三陰性乳腺癌的超聲圖像特征及其與P53、BRCA1蛋白表達(dá)的相關(guān)性

陳功泉 石琳 胡卯秀 劉宇 秦瓊

三陰性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）具有較高的侵襲性，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)大，復(fù)發(fā)率高，預(yù)后欠佳［1］。研究［2］顯示，乳腺癌病變特征復(fù)雜，不同患者的組織生物學(xué)特性存在差異，可能與部分基因的異常表達(dá)相關(guān)。P53是一種抑癌基因，對(duì)細(xì)胞凋亡及增殖均有調(diào)節(jié)作用，具有較高的突變率，突變后會(huì)導(dǎo)致其功能受損，無(wú)法確保細(xì)胞凋亡、增殖的平衡性，導(dǎo)致抑癌基因轉(zhuǎn)變成癌基因，促使腫瘤進(jìn)展，為腫瘤轉(zhuǎn)移提供條件［3-4］。BRCA1蛋白對(duì)腫瘤進(jìn)展亦有影響，其在腫瘤組織內(nèi)無(wú)表達(dá)或極低表達(dá)，基因突變后可使基因產(chǎn)物發(fā)生變化，導(dǎo)致抑癌基因作用削弱［5］。P53、BRCA1蛋白均與腫瘤發(fā)生、進(jìn)展相關(guān)，故可能在TNBC中存在異常表達(dá)。超聲可較好地觀察乳腺癌病灶的生長(zhǎng)形態(tài)，但由于TNBC缺乏典型的乳腺癌超聲圖像特征，因此準(zhǔn)確診斷有一定難度［6］。本研究通過(guò)觀察TNBC患者的超聲圖像特征及P53、BRCA1蛋白表達(dá)情況，分析二者間的相關(guān)性，旨在為臨床診療提供參考依據(jù)。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2019年2月至2020年2月我院收治的女性乳腺癌患者168例（均為單發(fā)病灶），年齡30～65歲，平均（40.39±7.81）歲；絕經(jīng)64例，未絕經(jīng)104例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移95例，未轉(zhuǎn)移73例；組織學(xué)分級(jí)Ⅰ級(jí)48例，Ⅱ級(jí)76例，Ⅲ級(jí)44例；脈管癌栓95例，無(wú)脈管癌栓73例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期97例，Ⅲ～Ⅳ期71例；非浸潤(rùn)型管癌31例，浸潤(rùn)型管癌137例。所有患者根據(jù)孕激素受體（PR）、雌激素受體（ER）、人表皮生長(zhǎng)因子受體-2（Her-2）的不同表達(dá)分為T(mén)NBC組61例和非TNBC組107例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)；②均于術(shù)前1周接受超聲檢查；③免疫組化、超聲及病理檢查資料均齊全；④認(rèn)知功能、精神狀態(tài)正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前行放療、化療患者；②伴其他原發(fā)性腫瘤患者；③合并其他免疫系統(tǒng)病患者；④就診前有乳腺手術(shù)史。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

二、儀器與方法

1.超聲檢查：使用麥迪遜MySono U6彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率7.5～12.0 MHz。受檢者取仰臥位，雙臂上舉充分暴露雙側(cè)乳房及腋下，以乳頭為中心進(jìn)行探查，觀察腫瘤邊界、形態(tài)、內(nèi)部鈣化、后方回聲、病灶大小等情況；彩色多普勒觀察病灶周?chē)皟?nèi)部血流情況。血流分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［7］：0級(jí)，病灶內(nèi)未見(jiàn)血流信號(hào)；Ⅰ級(jí)，病灶內(nèi)僅見(jiàn)1～2處細(xì)棒狀、點(diǎn)狀血流信號(hào)；Ⅱ級(jí)，病灶內(nèi)可見(jiàn)中等血流信號(hào)，有1條主要血流；Ⅲ級(jí)，病灶內(nèi)可見(jiàn)豐富血流信號(hào)，有5處點(diǎn)狀血流，或2條主要血流。其中0～Ⅰ級(jí)為少血供，Ⅱ～Ⅲ級(jí)為富血供。所有操作均由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的超聲醫(yī)師完成。

2.免疫組化檢測(cè)：PR、ER、Her-2、P53、BRCA1蛋白檢測(cè)結(jié)果均經(jīng)病理檢驗(yàn)后明確。評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)［8］：①PR、ER陽(yáng)性：≥1%的腫瘤細(xì)胞核著色；②Her-2陽(yáng)性：染色評(píng)分為+++，或染色評(píng)分為++，進(jìn)一步經(jīng)熒光原位雜交提示為陽(yáng)性；③P53陽(yáng)性：細(xì)胞核中有明顯褐色或棕黃色物質(zhì)沉積；④BRCA1陽(yáng)性：細(xì)胞核中有明顯棕黃色物質(zhì)沉積。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以例或率表示，行χ2檢驗(yàn)。應(yīng)用Logistic回歸分析TNBC患者P53、BRCA1陽(yáng)性表達(dá)的影響因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

一、兩組超聲圖像特征比較

TNBC組病灶邊緣毛刺、微鈣化比例均低于非TNBC組，TNBC組富血供比例高于非TNBC組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。見(jiàn)表1和圖1。

圖1 TNBC組和非TNBC組的超聲圖像

表1 兩組超聲圖像特征比較 例

二、兩組P53、BRCA1表達(dá)比較

TNBC組P53陽(yáng)性表達(dá)率為60.66%（37/61），高于非TNBC組的43.93%（47/107），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.350，P=0.037）；TNBC組BRCA1陽(yáng) 性 表 達(dá) 率 為29.51%（18/61），低于非TNBC組的55.14%（59/107），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.282，P=0.001）。

三、不同P53、BRCA1表達(dá)TNBC患者的超聲特征

P53陽(yáng)性者后方回聲增強(qiáng)比例和富血供比例均高于陰性者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。BRCA1陽(yáng)性者后方回聲增強(qiáng)比例和富血供比例均低于陰性者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。見(jiàn)表2，3。

表2 不同P53表達(dá)TNBC患者的超聲圖像特征比較 例

表3 不同BRCA1表達(dá)TNBC患者的超聲圖像特征比較 例

四、Logistic回歸分析

Logistic回歸分析顯示，血流分級(jí)（富血供）是TNBC患者P53陽(yáng)性表達(dá)的影響因素（O R=2.958，P=0.006，95%可信區(qū)間1.353～6.466）；血流分級(jí)（少血供）是TNBC患者BRCA1陽(yáng)性表達(dá)的影響因素（O R=0.321，P=0.003，95%可信區(qū)間0.150～0.685）。

討論

近年來(lái)，我國(guó)乳腺癌患病率逐漸增高，TNBC是乳腺癌的特殊類(lèi)型，即PR、ER、Her-2表達(dá)均呈陰性且具有自身獨(dú)特的病理學(xué)特征［9］。大部分TNBC患者的腫瘤分化程度低，細(xì)胞增殖非?；钴S，分裂計(jì)數(shù)、組織學(xué)分級(jí)均較高，此病理類(lèi)型的乳腺癌惡性程度更高，臨床需對(duì)此引起重視。

本研究通過(guò)分析乳腺癌患者的超聲圖像特征，提示TNBC與非TNBC患者的病灶邊緣形態(tài)、微鈣化、血流分級(jí)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。乳腺癌患者病灶邊緣表現(xiàn)為毛刺征，提示病灶侵襲性低，癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較低。有學(xué)者［10］發(fā)現(xiàn)，非TNBC患者中邊緣無(wú)毛刺征占比約為41.47%，而TNBC患者中無(wú)毛刺征占比達(dá)74.29%，提示TNBC患者的毛刺征率降低。本研究結(jié)果也顯示TNBC患者毛刺征占比較低，表明此病理類(lèi)型乳腺癌侵襲性強(qiáng)，轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)高。此外，本研究結(jié)果還顯示TNBC患者微鈣化率較低，與既往研究［11］結(jié)論相符。微鈣化主要與炎癥、乳腺既往損傷等有關(guān)［12］。血管供應(yīng)充足營(yíng)養(yǎng)是病灶侵襲性增強(qiáng)的重要條件，病灶分化程度與血流豐富度密切相關(guān)，通常分化越差的患者血流更豐富。既往研究［13］發(fā)現(xiàn)，TNBC患者血供豐富占比達(dá)57.70%，本研究提示TNBC患者的血流分級(jí)以富血供為主，占比達(dá)65.57%（41/61），再次證實(shí)TNBC血流豐富，分化較差。

研究［14］表明，P53基因與腫瘤發(fā)病及進(jìn)展高度相關(guān)，其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡均有一定作用。P53突變后，在病灶組織內(nèi)易被檢測(cè)，可評(píng)估患者預(yù)后情況。BRCA1在乳腺癌中的表達(dá)存在特異性，其可調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)DNA損傷修復(fù)［15］。本研究結(jié)果顯示，與非TNBC患者相比，TNBC患者的P53陽(yáng)性率（60.66%）明顯增加，而B(niǎo)RCA1陽(yáng)性率（29.51%）明顯減少，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05）。TNBC患者P53陽(yáng)性表達(dá)居多，促進(jìn)腫瘤發(fā)展，提高了病灶侵襲性。此外，TNBC患者BRCA1陽(yáng)性表達(dá)減少，致基因產(chǎn)物出現(xiàn)變化，促使該基因的抑癌作用減弱。研究［16］發(fā)現(xiàn)，P53蛋白陽(yáng)性乳腺癌患者的腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高達(dá)81.08%，證實(shí)P53陽(yáng)性對(duì)腫瘤進(jìn)展有促進(jìn)作用。

研究［17］顯示，病灶后方回聲表現(xiàn)主要與內(nèi)部成分存在關(guān)聯(lián)，若癌相關(guān)肌成纖維細(xì)胞水平越高，則能產(chǎn)生越多膠原纖維，對(duì)超聲波具有較強(qiáng)吸收能力，致后方回聲衰減，且病變?cè)街卦摫憩F(xiàn)越明顯，故后方弱回聲通常被認(rèn)為是惡化特征。研究［18］發(fā)現(xiàn)，良性病變或惡變程度較輕的患者也存在后方回聲減弱，表明后方回聲衰弱對(duì)惡性病變?cè)u(píng)估的價(jià)值尚存在爭(zhēng)議。BRCA1具有抑癌作用，BRCA1陽(yáng)性病例通常惡變程度低。本研究結(jié)果顯示，BRCA1陽(yáng)性患者后方回聲衰減率增加，證實(shí)后方回聲衰減也可存在于惡變程度低的病例中，提示臨床不能將后方回聲衰減認(rèn)定為絕對(duì)的惡化特征。

本研究結(jié)果提示，不同P53、BRCA1表達(dá)TNBC患者的血流分級(jí)存在差異，經(jīng)Logistic回歸分析證實(shí)血流分級(jí)與二者表達(dá)有關(guān)，即血流分級(jí)越高，P53陽(yáng)性表達(dá)越高，而B(niǎo)RCA1陽(yáng)性表達(dá)越少。其中P53陽(yáng)性者血流分級(jí)主要為富血供，而B(niǎo)RCA1陽(yáng)性者主要為少血供。富血供是腫瘤侵犯的常見(jiàn)表現(xiàn)，患者的腫瘤侵犯性越強(qiáng)，血供越豐富。研究［19］表明，TNBC患者組織學(xué)分級(jí)越高，陽(yáng)性表達(dá)率越高，證實(shí)腫瘤惡性程度越高，P53陽(yáng)性表達(dá)率越高。而在BRCA1陽(yáng)性患者中，因BRCA1表達(dá)較高，抑癌作用較強(qiáng)，新生血管生成較少，局部表現(xiàn)為少血供，惡性程度低。提示P53陽(yáng)性會(huì)增加乳腺癌惡化風(fēng)險(xiǎn)，而B(niǎo)RCA1陽(yáng)性則能降低惡化風(fēng)險(xiǎn)。因此，臨床可將P53、BRCA1檢測(cè)作為鑒別TNBC與非TNBC的標(biāo)志物，并評(píng)價(jià)病灶轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，TNBC患者的超聲圖像特征表現(xiàn)為毛刺征、微鈣化較少、以富血供為主，對(duì)臨床診斷有一定參考價(jià)值；且結(jié)合P53、BRCA1蛋白表達(dá)情況可提高TNBC的診斷準(zhǔn)確率。但乳腺癌作為異質(zhì)性疾病，不同分型患者的超聲表現(xiàn)可能有所差異，今后應(yīng)擴(kuò)大樣本量對(duì)其他類(lèi)型的乳腺癌患者進(jìn)一步分類(lèi)比較。