動物源性食品中β-受體激動劑殘留檢測技術研究進展

張 蕾，馮騰壘，曹 楠，高慶輝，林文秀，張 瓊

（1.石家莊市畜產品和獸藥飼料質量檢測中心 050041；2. 石家莊市農業(yè)行政綜合執(zhí)法支隊 050000）

β-受體激動劑具有類似腎上腺素的功能，俗稱瘦肉精，其母核為苯乙醇胺類結構，根據取代基不同，可分為苯酚類和苯胺類，其基本化學結構式如圖1所示。

圖1 β-受體激動劑基本結構

β-受體激動劑在醫(yī)學上具有興奮呼吸道平滑肌、降低微血管通透性的作用，因此常被用于治療支氣管疾病。該類化合物還能夠增加動物體內蛋白質含量及瘦肉率，提高飼料的利用率，因此常被一些不法商家用于畜牧行業(yè)中，但其性質穩(wěn)定，在動物源性食品中代謝困難，容易聚積。當人體食入含有β-受體激動劑的動物源性食品后，會造成人體神經系統(tǒng)損傷，因此該類化合物被嚴禁用于動物飼養(yǎng)過程中。目前常用的檢測方法有液相-質譜聯用法、高效液相色譜法、酶聯免疫檢測技術、表面增強拉曼光譜等，本文綜述了β-受體激動劑常用檢測方法，以其能夠為未來動物源性食品中該類化合物的殘留檢測提供依據。

1 液相-質譜聯用法

液相色譜-串聯質譜法檢測化合物具有靈敏度高、特異性強等特點，常被用于檢測畜產品中的β-受體激動劑類。劉新輝等在前處理過程采用酸水解法，并利用超高效液相色譜-串聯質譜法(UHPLC-MS)檢測畜產品中β-受體激動劑類物質，檢測限達到0.43～0.50μg/kg，回收率為80.2%～106.0%，且與國家標準方法相比，靈敏度高，前處理操作簡單。羅輝泰等利用具有混合分離功能的新型色譜柱，結合同位素稀釋法，建立了高效液相色譜-質譜串聯法，可同時檢測豬肉中26種β-受體激動劑，檢測限達到0.03～0.1μg/kg，定量限為0.1～1.0μg/kg。郭平等在豬尿樣品中測定β-受體激動劑時，前處理采用乙酸銨緩沖液和β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進行酶解，并經陽離子固相萃取柱凈化后，建立了超高效液相色譜-串聯質譜方法(UHPLC-MS /MS)檢測豬尿液品中22種β-受體激動劑的方法，由于該試驗過程優(yōu)化了前處理過程中酶解過程和固相萃取柱的淋洗方式，提高了抗干擾能力與方法靈敏度。

2 高效液相色譜法

高效液相色譜法(HPLC)是以液體作為流動相，并結合高壓輸液系統(tǒng)將具有不同極性的流動相泵入含有色譜柱中，在柱內利用各成分在兩相系統(tǒng)中吸附能力不同，從而實現對目標化合物與雜質分子的分離檢測。李娜等以甲醇-磷酸二氫鈉混合液作為流動相，用高效液相色譜結合紫外檢測器，測定豬肉及血清中的鹽酸克倫特羅含量，檢測限為1.8μg/kg，加標回收率為87.4%～99.2%。朱曉艾等采用C18為色譜柱，用乙腈：0.02mol/L乙酸銨溶液(0.1%甲酸)=25：75作為流動相，建立了高效液相色譜法檢測豬肉中鹽酸克倫特羅的檢測方法，檢測限達到25μg/kg，回收率在88.55%～94.03%。張群等對樣品前處理方法和色譜條件進行優(yōu)化，延長超聲提取時間，利用C18固相萃取柱凈化，以甲醇∶磷酸二氫鈉=40∶60作為流動相，結合反相高效液相色譜建立了鮮肉中鹽酸克倫特羅的殘留檢測方法，檢測限達到0.01 μg/mL，加標回收率在75%～82.5%之間。

3 酶聯免疫檢測技術

酶聯免疫檢測技術(ELISA)是指以酶為標記物，以抗原和抗體之間的特異性結合為基礎的一種分析方法，其特點是靈敏度高、操作簡便，適用于大批量樣品中β-受體激動劑的殘留檢測。孫明君等利用ELISA方法建立了進出口食用動物與飼料中的鹽酸克倫特羅的殘留檢測方法，該試驗了確立了包被抗原的最適質量濃度以及抗體的最佳稀釋度，檢測限達到0.05ng/mL，加標回收率為94.52%。

4 表面增強拉曼光譜

拉曼光譜屬于分子振動光譜，可以反映分子的特征結構，且利用拉曼光譜進行檢測具有分析時間短、前處理過程簡單、損耗少等特點，但是直接用常規(guī)拉曼光譜儀進行檢測，目標物檢測限難以達到要求。因此，在應用時常加入表面增強劑，以增強化合物的散射信號。甘盛等以銀納米顆粒溶膠作為表面信號增強劑，利用拉曼光譜技術實現對硫酸特布他林、鹽酸班布特羅、鹽酸氯丙那林等3種β-受體激動劑的定性和定量檢測；近年來，表面增強拉曼光譜法不僅能用于檢測動物源性食品、動物尿液中的β-受體激動劑的殘留檢測，還可用于飼料中β-受體激動劑的檢測分析，但該方法穩(wěn)定性較差，還需進一步進行探索完善。

5 展望

中國目前針對動物源性食品中β-受體激動劑的殘留檢測建立了數量眾多的檢測中心，但β-受體激動劑扔被不法分子作為生長促進劑用于動物飼養(yǎng)階段，所以在現有檢測技術的基礎上有必要開發(fā)靈敏度高、檢測速度快、準確性好的分析方法。