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    四種還原糖對(duì)魚(yú)皮膠原肽美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的理化性質(zhì)及增咸作用影響

    2021-07-21 13:20:32張廷奕王燦李治衡汪蓓付余鄔威
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2021年13期
    關(guān)鍵詞:核糖咸味木糖

    張廷奕,王燦,李治衡,汪蓓,付余*,鄔威

    1(西南大學(xué) 食品科學(xué)學(xué)院,重慶,400715)2(西南大學(xué) 食品科學(xué)與工程國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,重慶,400715) 3(西南大學(xué)附屬中學(xué),重慶,400700)4(西南大學(xué) 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,重慶,400715)

    長(zhǎng)期的高鈉鹽飲食是心血管疾病的主要誘發(fā)因素之一,而減少鈉鹽攝入可有效降低罹患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[1]。目前,常使用的食鹽替代物(如KCl、CaCl2或MgCl2)會(huì)導(dǎo)致食品的感官品質(zhì)下降,例如風(fēng)味降低、金屬異味增加[2]。因此,如何在減少鈉鹽的同時(shí)又不犧牲食品的味道成為亟需解決的問(wèn)題。

    食源性肽是以食源性蛋白為原料,經(jīng)過(guò)酶解、分離后的蛋白水解產(chǎn)物,具有良好的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、生理活性以及呈味特性[3]。日本科學(xué)家TADA首次在酪蛋白水解物的N-端類似物合成過(guò)程中發(fā)現(xiàn),Orn-β-Ala·HCl和Orn-Tau·HCl具有與NaCl類似的咸味[4]。不同食品蛋白質(zhì)來(lái)源的短肽,特別是魚(yú)精蛋白[5]、酪蛋白[5]和大黃魚(yú)蛋白[6]來(lái)源的肽具有一定的咸味增強(qiáng)作用。但是咸味肽的提取與合成費(fèi)用十分昂貴,因此不適合實(shí)際應(yīng)用。多肽與還原糖在加熱的條件下會(huì)發(fā)生美拉德反應(yīng),其反應(yīng)產(chǎn)物的滋味顯著提升,主要關(guān)鍵呈味物質(zhì)為分子質(zhì)量1 k~5 kDa的美拉德肽。食源性多肽與還原糖的美拉德反應(yīng)后,少量的美拉德肽可使食物更加美味,同時(shí)對(duì)人體的咸味受體TRPV1t產(chǎn)生增強(qiáng)作用[7-9]。最新研究表明,大豆蛋白[10]、豬血漿蛋白[11]和火雞肉蛋白[12]來(lái)源的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物均有顯著的咸味增強(qiáng)效果。

    羅非魚(yú)在加工過(guò)程中,會(huì)產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物(如魚(yú)皮、魚(yú)骨、魚(yú)鱗等),約占魚(yú)體重的40%~60%。羅非魚(yú)魚(yú)皮富含膠原,是一種良好的蛋白質(zhì)資源。此外,由于膠原中含有大量的甘氨酸,因此酶解產(chǎn)生的膠原肽不具有苦味。通過(guò)蛋白酶水解結(jié)合美拉德反應(yīng)修飾,有望將羅非魚(yú)魚(yú)皮轉(zhuǎn)化為高附加值的咸味增強(qiáng)肽,同時(shí)延伸羅非魚(yú)加工產(chǎn)業(yè)鏈。本研究以羅非魚(yú)魚(yú)皮膠原為原料,通過(guò)蛋白酶水解結(jié)合美拉德反應(yīng)修飾制備咸味增強(qiáng)肽,探究不同還原糖種類對(duì)所形成的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的理化性質(zhì)以及增咸作用的影響,為制備咸味增強(qiáng)肽提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    羅非魚(yú)魚(yú)皮膠原(蛋白質(zhì)含量85.2%),上海鑫汐生物科技有限公司;食品級(jí)D-核糖、D-木糖、葡萄糖、氨基葡萄糖(純度均>99%),深圳一諾食品配料有限公司;食品級(jí)蛋白酶A,日本天野酶制品株式會(huì)社;食品級(jí)NaCl(純度≥99.1%),重慶市北碚區(qū)永輝超市;鄰苯二甲醛(o-phthalaldehyde,OPA)(純度98%)、N-乙酰基-L-半胱氨酸(純度99%)、十二烷基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate,SDS),北京索萊寶科技有限公司;L-亮氨酸(純度99%),瑞士阿達(dá)瑪斯試劑有限公司;葡萄糖含量檢測(cè)試劑盒,南京建成生物工程研究所;其他所用試劑均為分析純。

    1.2 主要儀器

    F-380熒光分光光度計(jì),天津港東科技發(fā)展股份有限公司;UV-6100紫外分光光度計(jì),上海元析儀器有限公司;電熱恒溫水浴鍋,上海齊欣科學(xué)儀器有限公司;PB-10 pH計(jì),Sartorius賽多利斯;UltraScan PRO全自動(dòng)多功能色差儀,美國(guó)HunterLab。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的制備

    參考FU等[11]的方法。加水調(diào)整底物蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度至50 g/L,調(diào)節(jié)pH至7.0、溫度50 ℃,加入蛋白酶A進(jìn)行水解(水解過(guò)程中不調(diào)整pH,以避免引入過(guò)多的Na+)。反應(yīng)5 h后,沸水浴滅酶15 min。冷卻至室溫,離心除去沉淀后,獲得膠原肽。按蛋白質(zhì)與還原糖質(zhì)量比5∶1,添加不同還原糖(木糖、核糖、氨基葡萄糖和葡萄糖)于膠原肽中,調(diào)節(jié)pH至7.0,沸水浴反應(yīng)3 h(經(jīng)過(guò)前期實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,反應(yīng)3 h后的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有最高的咸味增強(qiáng)率,同時(shí)反應(yīng)3 h后還原糖已經(jīng)全部消耗),立即冷卻,冷凍干燥后用于后續(xù)分析。選擇未糖基化的膠原肽作為對(duì)照組。

    1.3.2 pH和色澤變化的測(cè)定

    利用pH計(jì)測(cè)定不同美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的pH值。

    采用色差儀來(lái)測(cè)定美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的L*(亮度值)、a*(紅度值)、b*(黃度值),以超純水作為空白組,總色差(ΔE)按公式(1)計(jì)算:

    (1)

    1.3.3 游離氨基含量測(cè)定

    采用OPA法測(cè)定美拉德反應(yīng)產(chǎn)物中游離氨基含量[13]。OPA試劑由10 mL 50 mmol/L的OPA,10 mL 50 mmol/L的N-乙?;?L-半胱氨酸,5 mL 200 mg/mL的SDS和75 mL 100 mmol/L硼酸鹽緩沖液(pH 9.5)組成。OPA測(cè)定由10 μL樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)與1.2 mL OPA試劑混合,室溫反應(yīng)10 min,通過(guò)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定其在340 nm波長(zhǎng)處的吸光值。使用亮氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,吸光值轉(zhuǎn)換為亮氨酸質(zhì)量濃度當(dāng)量(μg/mL),按公式(2)計(jì)算:

    y=0.000 4x+0.051 3(R2=0.999 2)

    (2)

    式中:x,亮氨酸質(zhì)量濃度,μg/mL;y,吸光值(A)。

    1.3.4 光譜法分析美拉德反應(yīng)產(chǎn)物

    1.3.4.1 紫外光譜分析

    采用紫外光譜法分析美拉德反應(yīng)的程度。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物用超純水稀釋至5 g/L,利用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)為200~500 nm范圍內(nèi)進(jìn)行紫外光譜掃描。

    1.3.4.2 熒光光譜分析

    采用熒光光譜法分析美拉德反應(yīng)的程度。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物用超純水稀釋至5 g/L,借助熒光分光光度計(jì)在激發(fā)波長(zhǎng)為347 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為370~600 nm范圍內(nèi)進(jìn)行熒光光譜掃描。

    1.3.5 分子排阻色譜分析美拉德反應(yīng)產(chǎn)物

    采用Ultimate 3000高效液相色譜系統(tǒng)分析美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布[14]。色譜柱為Phenomenex BioSepTMSEC-S2000。洗脫液為乙腈/水/三氟乙酸。進(jìn)樣體積10 μL,流速0.5 mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)214 nm。采用Chromeleon軟件分析色譜數(shù)據(jù),美拉德肽的分子質(zhì)量分布采用標(biāo)準(zhǔn)樣品與洗脫體積擬合方程計(jì)算。采用以下標(biāo)準(zhǔn)Trp(204 Da),GLV(287 Da),SGNIGFPGPK(1 114 Da)、胰島素(5 700 Da)和肌紅蛋白(17 600 Da),獲得分子質(zhì)量校準(zhǔn)曲線,按公式(3)計(jì)算:

    lgMW=-0.608 6t+6.938 1

    (3)

    式中:MW,分子質(zhì)量,Da;t,洗脫時(shí)間,min。

    1.3.6 美拉德產(chǎn)物的增咸特性評(píng)估

    1.3.6.1 咸味強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)曲線

    根據(jù)文獻(xiàn)[15],建立9人感官評(píng)價(jià)小組,感官評(píng)價(jià)員均具有2年以上的食品感官評(píng)價(jià)經(jīng)驗(yàn),對(duì)不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的增咸作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。首先,小組成員對(duì)3位數(shù)隨機(jī)編碼的5種不同濃度NaCl溶液(0.017、0.051、0.085、0.119、0.153 mol/L)進(jìn)行咸味強(qiáng)度評(píng)分(0=無(wú),14=極強(qiáng)),進(jìn)而建立評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)尺度。根據(jù)每位小組成員對(duì)各濃度NaCl溶液進(jìn)行評(píng)分,得出各濃度溶液咸味強(qiáng)度平均值,繪制NaCl溶液濃度與咸味強(qiáng)度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    1.3.6.2 咸味強(qiáng)度評(píng)價(jià)

    配制不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物(10 g/L)溶液,加入一定量NaCl,使NaCl終濃度為0.051 mol/L。選擇0.051 mol/L的NaCl溶液為對(duì)照,通過(guò)感官評(píng)價(jià)分析不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的咸味增強(qiáng)率。樣品采用3位數(shù)隨機(jī)編碼,取15 mL置于黑色品飲杯中,隨機(jī)順序呈送給各評(píng)價(jià)員,評(píng)價(jià)其咸味強(qiáng)度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算其咸味增強(qiáng)率,按公式(4)計(jì)算:

    (4)

    式中:x1,0.051 mol/L NaCl溶液咸味強(qiáng)度(5.44);x2,樣品咸味強(qiáng)度。

    1.3.7 數(shù)據(jù)處理

    每組試驗(yàn)重復(fù)3次,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。采用SPSS 22.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析和Pearson相關(guān)性分析,并用Duncan法進(jìn)行事后多重比較(P<0.05代表有顯著性差異,P>0.05代表無(wú)顯著性差異)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的pH和色澤變化

    美拉德反應(yīng)過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的化學(xué)反應(yīng),引起反應(yīng)產(chǎn)物pH和色澤的變化[16]。不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的pH呈不同程度的下降,分別下降至6.23(核糖)、6.35(氨基葡萄糖)、6.69(木糖)和6.95(葡萄糖)。由于美拉德反應(yīng)過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一些酸性物質(zhì)(乙酸等),同時(shí)美拉德反應(yīng)會(huì)消耗膠原肽的氨基,進(jìn)而導(dǎo)致反應(yīng)體系的pH下降。

    美拉德反應(yīng)高級(jí)階段會(huì)生成類黑精等褐色物質(zhì),引起反應(yīng)產(chǎn)物色澤的變化。不同還原糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的色差值如表1所示。與對(duì)照組相比,核糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物a*值和L*值變化顯著。不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的b*值呈現(xiàn)上升的趨勢(shì),表明美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有明顯的黃色特征。此外,不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的總色差(ΔE*)變化趨勢(shì)為核糖(14.19)>氨基葡萄糖(5.40)>木糖(3.65)>葡萄糖(0.31),這與pH值變化趨勢(shì)一致,其中核糖導(dǎo)致美拉德產(chǎn)物的褐變最強(qiáng)烈,主要由于核糖作為五碳糖,比六碳糖具有更高的反應(yīng)活性[17]。

    表1 不同還原糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的色差值

    4種還原糖對(duì)應(yīng)的膠原肽美拉德反應(yīng)產(chǎn)物如圖1所示,該結(jié)果與總色差結(jié)果一致,即核糖顏色最深,而葡萄糖顏色最淺。

    圖1 四種還原糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的照片

    2.2 游離氨基含量變化

    在美拉德反應(yīng)過(guò)程中,肽的游離氨基與體系中還原糖的羰基發(fā)生反應(yīng),造成氨基的損失[17]。游離氨基含量的減少,可間接地反應(yīng)出美拉德反應(yīng)的程度。圖2結(jié)果表明,與對(duì)照組相比,除氨基葡萄糖,其他還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的游離氨基濃度顯著下降(P<0.05),該結(jié)果與JIANG等[18]的結(jié)果一致,即美拉德反應(yīng)后,其反應(yīng)產(chǎn)物的游離氨基含量下降。氨基葡萄糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物游離氨基濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05),主要是由于其自身含有氨基,造成其反應(yīng)產(chǎn)物樣品濃度高于膠原肽對(duì)照組。

    圖2 不同還原糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的游離氨基含量

    在本研究中,其他3種還原糖導(dǎo)致游離氨基下降的順序?yàn)楹颂?木糖>葡萄糖。

    2.3 紫外、熒光光譜分析

    紫外掃描光譜法可用于監(jiān)測(cè)美拉德反應(yīng)的進(jìn)程[19]。320 nm處的吸光值可用于衡量美拉德反應(yīng)中間產(chǎn)物的形成,而420 nm處的吸光值常用于衡量美拉德反應(yīng)終末產(chǎn)物(類黑精等)的形成[12]。在本研究中,不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的紫外掃描光譜如圖3所示。與對(duì)照組相比,美拉德反應(yīng)產(chǎn)物在280~420 nm具有更高的吸光值,其大小順序?yàn)楹颂?氨基葡萄糖>木糖>葡萄糖。核糖和氨基葡萄糖在320和420 nm處具有更高的吸光值,說(shuō)明他們?cè)诿览路磻?yīng)過(guò)程中產(chǎn)生了更多的中間產(chǎn)物和終末產(chǎn)物,該結(jié)果與pH和色澤分析結(jié)果高度相關(guān)。在相同反應(yīng)條件下,五碳糖的反應(yīng)速率大于六碳糖,進(jìn)而形成了更多的美拉德反應(yīng)中間產(chǎn)物和終末產(chǎn)物[20]。核糖作為一種五碳糖,具有極強(qiáng)的反應(yīng)速率。因此,本研究中核糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有較高的反應(yīng)程度。

    圖3 不同還原糖與膠原肽的美拉德產(chǎn)物紫外吸收光譜圖

    熒光掃描光譜法可用于評(píng)估美拉德反應(yīng)產(chǎn)生的小分子熒光產(chǎn)物[12,21]。不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的熒光掃描光譜圖見(jiàn)圖4??傮w而言,與對(duì)照組相比,各個(gè)反應(yīng)產(chǎn)物在400~550 nm具有更高的熒光強(qiáng)度(最大熒光強(qiáng)度λ=430 nm),說(shuō)明形成了具有熒光吸收的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物。不同還原糖的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物熒光強(qiáng)度大小順序?yàn)榘被咸烟?木糖>核糖>葡萄糖。其中,氨基葡萄糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有更多的熒光物質(zhì)(與紫外掃描光譜結(jié)果類似),主要是由于形成的美拉德反應(yīng)中間產(chǎn)物具有熒光特性,可以作為褐色類黑精等物質(zhì)前體,所以美拉德體系中熒光強(qiáng)度與紫外光吸收強(qiáng)度表現(xiàn)出不同趨勢(shì)[22]。

    圖4 不同還原糖與膠原肽的美拉德產(chǎn)物熒光光譜圖

    2.4 分子質(zhì)量分布

    采用分子排阻色譜分析美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布,結(jié)果如圖5所示。與對(duì)照組相比,不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布變化不顯著,其中分子質(zhì)量<1 kDa肽組分略有下降,主要?dú)w因于低分子質(zhì)量的小肽具有較高反應(yīng)活性,參與美拉德反應(yīng)后比例降低[11]。1 k~5 kDa的美拉德肽組分比例增加不顯著(P>0.05),可能是由于交聯(lián)反應(yīng)以及分子質(zhì)量>5 kDa的肽組分降解導(dǎo)致。還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的分子質(zhì)量變化不顯著,主要是由于各實(shí)驗(yàn)組中熱降解和交聯(lián)同時(shí)發(fā)生,達(dá)到了一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)[22-25]。值得一提的是,分子質(zhì)量為1 k~5 kDa的美拉德肽可以作為風(fēng)味增強(qiáng)物質(zhì),有助于增加食物的咸味強(qiáng)度[9]。FU等[11,14]研究表明,豬肌肉蛋白水解物與氨基葡萄糖的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布比例與水解物之間無(wú)顯著差異。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有更高比例的1 k~5 kDa肽組分,是否能提高其咸味增強(qiáng)特性,需要進(jìn)行感官實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。

    圖5 不同還原糖與膠原肽的美拉德產(chǎn)物的分子質(zhì)量分布

    2.5 咸味增強(qiáng)作用評(píng)價(jià)

    根據(jù)不同NaCl溶液濃度與咸味強(qiáng)度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=75.49x+1.716 7,R2=0.980 4。將4種還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物加入NaCl溶液后(終質(zhì)量濃度為10 mg/mL),其咸味強(qiáng)度評(píng)價(jià)結(jié)果見(jiàn)表2??傮w而言,4種還原糖美拉德反應(yīng)的產(chǎn)物呈現(xiàn)出不同的增咸效果。木糖、核糖及氨基葡萄糖經(jīng)過(guò)美拉德反應(yīng)后均具有一定咸味增強(qiáng)作用,然而不同還原糖間差異不顯著(P>0.05)。與NaCl對(duì)照溶液(51 mmol/L)相比,木糖、核糖和氨基葡萄糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的咸味增強(qiáng)率分別為8.64%、6.25%和18.01%,其中氨基葡萄糖增咸效果顯著(P<0.05),可能是由于氨基葡萄糖具有較高的反應(yīng)速率。

    表2 不同還原糖與膠原肽的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的咸味增強(qiáng)率

    在前期實(shí)驗(yàn)中,以葡萄糖為例,測(cè)定美拉德反應(yīng)3 h后葡萄糖的消耗量超過(guò)91.5%。該結(jié)果表明,在溫度100 ℃、膠原肽與葡萄糖添加質(zhì)量比例為5∶1、反應(yīng)時(shí)間3 h,絕大部分葡萄糖被消耗。在相同的美拉德反應(yīng)條件下,4種還原糖的反應(yīng)活性為核糖>氨基葡萄糖>木糖>葡萄糖,考慮到其他3種還原糖比葡萄糖具有更強(qiáng)的反應(yīng)活性,因此在美拉德反應(yīng)過(guò)程中完全消耗。此外,本研究美拉德反應(yīng)中蛋白質(zhì)與還原糖質(zhì)量比為5∶1,因此體系中糖含量較低,加之它們的甜度值也較低(核糖沒(méi)有甜味),即使有剩余,對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物的咸味影響很小。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與之前研究結(jié)果一致,即不同還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)人咸味受體TRPV1t產(chǎn)生不同增強(qiáng)作用,增咸趨勢(shì)為氨基葡萄糖>木糖>葡萄糖[7]。課題組前期研究表明,豬血漿蛋白水解物與氨基葡萄糖的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物能夠起到一定的增咸作用,其主要原因是反應(yīng)產(chǎn)物中含有咸味增強(qiáng)作用的美拉德肽(1 k~5 kDa),但是其確切的增咸分子機(jī)制尚未闡明。王欣等[26]發(fā)現(xiàn)雙酶酶解哈氏仿對(duì)蝦蛋白可將其酶解產(chǎn)物的感官咸味強(qiáng)度從10 mmol/L NaCl 提高至55 mmol/L NaCl。陳瑞霞等[27]研究發(fā)現(xiàn),淘汰蛋雞蛋白酶解物可將50 mmol/L NaCl 溶液的咸味強(qiáng)度提升26.2%。本研究中氨基葡萄糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物有望作為咸味增強(qiáng)物質(zhì)在食品領(lǐng)域應(yīng)用,然而其確切的增咸構(gòu)效關(guān)系有待進(jìn)一步研究。

    3 結(jié)論

    探究核糖、木糖、葡萄糖和氨基葡萄糖對(duì)魚(yú)皮膠原肽美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的理化性質(zhì)和咸味增強(qiáng)作用的影響,發(fā)現(xiàn)4種還原糖得到的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有不同的理化特性及增咸作用,其中氨基葡萄糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的增咸效果顯著。4種還原糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物pH和游離氨基含量呈下降趨勢(shì),核糖和氨基葡萄糖膠原肽美拉德反應(yīng)產(chǎn)物總色差變化顯著。氨基葡萄糖-膠原肽美拉德反應(yīng)產(chǎn)物形成了大量的中間產(chǎn)物和終末產(chǎn)物。美拉德反應(yīng)產(chǎn)物中1 k~5 kDa肽組分比例增加,主要是形成具有咸味增強(qiáng)作用的美拉德肽。不同美拉德反應(yīng)產(chǎn)物具有不同的咸味增強(qiáng)作用,其趨勢(shì)為氨基葡萄糖>木糖>核糖>葡萄糖,其中氨基葡萄糖美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的咸味增強(qiáng)作用最佳,能夠?qū)?1 mmol/L的NaCl溶液的咸味感知強(qiáng)度提高18%。然而,美拉德反應(yīng)產(chǎn)物的構(gòu)效關(guān)系以及確切的增咸機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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