高熒光淋巴細胞百分比對傳染性單核細胞增多癥的診斷價值

劉 娟， 冀旭峰， 劉玲玲， 楊 春， 王伯玉

（吉林大學白求恩第一醫(yī)院檢驗科，吉林 長春 130021）

傳染性單核細胞增多癥是兒童常見病毒感染性疾病，常見于EB病毒、巨細胞病毒感染，傳統(tǒng)診斷主要依據(jù)典型臨床表現(xiàn)（不規(guī)則發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、皮疹、水腫）[1]和相關(guān)實驗室指標檢測結(jié)果[異型淋巴細胞百分比≥10%，EB病毒或巨細胞病毒抗原抗體檢測為陽性]。異型淋巴細胞百分比增高診斷傳染性單核細胞增多癥特異性高[2]，但需要采集患兒靜脈血進行涂片染色和鏡下白細胞分類，耗時長（4 h），且需要閱片經(jīng)驗豐富的操作人員，臨床應用受限。EB病毒和巨細胞病毒核酸定量檢測診斷傳染性單核細胞增多癥特異性也較高，但成本高、耗時長，不適合在基層醫(yī)院和普通二級甲等醫(yī)院開展。高熒光淋巴細胞百分比（high fluorescence intensity lymphocyte percentage，HFLY%）可采用全自動血液分析儀進行檢測[3]，是可快速篩查傳染性單核細胞增多癥的實驗室指標。本研究旨在分析HELY%對傳染性單核細胞增多癥的診斷價值，同時探討其與異型淋巴細胞百分比、EB病毒和巨細胞病毒負荷水平的相關(guān)性，為傳染性單核細胞增多癥的診斷提供有價值的實驗室依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2019年6—8月吉林大學白求恩第一醫(yī)院兒科住院部傳染性單核細胞增多癥患兒50例（疾病組），其中男30例、女20例，年齡1～13歲。傳染性單核細胞增多癥診斷標準：（1）發(fā)熱、咽炎、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大、皮疹中至少3項陽性；（2）淋巴細胞比例增高、異型淋巴細胞百分比≥10%、EB病毒抗體定量檢測陽性、EB病毒或巨細胞病毒核酸定量檢測陽性中至少1項符合。以同期吉林大學第一醫(yī)院小兒發(fā)育咨詢門診50名兒童為對照組，其中男25名、女25名，年齡1～13歲，所有對照兒童無發(fā)燒、高熱等臨床癥狀，體檢無異常。

1.2 方法

采集住院患兒首次住院、門診患兒首次就診時肘靜脈血2管（3 mL），乙二胺四乙酸抗凝，1管用于HFLY%測定和異型淋巴細胞百分比檢測，另1管用于EB病毒和巨細胞病毒核酸定量檢測。

1.3 主要儀器與試劑

XN-9000全自動血液分析儀（日本Sysmex公司）及配套試劑、Multiskan MK3酶標儀（美國ThermoFisher Scientific公司）、LightCycler480Ⅱ?qū)崟r熒光定量PCR儀（瑞士羅氏公司）及配套試劑、ALLegraX-12高速離心機（美國貝克曼庫爾特公司）。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈正態(tài)分布的計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價HFLY%診斷傳染性單核細胞增多癥的效能。采用Pearson相關(guān)分析評價HELY%與異型淋巴細胞百分比的相關(guān)性。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 疾病組與對照組HFLY%測定結(jié)果比較

疾病組HFLY%為（3.95±2.72）%，顯著高于對照組[（0.31±0.26）%]（P＜0.05）。

2.2 疾病組與對照組異型淋巴細胞百分比測定結(jié)果

對照組異型淋巴細胞百分比均＜4%。疾病組異型淋巴細胞百分比均＞8%，其中5%～10%有4例，10%～20%有33例，20%～30%有10例，＞30%有3例。

2.3 疾病組與對照組EB病毒和巨細胞病毒核酸定量檢測結(jié)果

對照組EB病毒和巨細胞病毒核酸檢測均為陰性。疾病組中，EB病毒核酸陽性37例，巨細胞病毒核酸陽性3例。

2.4 HFLY%診斷傳染性單核細胞增多癥的性能

ROC曲線分析結(jié)果顯示，HFLY%診斷傳染性單核細胞增多癥的曲線下面積為0.992，以0.85為臨界值，敏感性為94.7%、特異性為95.89%。見圖1。

圖 1 HFLY%診斷傳染性單核增多癥的ROC曲線

2.5 HFLY%和異型淋巴細胞百分比的相關(guān)性

Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，HFLY%與異型淋巴細胞百分比呈正相關(guān)（r=0.581，P＜0.05）。

3 討論

目前，臨床診斷傳染性單核細胞增多癥主要通過臨床癥狀和外周血異型淋巴細胞百分比、EB病毒和巨細胞病毒核酸載量確診。異型淋巴細胞百分比是診斷傳染性單核細胞增多癥的常用指標，但此項檢查全過程為人工操作，耗時長，1個病例檢查時間要3～4 h，不適合用于臨床兒科病毒感染性疾病初篩；而HFLY%可采用全自動血液分析儀檢測，幾分鐘之內(nèi)可獲得結(jié)果，很好地彌補了這一不足。對HFLY%明顯升高的患兒，進一步檢測其外周血異型淋巴細胞百分比，再結(jié)合臨床癥狀和EB病毒或巨細胞病毒核酸定量檢測結(jié)果，即可做出診斷。

HFLY%是近年來新開發(fā)的分析參數(shù)，主要反映活化的淋巴細胞數(shù)量的變化，通過監(jiān)測由病毒感染引起的活化淋巴細胞數(shù)量的變化，對EB病毒、巨細胞病毒引起的傳染性單核細胞增多癥進行早期篩查。本研究中，疾病組HFLY%水平顯著高于對照組（P＜0.05），提示傳染性單核細胞增多癥患兒體內(nèi)可能存在病毒刺激，導致淋巴細胞異?；罨?，高敏感的HFLY%明顯升高；而對照兒童因不存在外部病毒的刺激，未出現(xiàn)明顯的細胞免疫病理變化，故HFLY%數(shù)值無異常改變。

本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，HFLY%對傳染性單核細胞增多癥有良好的診斷效能，曲線下面積為0.992，以0.85為臨界值，敏感性為94.7%，特異性為95.89%。

本研究發(fā)現(xiàn)，HFLY%與外周血異型淋巴細胞百分比呈正相關(guān)（r=0.281，P＜0.05），疾病組50例患兒中有45例HFLY%明顯升高，46例異型淋巴細胞百分比＞10%。有研究結(jié)果顯示，HFLY%升高與異型淋巴細胞可能密切相關(guān)[4]，二者相結(jié)合可更準確、高效地診斷傳染性單核細胞增多癥。但部分傳染性單核細胞增多癥患兒HFLY%并未明顯升高[5]，在這種情況下，則需結(jié)合EB病毒或巨細胞病毒核酸定量檢測和臨床癥狀等來明確診斷。

綜上所述，HFLY%對傳染性單核細胞增多癥有較好的初篩價值。