食品檢驗(yàn)中的 方法驗(yàn)證和確認(rèn)及其重要性分析

楊麗

食品安全是當(dāng)今全社會(huì)共同關(guān)注的一個(gè)話題，作為食品安全管控的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，食品檢驗(yàn)在其中起著非常重要的作用。食品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，此外還有一些非標(biāo)準(zhǔn)方法和自制方法?！禦T/214-2017檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定能力評(píng)價(jià) 檢驗(yàn)檢測(cè)機(jī)構(gòu)通用要求》中規(guī)定，采用法定標(biāo)準(zhǔn)未收載的檢驗(yàn)方法前都要進(jìn)行方法驗(yàn)證和確認(rèn)。

一、方法驗(yàn)證和確認(rèn)前的準(zhǔn)備

在進(jìn)行方法驗(yàn)證和確認(rèn)前，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)所對(duì)應(yīng)的檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、材料、人員和檢驗(yàn)環(huán)境等直接影響檢測(cè)結(jié)果的因素進(jìn)行評(píng)估，查看本實(shí)驗(yàn)室是否具備能夠準(zhǔn)確執(zhí)行檢驗(yàn)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)方法的能力、是否符合檢驗(yàn)檢測(cè)工作的基本要求。

二、方法驗(yàn)證和確認(rèn)中的三個(gè)重要參數(shù)

實(shí)驗(yàn)時(shí)，檢驗(yàn)人員通過(guò)核查一個(gè)或多個(gè)技術(shù)參數(shù)是否能達(dá)到檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)要求來(lái)驗(yàn)證該方法是否適用于本實(shí)驗(yàn)室，具體參數(shù)包括方法的選擇性、方法的適用范圍、精密度、正確度、檢出限和/或定量限、標(biāo)準(zhǔn)曲線、穩(wěn)健度、靈敏度、結(jié)果的測(cè)量不確定度等。下面就其中幾個(gè)參數(shù)進(jìn)行闡述。

1.精密度。精密度可以通過(guò)多次測(cè)量或者再現(xiàn)性的方法來(lái)取得。重復(fù)性的測(cè)定通常對(duì)一個(gè)樣品測(cè)定7次;或?qū)?個(gè)樣品，每個(gè)樣品測(cè)定4次;或?qū)?個(gè)樣品，每個(gè)樣品測(cè)定3次。一般用計(jì)算測(cè)量所得數(shù)據(jù)的偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，也可用變異系數(shù)表示，計(jì)算得到標(biāo)準(zhǔn)偏差后除以平均值后的百分率即為變異系數(shù)。檢測(cè)過(guò)程中要注意被測(cè)組分含量不同，其變異系數(shù)的要求也不同。再現(xiàn)性可通過(guò)計(jì)算測(cè)量一系列的多個(gè)樣品的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)偏差，或計(jì)算多個(gè)系列測(cè)定結(jié)果數(shù)據(jù)的合成標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示。

2.正確度。根據(jù)檢驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)量時(shí)，存在系統(tǒng)誤差意味著正確度差，一般通過(guò)回收率的測(cè)定來(lái)評(píng)估。100%的回收率并不一定意味著好的正確度，但差的回收率則一定意味著正確度差。測(cè)定回收率時(shí)，應(yīng)盡可能覆蓋整個(gè)濃度測(cè)試范圍，用與樣品的基質(zhì)匹配且濃度相近的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)試?？捎靡阎兌鹊臉?biāo)準(zhǔn)物質(zhì)做加標(biāo)回收測(cè)定，在已知被測(cè)成分含量的樣品中再精密加入一定量的已知純度的被測(cè)成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，依據(jù)檢測(cè)方法測(cè)定。用測(cè)定值與被測(cè)物質(zhì)中含被測(cè)成分量之差，除以加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量來(lái)計(jì)算回收率。注意被測(cè)物質(zhì)濃度水平不同，回收率偏差范圍也不同。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)容應(yīng)包括標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)學(xué)方程式以及標(biāo)準(zhǔn)曲線的工作范圍、濃度范圍等。標(biāo)準(zhǔn)曲線一般作6個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)（包括零濃度），一般以檢出限的5-10倍為第一個(gè)點(diǎn)，以后根據(jù)1倍遞增，最高濃度是最低濃度的10-20倍之間為宜，具體實(shí)驗(yàn)可根據(jù)儀器的靈敏度來(lái)調(diào)整。每個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)測(cè)量時(shí)重復(fù)測(cè)量3次或更多，并計(jì)算平均值。實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)一般是用定量的方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.99，實(shí)際應(yīng)用中線性大于0.999才是比較理想的，這樣在整個(gè)線性范圍內(nèi)都會(huì)有一個(gè)比較滿意的結(jié)果。

方法驗(yàn)證和確認(rèn)結(jié)束后，要出具驗(yàn)證或確認(rèn)報(bào)告。一份完整的方法驗(yàn)證報(bào)告要給出驗(yàn)證內(nèi)容，要有驗(yàn)證人員、使用儀器、使用試劑的詳細(xì)內(nèi)容，分析步驟要簡(jiǎn)略描述，此外還要包括樣品重復(fù)測(cè)定次數(shù)、計(jì)算公式、標(biāo)準(zhǔn)曲線，包含原始數(shù)據(jù)的色譜圖、光譜圖以及這幾次測(cè)定數(shù)據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性是否符合要求、回收率是否在合理范圍內(nèi)等等內(nèi)容。通過(guò)對(duì)某一項(xiàng)或幾項(xiàng)參數(shù)的實(shí)驗(yàn)，來(lái)證明此檢檢驗(yàn)方法是否適用于本實(shí)驗(yàn)室。

一般實(shí)驗(yàn)室對(duì)國(guó)標(biāo)方法缺少方法驗(yàn)證，都是按照標(biāo)準(zhǔn)直接進(jìn)行檢驗(yàn)。方法的驗(yàn)證和確認(rèn)加強(qiáng)了對(duì)檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量、可靠性和一致性的分析和判斷，實(shí)驗(yàn)室人員一定要對(duì)方法驗(yàn)證和確認(rèn)重視起來(lái)，更準(zhǔn)確、科學(xué)地把好食品安全關(guān)口。