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    豬偽狂犬病的免疫防控

    2021-08-26 02:47:30劉國信山西省陽城縣畜牧獸醫(yī)局
    中國畜牧業(yè) 2021年13期
    關(guān)鍵詞:母源佐劑狂犬病

    文│劉國信(山西省陽城縣畜牧獸醫(yī)局)

    近年來,豬偽狂犬病病毒在國內(nèi)豬場的陽性感染率居高不下,嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。此外,養(yǎng)殖場戶病急亂投醫(yī)、隨意選擇疫苗,不按免疫程序進行免疫接種,首免日齡不正確,甚至多種疫苗輪番使用等問題,導(dǎo)致免疫效果事與愿違。經(jīng)過多年的免疫實踐與調(diào)查研究,筆者認為,只要抓住偽狂犬病毒易感的關(guān)鍵時間節(jié)點,避免母源抗體的干擾,選用高效、安全的豬偽狂犬疫苗,并科學(xué)掌握免疫的時機和方法,防控做到環(huán)環(huán)相扣,就能達到比較理想的效果。

    一、常用的疫苗種類

    豬偽狂犬病毒(PRV)屬于甲型皰疹雙鏈DNA病毒,雖然只有一個血清型,但其毒力有強弱之分,毒株的致病性也有高有低。近年來,我國科研團隊已經(jīng)分離出多個不同病毒株,證明豬偽狂犬病毒已經(jīng)發(fā)生了變異,且不同毒株感染同一動物時,病毒可進行重組,產(chǎn)生更強毒力的毒株,引起新的疫情暴發(fā)。因此,對合理選擇疫苗預(yù)防控制該病提出了更高的要求。目前,國內(nèi)有多種疫苗可用于預(yù)防控制及凈化豬偽狂犬病,現(xiàn)簡要介紹如下。

    1.滅活疫苗。制備滅活疫苗,通常是將豬偽狂犬病毒接種到雞胚或敏感細胞內(nèi)進行增殖,經(jīng)一段時間后收獲病毒液,再通過滅活加入佐劑而制成。滅活疫苗安全性較高,不易引起散毒和潛伏感染,在世界各地區(qū)均有應(yīng)用。由于該類疫苗難以誘導(dǎo)細胞毒T細胞發(fā)生反應(yīng)(CTL),只會產(chǎn)生體液免疫,存在很少甚至不能誘導(dǎo)細胞免疫的缺陷;同時,接種后產(chǎn)生的抗體滴度隨著時間的推移會逐漸降低,需要重復(fù)免疫接種,且免疫劑量較大,成本費用較高,有時還易發(fā)生過敏反應(yīng)。

    2.自然缺失弱毒活疫苗。常規(guī)意義上的自然缺失弱毒活疫苗,是將分離到的野毒株經(jīng)非豬源細胞反復(fù)傳代,加入突變劑培養(yǎng)而獲得的疫苗。國際上主流毒株是Bartha株和Buk株。目前,國內(nèi)豬場使用較多的常規(guī)缺失疫苗有Bartha株、SA215株、HB-98株和BUK株等。其中,廣泛使用的是gI/gE雙基因缺失偽狂犬弱毒凍干活疫苗(Bartha-k61株)。

    一般而言,自然基因缺失弱毒活疫苗,由于雙基因缺失,能夠阻斷弱毒株恢復(fù)毒力,并可以與野毒株相區(qū)別,具有良好的免疫原性,安全性高,且價格低廉,一直在防控中發(fā)揮著重要作用。該類疫苗的缺點是主要的毒力基因(TK基因)沒有缺失,存在毒力返強而致該病重新流行的風(fēng)險,同時還存在潛伏感染或向未免疫生豬散毒的可能。

    3.基因工程疫苗。近年來,隨著對豬偽狂犬病毒基因組結(jié)構(gòu)及免疫原性的不斷研究深入,目前包括基因工程缺失弱毒活疫苗、核酸疫苗、亞單位疫苗、重組病毒疫苗等一系列豬偽狂犬病基因工程疫苗被開發(fā)出來,并應(yīng)用于免疫實踐中,獲得了良好效果。

    (1)基因工程缺失弱毒活疫苗。通常將缺失PRV一個主要毒力基因(如TK基因)獲得的疫苗稱為第一代基因缺失疫苗,該類疫苗具有較高的安全性,30~35日齡仔豬接種后能產(chǎn)生中和抗體,并在攻毒后可表現(xiàn)再次免疫應(yīng)答,給豬群提供有效的保護。如四川農(nóng)業(yè)大學(xué)郭萬柱教授團隊研制成功的豬偽狂犬病SA215(TK基因缺失)活疫苗,就是我國第一株動物病毒基因工程疫苗。

    第二代基因缺失疫苗,是指在TK基因缺失的基礎(chǔ)上又缺失相應(yīng)的糖蛋白基因而研制成功的雙缺失或多缺失疫苗株。試驗表明,其顯著特點是可以通過血清學(xué)方法將免疫接種豬與自然感染野毒的豬相區(qū)分,有利于精準(zhǔn)防控,為豬偽狂犬病的凈化提供有力支撐。

    基因缺失區(qū)域明確,返祖可能性極小,是基因工程缺失弱毒活疫苗的顯著優(yōu)點。該類疫苗株具有很強的免疫原性和良好的遺傳穩(wěn)定性,實施免疫后能夠獲得較強的保護力,且安全性較高,但該類疫苗對儲存和運輸條件要求也非常嚴(yán)格,一般情況下豬場難以保證,進而可能影響到實際的免疫效果。

    (2)核酸疫苗。核酸疫苗又稱為DNA疫苗或基因疫苗,實施免疫后能夠激發(fā)動物機體產(chǎn)生針對外源蛋白質(zhì)的特異性免疫應(yīng)答。其主要優(yōu)點是能夠同時激活細胞免疫和體液免疫,避免潛伏感染,不受母源抗體干擾,安全性高,免疫周期長;缺點是雖然可以產(chǎn)生較高的抗體水平,但對強毒攻擊的保護力不太理想。

    (3)亞單位疫苗。亞單位疫苗是通過基因工程技術(shù),將PRV的保護性抗原基因進行克隆并在原核或真核系統(tǒng)中高效表達所獲得的產(chǎn)物制成的疫苗。由于其具有抗原遞呈與免疫增強的雙重作用,且不含核酸遺傳物質(zhì),實施免疫接種后不會產(chǎn)生潛伏感染或引起持續(xù)性感染,能夠?qū)⒚庖邞?yīng)答與野毒感染相區(qū)分,因而有利于豬偽狂犬病的控制和凈化,但由于其免疫原性與弱毒疫苗和滅活疫苗相比較差,生產(chǎn)成本相對較高,應(yīng)用受到一定的限制。

    (4)重組活載體疫苗。由于偽狂犬病的病毒宿主范圍和基因組都比較大,可在不影響PRV毒株增殖的同時插入一個或多個外源基因而重組獲得活載體疫苗。目前,主要有以腺病毒為載體的重組疫苗、以豬痘病毒為載體的重組疫苗及直接以豬偽狂犬病毒為載體的重組疫苗等。

    重組疫苗優(yōu)點是載體病毒較穩(wěn)定,免疫原性持久,能夠誘發(fā)體液免疫和細胞免疫,避免弱毒活疫苗和滅活疫苗免疫的缺陷,接種方便安全,免疫譜相對較廣。比如,接種以豬偽狂犬病毒為載體的重組雙價疫苗,能使豬同時獲得對PRV和CSFV兩種強毒攻擊的保護,因此,重組活載體疫苗不僅對豬偽狂犬病有很好的防控效果,而且對其它病毒類病的免疫防控也有良好的應(yīng)用前景。

    二、疫苗的動態(tài)選擇

    選擇疫苗通常要考慮毒株、效價、佐劑等因素,通過評估確定其安全性和有效性。研究表明,常規(guī)滅活疫苗、弱毒活疫苗以及基因缺失疫苗都有各自的優(yōu)缺點,在生產(chǎn)中可根據(jù)具體情況動態(tài)選用。當(dāng)然,選擇疫苗時,能夠通過疫苗免疫血清與流行毒株的交叉中和實驗,依據(jù)中和效價的高低來選擇更為科學(xué)合理。

    1.重視毒株的匹配。近年來,在實施豬偽狂犬病預(yù)防控制與凈化根除過程中,使用基因缺失疫苗已成為主流趨勢,現(xiàn)有疫苗Bartha株、HB-98株、 SA215株和BUK株發(fā)揮著主導(dǎo)作用,其中大部分國產(chǎn)和進口疫苗采用的均是Bartha毒株(代表產(chǎn)品是Bartha-K61株),用其免疫接種能與自然感染野毒相區(qū)分,其免疫原性好,免疫后能產(chǎn)生較強的免疫力,對預(yù)防豬偽狂犬病經(jīng)典株和變異株均有效,且安全性高、無毒力返強等風(fēng)險,目前不少國家都在推廣應(yīng)用,免疫效果也比較理想。

    一般情況下,對于正在暴發(fā)流行的豬場或野毒陽性豬場或免疫效果不好、抗體水平顯著下降的豬場,應(yīng)選用與其流行毒株一致的弱毒活疫苗,對豬群進行緊急預(yù)防接種,以期迅速建立免疫保護機制,在短時間內(nèi)控制疫病的傳播;而在疫情得到控制并逐漸穩(wěn)定后,為獲得穩(wěn)定且較持久的抗體水平,同時盡量避免使用弱毒活疫苗造成散毒感染,應(yīng)以滅活疫苗為主。如,對豬偽狂犬病野毒陰性豬場實施常規(guī)免疫時,建議使用基因缺失滅活疫苗。

    2.充分考慮疫苗的效價和佐劑。效價即抗原含量,免疫是通過特異性的抗原來產(chǎn)生特異性的免疫力來預(yù)防特定疾病的,因此疫苗每頭份中抗原含量決定著疫苗的效價水平。目前,豬偽狂犬病疫苗的抗原含量單位用TCID50(即半數(shù)細胞感染量)來表示,由于廠家不同,所生產(chǎn)疫苗的抗原含量有所差異,選購疫苗時不能僅看價格高低,還要參考抗原含量,選擇抗原含量高的產(chǎn)品。

    疫苗的佐劑有增強型與普通型之分,增強型的以油佐劑為多,水佐劑則有普通型與增強型兩種。這些佐劑性能特點各異,不能籠統(tǒng)的分出優(yōu)劣。一般來說,油佐劑疫苗抗體產(chǎn)生較慢,但能獲得穩(wěn)定且較持久的抗體水平,缺點是應(yīng)激相對較大;水性佐劑疫苗,抗體產(chǎn)生快,高峰期高,應(yīng)激較小,但抗體維持時間較短,容易出現(xiàn)波動。選擇水佐劑型還是油佐劑型疫苗,主要看免疫的對象和目的,如果主要為了通過母源抗體來保護新產(chǎn)仔豬,給經(jīng)產(chǎn)母豬接種時應(yīng)選用水佐劑疫苗,這樣可以利用水佐劑型疫苗快速產(chǎn)生抗體高峰的特點,保證母豬在產(chǎn)仔時能夠獲得較高的母源抗體水平;如果是使母豬整個生育期的抗體水平長時間保持較高且平穩(wěn)的狀態(tài),同時通過母源抗體既保護仔豬又保護母豬本身,則應(yīng)選用釋放較為平穩(wěn)緩慢、免疫抗體水平能夠維持較長時間的油佐劑型疫苗。

    近年來,為了解決油佐劑疫苗應(yīng)激大的缺陷,同時又保持油佐劑抗體持久、均勻度好的優(yōu)勢,隨著基因缺失疫苗的研發(fā),已有新型的水包油佐劑豬偽狂犬疫苗上市,該類疫苗高效價配以合適佐劑,可以產(chǎn)生更高水平的免疫力,有效阻斷病毒循環(huán)傳播,有利于豬偽狂犬病的控制與凈化,各類豬群均可使用。

    三、正確掌握免疫時機與免疫方法

    防控實踐表明,豬偽狂犬疫苗的首免時機選擇很重要,免疫次數(shù)也并非越多越好。為了達到理想的防控效果,必須抓住豬偽狂犬病毒易感的關(guān)鍵時間節(jié)點,掌握正確的免疫程序和操作方法實施免疫接種。

    1.首免時機的選擇。首免時間的選擇主要通過檢測母源抗體水平來決定,同時還要注意豬場的既往感染壓力,并考慮既往所使用的疫苗種類和質(zhì)量。當(dāng)前,豬偽狂犬疫苗的生產(chǎn)廠家很多,各類產(chǎn)品質(zhì)量不同,抗原效價參差不齊,免疫時間與免疫程序的確定應(yīng)相應(yīng)調(diào)整,不能憑經(jīng)驗一直沿用一套免疫程序。近年來,由于國內(nèi)豬場面臨的防控壓力普遍較大,對仔豬提前實施首次免疫的做法受到推崇,并獲得一定效果,但存在母源抗體和疫苗抗體相互抵消的可能性,掌握不好往往事與愿違。

    根據(jù)工作經(jīng)驗,疫苗的抗原效價越高,產(chǎn)生的免疫力越強,仔豬通過母源獲得的抗體水平就越高,因此選擇疫苗必須嚴(yán)密注意存在的質(zhì)量差異,確定首免時間,避免因抗原效價低而導(dǎo)致母源抗體持續(xù)時間不一的問題。一般而言,在豬場管理水平較高、防控壓力較小的情況下,首免日齡可以往后推,最好先對仔豬進行抗體水平檢測,然后根據(jù)抗體衰減規(guī)律,制訂個性化的免疫程序。

    跟蹤測定顯示,母豬使用高效價基因缺失疫苗免疫后,新生仔豬獲得的母源抗體水平較高,到10~12周左右仍有保護力,所以仔豬的最佳首免時間就應(yīng)安排在10~12周齡;如果使用的是低效價疫苗,母源抗體水平低,只能維持3~4周齡,仔豬就應(yīng)在3~4周齡進行首免。鑒于近年來高效價基因缺失疫苗普遍推廣使用,建議正常豬場在豬70日齡左右進行首免,間隔3~4周后加強免疫一次;而既往感染壓力較大的豬場,還應(yīng)提前對新產(chǎn)仔豬進行滴鼻免疫。

    2.滴鼻免疫的操作。經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn),母源抗體、野毒感染等干擾是造成免疫失敗的主要因素,如果豬場感染壓力持續(xù)加大,臨產(chǎn)母豬抗體水平低下,可提前對仔豬進行免疫接種,特別是周邊省份及本地有豬偽狂犬病流行時,為迅速有效抑制PRV感染,同時免受母源抗體干擾,提早對新生仔豬實施滴鼻免疫是一種十分有效的補充免疫接種手段。

    滴鼻免疫主要通過鼻腔粘膜發(fā)揮作用,能夠快速釋放抗原,成為近年豬偽狂犬病防控中的熱門話題。建議在仔豬1~3日齡進行,疫苗選用基因缺失弱毒活疫苗,佐劑以生理鹽水為好。根據(jù)免疫經(jīng)驗,滴鼻操作時若使用一般針管,不僅劑量很難把握,而且容易被豬噴出,為避免疫苗浪費,提高免疫效果,滴鼻免疫最好使用專用滴鼻器(以霧化液體形式分散,可增加吸收面積),每頭仔豬1毫升,每個鼻孔各0.5毫升。為確保疫苗被充分吸收利用,防止從鼻孔流出,滴鼻前后仔豬鼻孔都應(yīng)保持向上姿勢。

    3.合理制訂免疫程序。經(jīng)相關(guān)調(diào)查表明,由于有些豬場只重視母豬與種豬的免疫接種,而忽視育肥豬的免疫,導(dǎo)致育肥前期出現(xiàn)免疫空白;所用疫苗與免疫程序不適宜,首免時機把握不好,免疫接種劑量不足等因素,若遭遇強毒攻擊極易造成育肥期豬群感染;育肥豬群感染后臨床上出現(xiàn)咳嗽癥狀,可排出病毒再通過呼吸系統(tǒng)引起循環(huán)傳播,導(dǎo)致仔豬群感染,從而使整個豬場的偽狂犬病感染壓力驟然上升。

    在制訂免疫程序時,除進行母源抗體檢測外,為確定是否阻斷病毒循環(huán),最好對豬場進行IgE抗體檢測,IgE檢測一般應(yīng)在育肥豬16周齡以上進行。如果IgE抗體呈陰性,表示沒有野毒株存在;如果IgE抗體呈陽性,則提示有野毒株感染。通過對育肥豬群進行IgE抗體檢測,判斷是否存在野毒株感染情況,同時結(jié)合母源抗體檢測,再制訂個性化免疫程序,對豬偽狂犬病防控有非常重要的意義。

    根據(jù)工作經(jīng)驗,對使用基因缺失疫苗免疫接種的豬場,一般免疫程序為:生長育肥豬10周齡左右首免,一個月后再加強免疫1次;后備母豬配種前一個月免疫1次,間隔一個月加強免疫1次;經(jīng)產(chǎn)母豬每4個月免疫1次,產(chǎn)前1個月左右加強免疫1次;種公豬一般每4個月免疫1次;對于感染壓力較大的陽性豬場,新生仔豬一般1~3 日齡滴鼻首免,間隔一個月加強免疫1次,到10周齡再肌內(nèi)注射1次滅活疫苗。

    總之,豬偽狂犬病防控始終是一個動態(tài)的過程,對疫苗的選用,免疫程序的制訂與執(zhí)行,都應(yīng)依據(jù)母源抗體檢測與血清學(xué)監(jiān)測情況,并結(jié)合發(fā)病臨床癥狀與養(yǎng)殖場及所在地區(qū)流行狀況而確定。

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