中藥木瓜和木瓜籽的化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

代 琪，佘穎祺，葉俏波，羅 霄，雷 蕾，文永盛*

(1.成都市食品藥品檢驗(yàn)研究院 國家藥監(jiān)局中藥材質(zhì)量監(jiān)測評價(jià)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610045；2.成都中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，四川 成都 611137)

木瓜為薔薇科木瓜屬貼梗海棠植物(ChaenomelesSpeciosa(Sweet)Nakai)的成熟果實(shí)，始載于《名醫(yī)別錄》，也是2020版《中國藥典》木瓜的來源[1]，主產(chǎn)于安徽、四川、山東、云南等地，木瓜具有舒筋活絡(luò)、和胃化濕的功效，是治療風(fēng)濕痹痛、吐瀉轉(zhuǎn)筋的常用藥[2]。木瓜籽是貼梗海棠(ChaenomelesSpeciosa(Sweet)Nakai)的成熟種子，據(jù)《中華本草》記載，其具有祛濕舒筋的功能，主治霍亂[3]。古人認(rèn)為“每服木瓜子七粒，微嚼破，溫水吞之，可治療霍亂后煩躁臥不安”，故謂之“木瓜子方”[4]。

縱觀古籍，以木瓜籽為藥入方的方劑甚少，以木瓜入藥時(shí)“去子”[5]“去皮核”[6]“去瓤”[7]的描述不少。但是現(xiàn)行版《中國藥典》“木瓜”項(xiàng)下并未對去籽還是留籽進(jìn)行說明。在各地飲片炮制規(guī)范中，除了貴州省和北京市明確要求炮制時(shí)“篩去籽?！?，其他地方炮制規(guī)范均未對木瓜籽的去留進(jìn)行說明(表1)。當(dāng)前學(xué)界對木瓜果肉的研究頗多，對木瓜籽的研究卻很少，鑒于木瓜籽亦是中藥木瓜的重要組成部分，現(xiàn)將木瓜和木瓜籽的化學(xué)成分及藥理作用進(jìn)行整理、綜述，為深入研究木瓜和木瓜籽提供參考。

1 木瓜所含化學(xué)成分

1.1 三萜類

木瓜中的化學(xué)成分以五環(huán)三萜類化合物為主，三萜類化合物包括齊墩果酸、熊果酸、乙酰熊果酸、3-O-乙酰坡模醇酸、樺木酸等[8]。熊果酸和齊墩果酸是藥典選定的木瓜指標(biāo)成分。代琪等[9]采用HPLC法，以流動(dòng)相為乙腈-0.1%氨水溶液 (用磷酸調(diào)節(jié)pH=7.5) (70∶30)測得25批木瓜的熊果酸含量為0.115 2%～0.670 0%，平均含量為0.358 4%，齊墩果酸含量為0.088 6%～1.014 0%，平均含量為0.254 0%，熊果酸與齊墩果酸的分離度大于2，其中有21個(gè)樣品熊果酸含量高于齊墩果酸。王巍等[10]測得6份宣木瓜籽乙醇提取物的熊果酸平均含量為0.191 5%，但沒有測定齊墩果酸的含量。

從眾多文獻(xiàn)資料中可以看出木瓜中的熊果酸、齊墩果酸的含量高于木瓜籽中的含量。如果木瓜中含木瓜籽較多，就會(huì)降低木瓜指標(biāo)成分(齊墩果酸和熊果酸)的總量，測定結(jié)果可能少于現(xiàn)行版藥典標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的0.5%，造成不合格現(xiàn)象。

1.2 黃酮類

木瓜黃酮類成分主要由蘆丁、槲皮素、柚皮素、兒茶素等組成[11]。李娜等[12]在測定3個(gè)宣木瓜品種不同采收期的黃酮含量后，發(fā)現(xiàn)7月8日宣木瓜總黃酮含量達(dá)到1.62%，隨后不斷下降。翟金萍[13]在進(jìn)行木瓜籽不同極性部分黃酮含量測定時(shí)，按照藥典規(guī)定的比色法操作，發(fā)現(xiàn)沒有生成紅色螯合物，說明木瓜籽中不含黃酮或黃酮含量很低。

1.3 有機(jī)酸

木瓜與木瓜籽都含有機(jī)酸類成分，如奎尼酸、綠原酸、蘋果酸、莽草酸、原兒茶酸、咖啡酸等。周亞菁[14]研究測得5種木瓜水溶性有機(jī)酸總酸量2.84%～4.62%，蘋果酸和莽草酸含量相對較高。不同年份的宣木瓜中木瓜皮的水溶有機(jī)酸總含量略高于木瓜果肉，木瓜籽水溶有機(jī)酸含量0.18%～0.58%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于瓜皮與果肉。

1.4 微量元素

根據(jù)收集的文獻(xiàn)資料，目前學(xué)界常用的測定木瓜微量元素的方法有4種，分別是原子吸收分光光度法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法(ICP-AES)[15]、電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)[16]、火焰原子吸收光譜法(FAAS)。張恒等[17]和王岱杰等[18]均用第一種方法測定不同品種木瓜的微量元素，測得木瓜含有K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn元素，鉀元素和鈣元素的含量尤其多。馬凱旋[19]運(yùn)用FAAS測出皺皮木瓜鈣元素含量遠(yuǎn)高于其余5種微量元素，最高含量為1 606.80 μg/g，Cu平均含量為8.43 μg/g，Mn平均含量為132.02 μg/g，F(xiàn)e平均含量為157.38 μg/g。段玲利等[20]對檸檬籽和木瓜籽采用火焰原子吸收光譜法，測得木瓜籽含Cu 10.75 μg/g，低于檸檬籽，含F(xiàn)e 139.63 μg/g、Mn 190.63 μg/g，均高于檸檬籽?？梢娔竟吓c木瓜籽中均含有豐富的微量元素。

1.5 維生素

根據(jù)商業(yè)部濟(jì)南果品研究所[21]化驗(yàn)分析對比，沂州木瓜的維生素C 含量高于蘋果和梨。張秀真等[22]發(fā)現(xiàn)超聲波法對木瓜果實(shí)中維生素C和維生素B2的提取效果最好，用HPLC法測定后，測得木瓜果實(shí)中維生素C、維生素B1、維生素B2的平均含量分別為49.84、5.88和0.16 mg/100 g。唐克華等[23]在實(shí)驗(yàn)中得出中草藥籽油的提取率為木瓜>火棘>麥冬，維生素E的含量為火棘籽油>木瓜籽油>麥冬籽。赫彬彬等[24]采用索氏提取法提取了木瓜皮、肉、核的油脂，木瓜籽的出油率最高。研究綜合脂溶性維生素E不同結(jié)構(gòu)形式的含量后，發(fā)現(xiàn)木瓜皮脂溶性維生素E的含量均大于木瓜肉和木瓜籽，木瓜果肉與木瓜籽的維生素E的含量相差無幾，說明木瓜籽適合進(jìn)行木瓜籽油的開發(fā)。

1.6 其他成分

徐廣等[25]研究發(fā)現(xiàn)，六月中旬木瓜果仁皮的SOD活性最高，隨著木瓜果實(shí)的生長發(fā)育，果仁皮的SOD酶活力在不斷降低，到達(dá)木瓜采摘時(shí)間七、八月時(shí)，木瓜的SOD主要分布在果肉和果皮，木瓜籽則未見SOD的相關(guān)報(bào)道。

2 藥理作用

2.1 木瓜與木瓜籽共有的藥理作用

2.1.1 抗炎鎮(zhèn)痛免疫作用 木瓜苷(GCS)被認(rèn)為是木瓜發(fā)揮抗炎鎮(zhèn)痛作用的主要部位[26]。福爾馬林試驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生的疼痛反應(yīng)分為兩個(gè)時(shí)相，第一個(gè)時(shí)相是福爾馬林刺激脊髓使疼痛產(chǎn)生；第二個(gè)時(shí)相是局部炎癥介質(zhì)的釋放所致疼痛。汪倪萍等[27]發(fā)現(xiàn)經(jīng)GCS灌胃干預(yù)的小鼠對第一時(shí)相反應(yīng)與模型組無顯著差異，而對第二時(shí)相反應(yīng)的抑制很明顯。將GCS從側(cè)腦室給藥，再給予小鼠熱刺激，對小鼠熱板疼痛反應(yīng)潛伏時(shí)間無明顯改變，說明GCS通過抑制外周炎癥反應(yīng)而達(dá)到鎮(zhèn)痛效果。木瓜苷可使炎癥模型的高水平PGE2下降，ConA、LPS誘導(dǎo)的高水平T細(xì)胞、B細(xì)胞降低，T細(xì)胞亞型比例恢復(fù)平衡，IL-1、IL-2、TGF-β1水平下降，下調(diào)血清高水平的抗CⅡ抗體水平，從而達(dá)到治療炎癥免疫性疾病的目的[28-30]。

三萜類成分通過平衡抗炎因子和促炎因子的分泌可治療RAW264.7細(xì)胞炎癥[31]。莽草酸(SA)也被證明能抑制腹腔肥大細(xì)胞脫顆粒和炎癥介質(zhì)組胺的釋放[32]。

劉淑霞等[33]也發(fā)現(xiàn)，75%木瓜籽乙醇提取液能降低小鼠對熱刺激所致體表疼痛反應(yīng)，提高小鼠對醋酸所致的內(nèi)臟痛閾值，原液組與陽性組對體表疼痛的鎮(zhèn)痛效果相當(dāng)。木瓜籽還能抑制二甲苯所致的耳廓腫脹和肉芽腫生長，降低毛細(xì)血管的通透性，從而降低炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子的通過率，減少對感受器的刺激。陳玉娟等[34]在研究木瓜籽對蟾蜍坐骨神經(jīng)鈣含量的影響時(shí)，用50 mmol K+誘導(dǎo)Ca+增加，木瓜籽稀釋組和原液組的鈣含量均低于對照組，說明木瓜籽的鎮(zhèn)痛作用可能與鈣離子通道的阻斷有關(guān)，這與孔勁松等[35]在研究木瓜黃酮的鎮(zhèn)痛機(jī)制時(shí)得出的結(jié)論相似。王會(huì)堂等[36]以環(huán)磷酰胺所致的免疫功能低下的小鼠為研究對象，發(fā)現(xiàn)木瓜籽氯仿提取物能上調(diào)巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)、血清溶血素及T淋巴細(xì)胞數(shù)，說明木瓜籽對特異性免疫和非特異性免疫都有一定的興奮作用。

2.1.2 抗氧化 木瓜與木瓜籽醇提取物乙酸乙酯相清除DPPH自由基能力最高。田冰梅在DPPH和ABTS+薄層色譜上都發(fā)現(xiàn)了乙酸乙酯相中綠原酸和原兒茶酸的活性斑點(diǎn)，而齊墩果酸和熊果酸均未見明顯褪色現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)中IC50的高低與不同極性部位的多酚含量變化趨勢一致，這與對木瓜籽的研究結(jié)果一致。因此，酚酸類成分可能是木瓜發(fā)揮抗氧化能力的重要活性成分。但木瓜籽的水相提取物對ABTS自由基的清除率最高，說明木瓜籽清除DPPH自由基與ABTS自由基的機(jī)制不同[13，37]。鄧葉俊等[38]發(fā)現(xiàn)皺皮木瓜籽總酚含量達(dá)到538 mg/kg，對DPPH和羥自由基具有一定的清除率，見表2。

表2 木瓜和木瓜籽不同極性部位對自由基的清除能力

在3種極性部位中，熊果酸和齊墩果酸主要分布在乙酸乙酯部位，其次是石油醚部位。在測定抑制豬油過氧化的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，抑制率為乙酸乙酯部位>石油醚部位>正丁醇部位[37]。盛俠[38]發(fā)現(xiàn)齊墩果酸可清除羥自由基、超氧自由基和DPPH自由基，隨濃度增加清除力升高。同時(shí)，齊墩果酸還可提高SOD活性，降低MDA含量。說明木瓜三萜酸類化合物可能在抑制脂質(zhì)過氧化方面有一定作用。

此外，木瓜多糖和黃酮也具有抗氧化能力[39-40]。王夢倩等[41]發(fā)現(xiàn)皺皮木瓜籽的乙酸乙酯萃取物中總黃酮的含量豐富，與翟金萍[13]的研究結(jié)果相悖。

2.1.3 抗腫瘤 經(jīng)MTT法、平板克隆法等方法測定后，發(fā)現(xiàn)木瓜總?cè)颇芤种莆赴〩GC-27細(xì)胞增殖，降低其細(xì)胞活性和線粒體活性，促進(jìn)胃癌HGC-27細(xì)胞凋亡。PI13K/AKt通路的激活是影響癌細(xì)胞增殖生長的重要信號傳導(dǎo)通路之一。木瓜總?cè)瓶山档蚉I13K、AKt及其下游靶標(biāo)NAG-1的蛋白表達(dá)。學(xué)者還選擇了促癌通路PI13K/AKt/mTOR的上游調(diào)節(jié)因子miR-10a及下游效應(yīng)物p70S6K進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，木瓜總?cè)品謩e與miR-10a mimic(miR-10a模擬物)、LY294002(PI13K抑制物)、CCI-779(mTOR抑制物)聯(lián)用后均會(huì)影響PI13K/AKt/mTOR/p70S6K通路的正常表達(dá)，與木瓜總?cè)茊斡脮r(shí)產(chǎn)生的作用相似，提示木瓜抑制胃癌HGC-27細(xì)胞的作用是通過調(diào)節(jié)PI13K/AKt/mTOR/p70S6K通路來實(shí)現(xiàn)的[42-43]。

研究還發(fā)現(xiàn)，綠原酸具有抗腫瘤、抑制細(xì)胞突變的作用[44]。齊墩果酸和熊果酸提取物可使接種H22瘤種的荷瘤小鼠瘤重降低[45]。

皺皮木瓜籽的乙醇提取物對肝癌細(xì)胞HepG2具有一定的生長抑制作用，以正己烷相的抑制作用最為顯著，呈劑量依賴作用，王夢倩等[41]推測木瓜籽的抗癌活性成分為苯基異硫氰氨酸鹽。有報(bào)道顯示，木瓜種子含有的異硫氰酸芐酯可抑制大腸癌細(xì)胞的增殖[46]。還有研究發(fā)現(xiàn)，異硫氰酸鹽的代謝是木瓜籽抗癌的新作用機(jī)制。

2.1.4 保肝作用 木瓜醇提取物和由木瓜籽油、萜類成分和甾類成分組成的木瓜籽提取物都具有保肝作用，可降低四氯化碳致肝損傷小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平，提取物濃度越高，保肝效果越明顯[47-48]。

關(guān)于木瓜保肝機(jī)制的研究較多，李斌等[49]認(rèn)為木瓜對非酒精性脂肪肝炎(NASH)具有一定的預(yù)防效果，其發(fā)揮作用的機(jī)制可能與TLR受體、PD-L1和炎性因子有關(guān)。向婷婷等[50]認(rèn)為木瓜正丁醇提取物的保肝作用可能與抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激偶聯(lián)炎癥反應(yīng)有關(guān)。在對非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的研究中，木瓜醇提物可能通過調(diào)節(jié)SIRT1/FoxO1、miR-199a-5p-HGF/c-Met信號通路保肝[51-52]。劉厚佳等[53]發(fā)現(xiàn)齊墩果酸具有較強(qiáng)抑制HBV復(fù)制的作用。

2.2 木瓜獨(dú)具的藥理作用

2.2.1 抗關(guān)節(jié)炎作用 由于木瓜具有舒筋活絡(luò)的功效，木瓜對關(guān)節(jié)炎的治療作用機(jī)制被廣泛研究。時(shí)孝晴等[54]通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選出槲皮素、表兒茶酸、白樺脂酸和81個(gè)靶點(diǎn)對膝骨關(guān)節(jié)炎的治療作用。顧正位等[55]發(fā)現(xiàn)木瓜醇提取物可治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠模型。

2.2.2 保護(hù)胃腸作用 現(xiàn)代研究表明木瓜對上消化道出血[56]、小腸黏膜損傷[57]、胃潰瘍[58]等胃腸疾病具有一定的治療作用。

2.2.3 其他作用 木瓜可減少APOE基因缺陷小鼠的動(dòng)脈斑塊形成，從而防治動(dòng)脈粥樣硬化[59]。木瓜提取物還可修復(fù)損傷的脊髓神經(jīng)，恢復(fù)運(yùn)動(dòng)功能[60]。

2.3 木瓜籽獨(dú)具的藥理作用

2.3.1 鎮(zhèn)咳祛痰作用 殷金玲等[61]將經(jīng)木瓜籽提取液灌胃后的小鼠放入引咳籠后，給予氨水噴霧刺激，原液組和稀釋組咳嗽潛伏期延長，2分鐘內(nèi)咳嗽次數(shù)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。木瓜籽乙醇提取物能增加小鼠的酚紅排泌量，說明木瓜籽具有祛痰作用。現(xiàn)代臨床應(yīng)用中，多以木瓜治療濕邪傷及脾胃、浸淫筋脈所致的風(fēng)濕痹證、手足麻木、嘔吐泄瀉等。中醫(yī)認(rèn)為木瓜歸肺經(jīng)，《雷公炮制藥性解》載其“入肺、脾、肝三經(jīng)”，《本草蒙筌》認(rèn)為其“平胃以滋脾，益肺而去濕”，古代本草論述木瓜主轉(zhuǎn)筋亦多從肺論治，實(shí)驗(yàn)室中發(fā)現(xiàn)木瓜籽有鎮(zhèn)咳祛痰的作用，有望拓寬學(xué)者對木瓜的研究思路，擴(kuò)大木瓜的現(xiàn)代藥理作用。

3 結(jié)語

(1)木瓜是藥食兩用、營養(yǎng)豐富的食物和藥材，木瓜籽是木瓜的重要組成部位之一，但學(xué)界對木瓜籽的研究很少，從現(xiàn)有的文獻(xiàn)看，木瓜與木瓜籽在化學(xué)成分、藥理作用方面存在著一定差異。有必要對木瓜籽進(jìn)行深入的化學(xué)成分和藥理作用研究，把控木瓜的質(zhì)量，擴(kuò)大對有效資源的利用。

(2)從文獻(xiàn)考證中可以看出木瓜與木瓜籽均含有熊果酸、水溶性有機(jī)酸、銅鐵錳等微量元素及維生素E，其中成熟木瓜中的熊果酸、水溶性有機(jī)酸含量遠(yuǎn)高于木瓜籽，SOD活性也高于木瓜果仁皮，說明木瓜與木瓜籽在藥理基礎(chǔ)上存在著一定的差異，造成兩者在藥效方面的不同，但木瓜和木瓜籽銅鐵錳與維生素E的含量基本相同。此外，目前關(guān)于木瓜籽的黃酮含量仍有一定爭議，需要學(xué)者進(jìn)一步研究。

(3)從藥理學(xué)研究可以看出，木瓜與木瓜籽共同的藥理作用為抗炎鎮(zhèn)痛免疫、抗氧化、抗腫瘤、保肝。木瓜獨(dú)特的藥理作用是抗關(guān)節(jié)炎作用和保護(hù)胃腸等作用，而木瓜籽具有的鎮(zhèn)咳祛痰作用是木瓜沒有的。現(xiàn)行版中國藥典描述木瓜的功效為“舒筋活絡(luò)，和胃化濕”，主要用于濕痹拘攣、腰膝疼痛、暑濕吐瀉、轉(zhuǎn)筋攣痛、腳氣水腫，其中未包括木瓜籽的功效，現(xiàn)行版藥典中對木瓜功效的描述應(yīng)該與木瓜加工時(shí)去籽不去籽相結(jié)合。

本研究從化學(xué)成分及藥理作用對木瓜和木瓜籽進(jìn)行了比較，分析了兩者之間的異同點(diǎn)，為木瓜在產(chǎn)地加工時(shí)去籽還是留籽提供一定的參考依據(jù)，為中國藥典完善木瓜質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供幫助。