急性熱應激對肉雞抗氧化指標的影響

許師源，張峻瑋，張宏玲

（吉林農(nóng)業(yè)科技學院 動物科技學院 132101）

熱應激是家禽生產(chǎn)養(yǎng)殖中經(jīng)常面臨的問題之一，給禽業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟損失。當熱應激發(fā)生時，如果不能及時采取積極有效的防治措施，持續(xù)的熱應激會引起機體出現(xiàn)中暑，會對機體造成廣泛損傷作用,危及體內(nèi)各個系統(tǒng),導致器官組織在功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)上發(fā)生改變,甚至造成動物死亡。本研究以肉雞為試驗動物，建立急性熱應激模型，通過臨床觀察、抗氧化指標檢測等技術(shù)，探討熱應激條件下肉雞肝臟損傷的相關(guān)指標的變化。為探討熱應激條件下肉雞肝損傷的發(fā)病機理提供理論依據(jù)，對預防和抵抗熱應激有重要的實踐指導意義。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及分組

將60只10日齡的肉雞，隨機分為對照組、熱應激組、VC組，每組20只。各組動物常規(guī)飼養(yǎng)，自由采食飲水。所有雞飼喂全價飼料，其中，VC組飲用水中預混入VC溶劑（按250mg/kg標準）。每日光照時間維持10h左右，溫度維持在25℃左右，嚴格按照肉雞飼養(yǎng)標準飼養(yǎng)。待雞經(jīng)過一周的環(huán)境適應后，除對照組外，熱應激組和VC組雞分別進行熱應激處理（溫度為38±1℃，濕度為55%～65%）。

1.2 樣品采集與處理

待高溫應激分別持續(xù)2h、5h和10h時，對照組、熱應激組和VC組各選取5只雞,進行心臟無菌采血，分離血清備用。

1.3 檢測項目與方法

（1）NO含量測定——硝酸比色法；（2）GSH-Px活力測定——DTNB顯色法。

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有數(shù)據(jù)采用 SPSS軟件對本次試驗數(shù)據(jù)進行分析。

2 試驗結(jié)果

2.1 熱應激對肉雞血清中NO含量影響

數(shù)據(jù)結(jié)果表明，熱應激2h階段，熱應激組雛雞血清中NO含量升高，VC組NO含量降低，熱應激組與對照組相比，組間差異極顯著（p＜0.01），VC組與對照組相比，組間差異不顯著（p＞0.05）；5h階段，熱應激組和VC組NO含量有升高。

趨勢；各組與對照組相比，組間差異極顯著(p＜0.01)；10h階段，VC組NO含量比5h階段降低,但仍然高于對照組，與對照組相比差異極顯著(p＜0.01)，熱應激組NO含量繼續(xù)升高，與對照組相比差異極顯著，VC組與對照組比較差異顯著。

表1 熱應激肉雞血清中NO含量的變化（U/mL，n=8）

2.2 熱應激對肉雞血清中GSH-Px活性影響

由表2可以看出，熱應激2h階段，熱應激組和VC組肉雞血清中GSH-Px活性略有下降趨勢；與對照組相比，差異極顯著（p＜0.01）。VC組與對照組相比，組間差異顯著（p＜0.05）；5h階段，熱應激組和VC組GSH-Px活性繼續(xù)降低；各組與對照組相比，組間差異極顯著(p＜0.01)；10h階段，VC組GSH-Px活性比5h階段升高,但仍高于對照組，與對照組相比差異極顯著(p＜0.01)，熱應激組GSH-Px活性繼續(xù)升高，與對照組相比差異極顯著，VC組與對照組相比差異不顯著(p＞0.05)。

表2 熱應激對肉雞血清中GSH-Px活性的變化（U/mL，n=8）

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，熱應激組和VC組肉雞血清中NO含量明顯增高，同時GSH-Px活性下降。已有研究表明，熱應激顯著抑制機體氧自由基代謝，是造成該環(huán)境下機體免疫力下降的原因之一，氧自由基的產(chǎn)生在熱應激性的病理過程中起重要作用[1]。在正常情況下，生物體內(nèi)氧自由基產(chǎn)生、利用和清除保持著動態(tài)平衡，自由基清除主要依靠體內(nèi)NO、SOD、GSH-Px等酶類物質(zhì)[2]。當機體受應激刺激時，會誘導NO的產(chǎn)生，NO與體內(nèi)超氧陰離子（0-2）等活性氧反應介導細胞毒作用，造成生物膜結(jié)構(gòu)和功能損傷。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）是機體內(nèi)一種重要的過氧化物分解酶，能清除細胞內(nèi)有害的過氧化代謝產(chǎn)物，阻止脂質(zhì)過氧化連鎖反應，從而對細胞膜結(jié)構(gòu)和功能起到保護的作用[3]。過量的O-2，H2O2能使還原型谷胱甘肽氧化成氧化型谷胱甘肽，進而抑制GSH-Px酶的活性，引起動物免疫力下降，誘發(fā)各種疫病[4]。楊鳳微等（2009年）研究證實，冷應激能引起雛雞血清NO含量升高、GSH-PX活性降低，使機體抗氧化系統(tǒng)遭到破壞[5]。Gumuslu等學者在對小鼠慢性冷應激研究過程中，發(fā)現(xiàn)冷應激可使小鼠紅細胞CuZn-SOD活性下降，GSH-Px活性升高[6]。

在熱應激條件下，VC有利于維持細胞膜的完整性，能增強白細胞吞噬功能和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)功能，另外VC能減輕熱應激造成的氧化應激損傷，提高超氧化物酶和谷胱甘肽的活性。孫延鳴等發(fā)現(xiàn)，預先添加VC能顯著改善熱應激產(chǎn)蛋雞血清ALT、LDH、TP等生化指標[6]。然而 Nockels卻發(fā)現(xiàn)，高溫條件下在肉雞的日糧中添加200mg/kg VC并不能改善各項指標和減少死亡率。本試驗結(jié)果中，熱應激組肉雞隨著熱應激時間的持續(xù)，NO含量升高，GSH-Px活性降低，總體趨勢與所報道的研究結(jié)果基本一致，表明熱應激時，肉雞體內(nèi)氧化-抗氧化平衡被破壞，導致氧自由基生成增多，對機體造成一定程度上損害。VC組在熱應激初期NO含量降低,中期升高,末期又下降，NO總體水平比未添加組要低，說明VC在緩解熱應激損傷方面起到了一定的作用。