí)已為中晚期，威脅患者的生命[1]。近幾年，宮頸癌篩查在我國得到了大力推廣，部分女性通過早期宮頸癌篩查得到了有效的治療和控制。陰道鏡病理活檢是篩查宮頸癌的一種有效方法，即從陰道上取一小塊或幾塊組織作病理檢查，以確定診斷，但是由于其具有一定的創(chuàng)傷性，因此患者接受度較低[2]。目前臨床上對于宮頸癌的篩查方法還有液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測和DNA倍體細(xì)胞檢測，這兩種方法均有一定的診斷價(jià)值，但是可能存在漏診情況[3]。因此本研究將該兩種方法聯(lián)合應(yīng)用，旨在探討TCT聯(lián)合DNA倍體細(xì)胞檢測在宮頸癌篩查中的檢出情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年12月至2020年12月于東莞市橫瀝醫(yī)院做健康體檢時(shí)70例疑似宮頸癌患者的臨床資料，年齡27～77歲，平均（43.43±1.26）歲；第1次性生活年齡19～28歲，平均年齡（23.49±2.16）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：均有婦科疾病的臨床癥狀，表現(xiàn)為陰道異常流血、異味、白帶異常者；均有過性生活且無家族性宮頸癌史者；未接受過子宮切除或?qū)m頸錐切除術(shù)者；臨床資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：近3個(gè)月內(nèi)服用過激素藥物者；合并卵巢囊腫或子宮肌瘤等其他婦科病變者；妊娠期婦女。本研究已經(jīng)院內(nèi)醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。

1.2 方法 所有研究對象均于檢查前3 d禁止性生活和陰道用藥，月經(jīng)期者則待月經(jīng)停止3～7 d后進(jìn)行檢查。

1.2.1 TCT檢測 將特制宮頸刷輕輕插入宮頸處，以順時(shí)針的方向輕輕轉(zhuǎn)動5～6圈，停留約15 s后，將收集到的細(xì)胞組織放入液基細(xì)胞保存液中保存，并用95%含量的乙醇固定標(biāo)本，經(jīng)巴氏染色后利用陰道細(xì)胞學(xué)的分類與伯塞斯達(dá)系統(tǒng)（TBS）[4]進(jìn)行診斷，可分為5類，正?；蜓装Y、不明意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞或不典型腺細(xì)胞、低度鱗狀上皮內(nèi)病變、高度鱗狀上皮內(nèi)病變、鱗狀細(xì)胞癌（SCC），以正?；蜓装Y為陰性，其余為陽性。

1.2.2 DNA倍體細(xì)胞檢測 使用無菌棉簽輕拭宮頸口處分泌物，在宮頸口以順時(shí)針方向轉(zhuǎn)動5～6圈，并放入指定樣本收集試管保存樣本，放至低溫箱，采集后需要在12 h內(nèi)盡快送檢，檢測環(huán)境溫度不超過28 ℃，標(biāo)本經(jīng)Feulgen染色后，分別檢測人乳頭瘤病毒（HPV）基因分型，以HPV基因型分布對應(yīng)判斷基因類型。結(jié)果可分為3類，1類以正常二倍體細(xì)胞為主，未見細(xì)胞核DNA指數(shù)＞ 2.5倍體異常細(xì)胞；2類以可見少量DNA倍體異常細(xì)胞，異常細(xì)胞數(shù)目為1～2個(gè)或細(xì)胞增殖比例為5%～10%；3類以可見DNA倍體異常細(xì)胞，異常細(xì)胞數(shù)目≥3個(gè)或細(xì)胞增殖比例＞ 10%，當(dāng)檢查結(jié)果為1類時(shí)為陰性，其余為陽性[5]。

1.2.3 陰道鏡病理活檢 研究對象取截石位，輕輕置入陰道鏡，通過陰道鏡觀察宮頸移行上皮和血管的變化情況，對病灶位置取材，在可疑病變部位留取樣本，取樣位置分別在3、6、9、12點(diǎn)，使用甲醛溶液固定以后送病理檢查。結(jié)果分為正常或炎癥、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）（其中CIN包括CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級）、SCC，并以CINⅠ級為陽性病變閾值[6]。

1.3 觀察指標(biāo) ①對比3種檢測方式的檢出情況。②以陰道鏡病理活檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對比3種檢測方式的檢出結(jié)果。③對比3種檢測方式的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%，特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，準(zhǔn)確度=（真陽性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%，陽性預(yù)測值=真陽性例數(shù)/（真陽性例數(shù)+假陽性例數(shù)）×100%，陰性預(yù)測值=真陰性例數(shù)/（假陰性例數(shù)+真陰性例數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，多組間計(jì)數(shù)資料比較采用χ2趨勢檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 檢出情況 70例疑似宮頸癌患者中經(jīng)病理確診正?；蜓装Y（陰性）22例，CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級、SCC分別為23例、16例、6例、3例，共48例。其中聯(lián)合檢測陰性與陽性（CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、SCC）符 合 率 分 別 為 100.00%、100.00%、93.75%、100.00%、100.00%，均高于DNA倍體細(xì)胞檢測的95.45%、95.65%、87.50%、83.33%、66.67% 及 TCT 檢測的 86.36%、86.96%、81.25%、83.33%、66.67%，但 3組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表1。

表1 不同檢測方式的檢出情況比較[例(%)]

2.2 檢出結(jié)果 70例疑似宮頸癌患者中陰性22例，陽性48例；經(jīng)TCT檢測發(fā)現(xiàn)，陰性27例，陽性43例，漏診8例；經(jīng)DNA倍體細(xì)胞檢測發(fā)現(xiàn)，陰性26例，陽性44例，漏診5例；經(jīng)聯(lián)合檢測發(fā)現(xiàn)，陰性23例，陽性47例，漏診1例，見表2。

表2 不同檢測方式與病理學(xué)檢查結(jié)果比較(例)

2.3 診斷效能 與聯(lián)合檢測比較，TCT檢測準(zhǔn)確度顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且聯(lián)合檢測敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值占比均高于單項(xiàng)檢測，準(zhǔn)確度高于DNA倍體細(xì)胞檢測，但組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見表3。

表3 不同檢測方式對宮頸癌的診斷效能比較(%)

3 討論

宮頸癌原發(fā)位置在子宮頸部，是惡性腫瘤的一種，發(fā)病年齡多為50歲以上中年女性，但由于當(dāng)下女性在職場和家庭生活中所受壓力較大，導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)病年齡有年輕化的發(fā)展趨勢。宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有一定的過程，在病變早期，上皮組織發(fā)生內(nèi)瘤樣病變，而隨著疾病進(jìn)展可出現(xiàn)早期浸潤，進(jìn)而發(fā)展為宮頸癌，因此，早期篩查、發(fā)現(xiàn)宮頸癌，有利于預(yù)防上皮內(nèi)瘤病變的進(jìn)展，從而降低宮頸癌的發(fā)生。研究表明，宮頸癌自身不具有傳染性，但是HPV會通過性接觸傳染，所以在性生活過程中采取安全防護(hù)措施十分必要[7]。

陰道鏡病理活檢通過直視下觀察宮頸病變部位，并可針對異常區(qū)域進(jìn)行組織活檢，具有較高的準(zhǔn)確率，但其屬于有創(chuàng)操作，且對可見組織的檢查存在一定的主觀性，因此，在一定程度上可影響病情判斷[8]。TCT檢查主要通過計(jì)算機(jī)與常規(guī)物理技術(shù)相結(jié)合，利用液基薄層細(xì)胞檢測技術(shù)，將宮頸黏液、炎性細(xì)胞、血液及上皮細(xì)胞更好地分離，從而觀察到宮頸脫落的上皮細(xì)胞中是否存在上皮內(nèi)瘤樣病變或是腫瘤，但其只能觀察細(xì)胞形態(tài)特征，而對組織結(jié)構(gòu)特征分辨率較低[9]。正常情況下，人體細(xì)胞的DNA數(shù)量是固定的，當(dāng)發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞可出現(xiàn)異常重組，而DNA倍體細(xì)胞檢測可利用計(jì)算機(jī)對樣本細(xì)胞進(jìn)行自動分析掃描，通過對病變位置的DNA含量的變化比較，能夠更加精準(zhǔn)地判斷出腫瘤的發(fā)生，而且DNA倍體檢測還可以觀察到人體遺傳基因變異的過程，一定程度上避免了主觀因素的影響[10]。本研究對70例疑似宮頸癌患者進(jìn)行了TCT檢測、DNA倍體細(xì)胞檢測和聯(lián)合檢測3種方式，并與最終的病理活檢結(jié)果做比較，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測陰性、陽性檢出符合率均高于單獨(dú)檢測，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且TCT檢測的準(zhǔn)確率可達(dá)84.29%，DNA倍體細(xì)胞檢測的準(zhǔn)確率可達(dá)91.43%，都可以較好地檢測出宮頸癌，但二者聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確率高達(dá)98.57%，可見TCT聯(lián)合DNA倍體細(xì)胞檢測能夠更加準(zhǔn)確地診斷出宮頸癌，而且其均為無創(chuàng)檢查，很大程度上降低了患者檢查過程的痛苦，對宮頸癌與癌前病變的篩查具有重要意義。

綜上，在宮頸癌篩查時(shí)，采用TCT聯(lián)合DNA倍體細(xì)胞檢測能夠更加準(zhǔn)確地診斷出宮頸癌與癌前病變，進(jìn)而及時(shí)阻止宮頸癌前病變的進(jìn)一步發(fā)展，同時(shí)，也為宮頸癌患者的及早發(fā)現(xiàn)提供了有效的診斷依據(jù)，而且檢查過程無痛苦，受檢者更易接受，值得臨床上的大力推廣與應(yīng)用。