痤瘡患者外周血IL-6、TNF-α表達(dá)水平及其與痤瘡嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究

莫惠芳，鐘敏華，儲(chǔ)開(kāi)宇，羅文峰，鐘衛(wèi)紅，湯勇軍，陳怡君，陳海生

佛山市中醫(yī)院1.皮膚科，2.檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000

痤瘡是臨床上很常見(jiàn)的一種炎癥性皮膚病，好發(fā)于青春期，常見(jiàn)于額面部、胸背部等皮脂腺豐富的部位，因其反復(fù)發(fā)作，可能會(huì)遺留色素沉著，影響美觀，給患者心理造成較大負(fù)擔(dān)［1］。炎癥是痤瘡發(fā)病的核心，多種因素參與了痤瘡炎癥的發(fā)生與發(fā)展，如痤瘡丙酸桿菌［2］、與痤瘡相關(guān)的Toll樣受體［3］、細(xì)胞因子及炎癥因子等。其中，Toll受體介導(dǎo)的信號(hào)通路促進(jìn)了IL-6的釋放，從而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)并引起組織損傷［4］。TNF-α不僅能夠促進(jìn)中性粒細(xì)胞的吞噬作用，還能參與啟動(dòng)機(jī)體的固有免疫應(yīng)答，產(chǎn)生其他細(xì)胞因子，使痤瘡的炎癥反應(yīng)更加明顯［5］。有研究顯示，痤瘡患者血清中IL-6、TNF-α等多個(gè)細(xì)胞因子表達(dá)升高［6-7］。本研究檢測(cè)痤瘡患者外周血中IL-6和TNF-α的表達(dá)水平，并分析兩者與痤瘡嚴(yán)重程度的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《中國(guó)痤瘡治療指南(2019版)》中尋常痤瘡的診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］；②年齡15～40歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：①妊娠及哺乳期婦女；②合并心血管、腦血管、肝、腎和其他嚴(yán)重的系統(tǒng)性疾病。按以上標(biāo)準(zhǔn)納入2019年3月至2020年11月在我科門(mén)診就診的面部尋常痤瘡患者114例，其中男34例，女80例；年齡17～37歲，平均(23.96±3.61)歲。參照Pillsbury改良分類(lèi)法［9］，根據(jù)患者皮損數(shù)目及形態(tài)將痤瘡分為Ⅰ～Ⅳ級(jí)，其中Ⅰ級(jí)(輕度)35例，Ⅱ～Ⅲ級(jí)(中度)43例，Ⅳ級(jí)(重度)36例。同期隨機(jī)選擇本院體檢中心健康志愿者30例作為對(duì)照組，其中男12例，女18例，年齡(24.50±3.18)歲。兩組性別(χ2=1.13，P＞0.05)、年齡(t=3.05，P＞0.05)均無(wú)明顯差異，具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核并批準(zhǔn)(2018112)。

1.2 檢測(cè)方法

于晨間空腹采集受試者靜脈血5 mL，低溫離心15 min(2 500 r/min)，吸取上清液置于EP管中，置-20℃冰箱保存待檢。采用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清IL-6、TNF-α水平。檢測(cè)儀采用西門(mén)子公司生產(chǎn)的IMMULITE 2000，試劑盒為配套的IL-6和TNF-α試劑盒，試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。各組IL-6、TNF-α水平符合非正態(tài)分布，采用M(P25，P75)表示，組間比較采用Kruskal-WallisH檢驗(yàn)，兩兩比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。IL-6、TNF-α表達(dá)水平與痤瘡嚴(yán)重程度分級(jí)相關(guān)研究采用Spearman分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 痤瘡患者IL-6和TNF-α的水平變化

行Kruskal-Wallis非參數(shù)檢驗(yàn)(表1)，各組間IL-6表達(dá)水平有明顯差異(Kruskalχ2=29.94，P＜0.05)，而TNF-α表達(dá)水平無(wú)明顯差異(Kruskalχ2=4.10，P＞0.05)；進(jìn)一步用Mann-Whitney U檢驗(yàn)對(duì)組間IL-6表達(dá)水平兩兩比較(表2)，輕度、中度、重度痤瘡組均較對(duì)照組明顯升高(P值均＜0.01)；而中度、重度痤瘡組與輕度組間無(wú)明顯差異(P值均＞0.05)，中度與重度痤瘡組間亦無(wú)明顯差異(P＞0.05)。

表1 各組患者的IL-6及TNF-α水平比較［M(P25，P75)］Table 1 Comparison of IL-6 and TNF-αlevels among groups［M(P25，P75)］

表2 各組患者IL-6水平統(tǒng)計(jì)比較結(jié)果Table 2 Comparison of IL-6 levels between groups

2.2 IL-6和TNF-α與痤瘡嚴(yán)重程度的相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示，痤瘡嚴(yán)重程度與IL-6(r=0.11，P=0.227)及TNF-α(r=0.15，P=0.109)均無(wú)明顯相關(guān)性。

3 討論

流行病學(xué)研究表明，80%～90%的青少年患過(guò)痤瘡［10］。痤瘡發(fā)病機(jī)制未明，主要與性激素水平、皮脂腺分泌旺盛、痤瘡丙酸桿菌感染、毛囊皮脂腺導(dǎo)管異常角化及炎癥等因素有關(guān)［9］。越來(lái)越多的研究證實(shí)，炎癥反應(yīng)是貫穿其始終的重要因素。其中，細(xì)胞因子與炎癥因子在痤瘡炎癥中起著十分重要的作用。痤瘡丙酸桿菌引起痤瘡炎癥主要與免疫應(yīng)答有關(guān)，痤瘡丙酸桿菌可以通過(guò)激活與痤瘡相關(guān)的各種細(xì)胞Toll樣受體(TLR)表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞因子、趨化因子的釋放，從而誘導(dǎo)局部炎癥反應(yīng)和機(jī)體免疫反應(yīng)［11］。

IL-6和TNF-α均由單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，又被稱(chēng)為前炎癥細(xì)胞因子，是啟動(dòng)固有性免疫應(yīng)答反應(yīng)的關(guān)鍵［12］，能促進(jìn)毛囊口的過(guò)度角化以及痤瘡的特征性炎性損傷［13］。IL-6是許多炎癥性疾病的重要介質(zhì)，它對(duì)中性粒細(xì)胞和多種炎癥細(xì)胞具有趨化、激活作用，急性炎癥期也會(huì)相應(yīng)升高［14］。它不僅可以刺激肝細(xì)胞分泌急性期蛋白，還可以刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體和T細(xì)胞增殖，主要在機(jī)體的細(xì)胞免疫、炎癥反應(yīng)和造血功能等方面發(fā)揮重要作用。TNF-α是一種多肽類(lèi)細(xì)胞因子，可以激活炎性細(xì)胞，使其產(chǎn)生一系列的炎性介質(zhì)，進(jìn)而在調(diào)節(jié)炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)和痤瘡的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用［15］，并能趨化激活中性粒細(xì)胞，增強(qiáng)溶酶體酶活性，提高吞噬能力，增強(qiáng)局部炎癥［16］。TNF-α通過(guò)作用于內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生黏附分子來(lái)促進(jìn)炎癥細(xì)胞向皮膚損傷部位聚集，從而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的出現(xiàn)［17］。

本研究結(jié)果表明，痤瘡患者血清中IL-6水平高于對(duì)照組，提示IL-6參與了痤瘡的發(fā)病，與王玉等［7］研究結(jié)果一致；不同嚴(yán)重程度痤瘡患者IL-6水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示IL-6不能用于評(píng)估痤瘡病情的改善與否。既往文獻(xiàn)提示TNF-α參與了痤瘡炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，其血清水平明顯高于健康對(duì)照［6，15，17］。而本研究顯示，痤瘡患者血清TNF-α水平與對(duì)照組無(wú)明顯差異，與痤瘡嚴(yán)重程度間也無(wú)明顯相關(guān)。分析研究結(jié)果不一致的原因可能是：①既往文獻(xiàn)大部分選擇ELISA法檢測(cè)血清TNF-α水平。本研究選擇穩(wěn)定性更強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光法，數(shù)據(jù)可靠性可能更強(qiáng)。②本研究病例組女性患者居多，可能對(duì)結(jié)果有一定影響。

總之，本研究顯示，IL-6參與了痤瘡的炎癥反應(yīng)，提示下一步需開(kāi)展大樣本的臨床研究分析IL-6和TNF-α在痤瘡發(fā)生和發(fā)展中的作用。