PCT、TNF-α和Th17在肝移植術(shù)后患者中的表達(dá)及對(duì)肝移植術(shù)后感染的預(yù)測(cè)價(jià)值

吳雅婷，師 婷，張 錦，高 娣

隨著器官移植技術(shù)的進(jìn)步，肝移植手術(shù)已逐漸成為終末期肝病患者的有效治療手段[1]。然而，有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，肝移植手術(shù)患者術(shù)前和術(shù)后補(bǔ)體和免疫球蛋白等水平較低，且術(shù)中大量輸注血制品和過(guò)量使用麻醉劑，術(shù)后各種導(dǎo)管留置和呼吸機(jī)使用等，導(dǎo)致術(shù)后感染概率較大[2]。因此，如何降低肝移植術(shù)后感染情況，保證患者治療效果是目前臨床研究熱點(diǎn)。

肝移植術(shù)后感染可使患者各種實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)發(fā)生變化[3]。降鈣素原(procalcitonin，PCT)作為診斷細(xì)菌感染的敏感指標(biāo)，廣泛應(yīng)用于臨床，在多種感染性疾病中呈高表達(dá)狀態(tài)[4]。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)是人體內(nèi)最常見(jiàn)的炎性因子。有文獻(xiàn)報(bào)道TNF-α可促進(jìn)自由基及炎性介質(zhì)等釋放，加重感染情況[5]。輔助性T淋巴細(xì)胞17(T helper cell 17，Th17)是近年新發(fā)現(xiàn)的一種CD4+細(xì)胞亞群，可特異性產(chǎn)生白細(xì)胞介素，在自身免疫性疾病和機(jī)體防御反應(yīng)中具有重要的意義[6]。本研究探討PCT、TNF-α和Th17在肝移植術(shù)后患者中的表達(dá)及對(duì)肝移植術(shù)后感染的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月—2019年5月在空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院西京醫(yī)院行肝移植手術(shù)且符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的肝移植術(shù)后120例作為研究組，男81例，女39例；年齡34～65(51.41±5.71)歲；原發(fā)性肝癌合并肝硬化59例，肝硬化失代償32例，原發(fā)性肝癌18例，先天性膽道疾病6例，轉(zhuǎn)移性肝癌5例。另選取同期在該院進(jìn)行體檢的健康體檢者98例作為對(duì)照組，男53例，女45例；年齡35～66(51.69±5.75)歲。根據(jù)是否發(fā)生術(shù)后感染[7]將肝移植術(shù)后120例分為感染組(69例)和未感染組(51例)兩組。各組一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意執(zhí)行。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均順利完成肝移植手術(shù)；②臨床資料完整；③患者和(或)其家屬簽署相關(guān)知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并肝腎功能嚴(yán)重不全及惡性腫瘤者；②合并精神疾病無(wú)法配合本研究開(kāi)展者。

1.3研究方法 研究組術(shù)后均給予免疫抑制等對(duì)癥支持治療。收集所有入選者臨床資料，比較研究組與對(duì)照組及感染組與未感染組PCT、TNF-α和Th17水平，應(yīng)用多因素Logistic回歸分析探討肝移植術(shù)后感染的影響因素，應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線分析PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1.4檢測(cè)方法和判斷標(biāo)準(zhǔn) 研究組于肝移植術(shù)后次日，對(duì)照組于體檢當(dāng)日清晨抽取空腹靜脈血5 ml，使用乙二胺四乙酸抗凝處理后，3000 r/min離心10 min，取上清液備用。應(yīng)用德國(guó)羅氏公司生產(chǎn)的E601電化學(xué)發(fā)光自動(dòng)免疫分析儀檢測(cè)PCT水平；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)TNF-α水平，試劑盒購(gòu)自欣博盛生物科技有限公司；采用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的流式細(xì)胞儀檢測(cè)Th17水平。所有操作均嚴(yán)格按照儀器或試劑盒配套說(shuō)明書(shū)由專業(yè)人員進(jìn)行。

PCT判定標(biāo)準(zhǔn)[4]：PCT<0.5 ng/ml為正常，PCT≥0.5 ng/ml為升高。TNF-α判定標(biāo)準(zhǔn)[5]：TNF-α<30 pg/ml為正常，TNF-α≥30 pg/ml為升高。Th17判定標(biāo)準(zhǔn)[6]：Th17<1%為正常，Th17≥1%為升高。

術(shù)后長(zhǎng)期使用抗菌藥物標(biāo)準(zhǔn)[8]：采用世界衛(wèi)生組織推薦的限定日劑量(DDD)、藥物利用頻度(DDDs)和藥物利用指數(shù)(DUI)作為評(píng)價(jià)用藥是否合理的依據(jù)，本研究DDD值以《新編藥物學(xué)》[9]及藥品說(shuō)明書(shū)規(guī)定的日劑量為準(zhǔn)，DDDs=總用藥量/DDD，DUI=DDDs/總用藥天數(shù)，DUI≤1為用藥量基本合理。

2 結(jié)果

2.1研究組和對(duì)照組PCT、TNF-α和Th17水平比較 研究組PCT、TNF-α和Th17水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1 肝移植術(shù)后患者和健康體檢者兩組PCT、TNF-α和Th17水平比較

2.2感染組與未感染組PCT、TNF-α和Th17水平比較 感染組PCT、TNF-α和Th17水平高于未感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見(jiàn)表2。

表2 肝移植術(shù)后感染與未感染兩組PCT、TNF-α和Th17水平比較

2.3肝移植術(shù)后感染影響因素分析 多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，術(shù)后長(zhǎng)期使用抗菌藥物、深靜脈導(dǎo)管留置時(shí)間≥9 d和PCT、TNF-α、Th17水平升高為影響肝移植術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05或P<0.01)，見(jiàn)表3。

表3 肝移植術(shù)后感染影響因素分析

2.4PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染預(yù)測(cè)價(jià)值的約登指數(shù)分別為0.626、0.638、0.624、0.788；曲線下面積分別為0.789、0.777、0.729和0.912，其中以PCT、TNF-α和Th17 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積最大，見(jiàn)圖1和表4。

表4 PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染預(yù)測(cè)價(jià)值的ROC曲線分析結(jié)果

圖1 PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染預(yù)測(cè)價(jià)值的ROC曲線

3 討論

有研究報(bào)道，手術(shù)創(chuàng)傷和免疫抑制劑使用會(huì)削弱肝移植患者免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致肝移植術(shù)后感染風(fēng)險(xiǎn)顯著增加[10-13]。另有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌感染是導(dǎo)致肝移植術(shù)后死亡的主要原因之一[14-17]。因此，尋找快捷、可靠的術(shù)后感染診斷方法對(duì)肝移植患者具有重要意義。

PCT是一種無(wú)激素活性降鈣素前體，正常情況下主要于甲狀腺及肺部神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞表達(dá)并裂解成降鈣素，一旦機(jī)體遭受細(xì)菌感染，PCT水平可快速上升，且其升高程度與感染呈正相關(guān)[18]。有相關(guān)研究顯示，PCT水平變化與細(xì)菌感染密切相關(guān)，感染嚴(yán)重時(shí)PCT迅速升高，感染控制時(shí)PCT明顯下降，其不受機(jī)體免疫抑制狀態(tài)的影響[19]。Harputluoglu等[20]研究發(fā)現(xiàn)，PCT對(duì)感染診斷具有特異度高和敏感度好等優(yōu)勢(shì)。Ossami Saidy等[21]對(duì)肝移植術(shù)后感染進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，肝移植術(shù)后感染患者PCT水平顯著高于未感染患者及正常人群，提示PCT對(duì)肝移植術(shù)后感染具有一定診斷價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，研究組PCT水平高于對(duì)照組，感染組PCT水平高于未感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與上述Ossami Saidy等[21]的研究結(jié)果基本一致。本研究多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，PCT水平升高為影響肝移植術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步證明PCT水平變化與肝移植術(shù)后感染密切相關(guān)，可作為評(píng)估肝移植術(shù)后感染的指標(biāo)。

TNF-α是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌的一種炎性介質(zhì)。有研究證實(shí)TNF-α可誘導(dǎo)前列腺素E2、膠原酶的分泌和滑膜細(xì)胞的合成，促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生[22]。Dohna Schwake等[23]研究發(fā)現(xiàn)TNF-α可誘導(dǎo)上皮及內(nèi)皮細(xì)胞使腎臟固有細(xì)胞異常增殖，造成炎性因子表達(dá)升高，直接損傷系膜細(xì)胞；且其還具有促纖維化作用。本研究結(jié)果顯示,研究組TNF-α水平高于對(duì)照組，感染組TNF-α水平高于未感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，TNF-α水平升高為影響肝移植術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。說(shuō)明TNF-α水平升高與肝移植術(shù)后感染有密切關(guān)系。

Th17是由輔助性T淋巴細(xì)胞0在白細(xì)胞介素-6和白細(xì)胞介素-23的刺激下分化而成的輔助性T淋巴細(xì)胞，主要分泌白細(xì)胞介素-17、白細(xì)胞介素-21和白細(xì)胞介素-23等促炎因子，在自身免疫調(diào)節(jié)中起著重要作用。有文獻(xiàn)報(bào)道，Th17在多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和過(guò)敏性疾病等自身免疫性疾病中表達(dá)增加[24]。近年，有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，輔助性T淋巴細(xì)胞1是參與移植急性排斥反應(yīng)的主要免疫細(xì)胞，Th17通過(guò)招募中性粒細(xì)胞促進(jìn)炎癥反應(yīng)[25]。同時(shí)，有學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，Th17可誘導(dǎo)炎性細(xì)胞釋放炎性因子，加重血管病變，導(dǎo)致受檢者免疫系統(tǒng)損傷[26]。本研究結(jié)果顯示，研究組Th17水平高于對(duì)照組，感染組Th17水平高于未感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，Th17水平升高為影響肝移植術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。說(shuō)明Th17與肝移植術(shù)后感染密切相關(guān)，肝移植術(shù)后感染患者Th17水平升高，但關(guān)于其具體機(jī)制現(xiàn)尚未明確，還需進(jìn)一步深入研究。

此外，本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，PCT、TNF-α、Th17及3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染預(yù)測(cè)價(jià)值的曲線下面積分別為0.789、0.777、0.729和0.912，其中以PCT、TNF-α和Th17 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積最大。提示臨床可通過(guò)PCT、TNF-α和Th17 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)提高對(duì)肝移植術(shù)后感染的預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，PCT、TNF-α和Th17在肝移植術(shù)后和肝移植術(shù)后感染患者中呈異常狀態(tài)。術(shù)后長(zhǎng)期使用抗菌藥物、深靜脈導(dǎo)管留置時(shí)間≥9 d和PCT、TNF-α、Th17水平升高為影響肝移植術(shù)后感染的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。PCT、TNF-α和Th17 3項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝移植術(shù)后感染有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。