鼻咽部黏膜細胞FH檢測聯(lián)合EB-DNA、CEA在鼻咽癌早期診斷中的價值研究

高海彥 楊海寧 張會玲 王發(fā)治

甘肅省武威市涼州醫(yī)院 733000

鼻咽癌是耳鼻喉科疾病中一種常見的惡性腫瘤，好發(fā)于鼻咽腔頂部和側(cè)壁，在東南亞、華南地區(qū)常見[1-2]。鼻咽癌的發(fā)病率在頭頸部腫瘤中居于首位[3]，嚴重危害人類身體健康。鼻咽癌患者早期癥狀不明顯，不易與其他疾病區(qū)分開，加之生理解剖位置又比較隱蔽，一般體格檢查難以發(fā)現(xiàn)，給臨床診治工作帶來不少困擾。另外，鼻咽癌的局部復發(fā)率和遠處轉(zhuǎn)移率高，而總存活率很低[4]。因此，早發(fā)現(xiàn)早治療是改善鼻咽癌預(yù)后的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，尋求有實際意義的高敏感性檢測方法對鼻咽癌患者提高生存率至關(guān)重要[5]。在本次研究中，對108例鼻咽癌患者、80例良性病變患者、80例健康體檢者進行FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的檢測，為臨床醫(yī)師對鼻咽癌的早期診斷提供依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，選取本院耳鼻喉科2018年6月—2020年6月收治的鼻咽癌患者108例作為A組，良性病變組80例作為B組。所有患者均以手術(shù)后病理活檢為金標準進行分組。同期選取選取體檢中心80例健康體檢者作為C組。其中A組年齡25～66歲，平均年齡(44.26±13.86歲)；B組年齡26～64歲，平均年齡(45.26±14.23歲)；C組年齡24～64歲，平均年齡(44.13±13.62歲)。排除標準：合并其他惡性腫瘤、免疫系統(tǒng)或血液系統(tǒng)疾病。三組研究對象的性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。所有入組患者均知情同意，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準備案。

1.2 檢測方法 三組受試者禁食10h以上于第二天早晨8點空腹采集靜脈血各兩管：EDTA-K2抗凝2ml及無抗凝劑3ml。3 000r/min離心10min，取上清液進行檢測。采用中山大學達安基因股份有限公司實時熒光定量PCR儀檢測EB病毒DNA；采用德國貝克曼公司DXI-800全自動化學發(fā)光分析儀檢測CEA。所有檢測試劑均采用儀器配套試劑，所有檢測項目室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評均在控。同時，對所有入組患者采用鼻咽部黏膜滲液采樣器，從鼻咽部位緩慢插入，左右旋轉(zhuǎn)180°，按照鼻咽后壁、咽鼓管咽口及圓枕、咽隱窩的順序進行緩慢擦拭，采集鼻咽部黏膜滲液，并充分蘸取，將取樣器放入試劑內(nèi)攪動，使其充分混勻，靜置10min后檢驗。

1.3 判斷標準 所有檢測項目的陽性標準均參考試劑盒說明書。EB病毒DNA檢測曲線呈典型的S型曲線且含量>1×103copies/ml時判定EB-DNA為陽性。CEA>5μg/L可判斷為陽性。FH檢測顯示藍色、綠色、藍綠色為陽性，不變色為陰性。聯(lián)合檢測中出現(xiàn)一項陽性即可判斷為陽性。

2 結(jié)果

2.1 三組患者血漿EB-DNA、CEA檢測比較 三組患者中A組患者的血漿EB-DNA、CEA檢測值顯著高于B組、C組，B組EB-DNA、CEA明顯高于C組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組患者的EB-DNA、CEA-檢測平均值比較

2.2 A、B組患者鼻咽部FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較 A組的鼻咽部黏膜細胞穩(wěn)定性FH檢測、EB-DNA、CEA檢測陽性率明顯高于B組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 A、B組患者鼻咽部FH檢測以及血漿EB-DNA、CEA的陽性率比較(%)

2.3 鼻咽癌組患者各項聯(lián)合檢測的診斷效能比較 鼻咽癌組的FH檢測聯(lián)合血漿EB-DNA、CEA三項檢測的靈敏度、特異度、準確度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值、約登指數(shù)分別為92.60%，91.25%，92.02%，93.46%，90.12%，83.85%，三項聯(lián)合檢測的診斷效能均有很大程度提高。見表3。

表3 鼻咽癌組的EB病毒DNA、CEA、SF各項聯(lián)合檢測效能的比較(%)

3 討論

鼻咽癌是頭頸部的惡性腫瘤之一，轉(zhuǎn)移性和侵襲性都比較高，我國南方地區(qū)的發(fā)病率可以達到20～30/10萬[6]。鼻咽部腫瘤多在深部位置，不易發(fā)現(xiàn)，早期可能無癥狀或癥狀不明顯，容易誤診、漏診，錯過最佳診斷時間。手術(shù)有時無法完全切除原發(fā)病灶，因此轉(zhuǎn)移復發(fā)是鼻咽癌患者治療失敗最主要的原因[7]。臨床上早發(fā)現(xiàn)早治療是提高鼻咽癌患者生存率及預(yù)后的關(guān)鍵。

有研究表明[8]，EB病毒感染、食物以及遺傳是造成鼻咽癌發(fā)病地域不同的主要原因。EB病毒的檢測已經(jīng)發(fā)展成為鼻咽癌早期診斷的主要實驗室指標之一。EB病毒是Epstein和Barr在1964年研究非洲兒童Burkitt淋巴瘤時發(fā)現(xiàn)的一種病毒，是傳染性單核細胞增多癥的病原體，與鼻咽癌密切相關(guān)。隨著分子診斷技術(shù)的飛速發(fā)展，EB-DNA已逐漸成為檢測鼻咽癌的早期診斷指標，具有敏感性高、特異性好的優(yōu)點[9]。EB病毒的DNA一般采用實時熒光定量PCR檢測技術(shù)，能準確測定病毒的拷貝數(shù)，真實反映機體病毒的感染情況。EB病毒具有明顯的潛在癌基因，在一定的條件刺激下可從潛在狀態(tài)轉(zhuǎn)化為增殖狀態(tài)，在鼻咽癌腫瘤細胞中高度表達，且在早期階段有一定傳染作用[10]。因此對于鼻咽癌的早期診斷作用巨大。

CEA是一種酸性糖蛋白，具有人類胚胎抗原特性，可引起患者的免疫反應(yīng)。它是一種廣譜的腫瘤標志物，在很多腫瘤細胞中均可表達，在大腸癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、乳腺癌等中均有表達，針對某種腫瘤單獨檢測特異度、靈敏度不高。在腫瘤的鑒別診斷中一般和其他腫瘤標志物聯(lián)合檢測以提高靈敏度和特異度。在本研究中，CEA在鼻咽癌中也有一定程度的表達，這與何平[11]的報道一致。

鼻咽部黏膜細胞FH物質(zhì)一般是以結(jié)合的形式存在于上皮細胞蛋白中。當一些致病因子出現(xiàn)以后會導致細胞穩(wěn)定性失調(diào)、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，F(xiàn)H物質(zhì)從細胞的蛋白質(zhì)中脫落下來，上皮細胞內(nèi)FH物質(zhì)含量也因此增加?；诒茄什筐つぜ毎€(wěn)定性FH檢測可以提示鼻咽部細胞惡變的程度，是具有臨床疾病標志意義的亞細胞分子[12]。

臨床上針對鼻咽癌的單一檢測價值并不高，每一種腫瘤標志物均存在不同程度的缺陷。聯(lián)合檢測對提高鼻咽癌的早期診斷水平十分重要[13]。本研究中，鼻咽部黏膜細胞FH檢測聯(lián)合血漿EB-DNA、CEA檢測在鼻咽癌的早期診斷中具有較高的診斷效能，聯(lián)合檢測的指標可達到靈敏度92.60%、特異度91.25%、準確度92.02%、陽性預(yù)測值93.46%、陰性預(yù)測值90.12%、約登指數(shù)83.85%，這與邱燁等[14]的報道一致。但本次研究樣本量較小，觀察時間較短，尚需要加大樣本量進行更深層次研究。