枳椇子泡騰顆粒的制備工藝優(yōu)化研究

何 丹, 王夢男, 戴雅吉

（1.安徽省藥品審評查驗中心，安徽 合肥 230051；2. 安徽中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，安徽 合肥 230038；3. 安徽省第二人民醫(yī)院 藥學(xué)部，安徽 合肥 230041）

枳椇子為鼠李科植物枳椇Hovenia dulcisThunb的干燥成熟果實，別名拐棗、木蜜、樹蜜等[1-3]。枳椇子始載于《唐本草》，在《本草綱目》《 雷公炮制論》《救荒本草》《醫(yī)林纂要》等多部醫(yī)藥著作中均有收載，常用于治酒醉、煩熱、口渴、嘔吐、二便不利等癥，泡酒服亦能舒筋絡(luò)[4]。在我國，枳椇子資源豐富，應(yīng)用廣泛。據(jù)文獻報道[5-7]，枳椇子主要含生物堿類、黃酮類、皂苷類、有機酸類、糖類等成分，能有效減輕酒精誘導(dǎo)的氧化性肝損傷，顯著降低丙氨酸和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶和甘油三酯的水平，起到解酒和保肝的作用，此外，它具有抗腫瘤、抗衰老、抗纖維化、抑制組胺釋放、抑制中樞神經(jīng)等多方面的作用[8-10]。

泡騰顆粒劑具有攜帶方便、崩解快速、服用方便、起效迅速等優(yōu)點[11]?；诖?，本試驗對枳椇子泡騰顆粒的制備工藝進行了優(yōu)化研究，以總黃酮成分中蘆丁及泡騰顆粒的泡騰時間等為主要評價指標(biāo)，采用正交設(shè)計考察了其提取工藝和泡騰顆粒的制備工藝，并對其工藝進行優(yōu)化。通過對枳椇子泡騰顆粒劑制備的研究，為中藥在解酒保肝領(lǐng)域的應(yīng)用提供實踐基礎(chǔ)，亦為中藥現(xiàn)代化研究提供新的思路和方法。

1 儀器與材料

1.1 實驗儀器

DF–1型集熱式磁力攪拌器（江蘇金壇市金城國盛實驗儀器廠）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）；ZF-2型三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠）；KQ–200KDB型高功率數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；HH-4型數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇晶玻實驗儀器廠）；CP225D型十萬分之一電子天平（德國賽多利斯集團）；GZX-9240型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）。

1.2 材料

無水乙醇（分析純，上海蘇懿化學(xué)試劑有限公司）；蘆丁（標(biāo)準品，上海華藍化學(xué)科技有限公司）；氫氧化鈉（分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；硝酸鋁（分析純，上海振欣試劑廠）；亞硝酸鈉（分析純，海瀾化學(xué)工業(yè)有限公司）；藥用淀粉（遼寧東源藥業(yè)有限公司）；糊精（化學(xué)純，青島海洋化工有限公司）；檸檬酸（分析純，上海中試化工總公司）；碳酸氫鈉（分析純，上海中試化工總公司）；聚乙二醇6000（化學(xué)純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）；木糖醇（分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司）。

1.3 藥材

枳椇子藥材購自安徽亳州，經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學(xué)彭華勝教授鑒定為鼠李科植物枳椇Hovenia dulcisThunb的干燥成熟果實。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準曲線的繪制

精密稱取120 ℃干燥至恒重的蘆丁對照品33.2 mg，置于100 mL容量瓶中，用80%乙醇溶解并定容,配成濃度為0.332 mg/mL的對照品溶液，精密量取上述對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分別置于50 mL容量瓶中，加5% NaNO2溶液2.0 mL，搖勻，放置6 min，加10% Al（NO3）3溶液2.0 mL，搖勻，放置6 min，加入4% NaOH溶液20.0 mL，用80%乙醇稀釋至刻度，混勻，放置15 min，待測。

在500 nm波長處，以相應(yīng)試劑作空白，分別測吸光度。以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，濃度（C，mg/mL）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準曲線[7]。A= 8.7 × 103C+ 3.8 ×103（ 0 ～ 0.032 mg/mL），R2= 0.994 4。

2.2 提取工藝的考察

2.2.1 回流法 精密稱取枳椇子粉末10 g，置提取器中，以乙醇濃度（A）、提取溫度（B）、提取時間（C）為因素，以浸膏收率與浸膏中總黃酮含量為指標(biāo)，設(shè)計了正交試驗[12-15]，結(jié)果見表1、表2。

表1 回流提取法正交試驗因素水平表Tab. 1 Factors and levels of orthogonal design of reflux extraction

表2 回流提取法L9（34） 正交試驗表Tab. 2 The results of orthogonal test in reflux extraction

由表2看出，影響提取工藝的主次因素為乙醇濃度、提取溫度和提取時間，綜合分析得出回流法提取最佳工藝為A2B3C1，即70%乙醇，90 ℃提取3次，每次0.5 h。表3與表4的方差分析表明，乙醇濃度對回流法提取工藝有明顯影響。

表3 回流提取法中浸膏率方差分析表Tab. 3 Variance analysis of extraction rate

表4 回流提取法中黃酮含量方差分析表Tab. 4 Variance analysis of flavone content in reflux extraction

2.2.2 超聲法 精密稱取枳椇子粉末10 g，置于提取器中，以乙醇濃度（A）、提取溫度（B）、提取時間（C）為因素，以浸膏收率與浸膏中總黃酮含量為指標(biāo)，設(shè)計了正交試驗，結(jié)果見表5、表6。

表5 超聲提取法正交試驗因素水平表Tab. 5 Factors and levels of orthogonal design of ultrasonic extraction

表6 超聲提取法L9（34） 正交試驗表Tab. 6 The results of orthogonal test in ultrasonic extraction

綜合考察浸膏率和總黃酮含量2個指標(biāo)，由正交試驗結(jié)果可以看出，乙醇濃度對浸膏率影響最大，優(yōu)水平為A2；溫度對總黃酮含量影響最大，優(yōu)水平為B3，即70%乙醇，90 ℃提取3次，每次15 min。表7與表8的方差分析表明，溫度對超聲法提取工藝有明顯影響。

表7 超聲提取法中浸膏率方差分析表Tab. 7 Variance analysis of extraction rate in ultrasonic extraction

表8 超聲提取法中黃酮含量方差分析表Tab. 8 Variance analysis of flavone content in ultrasonic extraction

2.2.3 索氏提取法 精密稱取枳椇子粉末10 g，置于提取器中，以乙醇濃度（A）、提取溫度（B）、提取時間（C）為因素，以浸膏收率與浸膏中總黃酮含量為指標(biāo)，設(shè)計了正交試驗，結(jié)果見表9、表10。

表9 索氏提取法正交試驗因素水平表Tab. 9 Factors and levels of orthogonal design of soxhlet extraction

由表10可以看出，在索氏提取法中，實驗1、2、3、4、5、7、9不能提取出相關(guān)物質(zhì)，僅有實驗6、8可正常提取。

表10 索氏提取法L9（34）正交試驗表表Tab. 10 The results of orthogonal test in soxhlet extraction

2.3 制粒工藝考察

將聚乙二醇加熱熔融后, 加入碳酸氫鈉攪拌（聚乙二醇6000與碳酸氫鈉的比例為0.5∶1），冷卻后，粉碎成細粉（過60目篩）。取淀粉3 g、糊精2 g、木糖醇3 g，加入藥物浸膏1.6 g，以檸檬酸含量（E）、碳酸氫鈉含量（F）、是否包裹為因素（G），每個因素選取3水平，見表11，以pH值與泡騰時間為指標(biāo)，按L9（34）正交試驗表進行制粒，50 ℃以下干燥，結(jié)果見表12。

表11 制粒正交試驗因素水平表Tab. 11 Factors and levels of orthogonal design of pellet

通過表12正交試驗結(jié)果，再結(jié)合實際進行綜合分析，確定影響制粒工藝的主要因素為是否包裹，其次是碳酸氫鈉含量和檸檬酸含量，明確制粒最佳工藝為E1F1G1，即用10%檸檬酸、10%碳酸氫鈉進行包裹。

表12 制粒正交試驗結(jié)果及分析表Tab. 12 The results of orthogonal test in pellet

3 討論

結(jié)合文獻[11]及前期實驗結(jié)果，在回流法、超聲波提取法及索氏提取法中，索氏提取法相比較前兩種方法所需反應(yīng)條件較高，在所設(shè)定的實驗條件下無法完成相應(yīng)的提取，必須提高乙醇濃度或提高相應(yīng)溫度才能完成相應(yīng)提取，而提高乙醇濃度會增加相應(yīng)生產(chǎn)成本，提高提取溫度可能會破壞提取物，故在實際生產(chǎn)中，為降低生產(chǎn)成本，盡可能保證提取物不被破壞，可將索氏提取法排除。進一步的試驗結(jié)果表明乙醇回流法的提取效果明顯優(yōu)于超聲波提取法與索氏提取法，最終確定枳椇子的提取工藝為70%乙醇，90 ℃提取3次，每次0.5 h。以最佳工藝提取后，測得的浸膏收率與總黃酮含量均優(yōu)于正交試驗中的任何一組，說明該工藝穩(wěn)定可行。

另外，傳統(tǒng)的方法不能有效地將酸源和堿源進行隔離，因此存在泡騰顆粒引濕失效的問題。本試驗采用聚乙二醇6000包裹碳酸氫鈉，有效地隔離了酸源與堿源，有利于制劑的穩(wěn)定，使泡騰劑能發(fā)揮最佳效果。在泡騰顆粒制備正交試驗中也證明包裹對pH值和泡騰時間影響最大。因此制粒最佳工藝為10%檸檬酸、10%碳酸氫鈉，采用5%聚乙二醇包裹碳酸氫鈉。

4 結(jié)論

枳椇子作為我國傳統(tǒng)中藥，具有療效確切、應(yīng)用廣泛的特點。枳椇子泡騰顆粒劑攜帶方便、易保存、質(zhì)量可控，優(yōu)于其傳統(tǒng)的復(fù)方制劑。因此在優(yōu)化枳椇子提取工藝的基礎(chǔ)上，本試驗對枳椇子泡騰顆粒的制備工藝加以研究，具有一定的創(chuàng)新性和實用性，同時也為枳椇子在制劑方面研究與探索提供參考。在現(xiàn)有工藝基礎(chǔ)上，下一步將在枳椇子提取與制備泡騰顆粒的試驗過程中采用響應(yīng)面法分析進行提取工藝考察，制備口感更好的泡騰顆粒。