談一談流行性感冒病毒的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

劉健

流行性感冒是一種流感病毒引起的急性發(fā)熱性呼吸道傳染病，以畏寒、頭痛、高熱、全身酸痛、疲勞乏力等全身癥狀為主要表現(xiàn)，患者也會(huì)出現(xiàn)呼吸道癥狀，癥狀相對(duì)較強(qiáng)。流行性感冒多呈自限性，一般病程在3 日～4 日。嬰幼兒、老年人、合并慢性病或心臟病患者、免疫低下患者一旦感染流行性感冒，極有可能并發(fā)肺炎，加重病情，預(yù)后效果差。典型流感患者會(huì)出現(xiàn)明顯的全身中毒癥狀，輕微的呼吸道癥狀，少數(shù)患者也會(huì)出現(xiàn)流淚、畏光等眼部癥狀，閉塞、流涕、咳嗽、咽干等癥狀，體溫可達(dá)到40℃，面部潮紅，有輕微充血。肺部聽診可聞及干啰音，發(fā)病后1 日～2 日內(nèi)發(fā)熱癥狀可到達(dá)高峰，3 日～4 日會(huì)逐漸退燒。呼吸道癥狀在退燒后仍會(huì)遺留3 日～4 日。胃腸型流感多見于兒童，主要是受涼所致，以惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等癥狀為主，一般發(fā)病后2d～3d 即可恢復(fù)正常。流感病毒性肺炎是指流感病毒感染患者從最初的單純型轉(zhuǎn)變?yōu)榉窝仔停蚧疾『笾苯颖憩F(xiàn)為肺炎型?；颊邥?huì)出現(xiàn)高熱持續(xù)不退、呼吸困難、劇烈咳嗽、面色發(fā)紺、泡沫樣黏液痰、痰中帶血等癥狀，查體時(shí)可觀察到雙肺呼吸音低，哮鳴音多，無實(shí)體病變體征。經(jīng)胸透檢查，雙側(cè)肺部可見絮狀陰影，經(jīng)肺門向四周擴(kuò)散。流感病毒性肺炎的病程周期可達(dá)到3 周～4 周，此病多見于潛在肺部、心臟疾病患者、孕婦以及存在免疫功能缺陷人群。中毒型流行性感冒極為少見，主要是由于病毒侵入到神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)內(nèi)，引起的中毒性癥狀，患者也會(huì)出現(xiàn)腦炎、腦膜炎癥狀，患者以昏迷、高熱為主，兒童患者也可出現(xiàn)抽搐表現(xiàn)，成人患者會(huì)出現(xiàn)譫妄癥狀。個(gè)別中毒型病例也會(huì)出現(xiàn)血管神經(jīng)系統(tǒng)紊亂、腎上腺出血等并發(fā)癥，導(dǎo)致患者持續(xù)血壓下降、休克等癥狀。

流行性感冒使由于流感病毒感染所致，流感病毒呈球形，是一種包膜的RNA 病毒，新分離的毒株可呈絲狀。流感病毒結(jié)構(gòu)由三部分組成內(nèi)部為核心，中間為基質(zhì)蛋白，外部為包膜。核心病毒是由核算、核蛋白兩種成分構(gòu)成，又稱為核衣殼，其中有存儲(chǔ)病毒信息的遺傳物質(zhì)，病毒存活所需酶。流感病毒遺傳物質(zhì)是分階段的單股負(fù)鏈RNA，而其中每個(gè)階段均可編碼一種結(jié)構(gòu)的功能蛋白，也可編碼結(jié)構(gòu)蛋白。目前，常見的甲型流感病毒、乙型流感病毒的基因組均為8 個(gè)階段，而丙型流感病毒的階段只有7 個(gè)。流感病毒基因組在復(fù)制過程中，會(huì)出現(xiàn)基因重組，進(jìn)而出現(xiàn)新的病毒株。病毒每個(gè)RNA 階段外均有核蛋白進(jìn)行包繞，核蛋白成螺旋對(duì)稱結(jié)構(gòu)，是一種可溶性抗原，免疫性能穩(wěn)定，變異性較低，具有一定的特異性。流感病毒的生存能力較低，耐熱性較差，一般在56℃環(huán)境內(nèi)病毒的存活時(shí)間就會(huì)大幅縮短，在30 分鐘內(nèi)就可滅活，對(duì)于化學(xué)藥物、紫外線等均具有一定的敏感性，而在低溫環(huán)境中病毒的存活時(shí)間較長(zhǎng)。

流行性感冒發(fā)病突然，傳播速度快，可出現(xiàn)地方性流行，冬季高發(fā)，人們對(duì)于新型流感病毒的變異菌株缺少有效的免疫力，一旦未能及時(shí)控制，極易出現(xiàn)大流行。流感病毒根據(jù)RNP 與M 蛋白的抗原不同，可劃分為甲型流感、乙型乙肝以及丙型流感三種類型。甲型流感根據(jù)HA、NA抗原性差異，可再次劃分為H1～H3、N1～N9 等若干亞型，極易出現(xiàn)變異，一種變異幅度小，屬于量表，成為抗原漂移;一種變異幅度大可形成新的亞型，稱之為抗原轉(zhuǎn)換。若人群推動(dòng)原有細(xì)菌免疫，也會(huì)引起大范圍流行、發(fā)生世界性流行。目前，臨床針對(duì)流感多是采用血常規(guī)、流感病毒抗原檢查、抗體檢查等方式，例如，血凝抑制試驗(yàn)、綜合試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)等。

目前針對(duì)流行性感冒病毒進(jìn)行篩查診斷的方式較多，可通過外周血象檢查，可發(fā)現(xiàn)流行性感冒患者的白細(xì)胞總數(shù)降低，淋巴細(xì)胞數(shù)目相對(duì)增多。病毒分離操作，主要是通過無菌棉簽取鼻咽內(nèi)分泌物，或者從口腔含漱液中分離出病菌，對(duì)流感病毒類型進(jìn)行判斷。血清學(xué)檢查時(shí)，流感病毒感染患者在感染初期或者恢復(fù)期，利用雙份血清抗流感病毒進(jìn)行抗體滴度檢查時(shí)，結(jié)果可出現(xiàn)明顯升高，多是呈現(xiàn)4 倍升高。呼吸道上皮細(xì)胞檢查時(shí)，也可觀察到流感病毒抗原陽性。開展快速血清病毒PCR檢查也有利于對(duì)流行性感冒患者的所感染的病毒進(jìn)行早期診斷。早期開展實(shí)驗(yàn)室檢查，也有利于對(duì)普通感冒、不明原因性肺炎進(jìn)行鑒別診斷。普通感冒患者的呼吸道局部癥狀較重，全身癥狀輕，開展流感病原學(xué)檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果為陰性。流行性病毒感染也需與非典型病原、新冠病毒感染等肺炎進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別診斷。

而實(shí)驗(yàn)室檢查應(yīng)用較多，常用方法包括：（1）病毒分離：主要是在流感病毒后出現(xiàn)癥狀3d 內(nèi)，取患者的咽部含漱液、咽拭子，進(jìn)行胚胎接種、組織培養(yǎng)等，將病毒分離，觀察病毒外形狀態(tài)，對(duì)感染病毒類型進(jìn)行明確，更好指導(dǎo)后續(xù)治療。（2）早期快速特異性檢查：是利用免疫熒光染色法、ELISA 法對(duì)抗原類型進(jìn)行檢測(cè)。檢查時(shí)，是利用鼻洗液中的黏膜上皮細(xì)胞進(jìn)行涂片，通過ELISA 法、免疫熒光染色法（IFA）檢測(cè)出相應(yīng)抗原，此種方法具有檢查迅速，靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，有利于臨床診斷。實(shí)驗(yàn)室開展早期快速特異性檢查時(shí)對(duì)單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè)，也可對(duì)甲型流感與乙型流感進(jìn)行鑒別性診斷。（3）血清學(xué)檢查：一般是在患者起病3 日內(nèi)，發(fā)病2～4 周采集空腹靜脈血，提取血清，利用獲取的雙份血清，開展血凝抑制試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，若患者恢復(fù)期抗體效價(jià)升高4 倍則具有針對(duì)價(jià)值。血清學(xué)檢查多用于臨床回顧性診斷、流行病學(xué)調(diào)查等工作開展中。（4）PCR 檢測(cè)：流感病毒基因通過PCR 進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可根據(jù)流感病毒基因組各個(gè)RNA 階段內(nèi)3 '端與5 '端所具備的保守性，合理設(shè)計(jì)合成引物，然后進(jìn)行PCR 檢測(cè)。PCR 技術(shù)的應(yīng)用，可直接在患者的分泌物內(nèi)檢出患者所感染的流感病毒基因，相比于病毒培養(yǎng)法而言，檢查速度更快，且敏感性更高，但是檢查結(jié)果存在一定的假陽性可能，對(duì)于PCR 檢測(cè)陽性患者也需進(jìn)一步檢查確診。

綜上所述，流行病感冒主要是以流感病毒感染所致，由于流感類型不同，病情嚴(yán)重程度也存在一定差異，及時(shí)開展有效檢查，可與普通感冒、非典型性流感進(jìn)行鑒別診斷，也可保證臨床治療方案制定的準(zhǔn)確性。目前，臨床多采用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)對(duì)流感性感冒患者的病毒類型進(jìn)行檢測(cè)，可及時(shí)了解病毒類型，也可開展有效鑒別診斷，臨床應(yīng)用價(jià)值較高，不同實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方式的優(yōu)劣勢(shì)不同，在臨床實(shí)際檢驗(yàn)過程中格局患者的實(shí)際情況選擇合適的檢驗(yàn)方式，具有重要意義。