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      干擾素誘導(dǎo)蛋白16在兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥中的應(yīng)用價(jià)值

      2021-09-28 09:36:42虞莉莎楊慧潔殷雪瑞葛寒宇王慧燕鄭曉群
      檢驗(yàn)醫(yī)學(xué) 2021年9期
      關(guān)鍵詞:中位數(shù)百分比急性期

      虞莉莎, 楊慧潔, 殷雪瑞, 葛寒宇, 王慧燕, 鄭曉群

      (溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 育英兒童醫(yī)院檢驗(yàn)科,浙江 溫州 325027)

      傳染性單核細(xì)胞增多癥(infectious mononucleosis,IM)是好發(fā)于兒童及青少年的傳染性疾病,主要由EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)急性感染所致。該病早期具有多種臨床表現(xiàn),無特異性,診斷難度較大[1]。干擾素誘導(dǎo)蛋白16(interferon-induced protein 16,IFI16)是新近發(fā)現(xiàn)的一種能識別細(xì)胞DNA的分子,是PYHIN家族成員之一,由1個(gè)PYHIN和2個(gè)HIN結(jié)構(gòu)域組成。IFI16不但能識別多種病毒的雙鏈DNA,也能被單鏈DNA活化[2],在抗病毒感染過程中起著重要作用。有研究結(jié)果顯示,IFI16是參與EBV生命周期的獨(dú)特宿主因子蛋白[3],但I(xiàn)FI16是否存在于IM患兒血清中尚未見報(bào)道。為此,本研究擬通過分析IM患兒血清IFI16水平及其與外周血淋巴細(xì)胞亞群等指標(biāo)之間的相關(guān)性,探討IFI16在IM中的應(yīng)用價(jià)值。

      1 材料和方法

      1.1 研究對象

      選取2018年11月—2019年9月在溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院確診并住院的IM患兒73例(IM組),其中男39例、女34例,年齡(4.7±2.5)歲。將發(fā)病3~7 d的IM患兒納入急性期組,發(fā)病15~30 d的IM患兒納入恢復(fù)期組[4],有20例患兒的病程包括急性期和恢復(fù)期。另選取同期健康體檢兒童75名(正常對照組),其中男46名、女29名,年齡(5.1±2.3)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡≤14周歲;(2)無病毒或細(xì)菌感染;(3)無慢性病史。2個(gè)組之間性別和年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),患兒家屬均知情同意。

      1.2 病例入選、排除標(biāo)準(zhǔn)

      參照第7版《褚福棠實(shí)用兒科學(xué)》[5]中的IM診斷標(biāo)準(zhǔn):(1)不規(guī)則發(fā)熱、扁桃體炎、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、肝腫大、脾腫大中3項(xiàng)以上陽性;(2)外周血異型淋巴細(xì)胞增多(≥10%)或總數(shù)>1.0×109/L;(3)EBV DNA陽性;(4)急性期EBV抗衣殼抗原IgM抗體陽性。具有(1)中的臨床表現(xiàn),且實(shí)驗(yàn)室檢查符合(2)、(3)、(4)中2條及以上者即可診斷。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并細(xì)菌感染;(2)合并其他病毒感染;(3)有慢性疾病史。

      1.3 方法

      采集所有對象外周靜脈血,乙二胺四乙酸二鉀抗凝,采集后立即采用BC-5390血液分析儀(深圳邁瑞公司)及配套試劑檢測外周血白細(xì)胞(white blood cell,WBC)計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞百分比(the percentage of lymphocyte,LYMPH%),采用FACSCanto Ⅱ流式細(xì)胞儀(美國BD公司)及配套試劑檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群。同時(shí)制作血涂片,采用CX41型光學(xué)顯微鏡(日本奧林巴斯公司)計(jì)數(shù)異型淋巴細(xì)胞,計(jì)算異型淋巴細(xì)胞百分比。另采集正常對照者及IM患兒急性期、恢復(fù)期的靜脈血,室溫下自然凝固,4 110×g離心10 min,分離血清,-70 ℃冰箱保存,統(tǒng)一檢測血清IFI16。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血清IFI16,試劑購自生工生物工程(上海)股份有限公司,檢測儀器為Sunrise酶標(biāo)儀(瑞士TECAN公司)。嚴(yán)格按試劑說明書及標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

      采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以±s表示,2個(gè)組之間比較采用獨(dú)立t檢驗(yàn)。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)(M)[四分位數(shù)(P25~P75)]表示,組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn),配對比較采用Wilcoxon符號秩檢驗(yàn)。各項(xiàng)指標(biāo)之間的相關(guān)性評價(jià)采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 IM組與正常對照組各項(xiàng)指標(biāo)的比較

      IM組WBC計(jì)數(shù)、LYMPH%、異型淋巴細(xì)胞百分比及血清IFI16水平均高于正常對照組(P<0.01)。見表1。

      表1 IM組和正常對照組各項(xiàng)指標(biāo)的比較

      2.2 IM患兒急性期與恢復(fù)期血清IFI16水平的比較

      IM患兒急性期血清IFI16水平為105.8(46.0~137.0)ng/L,明顯低于恢復(fù)期[132.5(114.0~158.0)ng/L](P<0.05)。有7例患兒恢復(fù)期血清IFI16水平低于急性期中位數(shù)水平,13例患兒恢復(fù)期高于急性期中位數(shù)水平。見圖1。

      圖1 IM患兒急性期和恢復(fù)期血清IFI16水平的比較

      2.3 IM患兒血清IFI16與其他指標(biāo)的相關(guān)性

      Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示,IM患兒血清IFI16與LYMPH%、CD4+T細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值呈正相關(guān)(r值分別為0.24、0.27、0.29,P<0.05),與異型淋巴細(xì)胞百分比、CD3+T細(xì)胞百分比、CD8+T細(xì)胞百分比、CD19+B細(xì)胞百分比及CD16+CD56+自然殺傷細(xì)胞無相關(guān)性(r值分別為-0.13、-0.18、-0.19、0.12、0.09,P>0.05)。

      3 討論

      IM是一種主要由EBV感染引起的,通過口咽分泌物在兒童及青少年間進(jìn)行傳播的急性傳染病。IFI16是新近發(fā)現(xiàn)的一種DNA感受器。在病毒DNA的刺激下,細(xì)胞核中的IFI16被激活,并易位至細(xì)胞質(zhì),與干擾素基因刺激蛋白(stimulator of interferon gene,STING)結(jié)合,傳遞信號,誘導(dǎo)Ⅰ型干擾素的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)[6-7]。當(dāng)皰疹病毒感染細(xì)胞時(shí),IFI16可識別病毒DNA并引發(fā)一系列炎癥反應(yīng)[8]。IFI16水平的下降可導(dǎo)致EBV裂解期轉(zhuǎn)錄水平升高,基因拷貝數(shù)增加[3]。因此,IFI16在EBV感染過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。本研究結(jié)果顯示,IM患兒血清IFI16明顯升高(P<0.01),且急性期低于恢復(fù)期(P<0.05)。由此可見,IFI16可能參與了IM的發(fā)病過程。

      IFI16作為真核細(xì)胞中最重要的固有免疫傳感器之一,在宿主抗DNA病毒免疫方面有著重要的作用。細(xì)胞被不同的病毒感染以及不同的IFI16亞細(xì)胞定位均會(huì)引起不同的免疫反應(yīng)。有研究結(jié)果顯示,IFI16能夠識別皰疹病毒DNA,但皰疹病毒表達(dá)的病毒蛋白pUL83可以與IFI16的吡啶結(jié)構(gòu)域結(jié)合,從而阻止IFI16寡聚和隨后的免疫信號傳導(dǎo),逃避宿主免疫[9]。為了逃避宿主免疫,EBV能產(chǎn)生某些在功能或結(jié)構(gòu)上可以模擬細(xì)胞因子或細(xì)胞因子受體的蛋白,干擾細(xì)胞因子或其受體的正常功能,從而影響細(xì)胞免疫[10]。本研究結(jié)果顯示,IM患兒血清IFI16水平與LYMPH%、CD4+T細(xì)胞百分比及CD4+/CD8+比值呈正相關(guān)(r值分別為0.24、0.27、0.29,P<0.05),提示細(xì)胞免疫應(yīng)答參與了IM的發(fā)病過程。

      本研究結(jié)果還顯示,有7例患兒恢復(fù)期IFI16水平低于急性期中位數(shù)水平,13例患兒恢復(fù)期IFI16水平高于急性期中位數(shù)水平。這可能與這些患兒存在肝功能損傷或因個(gè)體差異造成恢復(fù)時(shí)間不同有關(guān)。后續(xù)將擴(kuò)大樣本量,并觀察更長時(shí)間,以進(jìn)一步分析IFI16在IM中的作用。

      綜上所述,血清IFI16在IM的輔助診斷和預(yù)后判斷中均有一定的價(jià)值,或可作為IM輔助診斷和預(yù)后判斷的指標(biāo)。

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