降鈣素基因相關(guān)肽和內(nèi)皮素-1水平與中老年RA患者活動(dòng)程度的相關(guān)性

郭月麗 徐文鑫 林福安 梅序橋 章濤

(1漳州衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，福建 漳州 363000；2福建省轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)檢測應(yīng)用技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心；3漳州市醫(yī)院；4福建醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系)

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種一種病因不明的全身性免疫性炎癥，發(fā)病人群以中老年人群為主，它是以對稱性、侵蝕性的多關(guān)節(jié)炎為臨床主要特征的慢性、全身性、自身免疫性疾病。如果RA患者未能早期規(guī)范治療，隨著病程的進(jìn)展會(huì)造成進(jìn)行性的關(guān)節(jié)破壞，嚴(yán)重影響了患者的日常生活質(zhì)量〔1,2〕。降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)和內(nèi)皮素(ET)-1是廣泛存在于人體組織中的具有多種調(diào)節(jié)功能的神經(jīng)肽，在RA發(fā)生發(fā)展過程中也有許多細(xì)胞因子參與。發(fā)生進(jìn)程中的關(guān)系。本研究擬探討CGRP和ET-1與中老年人RA患者活動(dòng)程度的相關(guān)性。

1 材料與方法

表1 3組基線資料比較

1.2方法 空腹采集2 ml 靜脈血，置于含有100 g/L乙二胺四乙酸(EDTA)二鈉30 μl及抑肽酶 40 μl的試管中真空采血管中?；靹?，4℃離心,3 000 r/min離心10 min，分離血漿，保存于-70℃冰箱中待檢測。

1.3主要儀器和試劑 高速低溫離心機(jī)，型號L-90K，美國貝克曼有限公司；-70℃冰箱，型號DW-86L100，海爾有限公司；洗板機(jī)，型號RT-3100，酶標(biāo)儀，型號:RT-6000，深圳雷杜有限公司。試劑：人CGRP酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒，購于上?？祈樕锟萍加邢薰?，人ET-1 ELISA試劑盒，購于上海杏宜生物有限公司。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.1軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，線性回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1血漿中CGRP、ET-1的水平、DAS28評分比較 3組CGRP、ET-1水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。活動(dòng)期組DAS28評分〔(10.57±2.85)分〕明顯高于穩(wěn)定期組〔(2.31±1.41)分，t=9.75，P<0.001〕。

表2 各組血漿中CGRP和ET-1水平

2.2RA患者血漿中CGRP和ET-1的相關(guān)性 RA患者中CGRP和ET-1呈負(fù)相關(guān)(r=-0.520、P<0.05)；CGRP和ET-1/CGRP比值也呈負(fù)相關(guān)(r=-0.851、P<0.05)；而ET-1和ET-1/CGRP比值呈正相關(guān)(r=0.912、P<0.05)。見圖1。

圖1 RA患者中CGRP和ET-1的相關(guān)性

2.3RA患者病情評價(jià)(DAS28評分)與CGRP、ET-1、ET-1/CGRP比值的相關(guān)性 RA患者CGRP與病情評價(jià)指標(biāo)DAS28評分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.532，P<0.05)，而ET-1、ET-1/CGRP比值與DAS28評分呈正相關(guān)(r=0.635,0.721,P均<0.05)。見圖2。

圖2 RA患者中CGRP、ET-1、ET-1/CGRP和DAS28的相關(guān)性

3 討 論

ET-1具有很強(qiáng)的血管收縮作用，是由內(nèi)皮細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、腎小球系膜細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等許多細(xì)胞產(chǎn)生〔4～7〕。而CGRP則是最強(qiáng)的舒血管物質(zhì)之一，其主要由肽能神經(jīng)纖維釋放〔8,9〕，CGRP是由37個(gè)氨基酸組成的具有強(qiáng)大擴(kuò)張血管作用的一種生物活性多肽,它除了傳統(tǒng)的擴(kuò)張血管的作用外,還可以促進(jìn)細(xì)胞因子的活動(dòng)，廣泛分布于周圍、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)〔10～15〕。CGRP在體內(nèi)廣泛分布于各系統(tǒng)器官內(nèi)及血漿中，是體內(nèi)最強(qiáng)的舒血管活性多肽，具有拮抗 ET-1 的作用,參與機(jī)體許多重要功能的調(diào)節(jié)，在各種疾病的發(fā)病中具有重要的意義〔16～18〕。

ET-1和CGRP二者在體內(nèi)保持平衡，對血管彈性進(jìn)行調(diào)節(jié)，以維持局部血管的舒縮功能。RA患者是以關(guān)節(jié)滑膜有微血管新生及大量血管翳形成為主要病理基礎(chǔ)的自身免疫性疾病，新生微血管內(nèi)皮細(xì)胞可高度表達(dá)多種細(xì)胞因子，包括ET-1、CGRP，促使其破壞滑膜及骨組織〔19,20〕。另外RA滑膜處聚集的巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，形成大量血管翳，通過分泌細(xì)胞因子，蛋白酶及炎癥介質(zhì)不斷侵蝕軟骨及骨組織，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的不可逆性破壞，關(guān)節(jié)變形及功能障礙〔21,22〕。本研究結(jié)果說明CGRP和ET-1的合成和釋放可能參與了RA的發(fā)病過程。也有報(bào)道稱血管內(nèi)皮受損產(chǎn)生和釋放ET-1增加，CGRP 下降〔23，24〕，與本研究相符。本研究結(jié)果提示ET-1與CGRP失衡可能與RA病情嚴(yán)重程度及RA的發(fā)生發(fā)展的具有一定相關(guān)性。這可能與由于RA患者體內(nèi) ET 增多、CGRP 減少,血管舒縮功能失調(diào),血管收縮反應(yīng)增強(qiáng),這與已有研究〔25〕表明ET-1與CGRP在心腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中存在相互拮抗效應(yīng)相一致。這些反應(yīng)進(jìn)而導(dǎo)致血管痙攣、滲出增加,使關(guān)節(jié)局部的血液循環(huán)受到影響有關(guān)，并由于機(jī)體的代償功能,而造成滑膜內(nèi)微血管的大量新生及滑膜炎癥,進(jìn)而導(dǎo)致大量血管翳形成及骨、關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)的破壞〔26〕。 此外,ET本身尚有刺激內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維樣細(xì)胞增殖的活性,可通過直接促進(jìn)微血管新生及血管翳形成而加重關(guān)節(jié)損傷。尤其可能在關(guān)節(jié)滑膜內(nèi)微血管新生及血管翳形成過程中起重要作用〔27〕。