腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞因子檢測對胃腺癌生存期的臨床意義

張曉艷

河南省內(nèi)黃縣人民醫(yī)院 456300

胃腺癌是我國消化系統(tǒng)腫瘤中發(fā)病率最高的疾病類型，根治性切除手術(shù)是目前治療該病的首選方案，研究表明術(shù)后腫瘤的殘余狀態(tài)和病理分期是影響術(shù)后患者預(yù)后的獨立危險因素，但對于患者術(shù)后生存周期的預(yù)測價值并不高[1-2]。近年來越來越多的研究證實，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在腫瘤原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶中的表現(xiàn)具有特異性，可通過促進腫瘤血管的形成介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫、增殖、轉(zhuǎn)移[3-5]。因此推測腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞檢測可能與胃腺癌預(yù)后和生存有關(guān)。鑒于此，筆者選取既往研究中表現(xiàn)突出的CD68、CD163等巨噬細(xì)胞因子作為觀測對象，觀察在原發(fā)性胃腺癌患者中的陽性表達(dá)特點，以及對5年生存率的影響，旨在為建立早期術(shù)后生存周期預(yù)測體系提供理論依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料 經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，選取2014年1—12月經(jīng)我院行手術(shù)根治術(shù)治療的胃腺癌患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)確診時年齡≥18歲；(2)術(shù)前未接受輔助治療；(3)術(shù)后經(jīng)病理學(xué)組織檢查確診；(4)有完整的術(shù)后門診或電話隨訪記錄。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)腫瘤轉(zhuǎn)移；(2)預(yù)計生存期<6個月；(3)術(shù)后接受他院治療方案或中醫(yī)藥治療者；(4)因其他疾病導(dǎo)致死亡者；(5)中斷隨訪者。本次研究共收入符合上述納排標(biāo)準(zhǔn)患者85例，其中男66例，女19例，年齡32～71歲，平均年齡(61.81±11.96)歲。

1.2 方法

1.2.1 手術(shù)方法：所有患者均接受手術(shù)根治術(shù)，食管癌行食管切除術(shù)，遠(yuǎn)端胃癌行全腹胃切除術(shù)，對于晚期胃癌患者在進行胃切除術(shù)后進行淋巴結(jié)清掃，必要時再行脾切除術(shù)和(或)結(jié)腸切除術(shù)。術(shù)后6例患者接受輔助治療，其中4例接受氟嘧啶放化療，1例僅接受放療，1例僅接受化療。

1.2.2 研究方法：術(shù)后對患者原發(fā)腫瘤組織腫瘤分期、分化等級進行檢驗，并取核心組織采用免疫組織化學(xué)SP法對巨噬細(xì)胞因子CD68、CD163陽性表達(dá)情況進行分析，檢驗所需單克隆抗體均由沃卡威(北京)生物技術(shù)有限公司提供。CD163檢驗以400倍視野下50個視野范圍下計算陽性細(xì)胞數(shù)，陽性等級標(biāo)準(zhǔn)：(1)陽性細(xì)胞占比>50%為3分，陽性細(xì)胞數(shù)占比>10%，≤50%為2分，陽性細(xì)胞數(shù)占比>1%，≤10%為1分，陽性細(xì)胞數(shù)占比≤1%為0分。(2)染色強度：強陽性為3分，中等陽性為2分，弱陽性為1分，陰性為0分。CD68檢驗以400倍視野下50個視野范圍下計算陽性細(xì)胞數(shù)，陽性等級標(biāo)準(zhǔn)：(1)陽性細(xì)胞占比>50%為3分，陽性細(xì)胞數(shù)占比>25%，≤50%為2分，陽性細(xì)胞數(shù)占比≤25%為1分，無陽性細(xì)胞數(shù)為0分。(2)染色強度：強陽性為3分，中等陽性為2分，弱陽性為1分，陰性為0分。根據(jù)CD68和CD163陽性等級和染色強度評分之和評價其陽性表達(dá)水平，3分為低表達(dá)，4～5分為中等表達(dá)，6分為高表達(dá)。

1.2.3 分組：根據(jù)患者5年生存情況分為死亡組(62例)和生存組(23例)。以術(shù)后次日作為起始日，末次隨訪時間或死亡時間為終止計算生存期。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 將所得數(shù)據(jù)錄入SPSS24.0軟件進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料以例表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，組間比較采用t檢驗。通過繪制生存曲線圖，采用Mantel-Cox分析法比較不同陽性表達(dá)水平對生存期的影響，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 死亡組和生存組患者臨床資料比較 單因素分析顯示，兩組患者在年齡、腫瘤分期、分化等級、殘留腫瘤狀態(tài)以及CD68、CD163表達(dá)水平上差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組臨床資料比較(n)

2.2 巨噬細(xì)胞因子與生存期的關(guān)系 85例患者術(shù)后生存期最短6個月，最長66個月，平均生存期34.6個月，中位生存期31個月。經(jīng)Spearman相關(guān)性分析顯示，CD68+、CD163+表達(dá)水平與患者生存期均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.399/-0.350，P<0.05)。

2.3 巨噬細(xì)胞因子不同表達(dá)水平下生存率分析 CD68+、CD163+不同表達(dá)水平下患者5年內(nèi)生存率差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2及圖1、2。

表2 CD68+、CD163+不同表達(dá)水平下患者5年內(nèi)生存情況

圖1 不同CD68表達(dá)下生存曲線

圖2 不同CD163表達(dá)下生存曲線

3 討論

本次研究結(jié)果表明，年齡、腫瘤分期、腫瘤細(xì)胞分化程度以及術(shù)后殘留腫瘤狀態(tài)依舊是影響胃腺癌患者術(shù)后生存期的重要因素，這與既往的臨床研究結(jié)果一致[6-7]。同時在對腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞因子的檢驗中也顯示，CD68+、CD163+高表達(dá)與患者術(shù)后5年生存率有關(guān)[8-9]。腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞是存在于實體腫瘤中的具有特異性的細(xì)胞因子，近年的研究認(rèn)為，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在促進腫瘤血管形成、腫瘤細(xì)胞浸潤、增殖、轉(zhuǎn)移等過程中均有直接的作用[10-11]。其中CD68是來自于腫瘤微環(huán)境中細(xì)菌產(chǎn)物及TNF-γ等刺激物介導(dǎo)產(chǎn)生的巨噬細(xì)胞，而CD163則來自白細(xì)胞介素加速因子介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞，兩者由于來源的不同在腫瘤發(fā)生發(fā)展中也有著不同的作用，前者可增強細(xì)胞的吞噬作用，后者可防止細(xì)胞遭受氧化損傷。既往的研究以胃癌、乳腺癌等患者進行研究，并證實切除腫瘤組織中CD68+、CD163+的濃度明顯高于癌旁組織，并且與病變程度呈相關(guān)性[12-13]。雖然大量的研究證實CD68+、CD163+與腫瘤進展有關(guān)，但其檢測技術(shù)基于核心腫瘤組織病理檢測，因此并不能作為常規(guī)篩查或活體檢驗的依據(jù)。本研究通過收集患者生存期的隨訪資料，并與原發(fā)病灶腫瘤組織CD68+、CD163+檢驗結(jié)果進行分析發(fā)現(xiàn)，不同表達(dá)水平下患者的生存率差異明顯，其中高表達(dá)下患者的5年生存率明顯低于低表達(dá)患者，這在既往的臨床研究少有報道。近年國內(nèi)學(xué)者同類研究結(jié)果均認(rèn)為，腫瘤組織中腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞因子陽性表達(dá)與腫瘤分期、浸潤深度以及淋巴轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，也證實陽性表達(dá)相比陰性表達(dá)患者近期和遠(yuǎn)期生存率均有所降低，其中則包括CD68和CD163[14-15]。而本次研究結(jié)果進一步證實了在陽性表達(dá)下，高表達(dá)水平患者的生存率更低，這為評估患者術(shù)后生存期提供了新的依據(jù)。除此之外，與上述同類研究不同，本次研究以胃腺癌為研究對象，作為胃癌中發(fā)生率最高的疾病類型，其發(fā)生率可占95%以上。手術(shù)切除是目前治療胃腺癌的唯一手段，但絕大多數(shù)患者在手術(shù)時腫瘤已呈彌散性或轉(zhuǎn)移，即使是切除大部分或全部胃組織及其鄰近淋巴結(jié)，其預(yù)后效果也不盡人意，大大降低了患者術(shù)后的生存質(zhì)量。因此早期評估術(shù)后生存期對于是否選擇手術(shù)或治療方案有著重要的指導(dǎo)作用?；诒敬窝芯拷Y(jié)果，筆者認(rèn)為腫瘤組織CD68+、CD163+水平與生存期密切相關(guān)，通過比較術(shù)前活檢CD68+、CD163+水平與術(shù)后病理檢驗是否具有一致性，以及與預(yù)后的相關(guān)性可能為術(shù)前預(yù)判提供依據(jù)。

綜上所述，本研究認(rèn)為腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞CD68+、CD163+高水平表達(dá)是降低胃腺癌術(shù)后生存率的重要因素，可以此為基礎(chǔ)針對術(shù)前病理檢查及其預(yù)后做進一步研究。