卵巢切除對(duì)大鼠骨骼結(jié)構(gòu)與力學(xué)特征的早期影響△

郭興滿，馬寶榮，姚倩倩，陳華芳，秦 健

（山東第一醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山東泰安 271000）

人口老齡化問(wèn)題日益加劇，與年齡相關(guān)的骨骼老化病變包括骨質(zhì)疏松癥和骨骼脆性也隨之增加，老年人生活質(zhì)量受到了直接甚至嚴(yán)重的影響［1，2］。骨質(zhì)疏松癥屬于骨代謝性疾病，I型原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥又稱為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致患者骨折風(fēng)險(xiǎn)增加，據(jù)報(bào)道，2016年中國(guó)60歲以上老年人骨質(zhì)疏松癥中女性患病率約為男性兩倍，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥已成為備受社會(huì)關(guān)注的中老年女性健康問(wèn)題［3～5］。

去卵巢（ovariectomy，OVX）雌性大鼠是研究雌激素缺乏引起骨質(zhì)疏松癥而廣泛使用的動(dòng)物模型?，F(xiàn)階段，Micro-CT由于其獨(dú)特的3D形態(tài)學(xué)測(cè)量技術(shù)以及直觀的骨骼微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)特點(diǎn)，已成為評(píng)估大鼠和其他小動(dòng)物離體骨形態(tài)和微結(jié)構(gòu)的“金標(biāo)準(zhǔn)”［6］。劉奮斗等［7］報(bào)道骨質(zhì)疏松早期骨小梁最先發(fā)生改變，并可伴隨生物力學(xué)特性的變化。

目前，已有不少學(xué)者從骨量、骨代謝等方面報(bào)道絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的特點(diǎn)［8～10］，但研究去卵巢大鼠骨微結(jié)構(gòu)和骨強(qiáng)度隨時(shí)間變化的報(bào)道很少，為了更好的理解絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的早期骨改變，本實(shí)驗(yàn)結(jié)合組織形態(tài)學(xué)，利用Micro-CT評(píng)估大鼠雌激素缺乏早期椎骨和長(zhǎng)骨骨微結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)并通過(guò)生物力學(xué)試驗(yàn)探究骨強(qiáng)度的特性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供50只12周齡、無(wú)特定病原體（specific pathogen free,SPF）級(jí)、雌性Sprague Dawley（SD）大鼠。采用隨機(jī)數(shù)字表法將動(dòng)物分為兩組，每組25只。本研究由山東第一醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物管理與使用機(jī)構(gòu)委員會(huì)批準(zhǔn)，并按照國(guó)家衛(wèi)生研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用指南進(jìn)行。

1.2 實(shí)驗(yàn)處理

去勢(shì)組：行腹部切口，分別切除大鼠雙側(cè)卵巢，縫合切口。

假手術(shù)組：僅行腹部切口，不切除卵巢，縫合切口。

術(shù)后，所有大鼠在符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)施環(huán)境中飼養(yǎng)，給予標(biāo)準(zhǔn)的鼠糧和水。于術(shù)后1、4、8、12、16周時(shí)兩組各隨機(jī)選取5只大鼠，觀察兩組大鼠毛發(fā)、爪子顏色、體形與運(yùn)動(dòng)狀態(tài)等，并記錄大鼠體重。頸椎脫臼處死動(dòng)物，完整取出L4、L5椎體及雙側(cè)股骨，分別置于70%乙醇中保存。

1.3 Micro-CT骨計(jì)量檢測(cè)

將大鼠左股骨及L5椎體附著組織去除，使用Mi?cro-CT 80掃描儀（SCANCO Medical AG,Switzerland）進(jìn)行掃描。掃描條件為電壓55 kVp，電流145 μA，180°旋轉(zhuǎn)掃描，間隔時(shí)間為221 ms。感興趣區(qū)（re?gion of interest,ROI）包括股骨干和腰椎全部松質(zhì)骨區(qū)。掃描結(jié)束后用自帶軟件計(jì)量分析各指標(biāo)，包括：骨體積組織體積分?jǐn)?shù)（percent trabecular area,BV/TV）（%）、骨小梁連接密度（connectivity density,Conn.D）（1/mm3）、骨小梁數(shù)量 （trabecular number,Tb.N）（1/mm）、骨小梁厚度 （trabecular thickness,Tb.Th）（μm）和骨小梁分離度（trabecular separation,Tb.Sp）（μm）。

1.4 力學(xué)檢測(cè)

去除大鼠右股骨及L4椎骨標(biāo)本附著的軟組織，用鋸齒形外科剪刀剪下椎小關(guān)節(jié)及上下終板，得到類似于圓柱體的椎體樣本。在Instron生物力學(xué)測(cè)試機(jī)進(jìn)行壓應(yīng)力模量測(cè)試，測(cè)右股骨樣本時(shí)將髕骨一側(cè)向上置于下壓板上，測(cè)L4椎體時(shí)將其軸向放置于下壓板上，施壓力載荷驟降40%時(shí)終止試驗(yàn)，連續(xù)測(cè)量3次，同時(shí)記錄每個(gè)樣本的彈性模量(Elastic Modu?lus,E,MPa)。

1.5 組織病理學(xué)檢測(cè)

L5椎體、左股骨標(biāo)本經(jīng)脫鈣、脫水后石蠟包埋，制備5 μm組織切片，行蘇木精-伊紅（Hematoxylin and Eosin,HE）染色，在裝有照相機(jī)的顯微鏡下觀察骨小梁結(jié)構(gòu)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 大鼠體重

兩組動(dòng)物不同時(shí)間點(diǎn)體重測(cè)量結(jié)果見(jiàn)表1，隨時(shí)間推移，兩組動(dòng)物體重均顯著增加（P<0.05）。術(shù)后1周兩組間體重的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。術(shù)后4～16周，去勢(shì)組的體重均顯著大于假手術(shù)組（P<0.05）。

表1 兩組動(dòng)物不同時(shí)間點(diǎn)體重測(cè)量結(jié)果（±s）與比較

表1 兩組動(dòng)物不同時(shí)間點(diǎn)體重測(cè)量結(jié)果（±s）與比較

images/BZ_58_1300_2651_1479_2719.pngimages/BZ_58_1479_2651_1754_2719.pngimages/BZ_58_1754_2651_2112_2719.png術(shù)后1周275.00±21.21271.00±19.150.564images/BZ_58_1300_2514_1479_2583.pngimages/BZ_58_1479_2514_1754_2583.pngimages/BZ_58_1754_2514_2112_2583.pngimages/BZ_58_2112_2514_2276_2583.pngimages/BZ_58_2112_2651_2276_2719.pngimages/BZ_58_1300_2787_1479_2855.png術(shù)后8周術(shù)后16周images/BZ_58_1479_2787_1754_2855.pngimages/BZ_58_1754_2787_2112_2855.pngimages/BZ_58_2112_2787_2276_2855.png395.20±34.70 459.40±37.98images/BZ_58_1754_2923_2112_2991.pngimages/BZ_58_1300_2923_1479_2991.pngimages/BZ_58_1479_2923_1754_2991.png330.40±9.15 353.60±27.54 0.016 0.009images/BZ_58_2112_2923_2276_2991.png

2.2 Micro-CT骨計(jì)量檢測(cè)

兩組動(dòng)物L(fēng)5椎體標(biāo)本Micro-CT骨計(jì)量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。隨時(shí)間推移，去勢(shì)組BV/TV、Conn.D和Tb.N顯著下降，而Tb.Sp顯著增加（P<0.05），但是Tb.Th無(wú)顯著改變（P>0.05）；假手術(shù)組不同時(shí)間點(diǎn)間的BV/TV、Conn.D、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp均無(wú)顯著變化（P>0.05）。術(shù)后1周，兩組間BV/TV、Conn.D、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；術(shù)后4～16周，去勢(shì)組BV/TV和Tb.Th均顯著低于假手術(shù)組（P<0.05）；術(shù)后12、16周，與假手術(shù)組相比，去勢(shì)組的Tb.N顯著降低，而Tb.Sp顯著增加（P<0.05）；術(shù)后12周，去勢(shì)組的Conn.D顯著低于假手術(shù)組（P<0.05）。

表2 兩組動(dòng)物L(fēng)5椎體Micro-CT檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

表2 兩組動(dòng)物L(fēng)5椎體Micro-CT檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

images/BZ_59_204_1114_523_1178.pngimages/BZ_59_523_1114_772_1178.pngimages/BZ_59_772_1114_1060_1178.pngBV/TV（%）images/BZ_59_204_986_523_1050.pngimages/BZ_59_523_986_772_1050.pngimages/BZ_59_772_986_1060_1050.pngimages/BZ_59_1060_986_1186_1050.pngimages/BZ_59_1060_1114_1186_1178.pngimages/BZ_59_204_1243_523_1307.pngimages/BZ_59_772_1243_1060_1307.pngimages/BZ_59_1060_1243_1186_1307.pngimages/BZ_59_523_1243_772_1307.pngimages/BZ_59_204_1371_523_1435.png0.36±0.05 0.30±0.03<0.001images/BZ_59_523_1371_772_1435.pngimages/BZ_59_772_1371_1060_1435.pngimages/BZ_59_1060_1371_1186_1435.pngimages/BZ_59_204_1499_523_1563.png0.45±0.03 0.44±0.03 0.978 0.032 0.008images/BZ_59_523_1499_772_1563.pngimages/BZ_59_772_1499_1060_1563.pngimages/BZ_59_1060_1499_1186_1563.pngimages/BZ_59_204_1627_523_1691.pngimages/BZ_59_523_1627_772_1691.pngimages/BZ_59_772_1627_1060_1691.pngimages/BZ_59_1060_1627_1186_1691.pngimages/BZ_59_204_1755_523_1820.pngimages/BZ_59_523_1755_772_1820.pngimages/BZ_59_772_1755_1060_1820.pngimages/BZ_59_1060_1755_1186_1820.pngimages/BZ_59_523_1884_772_1948.pngimages/BZ_59_204_1884_523_1948.pngimages/BZ_59_772_1884_1060_1948.pngimages/BZ_59_1060_1884_1186_1948.png103.50±22.76 93.97±10.40 68.81±8.30 118.87±15.56 85.61±11.90 93.06±17.80 0.548 0.310 0.095images/BZ_59_204_2012_523_2076.pngimages/BZ_59_772_2012_1060_2076.pngimages/BZ_59_523_2012_772_2076.pngimages/BZ_59_1060_2012_1186_2076.pngimages/BZ_59_204_2140_523_2204.pngimages/BZ_59_523_2140_772_2204.pngimages/BZ_59_772_2140_1060_2204.pngimages/BZ_59_1060_2140_1186_2204.pngimages/BZ_59_204_2268_523_2333.pngimages/BZ_59_523_2268_772_2333.pngimages/BZ_59_772_2268_1060_2333.pngimages/BZ_59_1060_2268_1186_2333.png4.36±0.33 3.89±0.36 0.003 4.62±0.53 4.92±0.29 0.575images/BZ_59_204_2397_523_2461.pngimages/BZ_59_523_2397_772_2461.png0.284<0.001images/BZ_59_772_2397_1060_2461.pngimages/BZ_59_1060_2397_1186_2461.pngimages/BZ_59_204_2525_523_2589.pngimages/BZ_59_523_2525_772_2589.pngimages/BZ_59_772_2525_1060_2589.pngimages/BZ_59_1060_2525_1186_2589.pngimages/BZ_59_204_2653_523_2717.pngimages/BZ_59_523_2653_772_2717.pngimages/BZ_59_772_2653_1060_2717.pngimages/BZ_59_1060_2653_1186_2717.pngimages/BZ_59_523_2781_772_2845.pngimages/BZ_59_204_2781_523_2845.pngimages/BZ_59_772_2781_1060_2845.pngimages/BZ_59_1060_2781_1186_2845.png0.08±0.00 0.07±0.00 0.07±0.00 0.08±0.00 0.08±0.00 0.08±0.00 0.944 0.021 0.029images/BZ_59_204_2910_523_2974.pngimages/BZ_59_772_2910_1060_2974.pngimages/BZ_59_523_2910_772_2974.pngimages/BZ_59_1060_2910_1186_2974.pngimages/BZ_59_204_3038_523_3102.pngimages/BZ_59_523_3038_772_3102.pngimages/BZ_59_772_3038_1060_3102.pngimages/BZ_59_1060_3038_1186_3102.pngimages/BZ_59_204_3166_523_3230.png術(shù)后4周術(shù)后12周P值術(shù)后1周術(shù)后8周術(shù)后16周Tb.N（1/mm）術(shù)后4周術(shù)后12周P值術(shù)后1周術(shù)后8周術(shù)后16周Tb.Sp（μm）術(shù)后4周術(shù)后12周P值images/BZ_59_523_3166_772_3230.png0.20±0.02 0.23±0.02 0.004images/BZ_59_772_3166_1060_3230.png0.19±0.02 0.17±0.01 0.465images/BZ_59_1060_3166_1186_3230.png0.463<0.001

兩組動(dòng)物股骨標(biāo)本Micro-CT骨計(jì)量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3。隨時(shí)間推移，去勢(shì)組BV/TV、Conn.D和Tb.N顯著下降（P<0.05），而Tb.Sp顯著增加（P<0.05），但是Tb.Th無(wú)顯著改變（P>0.05）；假手術(shù)組不同時(shí)間點(diǎn)間的BV/TV、Conn.D、Tb.N、Tb.Th和Tb.Sp均無(wú)顯著變化（P>0.05）。術(shù)后4～16周，與假手術(shù)相比，去勢(shì)組的BV/TV、Conn.D、Tb.N顯著降低（P<0.05），Tb.Sp顯著增加（P<0.05），但是相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，兩組間Tb.Th的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表3 兩組動(dòng)物Micro-CT左股骨檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

表3 兩組動(dòng)物Micro-CT左股骨檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

images/BZ_59_1283_1158_1558_1221.pngimages/BZ_59_1558_1158_1836_1221.pngimages/BZ_59_1836_1158_2125_1221.pngBV/TV（%）images/BZ_59_1283_1032_1558_1095.pngimages/BZ_59_1558_1032_1836_1095.pngimages/BZ_59_1836_1032_2125_1095.pngimages/BZ_59_2125_1032_2276_1095.pngimages/BZ_59_2125_1158_2276_1221.pngimages/BZ_59_1283_1283_1558_1346.pngimages/BZ_59_1836_1283_2125_1346.pngimages/BZ_59_2125_1283_2276_1346.pngimages/BZ_59_1558_1283_1836_1346.pngimages/BZ_59_1283_1409_1558_1472.png0.06±0.02 0.05±0.01<0.001images/BZ_59_1558_1409_1836_1472.pngimages/BZ_59_1836_1409_2125_1472.pngimages/BZ_59_2125_1409_2276_1472.pngimages/BZ_59_1283_1535_1558_1598.png0.15±0.04 0.12±0.05 0.325 0.016 0.008images/BZ_59_1558_1535_1836_1598.pngimages/BZ_59_1836_1535_2125_1598.pngimages/BZ_59_2125_1535_2276_1598.pngimages/BZ_59_1283_1660_1558_1723.pngimages/BZ_59_1558_1660_1836_1723.pngimages/BZ_59_1836_1660_2125_1723.pngimages/BZ_59_2125_1660_2276_1723.pngimages/BZ_59_1283_1786_1558_1849.pngimages/BZ_59_1558_1786_1836_1849.pngimages/BZ_59_1836_1786_2125_1849.pngimages/BZ_59_2125_1786_2276_1849.pngimages/BZ_59_1558_1912_1836_1975.pngimages/BZ_59_1283_1912_1558_1975.pngimages/BZ_59_1836_1912_2125_1975.pngimages/BZ_59_2125_1912_2276_1975.png47.99±18.23 22.02±6.78 15.23±3.13 45.97±21.62 62.31±3.87 45.56±6.57 1.000 0.008 0.008images/BZ_59_1283_2037_1558_2100.pngimages/BZ_59_1836_2037_2125_2100.pngimages/BZ_59_1558_2037_1836_2100.pngimages/BZ_59_2125_2037_2276_2100.pngimages/BZ_59_1283_2163_1558_2226.pngimages/BZ_59_1558_2163_1836_2226.pngimages/BZ_59_1836_2163_2125_2226.pngimages/BZ_59_2125_2163_2276_2226.pngimages/BZ_59_1283_2289_1558_2352.pngimages/BZ_59_1558_2289_1836_2352.pngimages/BZ_59_1836_2289_2125_2352.pngimages/BZ_59_2125_2289_2276_2352.png1.18±0.27 1.01±0.24<0.001 3.17±0.51 2.40±0.76 0.209images/BZ_59_1283_2415_1558_2477.pngimages/BZ_59_1558_2415_1836_2477.png0.008 0.008images/BZ_59_1836_2415_2125_2477.pngimages/BZ_59_2125_2415_2276_2477.pngimages/BZ_59_1283_2540_1558_2603.pngimages/BZ_59_1558_2540_1836_2603.pngimages/BZ_59_1836_2540_2125_2603.pngimages/BZ_59_2125_2540_2276_2603.pngimages/BZ_59_1283_2666_1558_2729.pngimages/BZ_59_1558_2666_1836_2729.pngimages/BZ_59_1836_2666_2125_2729.pngimages/BZ_59_2125_2666_2276_2729.pngimages/BZ_59_1558_2792_1836_2854.pngimages/BZ_59_1283_2792_1558_2854.pngimages/BZ_59_1836_2792_2125_2854.pngimages/BZ_59_2125_2792_2276_2854.png0.06±0.00 0.07±0.00 0.07±0.00 0.07±0.00 0.07±0.00 0.07±0.00 0.421 0.690 0.690images/BZ_59_1283_2917_1558_2980.pngimages/BZ_59_1836_2917_2125_2980.pngimages/BZ_59_1558_2917_1836_2980.pngimages/BZ_59_2125_2917_2276_2980.pngimages/BZ_59_1283_3043_1558_3106.pngimages/BZ_59_1558_3043_1836_3106.pngimages/BZ_59_1836_3043_2125_3106.pngimages/BZ_59_2125_3043_2276_3106.pngimages/BZ_59_1283_3169_1558_3231.png術(shù)后4周術(shù)后12周P值術(shù)后1周術(shù)后8周術(shù)后16周Tb.N（1/mm）術(shù)后4周術(shù)后12周P值術(shù)后1周8周術(shù)后16周Tb.Sp（μm）術(shù)后4周術(shù)后12周P值images/BZ_59_1558_3169_1836_3231.png0.90±0.24 1.04±0.25<0.001images/BZ_59_1836_3169_2125_3231.png0.32±0.05 0.44±0.12 0.480images/BZ_59_2125_3169_2276_3231.png0.008 0.008

2.3 力學(xué)實(shí)驗(yàn)

兩組動(dòng)物椎體和股骨標(biāo)本的壓應(yīng)力模量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表4。隨術(shù)后時(shí)間推移，去勢(shì)組L4椎體彈性模量無(wú)顯著變化（P>0.05），而假手術(shù)組L4椎體的彈性模量顯著增加（P<0.05）。術(shù)后4～16周，去勢(shì)組L4椎體的彈性模量均小于假手術(shù)組，但兩組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表4 兩組動(dòng)物椎體、股骨彈性模量檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

表4 兩組動(dòng)物椎體、股骨彈性模量檢測(cè)結(jié)果（±s）與比較

images/BZ_60_1310_380_1713_501.pngimages/BZ_60_1310_564_1713_627.pngimages/BZ_60_1713_380_1938_501.pngimages/BZ_60_1713_564_1938_627.pngimages/BZ_60_1938_380_2139_501.pngimages/BZ_60_1938_564_2139_627.pngL4椎體彈性模量（MPa）images/BZ_60_2139_380_2277_501.pngimages/BZ_60_2139_564_2277_627.pngimages/BZ_60_1310_690_1713_752.pngimages/BZ_60_1713_690_1938_752.pngimages/BZ_60_1938_690_2139_752.pngimages/BZ_60_2139_690_2277_752.pngimages/BZ_60_1310_815_1713_878.pngimages/BZ_60_1713_815_1938_878.pngimages/BZ_60_1938_815_2139_878.pngimages/BZ_60_2139_815_2277_878.png8.30±5.53 14.05±9.05 0.345 9.42±2.12 14.97±5.02 0.005images/BZ_60_1310_941_1713_1004.pngimages/BZ_60_1713_941_1938_1004.png0.548 0.754images/BZ_60_1938_941_2139_1004.pngimages/BZ_60_2139_941_2277_1004.pngimages/BZ_60_1310_1067_1713_1130.pngimages/BZ_60_1713_1067_1938_1130.pngimages/BZ_60_1938_1067_2139_1130.pngimages/BZ_60_2139_1067_2277_1130.pngimages/BZ_60_1310_1193_1713_1256.pngimages/BZ_60_1713_1193_1938_1256.pngimages/BZ_60_1938_1193_2139_1256.pngimages/BZ_60_2139_1193_2277_1256.png術(shù)后4周術(shù)后12周P值術(shù)后1周術(shù)后8周術(shù)后16周images/BZ_60_1713_1319_1938_1382.pngimages/BZ_60_1310_1319_1713_1382.png4.43±1.93 11.68±2.79 15.16±4.78images/BZ_60_1938_1319_2139_1382.png8.47±1.25 13.03±4.81 18.37±7.13 0.025 0.602 0.251images/BZ_60_2139_1319_2277_1382.png

隨術(shù)后時(shí)間推移，去勢(shì)組股骨的彈性模量顯著增加（P<0.05），而假手術(shù)組股骨標(biāo)本的彈性模量亦增加，但不同時(shí)間點(diǎn)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。術(shù)后4～16周，去勢(shì)組股骨標(biāo)本的彈性模量均小于假手術(shù)組，但兩組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.4 組織學(xué)觀察

組織學(xué)觀察所見(jiàn)見(jiàn)圖1。與假手術(shù)組相比，去勢(shì)組大鼠L5椎體和股骨頭標(biāo)本，隨時(shí)間推移，骨小梁數(shù)量減少，間隙增寬，骨小梁連續(xù)性變差。

圖1 去勢(shì)動(dòng)物術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)組織結(jié)構(gòu)變化（HE，×20） 1a～1e:術(shù)后1、4、8、12、16周去勢(shì)組大鼠L5椎體標(biāo)本鏡下像，隨時(shí)間推移，骨小梁數(shù)量減少，間隙增寬，骨小梁連續(xù)性變差 1f～1j:術(shù)后1、4、8、12、16周去勢(shì)組大鼠左股骨頭標(biāo)本鏡下像，隨時(shí)間推移，骨小梁數(shù)量減少，間隙增寬，骨小梁連續(xù)性變差

3 討論

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，但年齡增長(zhǎng)導(dǎo)致的骨骼微環(huán)境改變是其主要原因。人體衰老的先兆多是性激素水平開(kāi)始下降，男性雄激素水平一生中整體呈平緩式降低，而女性雌激素水平則為突然式下降［3］，因此絕經(jīng)后女性骨量狀態(tài)普遍比同齡男性差。有文獻(xiàn)報(bào)道絕經(jīng)后女性體重有上升趨勢(shì)［11］，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之類似，去勢(shì)組大鼠在術(shù)后4周體重明顯增加。

3個(gè)月月齡的幼鼠大約相當(dāng)于人類20～25歲［12］，體重、骨骼與性器官大致發(fā)育成熟。早有學(xué)者表明，對(duì)于雌激素缺乏骨小梁比骨皮質(zhì)更先作出反應(yīng)［13］。作者利用Micro-CT評(píng)估去卵巢術(shù)后骨小梁微結(jié)構(gòu)短期內(nèi)的變化，發(fā)現(xiàn)去勢(shì)組大鼠股骨Conn.D、Tb.N及Tb.Sp發(fā)生改變較腰椎早，去勢(shì)組大鼠椎體Conn.D在各時(shí)間點(diǎn)持續(xù)減少，Zeitoun等［14］報(bào)道骨小梁連接指標(biāo)可能與骨小梁重構(gòu)有關(guān)，并據(jù)Mosekilde等［11］描述大鼠骨小梁可發(fā)生重構(gòu)但是少見(jiàn)，因而本實(shí)驗(yàn)去勢(shì)組大鼠是否有重構(gòu)現(xiàn)象仍需進(jìn)一步探究。

有研究表明，卵巢切除術(shù)后脛骨、股骨骨丟失主要是由骨小梁消失引起，腰椎骨丟失主要是因骨小梁變?。?5，16］。本實(shí)驗(yàn)亦觀察到去勢(shì)組大鼠股骨的Tb.Sp在術(shù)后8周最高（67.69%）同時(shí)Tb.N也最低，說(shuō)明股骨骨小梁分離度增加主要是由于骨小梁數(shù)目減少；去勢(shì)組大鼠椎體的Tb.Sp在術(shù)后8周較高（9.52%）則主要是因骨小梁變薄（12.98%）。另外在術(shù)后16周時(shí)，去勢(shì)組大鼠椎體Tb.Sp達(dá)到最高（32.00%），此時(shí)多是由于骨小梁數(shù)目下降（35.67%），與術(shù)后8周表現(xiàn)不同。Shahrezaee等［17］報(bào)道經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)雌性大鼠在去卵巢術(shù)后3個(gè)月達(dá)到骨質(zhì)疏松狀態(tài)。本研究中，Micro-CT測(cè)得去勢(shì)組大鼠椎體、股骨骨量自術(shù)后4周下降，同時(shí)鏡下觀察去勢(shì)組大鼠骨小梁形態(tài)在術(shù)后4周有所變化，至術(shù)后12周骨小梁中斷、變薄稀疏明顯，可見(jiàn)Micro-CT在評(píng)估股骨、腰椎骨量與微結(jié)構(gòu)方面既敏感又準(zhǔn)確。

除松質(zhì)骨微結(jié)構(gòu)外，生物力學(xué)特性也是評(píng)價(jià)骨強(qiáng)度的重要指標(biāo)。眾所周知，骨骼力學(xué)特性基本由骨皮質(zhì)決定，在早期骨質(zhì)疏松癥中尚不足以引起股骨力學(xué)結(jié)構(gòu)的改變［13，14］，本實(shí)驗(yàn)去勢(shì)組大鼠股骨彈性模量?jī)H在術(shù)后1周組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Mosekilde等［11］研究表明，正常雌性大鼠在3～9個(gè)月時(shí)，椎體力學(xué)特性和骨骼硬度會(huì)增加，本實(shí)驗(yàn)假手術(shù)組大鼠腰椎在術(shù)后1～12周所承受的負(fù)荷量大致呈上升趨勢(shì)，去勢(shì)組大鼠腰椎負(fù)荷量變化與假手術(shù)組相似。

本實(shí)驗(yàn)仍存在一些局限性，各時(shí)間點(diǎn)每組大鼠的數(shù)量較少，個(gè)體差異可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。Laib等［15］報(bào)道在去卵巢術(shù)后的第1周內(nèi)骨小梁迅速消失，本實(shí)驗(yàn)以去卵巢術(shù)后1周為基線，未對(duì)術(shù)前骨微結(jié)構(gòu)進(jìn)行評(píng)估。另外，由于設(shè)備受限，在測(cè)量股骨力學(xué)特性時(shí)未按大多數(shù)文獻(xiàn)中的“三點(diǎn)彎曲”模式進(jìn)行［12］，但因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)測(cè)量的方法一致，所以測(cè)得的彈性模量應(yīng)仍有一定參考價(jià)值。

綜上所述，在雌性大鼠雌激素缺乏的早期階段，Micro-CT定量測(cè)量骨微結(jié)構(gòu)變化是可靠的，在評(píng)估股骨與椎體骨小梁方面同樣敏感，并且去卵巢大鼠早期的力學(xué)特性與同齡正常雌性大鼠相差不大。