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    液相色譜法測定果醬中的檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅、亮藍

    2021-08-27 04:50:55劉少梅
    中國食品 2021年15期
    關(guān)鍵詞:胭脂紅檸檬黃著色劑

    為了改善食品的顏色或外觀,從而有利于產(chǎn)品銷售,著色劑在食品工業(yè)中得到了很廣泛的應用。與天然色素相比,合成著色劑的著色力強、色澤鮮艷、不易褪色、穩(wěn)定性好、易溶解、易調(diào)色、成本低,但安全性低,所以國家對合成著色劑的監(jiān)管很嚴格。

    根據(jù)GB 2760-2014《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準》的規(guī)定,果醬(食品分類號04.01.02.05)產(chǎn)品允許使用合成著色劑,限值為:檸檬黃0.5g/kg、日落黃0.5g/kg、莧菜紅0.3g/kg、胭脂紅0.5g/kg、亮藍0.5g/kg。不過,GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》只適用于巧克力豆、硬糖、著色糖衣制品、蜜餞、配制酒、飲料、淀粉軟糖等7種產(chǎn)品的測定,對于允許而且經(jīng)常使用合成著色劑的果醬產(chǎn)品,則不在適用范圍內(nèi)。

    本文通過檢出限、回收率和精密度等檢驗數(shù)據(jù),驗證GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》的檢測方法是否適用于果醬產(chǎn)品的檢測,從而解決實驗室選擇測試方法的問題。

    一、實驗材料

    1 .試劑及配制方法。甲醇:色譜純。乙酸銨(CH3COONH4)溶液(0.02mol/L):稱量乙酸銨1.54g,加水至1L,后經(jīng)微孔濾膜(0.45μm)過濾。檸檬酸(C6H8O7·H2O)溶液(20g/100mL水),用該濃度的檸檬酸溶液把水調(diào)到pH6和pH4。氨水溶液:氨水含量要求20%-25%,把2mL的氨水加水稀釋至100mL。甲醇-甲酸溶液:把甲醇、甲酸按體積比(6+4)混勻。無水乙醇-氨水-水溶液:把無水乙醇、氨水溶液、水按體積比(7+2+1)混勻。聚酰胺粉(尼龍6):過200μm(目)篩。無水乙醇(CH3CH2OH),乙酸(CH3COOH)。

    2.標準品。檸檬黃(CAS︰1934-21-0);莧菜紅(CAS︰915-67-3);胭脂紅(CAS︰2611-82- 7);日落黃(CAS︰2783-94-0);亮藍(CAS︰3844-45-9)。

    3.標準溶液配制。購買濃度為0.500mg/L合成著色劑標準溶液,吸取2.0mL標準溶液,加pH6的水定容至10.0mL,配成濃度為0.100mg/mL的標準使用液。分別吸取濃度為0.100mg/mL標準溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL加pH6的水定容至10.0mL,配成每毫升相當1.0μg、2.0μg、5.0μg、10.0μg、20.0μg的合成著色劑。

    二、儀器和設(shè)備

    配有紫外可見光檢測器的LC-2010AHT高效液相色譜儀,日本島津公司。電子天平,美國賽多利斯丹佛,型號TP-213,感量為0.001g。HWS-12恒溫水浴鍋,上海一恒科學儀器有限公司。G3垂融漏斗。

    三、實驗方法

    1.試樣制備。稱取果醬產(chǎn)品3-5g(精確至0.001g),放入100mL的小燒杯中,加入約30mL水,攪拌溶解(不溶解的樣品可以適當延長時間或提升溫度至全部溶解)。如果溶解后的樣品溶液pH較高,可用檸檬酸溶液把樣品溶液的酸堿度調(diào)成pH6。

    2.色素提取。果醬產(chǎn)品的色素提取選用聚酰胺吸附法,試驗過程要注意溶液的溫度和pH值。先稱量1g聚酰胺粉于小燒杯中,加少許水調(diào)成粥狀備用;再把樣品溶液加熱到60℃,趁熱把準備好的聚酰胺粉倒入樣品溶液中,攪拌1分鐘后,用G3垂融漏斗對樣品溶液進行抽濾;將大約20mL的水(pH為4,溫度為60℃)倒入燒杯進行洗滌,并把洗滌水倒入G3垂融漏斗中抽濾;上述洗滌操作重復3-5次,然后用甲醇-甲酸溶液洗滌3-5次,再用水洗滌至樣品溶液為中性。換一個接收瓶,用乙醇-氨水-水混合溶液進行解吸,重復3-5次,直到聚酰胺粉上的色素被完全解吸出來;收集全部解吸液,加入乙酸中和,水浴加熱蒸發(fā)至近干,加水溶解,定容到10mL;經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后,上機分析。根據(jù)保留時間定性,以外標峰面積法定量。

    3.液相色譜條件。色譜柱為SHIMSEN Ankylo C18(250mm×4.6mm,5μm),檢測波長為254nm,柱溫控制在35℃,流速為1.0mL/min,進樣量為10μL。其中,流動相A為乙酸銨溶液,流動相B為甲醇(色譜純),梯度洗脫程序詳見表1。

    四、結(jié)果計算

    試樣中著色劑含量的計算公式如下:

    其中,X為樣品著色劑含量,g/kg;m為樣品質(zhì)量,g;v為試樣稀釋總體積,mL;1000為換算系數(shù)。

    五、檢出限、回收率和精密度

    1.檢出限。將濃度為1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL的標準溶液分別上機測定得出峰面積數(shù)據(jù),以色素的含量(μg/mL)為橫坐標X,以峰面積為縱坐標Y,繪制坐標圖,進行線性回歸分析,回歸方程如表2所示。

    2.回收率。在相同基質(zhì)的空白樣品中加入6個目標色素(加標量1mL,濃度為20μg/mL),加標后進行前處理,上機測定,經(jīng)計算得出加標回收率及相對標準偏差,詳見表3。

    六、綜述

    根據(jù)GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》規(guī)定,檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅的方法檢出限為0.5mg/kg,亮藍為1.0mg/kg。在上述檢出限驗證試驗中,色素線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2達到0.999以上,說明方法檢出限滿足標準要求。果醬產(chǎn)品中目標色素的回收率在83.1%-100.7%之間,對于樣品前處理經(jīng)過吸附、解析再上機測定的實驗過程來說,回收率已經(jīng)滿足要求?;厥章?次試驗的相對標準偏差RSD在3.3%-5.3%之間,均在6%以內(nèi),數(shù)據(jù)穩(wěn)定。目標色素在重復條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值占算術(shù)平均值的百分比在3.4%-8.9%之間,符合國家標準不超過10%的規(guī)定。

    綜上所述,果醬產(chǎn)品中檸檬黃、日落黃、莧菜紅、胭脂紅、亮藍的測定可參照GB 5009.35-2016《食品安全國家標準 食品中合成著色劑的測定》執(zhí)行,其檢出限、回收率和精密度均滿足該標準規(guī)定。

    作者簡介:劉少梅(1980-),女,漢族,質(zhì)量工程師,大學本科,研究方向為質(zhì)量管理、食品檢驗。

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