酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對梅毒螺旋體感染的診斷價(jià)值

姚金坊

(郟縣人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 平頂山 467100)

梅毒屬于一類具有較強(qiáng)傳染性的性疾病，主要有2種傳染途徑，即性傳染與胎傳染，主要病原體為梅毒螺旋體(treponema pallidum，TP)，檢測特點(diǎn)為透明狀與不易著色，其發(fā)生率隨近年來人口流動(dòng)量持續(xù)性增加而升高[1]。臨床常用檢測方式為血清學(xué)檢測，一般用甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(tolulized red unheated serum test，TRUST)，其特異性較差，具有一定假陽性及假陰性，多用于大樣本初步篩選[2]。因此臨床仍需尋找更為準(zhǔn)確的檢測方式。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)是臨床新型診斷TP感染方式，具有操作簡單、自動(dòng)化度高等特點(diǎn)，在大樣本檢測中具有較高應(yīng)用效果，而在小樣本檢測中應(yīng)用效果需做進(jìn)一步研究。本研究選取84例疑似TP感染患者作為研究對象，旨在分析ELISA的價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料選取2018年3月至2020年3月郟縣人民醫(yī)院收治的84例疑似TP感染者接受ELISA與TRUST檢測，其中男44例，女40例，年齡22～58歲，平均(40.11±8.93)歲，體質(zhì)量指數(shù)18.5～26.9 kg·m-2，平均(22.87±2.11)kg·m-2。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核通過。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①滿足梅毒感染臨床表現(xiàn)，即不同程度硬下疳、陰莖/陰道周邊丘疹或斑塊，腹股溝淋巴結(jié)腫大。②自愿參與本研究，且簽署知情同意書；③無血液系統(tǒng)疾病。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤；②內(nèi)分泌系統(tǒng)病變；③合并代謝系統(tǒng)疾病；④重要器官器質(zhì)性病變嚴(yán)重；⑤伴有嚴(yán)重認(rèn)知障礙或者精神疾病而不配合檢查。

1.3 檢測方法(1)儀器：全自動(dòng)酶標(biāo)儀、ELISA試劑盒、美國BIO-RAD恒溫水浴箱及洗板機(jī)、TRUST試劑盒、ELISA試劑盒；(2)步驟：取靜脈血3～5 mL，以3 000 r·min-1轉(zhuǎn)速離心15 min，取血清，分別采用ELISA、TRUST檢測，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書步驟進(jìn)行。

1.4 觀察指標(biāo)(1)臨床檢查結(jié)果。(2)ELISA檢測、TRUST檢測結(jié)果。(3)ELISA檢測、TRUST檢測的準(zhǔn)確率、特異性、敏感性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值。(4)ELISA、TRUST檢測的分期診斷結(jié)果。(5)ELISA、TRUST檢測的分期符合率與一致性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料(準(zhǔn)確率、敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、分期符合率)以頻數(shù)(n)和百分比(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)； ELISA檢測、TRUST檢測與梅毒臨床分期的一致性采用Kappa檢驗(yàn)，其中Kappa指數(shù)>0.75表示一致性極好，Kappa指數(shù)在0.4～0.75之間表示一致性較好，Kappa指數(shù)<0.4表示一致性差。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床檢查84例疑似TP感染者中，臨床檢查結(jié)果為：陽性67例(Ⅰ期25例、Ⅱ期23例、Ⅲ期19例)，陰性17例。

2.2 ELISA檢測、TRUST檢測ELISA檢測結(jié)果為真陽性66例，真陰性16例；TRUST檢測結(jié)果為真陽性58例，真陰性7例。見表1。

表1 ELISA檢測、TRUST檢測

2.3 ELISA檢測、TRUST檢測的診斷價(jià)值ELISA檢測TP感染準(zhǔn)確率、敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值較TRUST檢測高(P<0.05)。見表2。

表2 ELISA檢測和TRUST檢測的診斷價(jià)值比較[%(n/N)]

2.4 分期診斷結(jié)果ELISA檢測結(jié)果中，無17例、Ⅰ期 24例、Ⅱ期23例、Ⅲ期20例；TRUST檢測結(jié)果中，無16例、Ⅰ 期27例、Ⅱ 期23例、Ⅲ 期18例。見表3。

表3 ELISA檢測和TRUST檢測的分期診斷結(jié)果

2.5 分期符合率與一致性ELISA檢測的分期符合率較TRUST檢測高，且Kappa指數(shù)較TRUST檢測高(P<0.05)。見表4。

表4 ELISA檢測和TRUST檢測的分期符合率與一致性比較

3 討論

梅毒多由TP感染所致，屬于較為常見的性傳播疾病之一，具有較高發(fā)病率，分為Ⅰ～Ⅲ期，其中Ⅰ期、Ⅱ期為早期，此時(shí)傳染性較低，且對患者機(jī)體破壞較少，Ⅲ期為晚期梅毒，傳染性較高，且病程較長，對機(jī)體破壞程度較大[3-4]。目前關(guān)于梅毒發(fā)病機(jī)制并未明確，一旦發(fā)生TP感染，嚴(yán)重影響生存質(zhì)量，甚至增加心理負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致患者產(chǎn)生自殺傾向。因此，早期診斷TP感染極具意義。臨床常用檢測方式包括TP血球凝集試驗(yàn)、TP明膠凝集試驗(yàn)、熒光TP吸收試驗(yàn)等，其中TP明膠凝集試驗(yàn)是基于TP血球凝集試驗(yàn)發(fā)展形成，可減少TP血球凝集試驗(yàn)產(chǎn)生的假陽性與假陰性情況，結(jié)果更為準(zhǔn)確、可靠，并具有特異性強(qiáng)、操作簡便的特點(diǎn)，但價(jià)格昂貴，無法大范圍推廣。因此，仍需尋找更為有效的檢測方式。

臨床常用血清檢測方式為TRUST，在臨床梅毒篩查以及療效判斷中應(yīng)用廣泛，屬于非TP抗原血清的檢測方式，但其檢測無特異性抗原，在臨床實(shí)際應(yīng)用中特異性較差，極易發(fā)生漏診、誤診狀況。因此仍需尋找更為有效檢測手段[5-6]。近年來，ELISA已逐漸成為臨床較為廣泛的檢測方式。本研究結(jié)果顯示，ELISA檢測TP感染準(zhǔn)確率、敏感性、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值較TRUST檢測高，ELISA檢測的分期符合率較TRUST檢測高，且Kappa指數(shù)較TRUST高，說明與TRUST檢測相比，ELISA檢測的準(zhǔn)確率、特異性、敏感性、陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值較高，與臨床分期檢測結(jié)果一致性較高，可作為臨床首選檢測方式。ELISA是隨近年來基于TP基因工程所研發(fā)的一種新型血清學(xué)檢測方式，在固相載體表面吸附的抗原或抗體，經(jīng)酶對抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記，通過洗滌將液相內(nèi)游離成分有效清除，觀察底物顏色變化狀況，對免疫反應(yīng)狀況進(jìn)行判斷。ELISA檢測是酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性與抗原抗體結(jié)合產(chǎn)生的高敏感性與高特異性的一類臨床檢測方式，此外，ELISA具有檢測范圍廣、無需特殊設(shè)備及操作簡單等特點(diǎn)，進(jìn)一步提高了TP感染的臨床診斷價(jià)值[7-8]。

綜上所述，ELISA在TP感染診斷中應(yīng)用價(jià)值較高，可作為臨床診斷首選檢測方式，為臨床治療方案的制定提供參照。ELISA在臨床應(yīng)用時(shí)需嚴(yán)格依據(jù)試劑盒說明書中操作步驟進(jìn)行，以免操作失誤而對最終檢測結(jié)果造成偏差，影響臨床治療效果。