骨髓增生異常綜合征患者免疫療法反應(yīng)性的比較

尚碩紅，權(quán)曉燕，何 瑛，馬 強(qiáng)，糟秀梅

骨髓增生異常綜合征(MDS)是一種起源于造血干細(xì)胞的異質(zhì)性髓系惡性克隆性疾病，臨床表現(xiàn)為正常造血受抑或無效造血，血液中一系或多系血細(xì)胞減少，最終向急性髓系白血病轉(zhuǎn)化[1]。臨床中尚無特效的治療方法，隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)與骨髓增生異常綜合征具有密切關(guān)系[2]，且免疫療法能夠有效地改善患者血細(xì)胞情況，反應(yīng)性較好[3]。但對(duì)于病理性發(fā)育不良的MDS患者而言，免疫療法不能有效地提高患者血細(xì)胞的緩解率，患者的反應(yīng)性較差[4]。因此，臨床上需要制定用于預(yù)測MDS患者接受免疫療法治療后反應(yīng)性的標(biāo)準(zhǔn)，以提高治療效果。目前國內(nèi)外對(duì)于本方面的研究較少，故本研究選擇研究基因突變與骨髓增生異常綜合征患者免疫療法反應(yīng)性的相關(guān)性。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院2014年1月-2018年1月收治的67例骨髓增生異常綜合征的患者為研究對(duì)象，根據(jù)患者免疫療法的反應(yīng)性分為反應(yīng)性好組和反應(yīng)性差組(患者治療后中性粒細(xì)胞或血小板降低至50%，血紅蛋白降低至少1.5g/dL，或恢復(fù)輸血依賴性為反應(yīng)性差)，其中反應(yīng)組29例，無反應(yīng)組38例。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合骨髓增生異常綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②首次診斷，且未接受其他治療者；③年齡在25～75歲之間；④無精神疾病、意識(shí)障礙者。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①無其他惡性腫瘤者；②對(duì)免疫抑制藥物過敏者；③合并肝、脾、腎等其他嚴(yán)重的臟器功能障礙者；④合并其他血液系統(tǒng)疾病者；⑤妊娠或哺乳期患者。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)已由醫(yī)院倫理學(xué)委員會(huì)審核批準(zhǔn)，并與患者本人或其家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：所有患者均采用免疫療法進(jìn)行治療，予患者靜脈滴注地西他濱(生產(chǎn)單位:江蘇豪森藥業(yè)集團(tuán)有限公司,國藥準(zhǔn)字:H20130092,50 mg),用量為[20 mg/(m2·d)]，連續(xù)滴注5 d，28 d為1個(gè)療程,治療持續(xù)6個(gè)月以上。在治療過程中若患者出現(xiàn)血紅蛋白低于60 g/L，需予患者輸血處理；若患者出現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)低于10×109/L，或有嚴(yán)重的出血傾向時(shí)，需予患者輸血小板治療。

1.2.2 DNA檢測方法：所有患者在治療前均抽取2 ml的骨髓液放入肝素的采血管內(nèi)，提取骨髓液中的單個(gè)核細(xì)胞，然后使用常規(guī)的方法提取單個(gè)核細(xì)胞內(nèi)的DNA，取1 μg的DNA制備DNA的基因組文庫，而后采用MDS二代測序的基因芯片，并應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，富集目標(biāo)區(qū)域的DNA，于北京海斯特檢驗(yàn)中心進(jìn)行測序，確定基因內(nèi)致病性突變位點(diǎn)。

1.3 觀察指標(biāo)：記錄患者臨床資料，包括年齡、性別、血常規(guī)、乳酸脫氫酶、合并癥；記錄患者的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，包括WHO分型、原始細(xì)胞、骨髓增生程度、IPSS-R、核型、細(xì)胞遺傳學(xué)、CD4+/CD8+比值、HLA-DR15；記錄患者的基因突變，包括SF3B1、ASXL1、TET2、EZH2、STAG2、ZRSR2、IDH2、KDM6A、SETBP1、GATA2、RAD21、WT1、GNAS。

2 結(jié)果

2.1 2組患者生存分析：隨訪24個(gè)月，反應(yīng)組患者的生存率為96.77%，無反應(yīng)組患者的生存率為73.68%，反應(yīng)組患者的生存率明顯高于無反應(yīng)組患者的生存率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.2 2組患者臨床指標(biāo)比較：2組患者性別、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、中性粒細(xì)胞、血紅蛋白、乳酸脫氫酶、伴PNH克隆、伴LGL克隆比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 2組患者臨床指標(biāo)比較

2.3 2組患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較：反應(yīng)組原始細(xì)胞為(8.03±0.47)%,無反應(yīng)組為(7.81±0.56)%反應(yīng)組CD4+/CD8+比值為(1.68±0.33)%,無反應(yīng)組為(1.75±0.42)%。2組患者原始細(xì)胞、骨髓增生程度、核型、細(xì)胞遺傳學(xué)、CD4+/CD8+比值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 2組患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較[n(%)]

2.4 2組患者基因突變比較：2組SF3B1基因比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其余基因突變比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表3。

表3 2組患者基因突變比較[n(%)]

基因反應(yīng)組(n=29)無反應(yīng)組(n=38)χ2值P值STAG23(10.34)3(7.89)0.007>0.05ZRSR23(10.34)2(5.26)0.099>0.05IDH21(3.45)1(2.63)0.281>0.05KDM6A1(3.45)1(2.63)0.281>0.05SETBP11(3.45)2(5.26)0.058>0.05GATA22(6.90)1(2.63)0.058>0.05RAD211(3.45)1(2.63)0.281>0.05WT11(3.45)2(5.26)0.058>0.05GNAS1(3.45)1(2.63)0.281>0.05

2.5 影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性單因素Logistic回歸分析：年齡>50歲(OR=3.021，P<0.05)，IPSS-R(OR=7.875，P<0.05)，RARS(OR=18.261，P<0.05)，HLA-DR15(OR=2.917，P<0.05)，SF3B1(OR=20.364，P<0.05)為影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性相關(guān)危險(xiǎn)因素，見表4。

表4 影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性相關(guān)危險(xiǎn)因素的單因素Logistic回歸分析

2.6 影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性多因素Logistic回歸分析：RARS(OR=9.537,P<0.05)，SF3B1(OR=15.489,P<0.05)為影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見表5。

表5 影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性獨(dú)立危險(xiǎn)因素的多因素Logistic回歸分析

3 結(jié)果

骨髓增生異常綜合征是以骨髓造血細(xì)胞發(fā)生病態(tài)改變或異常造血功能為主要特點(diǎn)的惡性血液系統(tǒng)性疾病[6]，且隨著患者年齡的增長，MDS的發(fā)病率不斷增高，但本病的發(fā)病機(jī)制尚未明確。有研究發(fā)現(xiàn)MDS患者的骨髓增生不良與T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)密切相關(guān)，故免疫治療能夠糾正機(jī)體血細(xì)胞減少的狀態(tài)[7]，但臨床中部分患者對(duì)于免疫治療的反應(yīng)性較差，治療效果欠佳。因此，確定骨髓增生異常綜合征患者免疫療法反應(yīng)性的相關(guān)因素尤為重要，故我院選擇研究基因突變與骨髓增生異常綜合征患者免疫療法反應(yīng)性的相關(guān)性，為臨床提供理論依據(jù)。

本研究通過比較2組患者隨訪24個(gè)月的生存情況，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)組患者的生存率明顯高于無反應(yīng)組，分析原因?yàn)榈匚魉麨I，又名5-氮雜-2-脫氧胞苷酸，是一種天然的脫氧胞苷酸的腺苷類似物，低濃度的地西他濱能夠替代腫瘤細(xì)胞內(nèi)的胞嘧啶與DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶共價(jià)結(jié)合，使得DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶失去活性，起到去甲基的作用，從而達(dá)到治療目的[8-10]。因此地西他濱能夠發(fā)揮更好的免疫治療作用，達(dá)到治療目的，但對(duì)于免疫治療無反應(yīng)的患者，體內(nèi)造血抑制狀態(tài)尚未解除，未能起到治療作用，故反應(yīng)組患者的生存率較高。本研究結(jié)果與李振波等[11]研究結(jié)果一致。

通過比較2組患者的臨床指標(biāo)，結(jié)果顯示反應(yīng)組患者的年齡>50歲、SF3B1基因突變低于無反應(yīng)組，而IPSS-R、HLA-DR15、RARS型明顯高于無反應(yīng)型(P<0.05),對(duì)以上有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的因素先后進(jìn)行單因素和多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，RARS型、SF3B1是影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究發(fā)現(xiàn)RARS型骨髓增生異常綜合征的患者對(duì)免疫療法的反應(yīng)性較差，分析原因?yàn)镽ARS型MDS患者體內(nèi)存在線粒體上鐵蛋白過表達(dá)的狀態(tài)，使得胞漿內(nèi)的鐵池缺乏，導(dǎo)致原幼紅細(xì)胞攝入鐵增多。本研究顯示SF3B1基因突變是影響MDS患者免疫療法反應(yīng)性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果與Zhang等[12]一致。同時(shí)本研究還存在不足之處，由于樣本量較少，研究結(jié)果受到了一定的影響，故需進(jìn)行更大樣本的研究。