H5N6亞型禽流感的流行特點(diǎn)與防控要點(diǎn)

郭康康，張 誠，崔 歡，孟利佳，張 博，陳立功，3，張春茂，劉聚祥，3，郭振東*，董世山，3*

(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071000；2.軍事科學(xué)院 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院 軍事獸醫(yī)研究所，吉林 長春 130122；3.農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫病病原生物學(xué)華北科學(xué)觀測實(shí)驗(yàn)站， 河北 保定 071000)

高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza，HPAI)具有發(fā)病急，傳播快，死亡率高等特點(diǎn)，因此被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織定為A類傳染病[1]。目前家禽中流行的禽流感(avian influenza，AI)主要有H5、H7和H9亞型，由于疫苗的使用，家禽中的AI疫情得到了較好的控制，但我國部分地區(qū)仍有AI疫情發(fā)生。1975年從美國綠頭鴨體內(nèi)首次分離到H5N6亞型AI病毒呈低致病性，2013年我國出現(xiàn)的禽源H5N6亞型AI表現(xiàn)為高致病性[2-3]。2013年以來，我國多地發(fā)生H5N6亞型AI疫情，對家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，2014年發(fā)生第1例人感染H5N6亞型AI案例，引起社會(huì)廣泛關(guān)注[4-5]。2020年初我國發(fā)生1起H5N1和6起H5N6亞型AI疫情(家禽2起，野生天鵝4起)[6]。因此，家禽中H5N6亞型AI的防控顯得尤為重要，做好H5N6亞型AI防控工作，不僅可以保證家禽養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，也為公共衛(wèi)生安全提供有力保障。

1 病原學(xué)

禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)屬正黏病毒科甲型流感病毒屬，為單股負(fù)鏈RNA病毒[7]。根據(jù)表面血凝素( HA) 和神經(jīng)氨酸酶( NA) 蛋白抗原性的差異，A型流感病毒可以分為18種不同的HA亞型和11種不同的NA亞型[8]。H5和H7亞型的部分毒株屬于HPAI，其余亞型AIV為低致病性[7]。通過基因比對和親緣關(guān)系分析，H5N6亞型的8個(gè)基因片段中，其HA、NA片段可能分別來自H5N1亞型的HA片段和H6N6亞型的NA片段，其余6個(gè)基因片段與H5N1亞型的親緣性最高，表明H5N6亞型AIV是由H5N1和H6N6亞型重組而來[9]。HA-NA功能的相互匹配對H5N6亞型AIV的入侵和增殖有重要作用，研究表明HA-NA匹配性好的毒株在雞群內(nèi)的傳播能力更強(qiáng)，因此對雞群的危害性更大[10]。

2 H5N6亞型AIV致病性分析

HA1亞單位結(jié)構(gòu)為HA的主要構(gòu)成，含有抗原決定簇和受體結(jié)合位點(diǎn)，人流感病毒主要識別并結(jié)合唾液酸 α-2,6 受體，而AIV主要識別并結(jié)合唾液酸 α-2,3 受體[10]。目前研究表明，隨著流感病毒的突變和進(jìn)化，H5N6亞型AIV對人和動(dòng)物的親和力逐漸增強(qiáng)[11]。周佩嬌等[13]對1株野禽H5N6亞型AIV進(jìn)行鑒定和遺傳分析發(fā)現(xiàn)HA蛋白受體蛋白結(jié)合位點(diǎn)S137A、K193N突變，增加了對人唾液酸a-2,6受體結(jié)合能力，其HA的第222～224位存在保守氨基酸序列QRG，表明對禽類依舊有感染能力。HA等[16]發(fā)現(xiàn)流感病毒HA蛋白RBS區(qū)域第226，228位氨基酸分別為Q和G時(shí)，流感病毒易與禽細(xì)胞表面受體結(jié)合。

黃曉峰等[13-16]研究也發(fā)現(xiàn)H5N6亞型AIV的HA基因關(guān)鍵位點(diǎn)Q226L、G228S突變，PB2的E627K、Q591K、D701N突變以及NS的G540A獨(dú)突變等，都增強(qiáng)了H5N6亞型AIV對哺乳動(dòng)物的致病性。對活禽市場中分離出的H5N6亞型AIV研究發(fā)現(xiàn)其致病性與HA 蛋白連接肽位點(diǎn)編碼堿性氨基酸數(shù)目的多少有關(guān)，毒株A/environment/Hunankaifu/303/2017 (H5N6) HA 蛋白連接肽位點(diǎn)堿性氨基酸數(shù)目為6個(gè)，則該毒株對禽表現(xiàn)為高致病性[15]。尤其是H5N6亞型AIV的PB2基因發(fā)生E627K、Q591K、D701N突變都增強(qiáng)了AIV對哺乳動(dòng)物的致病性。

3 H5N6亞型AIV的傳播途徑

直接接觸傳播是H5N6亞型AIV傳播的重要途徑，活禽市場是H5N6亞型AIV的感染和傳播的重要場所，但目前尚無人與人之間傳播的確切證據(jù)[18]。從貓?bào)w內(nèi)分離并鑒別出H5N6亞型AIV，研究表明該病毒與家禽中的高致病性H5N6亞型AIV 2.3.4.4分支密切相關(guān)，同時(shí)可作為H5N6亞型AIV的宿主，說明病毒很有可能感染并適應(yīng)貓等哺乳動(dòng)物后再通過直接接觸傳播給人類[14-18]。從廣州分離出H5N6亞型AIV毒株A/wildfowl/Guangdong/GZ882/2015(H5N6)，其NA基因序列與2015年湖南省分離到的鴨源毒株A/duck/Hubei/XG18/2015(H5N6)相似性達(dá)99%，PB2基因序列與2014年越南分離到的鴨流感病毒株A/duck/Vietnam/LBM760/2014(H5N6)相似性達(dá)99%。由此推斷該病毒很有可能是野鳥遷徙傳播到我國南方各省份[11]。

4 我國H5N6亞型AI的流行特點(diǎn)

4.1 H5N6亞型AIV成為優(yōu)勢毒株2018—2020年2月我國公布H5亞型AI疫情共計(jì)17起，其中H5N6亞型AI疫情14起，H5N1亞型AI疫情僅3起，H5N6亞型AI疫情發(fā)生率達(dá)到82.35%[6]。因此，H5N6亞型AI疫情發(fā)生的概率已經(jīng)超過H5N1，但H5N1的防控也不能忽視。此外，2020年初發(fā)生野生天鵝感染H5N6亞型AIV，表明H5N6亞型AIV可能通過野鳥傳播給家禽，另外野鳥的遷徙可能導(dǎo)致H5N6亞型AIV在家禽中更廣泛的傳播[12]。

4.2 南方地區(qū)呈H5N6亞型AI疫情多發(fā)2018—2019年，H5N6亞型AI疫情主要發(fā)生在廣西、貴州、湖南、湖北、云南、江蘇6個(gè)省份，南方為疫情多發(fā)地區(qū)；2020年1月野生天鵝H5N6亞型AI疫情發(fā)生4起(表1)[6]。因此應(yīng)當(dāng)盡量避免野鳥與家禽接觸，防止野鳥攜帶的病毒在家禽中感染并傳播。

4.3 H5N6亞型AI春秋季多發(fā)2018—2020年2月期間，其中1-3月份有7起H5N6亞型AI疫情，9-11月份發(fā)生4起H5N6亞型AI疫情，5月份僅有1起疫情發(fā)生(表1)；因此，H5N6亞型AI疫情以春季和秋季為主。

4.4 H5N6亞型AI血清學(xué)監(jiān)測情況2018年1月至2019年8月，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布我國家禽的監(jiān)測情況，禽場、商品代飼養(yǎng)場、散養(yǎng)戶、交易市場以及其他場所共檢測家禽391.717 5萬份血清樣品，免疫合格樣品364.939 5萬份，合格率為93.16%；其中2018年1月到2019年8月監(jiān)測雞、鴨、鵝血清樣品分別為351.888 6萬份、32.995萬份、68 339份，免疫合格樣品分別為328.977 1萬份、29.907 4萬份、60 550份，合格率分別為93.49%，90.64%，88.60%(表2，3)[19]。因此，由統(tǒng)計(jì)出的數(shù)據(jù)得出家禽中雞的血清免疫合格率最高，鵝的免疫合格率最低，家禽整體免疫狀況良好。

表1 2018—2020年2月我國公布的H5N6疫情統(tǒng)計(jì)

表2 2018年H5N6亞型AI免疫合格率 %

2019年1—8月免疫合格率 %

4.5 clade 2.3.4.4分支是目前H5N6亞型AIV優(yōu)勢分支H5亞型AIV主要包括2.3.1,2.3.2,2.3.3,2.3.4共4個(gè)分支，其中2.3.4又主要包含2.3.4.1,2.3.4.2,2.3.4.3,2.3.4.4，2.3.4.5共5個(gè)小分支。目前我國近幾年監(jiān)測和分離到的H5亞型AIV(包括H5N6)主要為clade 2.3.4.4分支，但也有其他分支的H5病毒存在(如2.3.2分支的H5亞型AIV)，從中國香港和中國臺灣野鳥中分離到的H5N6亞型AIV也屬于clade 2.3.4.4[20-21]，因此，當(dāng)前我國H5N6亞型AIV的優(yōu)勢分支是clade 2.3.4.4。

5 國外H5亞型AI疫情的發(fā)生情況

2019—2020年2月國外發(fā)生H5亞型AI疫情共計(jì)194起，其中H5N6亞型疫情共計(jì)發(fā)生24起(越南20起)，H5N8亞型疫情96起，H5N1和H5N2亞型疫情分別為30和32起，H5N7亞型疫情僅發(fā)生1起[6]。H5亞型AI疫情多發(fā)生于春冬季節(jié)，夏秋較少，與中國情況類似。

2019—2020年2月野禽發(fā)生H5亞型AI共計(jì)18起，其中H5N8亞型疫情11起，H5N1亞型疫情6起，H5亞型未確定NA的1起，其余176起疫情均為感染家禽[6]。2019—2020年2月活禽交易市場共計(jì)5起，3起為H5N6亞型，2起H5N8亞型，另有科威特寵物禽鳥商店發(fā)生1起H5N8疫情[6]。因此，H5亞型AI疫情主要發(fā)生地是家禽養(yǎng)殖場，活禽交易場所較少；家禽是H5亞型AIV易感宿主。2019—2020年2月越南累計(jì)發(fā)生20起H5N6亞型AI疫情，2018—2020年2月我國發(fā)生14起H5N6亞型AI疫情，有可能因?yàn)閮蓢g野鳥遷徙，從而為H5N6亞型AIV的感染和傳播提供了機(jī)會(huì)[20]。

圖1 2019—2020年2月H5亞型AI疫情發(fā)生情況

注：H5.表示未確認(rèn)NA亞型AI

6 防控要點(diǎn)

6.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)和嚴(yán)格消毒強(qiáng)化飼養(yǎng)管理，飼料營養(yǎng)做到全面均衡，避免單一。飼養(yǎng)管理員按禽群飼養(yǎng)需求添加維生素和微量元素及中草藥制劑等，增強(qiáng)禽群的抵抗力，保持適當(dāng)?shù)娘曫B(yǎng)密度，適宜的溫度和濕度。提倡封閉飼養(yǎng)，避免家禽與外界環(huán)境接觸并減少外界環(huán)境對家禽造成的應(yīng)激[22]。

建立完善消毒制度。按消毒要求對禽場全面消毒。外來人員和車輛進(jìn)出禽場應(yīng)做到定點(diǎn)消毒、定點(diǎn)隔離、登記備案等，及時(shí)追根溯源。對禽使用的飼料和飲水定期進(jìn)行病原菌檢測，嚴(yán)禁使用污染和霉變的飼料[22-23]。

6.2 保證疫苗質(zhì)量和免疫效果疫苗的購買首先要保證質(zhì)量和免疫效果，禁止養(yǎng)殖企業(yè)使用違法生產(chǎn)的疫苗。相關(guān)部門應(yīng)隨時(shí)對疫苗生產(chǎn)企業(yè)抽查、監(jiān)督，杜絕生產(chǎn)和銷售假、劣疫苗。2019年1月20日，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部(第99號)，組織制定了重組禽流感病毒(H5+H7)二價(jià)滅活苗和三價(jià)滅活苗等6種疫苗產(chǎn)品，地方政府要擴(kuò)大宣傳，鼓勵(lì)基層干部下地方講解政策[24]。另外，對農(nóng)村獸醫(yī)、駐場獸醫(yī)、飼養(yǎng)員等相關(guān)人員定期培訓(xùn)，教授理論，傳授實(shí)踐操作，保證所在轄區(qū)內(nèi)的免疫密度合格。實(shí)施2020年國家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃，對所涉轄區(qū)內(nèi)的禽場登記在案，養(yǎng)殖戶對禽場用藥等情況要準(zhǔn)確記錄[6]。

6.3 加強(qiáng)監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查定期對禽場、野鳥、環(huán)境樣本進(jìn)行H5亞型HPAIV監(jiān)測，保證H5N6亞型AI抗體滴度較低時(shí)要及時(shí)查清原因并整改[25]。動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心各級單位定期對所在地方所管轄區(qū)域進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，追蹤溯源，了解病毒變異情況，為防控提供支持。

7 小結(jié)與展望

H5N6亞型HPAI對家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失的同時(shí)，對公共衛(wèi)生健康也構(gòu)成了巨大挑戰(zhàn)。當(dāng)前我國同時(shí)流行H5N1和H5N6兩種亞型AIV，但以H5N6亞型為優(yōu)勢毒株。H5N6亞型AIV是重組病毒，但病毒的不斷突變和變異，使得H5N6亞型AIV致病力有增強(qiáng)趨勢；目前未發(fā)現(xiàn)人傳人的證據(jù)，亦需要保持警惕[7]。未來的防控關(guān)鍵應(yīng)放在疫苗的應(yīng)用，確保免疫效果。加大對H5N6亞型 AIV的監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查，及時(shí)了解病毒變異情況，從而為AI疫苗的更新提供有力的參考基礎(chǔ)，確保AI疫情防患于未然。