提升液相色譜法檢測食品添加劑準確性的對策

余澍 何亞芬

食品添加劑在食品加工生產中發(fā)揮著一定的作用，為了維護消費者權益，規(guī)范食品加工市場，需要運用液相色譜法對食品添加劑進行檢測，如何提高該方法的檢測準確性也就成為行業(yè)重點關注的問題?；诖?，本文簡單闡述了食品添加劑檢測中液相色譜法的應用，并從檢驗前、檢驗中、檢驗后三個方面提出了提高液相色譜法檢測食品添加劑準確性的有效策略。

一、食品添加劑檢測中液相色譜法的應用

1.食品防腐劑檢測。為了延長食物的保質期，食品加工廠可能會添加食品防腐劑，而食品防腐劑的主要成分是化學合成酯類，如果食品防腐劑食用超量，會抑制骨骼生長，并且危害人體肝臟、腎臟健康，因此加強食品防腐劑的檢驗工作非常重要，而液相色譜法作為檢驗食品防腐劑成熟手段之一，檢測便捷且限度較低。

2.食品甜味劑檢測。食品甜味劑包括合成甜味劑與天然甜味劑，由于天然甜味劑成本較高，因此在食品加工過程中通常選用化學合成甜味劑，而化學合成甜味劑食用超量會影響智力發(fā)育，破壞神經系統(tǒng)的穩(wěn)定性，引起腹瀉、腹脹，甚至會誘發(fā)各類癌癥。運用液相色譜法可以檢測出多種合成甜味劑及其劑量，而且可以多次驗證測驗結果，因此在食品甜味劑檢測中的應用較為廣泛。

3.食品合成色素檢測。色素可以調節(jié)食品的顏色，激發(fā)人們的食欲，在食品加工產業(yè)中的應用較為普遍。化學合成色素的著色效果好、成本低，但毒性較大，若食品中添加過量的化學合成色素，將嚴重損害人體機能，而液相色譜法在食品合成色素檢測中占據(jù)著非常重要的地位。

二、提高液相色譜法檢測食品添加劑準確性的有效策略

液相色譜作為各類食品添加劑檢測的首選方法，為了維持市場秩序、維護消費者的合法權益，需要進一步提高液相色譜法檢測的精準性。

1.加強檢驗前的準備。（1）過濾脫氣流動相。運用液相色譜法開展食品添加劑檢測工作之前，應對流動相進行過濾脫氣處理，因為流動相中通常存在不同直徑標準的細小顆粒，但色譜柱內腔極小，若細小顆粒直徑超出色譜柱內腔直徑，則會導致細小顆粒堵塞色譜柱。在檢測前需將流動相中直徑大于0.45μm的顆粒進行過濾，并對流動相進行脫氣處理，防止液相色譜系統(tǒng)氣泡溢出而對輸送泵的工作造成阻礙。除此之外，同樣需要過濾樣品溶液，去除直徑大于0.45μm的顆粒，防止其堵塞色譜柱、毛細管，并清除全部雜質顆粒。過濾微小顆粒后，應檢查HPLC檢測儀的性能，確保儀器的穩(wěn)定性及靈敏度，為檢測工作順利推進奠定基礎。在過濾脫氣過程中存在低沸點溶劑，運用煮沸法、抽氣法進行處理時，應注意各類溶劑揮發(fā)時引發(fā)的混合變化。處理溶劑樣品時通常采用超聲脫氣手段，可以規(guī)避溶劑揮發(fā)混合的問題，但需要嚴格控制超聲脫氣處理時間，需在30min左右完成超聲脫氣過程，在此過程中溶劑瓶不可碰觸超聲槽側壁及底部，避免樣品溶劑瓶在脫氣過程中破碎損壞。

（2）檢查并調整柱壓。在液相色譜法檢測之前，應檢查HPLC檢測器的柱壓狀態(tài)，防止在檢測過程中出現(xiàn)異常情況，導致食品添加劑檢測結果不精準。結合以往食品添加劑檢測的經驗，HPLC檢測儀的狀態(tài)異常多表現(xiàn)為柱壓過高，檢測前應拆卸HPLC檢測儀保護柱，觀察柱壓狀態(tài)，若柱壓下降，則證明保護柱發(fā)生故障；若柱壓未發(fā)生變化，則應詳細檢測。將HPLC檢測儀內的色譜柱拆卸，觀察柱壓變化，若柱壓仍處于過高狀態(tài)，則可判定柱壓過高由管路阻塞引起，此時應徹底清洗管路，完成清洗后再次檢查柱壓狀態(tài)。清洗管路時需反向連接色譜柱進出口，運用10倍柱體積流動相清洗色譜柱。若柱壓仍未下降，則更換色譜柱入口篩板；若此時柱壓下降，則表明有樣品溶劑大直徑顆粒堵塞入口篩板。若經上述處理后柱壓仍未下降，則表明儀器損壞，需進行維修。為了防止HPLC檢測儀柱壓過高，可在保護柱、進樣器之間設置過濾器，防止大直徑顆粒進入儀器設備，同時應及時排出輸液管路氣泡，防止氣泡對檢測的精準性與穩(wěn)定性造成影響，導致圖譜基線穩(wěn)定性降低，出現(xiàn)假峰現(xiàn)象，給檢測分析人員提供錯誤信號，繼而得出錯誤判斷。由此可見，及時處理氣泡可以在一定程度上提升檢測的精準性。

（3）控制環(huán)境及樣品。為了保障食品添加劑檢測的精準性，應嚴格控制檢測環(huán)境。適宜的溫濕度是保障HPLC檢測儀性能穩(wěn)定、運行正常的必要條件，需將室溫控制在20℃-30℃，日溫變化2℃-3℃，若溫度超出適宜范圍，HPLC檢測儀開機分析時則會影響色譜分離效果。夏季檢測時的溫度不可超出30℃界限，否則將產生氣泡，干擾HPLC檢測儀的正常工作，室內相對濕度也不可高于60%。在液相色譜儀分析中，流動相內甲醇、乙腈等成分將會揮發(fā)，對檢測儀器造成腐蝕，因此在檢測前應做好通風工作，及時排出有害氣體，維護儀器性能。同時，為保障HPLC輸液泵的精度，應為其輸送穩(wěn)定電壓，以提高儀器的穩(wěn)定性。在檢測前，應按照檢測標準處理樣品，若未展開樣品處理工作或處理不達標，則會導致樣品內存在雜質組分，無法實現(xiàn)成分徹底分離，導致食品添加劑檢測結果偏高；若未分離出樣品內提純待測成分，則會導致最終食品添加劑檢測結果偏低。由此可見，樣品內存在雜質或處理不徹底，均可影響檢測的精準性，因此需在檢測準備階段嚴格按照標準進行樣品處理，控制樣品處理的時間、溫度、試劑劑量等。

2.規(guī)范檢驗分析過程。（1）定性分析。為了全面提高食品添加劑檢測的精準性，應在定性測試前進行標準溶液進樣，加標同類樣品展開定性分析，將特定濃度的標樣添加到不含待測組分的同類樣品中，比較保留時間，確保檢測靈敏度。若不含待測組分樣品與檢測樣品保留時間類似，則在待測樣品中添加同體積標液，以此完成定性。若加標待測樣品并未出現(xiàn)叉峰現(xiàn)象，則需依據(jù)液相色譜法檢測結果，與現(xiàn)有條件進行混合計算，結果類似則證明檢測樣品中存在待測成分，結果差異較大則證明檢測樣品中不存在待測成分。若加標待測樣品出現(xiàn)叉峰現(xiàn)象，則證明檢測樣品中無待檢測成分。如果檢測多組分添加劑，應控制好測定比重，例如檢測山梨酸、苯甲酸、合成著色劑、糖精鈉時，應進行混標及單標測試，確定柱分離效果及保留時間，這樣可以規(guī)避檢測對象出錯問題，避免假陽性。

（2）定量分析。在待測樣品中添加同體積的標樣可以獲得對應響應值，此時可繪制出標樣含量及響應值校準曲線，可根據(jù)校準曲線尋找出樣品中待測成分響應值組分含量。若在檢測分析過程中發(fā)現(xiàn)樣品中待測成分濃度低于檢測低限，此時無法成功濃縮且無法成功檢出，可適當添加樣品量，提高待測成分濃度，將待測成分濃縮后進行檢測；若樣品中待測成分濃度高出校準曲線檢測上限，應適當稀釋樣品，當待測成分濃度處于校準曲線檢測范圍內時方可進行檢測工作。例如在檢測山梨酸、糖精鈉、苯甲酸時，待測成分中可能出現(xiàn)其他類型成分相似的峰，即苯甲酸檢測中可能出現(xiàn)與安賽蜜相似的峰，而糖精鈉可能在檢測時出現(xiàn)脫氫乙酸的峰，因分離效果不佳，出現(xiàn)叉峰、饅頭峰等現(xiàn)象，繼而干擾檢測的精準性，此時可根據(jù)食品標簽信息進行添加劑的確定，完成定性分析。為進一步檢測出待測成分含量，可以降低樣品中待測成分的濃度，起到降低流動相極性的效果，徹底分離雜質峰，完成定量檢測。若通過食品標簽信息無法判斷添加劑，則需要運用加標手段展開定性分析，后續(xù)展開定量分析工作。若在檢測過程中發(fā)現(xiàn)樣品中存在禁止添加的成分，此時需加標樣品，依次進行定性、定量分析，當待測峰與雜質峰分離后判斷檢測結果，最大化地保障檢測質量。

3.注意檢驗后的處理工作。流動相中存在無機鹽成分，若未及時清理，則會嚴重損壞色譜柱。因此，完成食品添加劑檢測工作后，為了保障后續(xù)檢測的精準性，應徹底清洗HPLC色譜柱，主要是運用甲醇純水溶液、80%乙腈恢復柱壓，并完成清洗工作。通常情況下，保護柱、過濾頭、單向閥、泵密封墊等儀器部件易堵塞，應重點清理，每月至少2次；純水過濾后添加10%乙腈與甲醇溶劑，避免儀器內滋生細菌，起到延長純水使用時間的效果。

綜上所述，液相色譜法在食品防腐劑、食品甜味劑、食品合成色素檢測中發(fā)揮著重要作用，為了提高檢測的準確性，要注重檢驗前的準備工作，包括過濾脫氣流動相、檢查并調整柱壓、控制周圍環(huán)境及樣品處理工作，同時應從定性、定量兩個方面規(guī)范檢驗分析過程，加強對檢驗過程的控制，檢測完畢后還要進行設備清理工作，為下一次檢測奠定基礎。

作者簡介：余澍（1989-），男，江西德興人，漢族，本科，助理工程師，研究方向為質量安全與檢測。