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    瑞鮑迪甙A對(duì)大鼠的致畸作用

    2015-10-21 19:57:36王雨晶
    安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年5期

    摘要 [目的] 為進(jìn)一步評(píng)價(jià)瑞鮑迪甙A的安全性積累資料。[方法] 于大鼠孕7~17 d經(jīng)口給予340、1 130和3 400 mg/kg b.w. 劑量的瑞鮑迪甙A,觀察母鼠和仔鼠的生長(zhǎng)發(fā)育情況,研究瑞鮑迪甙A對(duì)大鼠的生殖毒性和胚胎毒性。[結(jié)果]各劑量瑞鮑迪甙A組孕鼠行為正常,無(wú)中毒和死亡情況。各劑量瑞鮑迪甙A組黃體數(shù)、著床數(shù)、活胎率、窩仔數(shù)及畸胎率、活胎仔畸形率及母體畸胎率等與正常對(duì)照組均無(wú)顯著差異(P>0.05)。[結(jié)論]瑞鮑迪甙A對(duì)大鼠無(wú)明顯生殖毒性及胚胎毒性和致畸作用。

    關(guān)鍵詞 瑞鮑迪甙A;致畸作用;Wistar大鼠

    中圖分類號(hào) S859 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 0517-6611(2015)05-131-02

    Study on the Teratogenicity of Rebaudioside A in Wistar Rats

    WANG Yujing1, LU Qianqian1, YU Zhengrong1, ZHANG Yumei1,2* et al

    (1.College of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, Jiangsu 225009; 2. Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou, Jiangsu 225009)

    Abstract [Objective] The research aimed to provide materials for evaluating the safety of rebaudioside A futher. [Method] Rats were administrated with rebaudioside A at the doses of 340, 1 130 and 3 400 mg/kg b.w by gavage from the 7th day to the 17th day during the gestation. The growth and development laws of mother rats and baby rats were observed. And the reproductive toxicity and fetal toxicity of rebaudioside A to rats were studied. [Result] Abnormal behaviours, toxic symptom and death were not found on tested rats. And there was no significant difference of the luteal count, implanted number and live fetus rate, litter size, abnormal fetus rate, abnormal rate of live fetus and maternal teratogenic rate in the groups of different doses of rebaudioside A had no significant difference with that on control group(P>0.05) . [Conclusion] Rebaudioside A had no obvious reproductive toxicity, embryo toxicity and teratogenic effect on Wistar rats.

    Key words Rebaudioside A; Teratogenic effect; Wistar rats

    基金項(xiàng)目 江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目;揚(yáng)州大學(xué)“新世紀(jì)人才”工程資助項(xiàng)目。

    作者簡(jiǎn)介

    王雨晶(1991-),男,江蘇南京人,碩士研究生,研究方向:獸醫(yī)藥理及毒理學(xué)。*通訊作者,教授,博士,碩士生導(dǎo)師,從事藥理及毒理學(xué)研究。

    收稿日期 20141223

    甜菊糖苷是從菊科植物甜葉菊葉片中提取得到的一類天然的低熱量的高倍甜味劑,其甜度為蔗糖的250~300倍,熱量?jī)H為蔗糖的1/250左右[1-2]。甜菊糖苷因其高甜度、低熱量、味質(zhì)好、無(wú)毒副作用等特點(diǎn),在食品工業(yè)上得到了廣泛應(yīng)用。瑞鮑迪甙A是甜菊糖苷中甜度最高的一種糖苷,甜度約為蔗糖的450倍,純化的瑞鮑迪甙A甜味純正,甜味最接近蔗糖,可作為甜菊糖的精加工高端產(chǎn)品,在飲料、調(diào)味品和供給糖尿病患者食用的蜜餞、果脯中可應(yīng)用[3-6]。

    2008年,在食品添加劑專家委員會(huì)(JECFA)第69屆會(huì)議上規(guī)定了甜菊糖苷每日允許攝入量(ADIS),以甜菊醇表示,ADIS為0~4 mg/kg體重[7]。同年,美國(guó)藥品食品管理局(FDA)批準(zhǔn)允許在食品中使用甜葉菊提取物瑞鮑迪苷A。2012年,法國(guó)成為歐盟第一個(gè)批準(zhǔn)在食品和飲料產(chǎn)品內(nèi)使用高純度瑞鮑迪苷A(97%)的國(guó)家[8]。據(jù)報(bào)道,瑞鮑迪苷A在體內(nèi)主要代謝為甜菊醇[9],而甜菊醇體外試驗(yàn)中表現(xiàn)出一定的致突變性[10-11] ,以及目前瑞鮑迪苷A的代謝和毒理方面的資料不完整,其食用安全性還存在著爭(zhēng)議,國(guó)內(nèi)相關(guān)研究也較少。筆者對(duì)較高純度的瑞鮑迪苷A進(jìn)行了大鼠傳統(tǒng)致畸試驗(yàn),以期為進(jìn)一步評(píng)價(jià)其食用(飼用)安全性積累資料。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

    Wistar大鼠(清潔級(jí)),10周齡,由揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心提供,動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(蘇)2012-0004,使用許可證號(hào)為SYXK(蘇)2012-0029。

    1.2 孕鼠的獲得

    Wistar大鼠按雌雄比1∶1合籠過夜,次日清晨檢查陰道栓,以見栓的當(dāng)天為孕0 d。每組13只受精鼠,以保證試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組妊娠母鼠數(shù)不少于10只。

    1.3 受試物的給予及染毒劑量

    瑞鮑迪苷A,含量≥97%,批號(hào)為2012-002P,由上海永優(yōu)生物技術(shù)公司生產(chǎn)。

    瑞鮑迪甙A用蒸餾水配制成適宜濃度,采用灌胃法給予孕鼠,灌胃體積為10.0 ml/kg體重。

    瑞鮑迪甙A分為3 400、1 130和340 mg/kg b.w.3個(gè)劑量組;另設(shè)置陰性(蒸餾水)對(duì)照組。于檢栓后第7~17天連續(xù)給予,每天1次。

    1.4 觀察指標(biāo)

    試驗(yàn)期間每周稱取母鼠體重,觀察受孕大鼠的妊娠情況和胚胎發(fā)育情況。

    在受孕第20天處死孕鼠,取出子宮,稱取窩重、胎盤重,統(tǒng)計(jì)活產(chǎn)幼仔數(shù)、死胎以及吸收胎數(shù),按窩計(jì)算活產(chǎn)胎仔平均體重。按照傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)指導(dǎo)原則[12],先進(jìn)行外觀畸形檢查,然后進(jìn)行內(nèi)臟及軟組織畸形檢查,再進(jìn)行骨骼畸形檢查,最后統(tǒng)計(jì)畸胎總數(shù)和畸形總數(shù)。分析與正常對(duì)照組比畸胎率、活胎仔平均畸形率和母體畸胎率的差異性。

    1.5 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析采用SPSS12.0軟件進(jìn)行,顯著性分析采用ANOVA檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)。

    2 結(jié)果與分析

    瑞鮑迪甙A在340~3 400 mg/kg b.w. 范圍內(nèi)孕鼠行為正常,無(wú)中毒和死亡情況。

    由表1可知,試驗(yàn)期間不同處理對(duì)孕鼠的體重增加無(wú)明顯影響(P﹥0.05)。瑞鮑迪甙A對(duì)母鼠的生殖機(jī)能指標(biāo)(黃體數(shù)、著床數(shù)、活胎率、窩仔數(shù)等)與正常對(duì)照組無(wú)明顯差異(表2)。由表3可知,各劑量組平均卵巢重、胎仔平均體重、體長(zhǎng)、胎盤重、性別比及吸收胎率等與正常對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。瑞鮑迪甙A試驗(yàn)組未出現(xiàn)死胎,在外觀畸形、骨骼畸形及內(nèi)臟畸形檢查中畸胎率、活胎仔畸形率及母體畸胎率,與正常對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。

    3 結(jié)論與討論

    瑞鮑迪甙A在340~3 400 mg/kg b.w. 范圍內(nèi),對(duì)Wistar大鼠無(wú)明顯生殖毒性及胚胎毒性。該試驗(yàn)中采用的瑞鮑迪甙A劑量分別相當(dāng)于1/10、1/30和1/100 LD50。

    傳統(tǒng)致畸試驗(yàn)是應(yīng)用試驗(yàn)動(dòng)物鑒定外來化合物致畸性的最基本的試驗(yàn),可用于評(píng)價(jià)受試物作用于妊娠母體,干擾胚胎的正常發(fā)育,導(dǎo)致先天性畸形的毒作用。通過致畸試驗(yàn)可以檢測(cè)受試物導(dǎo)致胚胎死亡、結(jié)構(gòu)畸形及生長(zhǎng)遲緩的毒作用。

    Curry等[13]對(duì)瑞鮑迪甙A進(jìn)行的亞慢性毒性試驗(yàn)中,也考察了對(duì)繁殖性能的影響,包括交配性能、生育能力、妊娠長(zhǎng)度、發(fā)情周期、精子活力、濃度及形態(tài),結(jié)果表明無(wú)生殖毒性問題,與該試驗(yàn)的結(jié)果一致。鑒于瑞鮑迪甙A的主要代謝物甜菊醇存在著一定的體外致突變作用,對(duì)其生殖及胚胎毒性的研究還需要深入研究。

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    責(zé)任編輯 喬利利 責(zé)任校對(duì) 況玲玲

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