磷酸酶法與離子選擇電極法對(duì)血清鋰的檢測(cè)效果比較

李紹玲 吳梅丹 劉亞平

碳酸鋰是眾多精神治療藥物中反饋效果較好的一種[1]，此藥物通過(guò)抑制腺苷酸環(huán)化酶和磷脂酶C所介導(dǎo)的反應(yīng)來(lái)改善患者的精神疾病，并在多項(xiàng)研究中取得良好的反饋效果[2-4]。但碳酸鋰治療的缺陷在于安全閾值較低，患者極易因攝入量過(guò)多出現(xiàn)鋰中毒癥狀。因此服用碳酸鋰的患者在治療期間需要定期接受血清鋰含量的檢測(cè)。當(dāng)前的研究指出，對(duì)于血清鋰的檢測(cè)準(zhǔn)確率與鋰中毒具有相關(guān)性，因此需要選擇科學(xué)、準(zhǔn)確、可重復(fù)實(shí)施的檢測(cè)方法，離子選擇電極法、磷酸酶法是多種檢出方法中效率較高的兩種，但當(dāng)前對(duì)于兩種檢測(cè)方式的效果的研究較少[5-6]。為了了解兩種方式對(duì)于血清鋰的檢測(cè)情況，更好的幫助患者科學(xué)的服藥，本院開展了磷酸酶法與離子選擇電極法對(duì)血清鋰的檢測(cè)研究，取得了滿意的結(jié)果，詳細(xì)內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究選擇2019年3月—2020年12月參照EP9-A2標(biāo)準(zhǔn)搜集的100例服用碳酸鋰治療精神疾病的患者，所有患者在試驗(yàn)前均了解服藥、檢測(cè)等相關(guān)內(nèi)容，研究選擇的患者年齡在33～59歲，平均年齡（44.89±3.84）歲，男性54例，女性46例，躁狂癥患者47例，雙相情感障礙患者53例，所有患者均為我院在此期間收治，并持續(xù)接受治療直至完成研究。

參與患者的納入標(biāo)準(zhǔn)為：（1）經(jīng)臨床診斷，符合《中國(guó)精神障礙分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)第3版》[7-8]（CCMD-3）中精神疾?。ㄔ昕癜Y、雙相情感障礙）的判斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）智力正常，能夠配合醫(yī)師進(jìn)行試驗(yàn)；（3）未出現(xiàn)嚴(yán)重的自殘、自殺情緒和外向攻擊情緒。

排除標(biāo)準(zhǔn)為：（1）血脂、血糖指標(biāo)異常，有凝血功能障礙的患者；（2）有嚴(yán)重感染或中樞神經(jīng)感情癥狀的患者；（3）合并發(fā)生黃疸等癥狀的患者；（4）試驗(yàn)期間除碳酸鋰類藥物外還服用其他影響血清鋰濃度或?qū)е卵鹤兓乃幬?。本次研究符合醫(yī)學(xué)倫理，試驗(yàn)全部?jī)?nèi)容經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 試驗(yàn)材料

1.2.1 本次試驗(yàn)采用儀器 檢測(cè)系統(tǒng)一：為日立全自動(dòng)生化分析儀（簡(jiǎn)稱LABOSPECT 008 AS）；檢測(cè)系統(tǒng)二：深圳越華電解質(zhì)分析儀（簡(jiǎn)稱XI-921ET），所用試劑盒均為L(zhǎng)OST-008AS全自動(dòng)生化分析儀所用的鋰測(cè)定試劑盒，由中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)，盒中配套帶有3個(gè)濃度的校準(zhǔn)品，XI-921ET所用的試劑為深圳越華科技發(fā)展有限公司配套生產(chǎn)的定標(biāo)液試劑。

檢測(cè)時(shí)間為患者按照規(guī)定劑量服用碳酸鋰片（千金湘藥）（湖南千金湘江藥業(yè)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H43020372，規(guī)格：0.25 g×100片/瓶），每日劑量為1～2 g（4～8片），分2～3次服用，治療5～7 d或病情穩(wěn)定后，在患者末次服藥后凌晨采取患者空腹靜脈血，混勻后分兩管放置，以離心機(jī)（轉(zhuǎn)速為10 min，3 000 r）將兩管血液進(jìn)行離心處理，并采用相應(yīng)不同的檢測(cè)儀器對(duì)患者的血鋰濃度進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

檢測(cè)前需要先對(duì)檢測(cè)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，試驗(yàn)開始之前，LABOSPECT 008 AS生化分析儀用鋰測(cè)定試劑盒中自帶的3個(gè)不同濃度的校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)，XI-921ET電解質(zhì)分析儀用廠家配套生產(chǎn)的試劑進(jìn)行定標(biāo)，檢測(cè)質(zhì)量控制校準(zhǔn)均采用英國(guó)朗道的中、高值校準(zhǔn)血清，并每天分別在2臺(tái)儀器上做室內(nèi)質(zhì)控，確保兩臺(tái)儀器的血清鋰室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均在控，從而保證所有的試驗(yàn)結(jié)果都準(zhǔn)確無(wú)誤。在對(duì)試驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，兩次測(cè)定的順序需要相反，標(biāo)本也需要在2臺(tái)儀器中均進(jìn)行檢測(cè)，同一臺(tái)儀器的2次檢測(cè)結(jié)果需要取平均值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法

本次研究需要對(duì)檢測(cè)的靈敏度和精確度分析，以離子選擇電極法、磷酸酶法的結(jié)果為比較方法作為X軸和Y軸，用Excel 2003軟件得出回歸方程Y=bX+a，計(jì)算出電極法結(jié)果X與磷酸酶法結(jié)果Y之間的系統(tǒng)誤差（SE），將項(xiàng)目給定的醫(yī)學(xué)決定水平Xc的值代入線性回歸方程計(jì)算系統(tǒng)誤差SE=︱Y-X︱=︱a+（b-1）Xc︱相對(duì)偏差SE=（SE/Xc）×100%以SE≤1/2 CLIA’88允許總誤差（TEa）作為判斷方法具有可比性標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果的靈敏度精密度分析

根據(jù)兩次檢測(cè)的試劑盒說(shuō)明書，將濃度為1.05 mmol/L的血清鋰標(biāo)本進(jìn)行稀釋，稀釋采用生理鹽水，其中按照1：5測(cè)量后患者的血清鋰濃度為0.20 mmol/L，按照1：10濃度測(cè)量為0.10 mmol/L，按照1：20則無(wú)法檢測(cè)；朗道的中值質(zhì)控血清和磷酸酶法檢測(cè)，批內(nèi)血清鋰濃度為1.08 mmol/L，SD=0.03、CV=2.78%。

2.2 兩種檢測(cè)方式的臨床可接受評(píng)價(jià)分析

將3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平為0.4、0.8、1.2 mmol/L的血清鋰代入Y=bX+a回歸方程進(jìn)行計(jì)算，可見3個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平處二者的系統(tǒng)誤差都小于美國(guó)臨床試驗(yàn)室修正法規(guī)（CLIA‘88）規(guī)定的系統(tǒng)誤差1/2，詳見表1。

表1 兩種檢測(cè)方式的臨床可接受評(píng)價(jià)

2.3 兩種檢測(cè)方式的方法學(xué)比較

采用磷酸酶法與離子選擇電極法檢測(cè)鋰濃度，并將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比較，結(jié)果顯示兩者有良好的相關(guān)性，采用線性回歸分析，發(fā)現(xiàn)r2=0.967，回歸方程為Y=1.025X+0.002，兩者的線性關(guān)系良好，詳見圖1。

圖1 磷酸酶法與離子選擇電極法檢測(cè)顯示血清鋰的濃度散點(diǎn)圖及線性回歸圖

3 討論

前文所述，碳酸鋰雖然在精神病癥中具有良好的治療效果，但碳酸鋰的安全閾值較低，容易出現(xiàn)因血藥濃度過(guò)高引起鋰中毒，因此在治療期間執(zhí)行相應(yīng)的檢測(cè)措施具有必要性，而由于精神相關(guān)病癥通常需要花費(fèi)大量的時(shí)間才能得到有效的改善，但持續(xù)用藥情況下，患者有較高的概率出現(xiàn)鋰積蓄促使血藥濃度升高并引發(fā)不良癥狀，因此在對(duì)精神疾病患者執(zhí)行碳酸鋰治療時(shí)，需要選擇一種易操作，準(zhǔn)確率高能夠反復(fù)執(zhí)行檢測(cè)方式[9-11]。

離子選擇電極法通過(guò)對(duì)血清樣本中的鋰離子的活動(dòng)變化進(jìn)行控制（主要是對(duì)鋰離子的電極電位變化進(jìn)行控制），從而觀察到離子或分子態(tài)物質(zhì)有選擇性響應(yīng)的電極。這種方法的優(yōu)勢(shì)在于方法較為簡(jiǎn)單，能夠快速的對(duì)患者的血清鋰含量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，但由于該方法較為依賴對(duì)離子態(tài)鋰產(chǎn)生的電極響應(yīng)反應(yīng)的檢測(cè)，對(duì)于儀器、設(shè)備和專用的試劑都有較高的要求，因此容易因受到的影響[12-13]。磷酸酶檢測(cè)法是化學(xué)分析法的一種，相較于離子選擇電極法，能夠利用當(dāng)前普及率較高的生化分析儀，操作技術(shù)的難度較低，對(duì)檢測(cè)人員的壓力較小。因此離子選擇電極法更適合少量的標(biāo)本檢測(cè)，并且電解質(zhì)分析儀鋰濃度低于0.5 mmol/L檢測(cè)率低，穩(wěn)定性差，而全自動(dòng)生化分析儀能夠?qū)崿F(xiàn)標(biāo)本的大批量測(cè)定，自動(dòng)化程度高，減輕了檢測(cè)人員和醫(yī)護(hù)人員的工作壓力[14-15]。

而從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，本次研究符合EP9-A2文件要求，目前國(guó)內(nèi)外研究磷酸酶法測(cè)定鋰濃度的報(bào)道較少，當(dāng)前僅有國(guó)內(nèi)有報(bào)道醫(yī)院采用中生北控的鋰測(cè)定試劑盒與離子選擇電極法進(jìn)行比對(duì)的研究報(bào)道，該研究的結(jié)果顯示兩種檢測(cè)方式的相關(guān)性良好，兩者的系統(tǒng)誤差小于美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)（CLIA‘88）規(guī)定的系統(tǒng)誤差的1/2，本次試驗(yàn)的結(jié)果顯示根據(jù)回歸方程計(jì)算，兩種檢測(cè)方式的系統(tǒng)誤差均低于美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法的系統(tǒng)規(guī)定誤差值，與報(bào)道具有一致性[16]。本次研究還發(fā)現(xiàn)，根據(jù)檢測(cè)儀器的試劑盒說(shuō)明書和稀釋實(shí)驗(yàn)，本次研究的批內(nèi)血清鋰濃度為1.08 mmol/L，SD=0.03、CV=2.78%；從本文的測(cè)定結(jié)果看，通過(guò)線性回歸分析，發(fā)現(xiàn)r2=0.967，回歸方程為Y=1.025X+0.002，兩者的線性關(guān)系良好相關(guān)性滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，可見測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，磷酸酶法與離子選擇電極法均能有效對(duì)服用鹽酸鋰患者的血清鋰含量進(jìn)行檢測(cè)，并且兩種檢測(cè)方式具有較好的相關(guān)性，但磷酸酶法結(jié)合現(xiàn)代化儀器及先進(jìn)的檢測(cè)手段，自動(dòng)化程度高，對(duì)于制定和調(diào)整最佳個(gè)體化用藥方案，藥物中毒的診斷和療效監(jiān)控，確保藥物治療的有效性和安全性等具有重大意義。