尿液中紅細(xì)胞免疫球的檢測及其臨床意義

盧 佩， 丁振若， 鄭善鑾， 劉海波

（1. 空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710032；2. 陜西省中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710003）

通過多年對(duì)尿液中紅細(xì)胞形態(tài)的觀察，我們發(fā)現(xiàn)在不同泌尿系疾病中紅細(xì)胞形態(tài)會(huì)有所不同，并對(duì)臨床診斷有一定提示價(jià)值。本研究主要介紹在尿沉渣中發(fā)現(xiàn)的一種由小紅細(xì)胞緊密聚集成團(tuán)的特殊細(xì)胞，我們將其命名為紅細(xì)胞免疫球；并探討檢出紅細(xì)胞免疫球?qū)δI小球腎炎等泌尿系疾病進(jìn)行鑒別診斷與定位診斷的臨床價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年1月—2018年11月空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院腎內(nèi)科、泌尿外科住院患者260例（實(shí)驗(yàn)組），其中男135例、女125例，年齡（37±2）歲。260例患者中，腎盂腎炎患者50例，經(jīng)X線腎盂造影顯示異常改變；腎小球腎炎患者140例，其中IgA腎病患者32例、紫癜性腎小球腎炎患者40例、隱匿型腎小球腎炎患者38例，且均通過腎活檢確診，另有慢性腎小球腎炎患者30例；尿路感染患者60例，其中膀胱炎患者22例、尿道炎患者38例均有尿急、尿頻、尿痛等尿路刺激癥狀，膀胱鏡、尿道鏡和細(xì)菌培養(yǎng)異常；膀胱腫瘤患者10例，經(jīng)膀胱鏡、電子計(jì)算機(jī)斷層掃描、磁共振成像檢查確診。以同期100名體檢健康者作為對(duì)照組，其中男52名、女48名，年齡（39±2）歲，對(duì)照者X線腎盂造影均無異常改變，腎功能檢查、B超等各項(xiàng)檢查均正常。

1.2 方法

收集所有研究對(duì)象新鮮中段晨尿10 mL，430×g離心5 min，棄上清液，留取0.2 mL沉淀，混勻后取0.1 mL沉渣涂片，用高倍鏡全片檢查尋找紅細(xì)胞免疫球，檢測要求2 h內(nèi)完成。全片發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞免疫球≥1個(gè)按陽性計(jì)算，并通過免疫熒光染色對(duì)比試驗(yàn)確定；采用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體的方法進(jìn)行熒光素細(xì)胞染色[1]。檢測多型紅細(xì)胞百分比，記錄>75%的例數(shù)。EURostarⅢplus熒光顯微鏡、熒光染液購自歐蒙醫(yī)學(xué)診斷（中國）有限公司。BX53顯微鏡購自日本OLYMPUS公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 紅細(xì)胞免疫球的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)

在高倍鏡下，紅細(xì)胞免疫球是一群小紅細(xì)胞黏附聚集成的團(tuán)狀物，常有絲狀物纏繞，也可有膜狀物包裹，形態(tài)不規(guī)則，可呈圓形或橢圓形，每個(gè)細(xì)胞之間結(jié)合緊密，看不到膜間隔，有部分已融合在一起，見圖1。加熒光標(biāo)記兔抗人免疫球蛋白熒光抗體后，出現(xiàn)明顯黃綠色熒光。紅細(xì)胞免疫球經(jīng)兔抗人免疫球蛋白熒光染色后可呈明亮黃綠色熒光，單個(gè)紅細(xì)胞已融成一體，看不到單個(gè)紅細(xì)胞胞界，見圖2。

圖1 濕片中紅細(xì)胞免疫球形態(tài)（×400）

圖2 熒光染色后紅細(xì)胞免疫球形態(tài)（×400）

2.2 非紅細(xì)胞免疫球紅細(xì)胞聚集特點(diǎn)

在高倍鏡下觀察非紅細(xì)胞免疫球紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象，可見每個(gè)紅細(xì)胞之間結(jié)合較松散，一般是由黏液絲黏附在一起，形狀不規(guī)則，表面沒有膜狀物包裹，見圖3。單純紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象表現(xiàn)為熒光染色后可見紅細(xì)胞松散結(jié)合，可見單個(gè)紅細(xì)胞胞界，沒有融合，也沒有包膜包裹，見圖4。

圖3 濕片中紅細(xì)胞聚集形態(tài)（×400）

圖4 熒光染色后紅細(xì)胞聚集形態(tài)（×400）

2.3 不同泌尿系疾病患者尿液中紅細(xì)胞免疫球和多型紅細(xì)胞觀察結(jié)果

尿液中紅細(xì)胞免疫球多見于IgA腎病，以及由微生物、內(nèi)毒素引起的急性腎小球腎炎、過敏性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎，多出現(xiàn)在早期未經(jīng)治療患者的尿液中；多型紅細(xì)胞常見于IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎等疾病，多型紅細(xì)胞>75%為腎性紅細(xì)胞。見表1。

表1 不同泌尿系疾病患者尿液中紅細(xì)胞免疫球和多型紅細(xì)胞觀察結(jié)果

3 討論

紅細(xì)胞免疫球在尿沉渣濕片中為圓形、橢圓形紅細(xì)胞團(tuán)塊，是數(shù)個(gè)小紅細(xì)胞黏附聚集在一起形成的成團(tuán)單個(gè)紅細(xì)胞，間隔不清晰，相互融合，不易解離。紅細(xì)胞免疫球周邊光滑，用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體染色后，呈明亮黃綠色，有熒光[2]，說明表面被免疫球蛋白覆蓋。已有研究證實(shí)，在腎小球、腎小管病變患者尿中免疫球蛋白數(shù)量有所增加[3-4]，借此可區(qū)分是腎性紅細(xì)胞，還是非腎性紅細(xì)胞。而一般紅細(xì)胞聚集形態(tài)不規(guī)則，紅細(xì)胞間結(jié)合松散。單個(gè)紅細(xì)胞胞界清晰，無融合現(xiàn)象。熒光染色后呈黃綠色熒光，但結(jié)合疏松，形態(tài)多樣，周邊不光滑。本研究結(jié)果顯示，IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎患者尿沉渣中均能檢出紅細(xì)胞免疫球，且陽性率較高；慢性腎小球腎炎紅細(xì)胞免疫球陽性率不高。觀察尿沉渣中紅細(xì)胞免疫球有助于鑒別紅細(xì)胞來源，有利于泌尿系統(tǒng)疾病的鑒別診斷與定位診斷。

紅細(xì)胞免疫球在腎小球腎炎初期未經(jīng)治療患者尿中出現(xiàn)率較高，患者紅細(xì)胞形態(tài)也較差[5]，多出現(xiàn)在急性期。本研究結(jié)果顯示，紅細(xì)胞免疫球在IgA腎病中檢出率最高，陽性率為93.7%；在紫癜性腎小球腎炎中檢出率也較高，陽性率為87.5%；隱匿型腎小球腎炎患者的陽性率為65.8%；慢性腎小球腎炎的陽性率為16.7%。紅細(xì)胞免疫球在免疫因素介導(dǎo)的急性腎小球腎炎中檢出率較高，而在慢性腎小球腎炎中檢出率較低，在尿路感染和泌尿系腫瘤患者尿液中沒有發(fā)現(xiàn)。提示通過檢測紅細(xì)胞免疫球陽性率，可鑒別腎小球腎炎種類，結(jié)合紅細(xì)胞形態(tài)可鑒別紅細(xì)胞來源是腎性紅細(xì)胞，還是非腎性紅細(xì)胞。紅細(xì)胞免疫球的形成可能由免疫反應(yīng)介導(dǎo)，但具體形成機(jī)制還需進(jìn)一步研究。

尿液紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測作為血尿來源定位初篩試驗(yàn)[6]，患者留取標(biāo)本簡單，且無創(chuàng)傷性，能較為準(zhǔn)確地判斷血尿來源。多型紅細(xì)胞指紅細(xì)胞大小不等，形態(tài)呈2種及以上多型性變化，顯微鏡下根據(jù)尿液中多型紅細(xì)胞的百分比來判斷是否為腎源性血尿，與病理學(xué)診斷的符合率高，能快速鑒別尿液中紅細(xì)胞是否來源于腎臟，已越來越廣泛地被應(yīng)用于臨床腎病篩查。尿液中紅細(xì)胞免疫球和紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)腎臟疾病，特別是腎小球腎炎有重要提示作用。