• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    安徽省克氏原螯蝦白斑綜合征病毒和蝦虹彩病毒檢測及分析

    2021-09-11 00:01:14陳紅蓮王永杰鮑俊杰張靜孫雯
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年17期
    關(guān)鍵詞:克氏原螯蝦

    陳紅蓮 王永杰 鮑俊杰 張靜 孫雯

    摘要 2020年檢測安徽省滁州、安慶和合肥的20個稻田養(yǎng)殖的200只克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)鰓組織中白斑綜合征病毒和蝦虹彩病毒,結(jié)果發(fā)現(xiàn)白斑綜合征病毒陽性檢出率為97.5%,病毒含量達106拷貝/mg的檢出率與克氏原螯蝦死亡率呈正相關(guān)。蝦虹彩病毒陽性檢出率為13%,只在滁州的3個和合肥的2個稻田的養(yǎng)殖蝦中檢出。

    關(guān)鍵詞 克氏原螯蝦;白斑綜合征病毒;蝦虹彩病毒

    中圖分類號 S945.4 文獻標(biāo)識碼 A

    文章編號 0517-6611(2021)17-0085-03

    doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.17.023

    Abstract Detection of white spot syndrome virus and shrimp hemocyte iridescent virus was performed in 200 red swamp crayfish (Procambarus clarkii) from 20 paddy fields in Chuzhou,Anqing,Hefei of Anhui Province in 2018.The results showed that the positive rate of WSSV in gill tissue of crayfish was 97.5%.The detection rate of 106 WSSV copies /mg gill tissue was positively correlated with the mortality rate of crayfish.The positive rate of shrimp hemocyte iridescent virus in crayfish was 13%,and was only detected positively in crayfish from 3 paddy fields in Chuzhou and 2 paddy fields in Hefei.

    Key words Procambarus clarkii;White spot syndrome virus;Shrimp hemocyte iridescent virus

    克氏原螯蝦(Procambarus clarkii)肉質(zhì)細(xì)嫩,深受消費者喜愛,是一種十分重要的甲殼類經(jīng)濟動物[1]。近10年來,克氏原螯蝦養(yǎng)殖業(yè)快速發(fā)展,在我國水產(chǎn)行業(yè)占有重要的經(jīng)濟地位。2018年克氏原螯蝦產(chǎn)量比2017年產(chǎn)量翻倍,達164萬t[2]。2018、2019、2020年安徽省克氏原螯蝦養(yǎng)殖面積分別為10.67萬、20.93萬和27.20萬hm2,呈急劇增加態(tài)勢。因此,該蝦疾病的防控對產(chǎn)業(yè)發(fā)展起舉足輕重的作用。

    2006年,白斑綜合征首次在浙江舟山養(yǎng)殖克氏原螯蝦中暴發(fā)[3]。近些年,WSSV在全國各地克氏原螯蝦中檢出[2],患病蝦死亡率高達52%[4],給該蝦的養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。2014年蝦淋巴細(xì)胞虹彩病毒(shrimp hemocyte iridescent virus,SHIV)首次被報道引起浙江省凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)出現(xiàn)暴發(fā)性疾病,引起蝦大量死亡[5]。目前,病毒性疾病尚無有效治療藥物,疫情一旦暴發(fā),不可控制。筆者在安徽省滁州市、安慶市、合肥市稻田采集克氏原螯蝦進行WSSV和SHIV檢測,對蝦的產(chǎn)量及死亡情況進行跟蹤調(diào)查,以期為稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦防控這2種病毒性疾病提供研究基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 克氏原螯蝦樣本采集

    2020年5月下旬至6月初在安徽省合肥市、安慶市和滁州市20個稻田采集養(yǎng)殖的克氏原螯蝦進行檢測,每個稻田采集10只蝦,體重15~20 g?;铙w帶回實驗室,及時采集蝦的鰓組織,1只蝦為1個樣本,放置-80 ℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2 WSSV熒光定量PCR檢測

    取適量克氏原螯蝦鰓組織進行研磨,用Qiagen DNeasy Blood&Tissue Kit提取DNA作為PCR擴增模板。對抽提的DNA采用OIE的WSSV熒光定量PCR方法進行擴增[6]。制備含擴增片段的質(zhì)粒,用WSSV熒光定量PCR方法擴增,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,進行定量分析。

    1.3 SHIV PCR檢測

    采用農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在SHIV監(jiān)測計劃中推薦的套式PCR方法進行檢測。PCR為50 μL反應(yīng)體系:DEPC水33.5 μL,10×PCR緩沖液5.0 μL(含1.5 mmol/L MgCl2),4×dNTP混合物4.0 μL(2.5 μmol/L),引物各1.0 μL(20 μmol/L),Taq DNA聚合酶0.5 μL(5.0×106 U/L),模板DNA 5.0 μL。PCR使用的引物與反應(yīng)條件見表1。PCR產(chǎn)物用1%瓊脂糖凝膠進行電泳分析。

    1.4 克氏原螯蝦發(fā)病情況

    稻田均為稻蝦連作種養(yǎng)模式,一年養(yǎng)殖一茬克氏原螯蝦,4—5月輪捕蝦上市,6月初開始種植水稻。統(tǒng)計蝦的產(chǎn)量,觀察蝦的發(fā)病情況,統(tǒng)計蝦的死亡量,計算死亡率。

    1.5 WSSV感染試驗

    取0.1 g患病克氏原螯蝦鰓組織,用5 mL三羥甲基氨基甲烷氯化鈉EDTA緩沖劑(0.05 mol/L Tris,0.1 mol/L NaCl,0.001 mol/L EDTA,pH 7.4)勻漿,4 ℃、 6 000 r/min離心20 min,上清用0.45 μm PVDF膜過濾,稀釋103倍,第二腹節(jié)注射克氏原螯蝦20只,10 μL/只稀釋液,觀察蝦的死亡情況。取10只瀕臨死亡克氏原螯蝦鰓組織進行研磨,抽提蝦鰓組織的DNA采用OIE的WSSV實時熒光定量PCR方法進行擴增,進行定量分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 克氏原螯蝦WSSV檢測

    200只克氏原螯蝦的WSSV熒光定量PCR檢測陽性率為97.5%,其中,15個稻田的蝦WSSV PCR陽性檢出率為100%(表2)。統(tǒng)計各稻田蝦鰓中WSSV含量為106拷貝/mg以上的檢出率:8和18號稻田的檢出率分別為100%、90%;9和15號稻田的檢出率分別為60%、30%;4、6、10和13號稻田的檢出率為20%~40%;1、2、5、7和12號稻田的檢出率均為10%。另7個稻田養(yǎng)殖蝦鰓中WSSV含量均在104拷貝/mg及以下。

    2.2 克氏原螯蝦SHIV檢測 200個克氏原螯蝦鰓組織樣本,首輪SHIV PCR檢測結(jié)果均為陰性,第二輪PCR陽性檢出率為13%(表3)。滁州2、3和4號稻田養(yǎng)殖蝦的SHIV陽性檢出率分別為70%、20%、70%;合肥的19、20號稻田養(yǎng)殖蝦的SHIV陽性檢出率均為50%;安慶的7個稻田養(yǎng)殖蝦的SHIV檢測結(jié)果均為陰性。

    2.3 克氏原螯蝦發(fā)病情況

    20個稻田克氏原螯蝦產(chǎn)量均在2 550 kg/hm2以下。所有稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦均出現(xiàn)不同程度死亡,8和18號稻田的蝦死亡率最高,達30%;9和15號稻田的蝦死亡率分別達20%、15%;4、6、10和13號稻田的蝦死亡率均為10%。1、2、5、7和12號稻田的蝦死亡率為5%,其他7個稻田的蝦死亡率為2%。

    2.4 WSSV感染試驗 人工感染試驗結(jié)果顯示,克氏原螯蝦在注射感染后5 d內(nèi)全部死亡。10只克氏原螯蝦鰓中WSSV含量為2.23×108~6.39×108拷貝/mg(圖1)。

    3 討論

    SHIV只在滁州和合肥的部分稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦中檢出,且首輪PCR陽性率為零,表明SHIV尚未在安徽省養(yǎng)殖克氏原螯蝦中大規(guī)模流行,且病毒攜帶量比較低,不會造成該蝦死亡。該研究使用OIE的熒光定量PCR方法檢測WSSV,比WSSV套式PCR檢測方法的靈敏度(20個拷貝)高,為4個拷貝[6]。WSSV在20個稻田養(yǎng)殖克氏原螯蝦中呈高流行趨勢,7個稻田養(yǎng)殖蝦的鰓中WSSV拷貝數(shù)均在104拷貝/mg以下,蝦只出現(xiàn)零星死亡。隨著稻田養(yǎng)殖蝦的鰓中WSSV含量在106拷貝/mg以上的檢出率增加,蝦死亡率也增加??耸显r的死亡率始終低于WSSV含量為106拷貝/mg的檢出率,一個原因是克氏原螯蝦繁殖不同步,成蝦養(yǎng)成的時間不同,采取輪捕的方式上市,4月中旬之前,水溫較低,WSSV復(fù)制速度慢,蝦攜帶病毒含量低,此前出售的蝦未發(fā)病;4月下旬后水溫上升,WSSV復(fù)制加快,克氏原螯蝦攜帶WSSV的量大幅度增加。另一個原因是攜帶大量WSSV也未必導(dǎo)致敏感宿主發(fā)病、死亡[7],人工感染試驗中瀕臨死亡的克氏原螯蝦鰓組織中WSSV含量達108拷貝/mg,表明采集的克氏原螯蝦鰓中WSSV含量均未達到導(dǎo)致其死亡的程度。維氏氣單孢菌和WSSV共同感染鰓導(dǎo)致克氏原螯蝦死亡率達100%,比單獨WSSV感染的死亡率(83.3%)高[8]。肝胰腺中氣單孢菌屬和檸檬酸桿菌屬細(xì)菌大量增殖導(dǎo)致克氏原螯蝦患病[9-11]。健康克氏原螯蝦的腸道存在一定量的氣單孢菌屬、檸檬酸桿菌屬和志賀氏菌屬條件致病菌[12],由于細(xì)菌間的協(xié)同作用,正常情況下不會對機體健康造成危

    害[13]。但WSSV感染會破壞甲殼動物中腸表皮完整性[14],腸道中存在的條件致病菌最容易在該處定殖、繁殖,造成以條件致病菌大量增加為特點的腸道菌群失調(diào)。因此,攜帶WSSV 106拷貝/mg以上的克氏原螯蝦是否發(fā)病死亡,還取決于其機體免疫力及腸道、肝胰腺和鰓組織中條件致病菌的增殖。

    2018年WSSV在全國13個省養(yǎng)殖的克氏原螯蝦中檢出率為46.3%,呈廣泛流行趨勢[2]。但白斑綜合征疾病只是零星發(fā)生,表明該病可控,主要從調(diào)控養(yǎng)殖水環(huán)境、增強克氏原螯蝦免疫和調(diào)控蝦腸道菌群入手。每隔10 d用一次分解底改,晴天施用芽孢桿菌制劑,陰雨天施用過碳酸鈉制劑,可以將稻田的環(huán)境因子(pH、氨氮、亞硝酸鹽)控制在合理范圍內(nèi)。稻田每隔10 d用碘制劑消毒一次,消滅養(yǎng)殖水體中的致病菌。用乳酸菌拌料投喂調(diào)節(jié)蝦腸道菌群。

    參考文獻

    [1] SHEN H S,HU Y C,MA Y C,et al.In-depth transcriptome analysis of the red swamp crayfish Procambarus clarkii[J].PLoS One,2014,9(10):1-15.

    [2] 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局,全國水產(chǎn)技術(shù)推廣總站,中國水產(chǎn)學(xué)會.2019中國水生動物衛(wèi)生狀況報告[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2019.

    [3] 王忠發(fā),何偉賢,許文軍.白斑綜合癥病毒引起小龍蝦疫病爆發(fā)流行的病原學(xué)研究[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2007,17(8):1397-1399.

    [4] 丁正峰,薛暉,夏愛軍,等.白斑綜合征病毒在養(yǎng)殖克氏原螯蝦中感染流行研究[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2008,31(4):129-133.

    [5] QIU L,CHEN M M,WAN X Y,et al.Characterization of a new member of Iridoviridae,shrimp hemocyte iridescent virus (SHIV),found in white leg shrimp (Litopenaeus vannamei)[J].Scientific reports,2017,7(1):1959-1985.

    [6] OIE.Manual of diagnostic tests for aquatic animals[EB/OL].[2020-07-28].http://www.oie.int/en/standard-setting/aquatic-manual/access-online.

    [7] TSAI M F,KOU G H,LIU H C,et al.Long-term presence of white spot syndrome virus (WSSV) in a cultivated shrimp population without disease outbreaks[J].Disease aquatic organism,1999,38: 107-114.

    [8] YUAN G L,ZHU L,JIANG X Y,et al.Diagnosis of co-infection with white spot syndrome virus and Aeromonas veronii in red swamp crayfish Procambarus clarkii[J/OL].Aquaculture,2020,532[2020-07-28].https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2020.736010.

    [9] 陳紅蓮,宋光同,何吉祥,等.克氏原螯蝦弗氏檸檬酸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗[J].淡水漁業(yè),2014,44(1):73-77.

    [10] 彭博文,楊移斌,艾曉輝,等.克氏原螯蝦源維氏氣單胞菌分離鑒定及藥敏特性研究[J].海洋湖沼通報,2018(4):108-114.

    [11] 唐慶權(quán),韓陽,許曉牧,等.克氏原螯蝦肝胰腺病原菌的分離鑒定和藥敏試驗[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2019,47(21):96-98.

    [12] SHUI Y,GUAN Z B,LIU G F,et al.Gut microbiota of red swamp crayfish Procambarus clarkii in integrated crayfish-rice cultivation model[J].AMB Express,2020,10(1):1-11.

    [13] ZHU J Y,DAI W F,QIU Q F,et al.Contrasting ecological processes and functional compositions between intestinal bacterial community in healthy and diseased shrimp[J].Microbiology ecology,2016,72(4):975-985.

    [14] PILOTTO M R,GONCALVES A N A,VIEIRA F N,et al.Exploring the impact of the biofloc rearing system and an oral WSSV challenge on the intestinal bacteriome of Litopenaeus vannamei[J].Microorganisms,2018,6(3):1-16.

    猜你喜歡
    克氏原螯蝦
    克氏原螯蝦蛋白營養(yǎng)研究進展
    湖南飼料(2017年4期)2018-02-10 15:12:47
    三種生物制劑農(nóng)藥對克氏原螯蝦影響研究初報
    日本沼蝦對克氏原螯蝦幼蝦脅迫試驗
    克氏原螯蝦稻田生態(tài)高產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)
    養(yǎng)殖密度對克氏原螯蝦大規(guī)格苗種生長和存活的影響
    襄陽市克氏原螯蝦養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)SWOT分析及對策研究
    克氏原螯蝦消化道一種新型抗菌物質(zhì)的分離與鑒定
    免疫多糖的生物學(xué)功能及其在克氏原螯蝦飼料中的應(yīng)用
    湖南飼料(2016年2期)2016-05-12 08:28:10
    克氏原螯蝦選育后代生長特性的初步研究
    烘烤克氏原螯蝦蝦仁的研制及HACCP體系的建立
    亚洲中文av在线| 嫩草影院精品99| 国产av麻豆久久久久久久| 久久久久久久精品吃奶| 免费看a级黄色片| 久久久精品大字幕| 高清毛片免费观看视频网站| 国产精品久久久av美女十八| 久久久国产成人精品二区| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产精品久久视频播放| 搡老岳熟女国产| 久久草成人影院| 久久久久久久久久黄片| 在线观看舔阴道视频| 在线观看日韩欧美| 欧美午夜高清在线| 999精品在线视频| 丁香六月欧美| 免费电影在线观看免费观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美zozozo另类| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 身体一侧抽搐| 日韩欧美国产在线观看| 九九热线精品视视频播放| 亚洲专区字幕在线| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 免费观看人在逋| 免费在线观看影片大全网站| 欧美一级毛片孕妇| 岛国视频午夜一区免费看| 欧美日韩黄片免| 国产av又大| 欧美不卡视频在线免费观看 | 精品久久久久久久久久免费视频| 色综合站精品国产| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 午夜福利18| av视频在线观看入口| 精品国产美女av久久久久小说| 成人欧美大片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美性长视频在线观看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产一区二区在线观看日韩 | 这个男人来自地球电影免费观看| 久久草成人影院| 一级毛片女人18水好多| 亚洲电影在线观看av| 国产三级在线视频| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 亚洲av熟女| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品 欧美亚洲| 一级毛片高清免费大全| 999精品在线视频| 老司机靠b影院| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 久久久久久久久久黄片| 亚洲七黄色美女视频| 国产亚洲欧美98| 91在线观看av| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 中国美女看黄片| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美乱色亚洲激情| 老汉色∧v一级毛片| 欧美成人午夜精品| 少妇人妻一区二区三区视频| 国产一区二区三区视频了| 男男h啪啪无遮挡| 麻豆一二三区av精品| 高潮久久久久久久久久久不卡| 午夜精品久久久久久毛片777| 禁无遮挡网站| a级毛片在线看网站| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲av成人av| 高清毛片免费观看视频网站| 看免费av毛片| 色哟哟哟哟哟哟| 欧美高清成人免费视频www| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 少妇粗大呻吟视频| 欧美性猛交黑人性爽| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 亚洲第一电影网av| 一夜夜www| av国产免费在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久伊人香网站| 亚洲成a人片在线一区二区| 免费看美女性在线毛片视频| av国产免费在线观看| 国产三级在线视频| 国产高清视频在线播放一区| 看黄色毛片网站| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 久久久久久国产a免费观看| 两个人的视频大全免费| 精品福利观看| 欧美性长视频在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美成狂野欧美在线观看| 黄色视频不卡| 午夜影院日韩av| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲精品av麻豆狂野| 中国美女看黄片| 亚洲精品美女久久av网站| 亚洲真实伦在线观看| 色老头精品视频在线观看| 国产人伦9x9x在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 久久久久久国产a免费观看| 亚洲精品美女久久av网站| 免费电影在线观看免费观看| 欧美精品啪啪一区二区三区| 亚洲精华国产精华精| 中文字幕最新亚洲高清| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久99久视频精品免费| 又大又爽又粗| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品精品国产色婷婷| 国产欧美日韩精品亚洲av| 精品久久久久久,| 欧美乱色亚洲激情| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲成a人片在线一区二区| 一级片免费观看大全| 香蕉av资源在线| 国产精品综合久久久久久久免费| 色老头精品视频在线观看| 精品国产乱子伦一区二区三区| 亚洲国产中文字幕在线视频| cao死你这个sao货| 亚洲国产看品久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 黄色丝袜av网址大全| 亚洲av电影在线进入| 国产又色又爽无遮挡免费看| 亚洲精品中文字幕在线视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 日韩欧美 国产精品| 色综合婷婷激情| 国产片内射在线| aaaaa片日本免费| 国模一区二区三区四区视频 | 国产成+人综合+亚洲专区| 中文在线观看免费www的网站 | 在线观看舔阴道视频| 日韩有码中文字幕| 亚洲一码二码三码区别大吗| 色综合站精品国产| 国产精品日韩av在线免费观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲精品中文字幕在线视频| 高潮久久久久久久久久久不卡| 成人三级做爰电影| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 免费高清视频大片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 亚洲av成人一区二区三| 中文字幕最新亚洲高清| 久久草成人影院| 亚洲欧美精品综合久久99| 婷婷丁香在线五月| 国产成人aa在线观看| 1024视频免费在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产亚洲欧美在线一区二区| 午夜影院日韩av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 黄色成人免费大全| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 老司机靠b影院| 最新美女视频免费是黄的| 级片在线观看| 黄频高清免费视频| 草草在线视频免费看| 精品人妻1区二区| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 黄色 视频免费看| 91九色精品人成在线观看| 免费观看精品视频网站| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产v大片淫在线免费观看| 91麻豆av在线| 91麻豆av在线| 热99re8久久精品国产| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 两人在一起打扑克的视频| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 99久久精品热视频| 色在线成人网| 午夜福利高清视频| 久久香蕉精品热| 亚洲在线自拍视频| 国产高清videossex| 桃色一区二区三区在线观看| 禁无遮挡网站| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 国产精品电影一区二区三区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 最近最新中文字幕大全电影3| 精品欧美国产一区二区三| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 两个人看的免费小视频| 天堂影院成人在线观看| 精品久久久久久成人av| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 深夜精品福利| 99re在线观看精品视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆 | 熟女电影av网| 久久久久久免费高清国产稀缺| 97碰自拍视频| 国产亚洲精品第一综合不卡| 久久久国产欧美日韩av| 999久久久精品免费观看国产| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 99热这里只有是精品50| xxx96com| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 少妇的丰满在线观看| 欧美3d第一页| 麻豆国产av国片精品| 久久性视频一级片| 一本一本综合久久| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美在线一区亚洲| 亚洲熟妇熟女久久| 男人舔女人的私密视频| 身体一侧抽搐| 欧美日韩黄片免| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 欧美成狂野欧美在线观看| 午夜精品在线福利| 嫁个100分男人电影在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 我要搜黄色片| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 天天添夜夜摸| 亚洲av电影在线进入| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲片人在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日韩精品青青久久久久久| 无遮挡黄片免费观看| 午夜福利欧美成人| 他把我摸到了高潮在线观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 又紧又爽又黄一区二区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 在线观看一区二区三区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 我的老师免费观看完整版| 午夜两性在线视频| 亚洲熟女毛片儿| 亚洲全国av大片| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美黄色片欧美黄色片| 久久久国产精品麻豆| 久久亚洲真实| 免费在线观看亚洲国产| 两人在一起打扑克的视频| 国产区一区二久久| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 999久久久国产精品视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 一本大道久久a久久精品| 国产午夜福利久久久久久| 精品久久久久久,| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲av五月六月丁香网| 国语自产精品视频在线第100页| 精品国产亚洲在线| 日本五十路高清| 国产精品免费一区二区三区在线| 免费看美女性在线毛片视频| 久久久国产成人免费| svipshipincom国产片| 日韩精品中文字幕看吧| 村上凉子中文字幕在线| 国产成年人精品一区二区| 男插女下体视频免费在线播放| 91大片在线观看| 日韩欧美 国产精品| 国产一区二区激情短视频| 亚洲人与动物交配视频| 精品久久久久久久久久久久久| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产激情欧美一区二区| 国内精品一区二区在线观看| 熟女电影av网| 全区人妻精品视频| 亚洲精品在线观看二区| 草草在线视频免费看| 国产精品免费一区二区三区在线| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产成人系列免费观看| 88av欧美| 黄色视频,在线免费观看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 在线观看午夜福利视频| 日本一区二区免费在线视频| 国产单亲对白刺激| 国产精品一区二区免费欧美| 黑人操中国人逼视频| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 人妻夜夜爽99麻豆av| 免费看a级黄色片| 久久天堂一区二区三区四区| 大型av网站在线播放| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产区一区二久久| 日本一本二区三区精品| 激情在线观看视频在线高清| 国产野战对白在线观看| a级毛片a级免费在线| a级毛片在线看网站| 最近在线观看免费完整版| 高清在线国产一区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 全区人妻精品视频| 亚洲专区中文字幕在线| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 视频区欧美日本亚洲| 香蕉国产在线看| 国产精品 欧美亚洲| 精品第一国产精品| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品福利观看| av天堂在线播放| 午夜免费观看网址| 免费观看人在逋| 午夜精品久久久久久毛片777| 人妻久久中文字幕网| 男男h啪啪无遮挡| 精品不卡国产一区二区三区| 熟女电影av网| 在线永久观看黄色视频| 亚洲人成77777在线视频| 最近最新免费中文字幕在线| 香蕉国产在线看| 校园春色视频在线观看| 中文字幕高清在线视频| 国产亚洲av高清不卡| ponron亚洲| 宅男免费午夜| 国产高清有码在线观看视频 | 亚洲成av人片在线播放无| 中文资源天堂在线| 不卡一级毛片| 国产91精品成人一区二区三区| 一级片免费观看大全| 热99re8久久精品国产| 亚洲avbb在线观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲最大成人中文| 美女大奶头视频| 一二三四社区在线视频社区8| 一本久久中文字幕| av片东京热男人的天堂| 国产在线精品亚洲第一网站| 色综合婷婷激情| 老汉色∧v一级毛片| 日韩欧美国产一区二区入口| 深夜精品福利| 一个人免费在线观看的高清视频| 在线观看日韩欧美| 日日夜夜操网爽| 亚洲第一电影网av| 99国产精品99久久久久| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| avwww免费| 亚洲国产精品成人综合色| 免费看日本二区| www日本在线高清视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久久久久久久久黄片| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 精品免费久久久久久久清纯| 色播亚洲综合网| 99在线视频只有这里精品首页| 国产日本99.免费观看| 久久热在线av| 一二三四在线观看免费中文在| 久久精品人妻少妇| 亚洲男人天堂网一区| а√天堂www在线а√下载| 一进一出抽搐动态| 正在播放国产对白刺激| 日本熟妇午夜| 日韩免费av在线播放| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 51午夜福利影视在线观看| 亚洲人成伊人成综合网2020| 色综合站精品国产| 俺也久久电影网| 成人精品一区二区免费| 亚洲自拍偷在线| 欧美zozozo另类| 久久久精品大字幕| 国产午夜福利久久久久久| videosex国产| 欧美大码av| av中文乱码字幕在线| 91国产中文字幕| 在线观看舔阴道视频| 亚洲精品色激情综合| 午夜福利成人在线免费观看| 久久精品91蜜桃| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品亚洲av一区麻豆| 老司机在亚洲福利影院| 九色成人免费人妻av| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| ponron亚洲| 国模一区二区三区四区视频 | 国产精品亚洲av一区麻豆| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 欧美黄色淫秽网站| 手机成人av网站| 床上黄色一级片| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 在线观看午夜福利视频| 欧美性长视频在线观看| 日韩欧美精品v在线| 日本 欧美在线| 日日爽夜夜爽网站| 男女午夜视频在线观看| 一本一本综合久久| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久香蕉国产精品| 色尼玛亚洲综合影院| 色哟哟哟哟哟哟| 51午夜福利影视在线观看| 观看免费一级毛片| 精品人妻1区二区| 黄片大片在线免费观看| 亚洲成av人片在线播放无| 男女床上黄色一级片免费看| 国产成人啪精品午夜网站| 亚洲精品一区av在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 色综合婷婷激情| av在线播放免费不卡| 午夜福利视频1000在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲精品美女久久av网站| 久久久久精品国产欧美久久久| 成人国产一区最新在线观看| 99riav亚洲国产免费| 波多野结衣巨乳人妻| av在线播放免费不卡| 亚洲成人久久爱视频| 在线观看www视频免费| 男女视频在线观看网站免费 | 国产欧美日韩一区二区三| 欧美色视频一区免费| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 欧美在线黄色| 一进一出抽搐动态| 亚洲电影在线观看av| 亚洲av熟女| 中文资源天堂在线| 九色成人免费人妻av| 级片在线观看| 美女午夜性视频免费| 日本一区二区免费在线视频| 婷婷精品国产亚洲av| 岛国在线免费视频观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 在线视频色国产色| 成人av在线播放网站| 麻豆成人av在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 怎么达到女性高潮| 国产免费av片在线观看野外av| 国产97色在线日韩免费| 悠悠久久av| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 18禁黄网站禁片免费观看直播| 在线观看日韩欧美| 熟女电影av网| cao死你这个sao货| 国产伦在线观看视频一区| 国产黄a三级三级三级人| avwww免费| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 国产精品亚洲一级av第二区| 两个人视频免费观看高清| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲美女视频黄频| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲国产精品sss在线观看| av片东京热男人的天堂| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 丝袜美腿诱惑在线| 国产探花在线观看一区二区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 成年女人毛片免费观看观看9| 男女午夜视频在线观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 18禁观看日本| 黄色片一级片一级黄色片| 亚洲全国av大片| 三级毛片av免费| 亚洲精品在线观看二区| 午夜老司机福利片| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲精品在线美女| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久香蕉精品热| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 国内精品久久久久精免费| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产精品一区二区免费欧美| 国产成年人精品一区二区| xxx96com| 亚洲av美国av| 伦理电影免费视频| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲avbb在线观看| 黄色女人牲交| 一本精品99久久精品77| 国产精品,欧美在线| 黄色丝袜av网址大全| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 欧美黄色淫秽网站| 2021天堂中文幕一二区在线观| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 黄色片一级片一级黄色片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 男人舔女人的私密视频| 国内精品久久久久久久电影| 最好的美女福利视频网| 久久这里只有精品19| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 在线看三级毛片| 色在线成人网| 婷婷丁香在线五月| 欧美黑人精品巨大| 午夜成年电影在线免费观看| 免费av毛片视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 一级毛片女人18水好多| 老汉色av国产亚洲站长工具| 一级毛片女人18水好多| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产探花在线观看一区二区| 国产黄a三级三级三级人| 黄色毛片三级朝国网站| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产人伦9x9x在线观看| 国产精品,欧美在线| 两个人看的免费小视频| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 中文字幕久久专区| 国产av不卡久久| 一区二区三区国产精品乱码| 久久久精品欧美日韩精品| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲一区中文字幕在线| 色精品久久人妻99蜜桃|