薯蕷粥對T2DM大鼠腸道微生物、血糖、胰島素的影響

洪雪珮，龐書勤，周 建，陳 芳，羅宗婷，張佳惠

（福建中醫(yī)藥大學護理學院，福建福州 350122）

2 型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）是一種以高血糖為特征的內分泌代謝性疾病，近年來，T2DM 的發(fā)病率呈迅速上升趨勢，已成為世界范圍內的公眾健康問題[1?2]。腸道菌群作為“人體的隱藏器官”，是連接環(huán)境、基因、免疫系統(tǒng)的重要紐帶，在機體代謝、免疫等方面發(fā)揮重要作用[3]。腸道菌群能夠通過炎性反應、氧化應激等多種途徑參與胰島素信號傳導和糖脂代謝，在T2DM 的發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用[4?6]。研究顯示，T2DM 改變腸道菌群的多樣性，主要表現(xiàn)為減少益生菌、增加有害菌，導致腸道微生態(tài)紊亂[5?6]。而補充益生菌、調節(jié)腸道微生物群平衡，能夠有效改善胰島素抵抗、降低血糖，延緩T2DM 的病情進展[7]，常見的干預手段有直接口服補充益生菌、調整飲食和糞便移植，相比之下，飲食干預更加方便、經濟實惠。

薯蕷粥出自近代醫(yī)家張錫純的《醫(yī)學衷中參西錄》，僅由一味生懷山藥組成[8]，山藥中含有多種活性成分如山藥多糖、抗性淀粉、薯蕷皂苷等，具有抗氧化、調節(jié)腸道菌群、降低血脂等作用[9]。課題組前期將薯蕷粥應用于T2DM 患者，連續(xù)食用12 周后發(fā)現(xiàn)薯蕷粥能夠改善T2DM 患者的氧化應激，增加腸道內雙歧桿菌的含量，降低血糖[10?11]；課題組前期動物實驗發(fā)現(xiàn)薯蕷粥能夠改善T2DM 大鼠胰島β細胞形態(tài)，減少結腸組織的TNF-α、IL-6 含量，提高IL-10、STAT3 表達，即薯蕷粥可能通過改變腸道菌群，減輕炎癥水平、改善胰島細胞功能，達到降低血糖的效果；為進一步明確薯蕷粥具體的降糖機制，現(xiàn)借助動物實驗，采用16S-rDNA 測序技術，詳細評估薯蕷粥對T2DM 大鼠腸道菌群構成的影響，探討薯蕷粥是否能夠通過改善T2DM 大鼠腸道微生物，增加短鏈脂肪酸的分泌，達到緩解胰島素抵抗、降低血糖的效果，為治療T2DM、探索薯蕷粥的降糖機制提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

SPF 級雄性Wistar 大鼠 60 只，8 周齡，體重（180±10）g，上海斯萊克實驗動物有限責任公司，動物許可證號：SCXK（滬）2012-0011，飼養(yǎng)于福建中醫(yī)藥大學動物中心清潔級動物房，實驗全程嚴格遵循《實驗動物保護條例》，經福建中醫(yī)藥大學動物實驗倫理委員會批準（2019-023）；高脂飼料 閩侯實驗動物貿易有限公司（中國福州），配方為：10%豬油、15%蔗糖、4%膽固醇、10%蛋黃粉、0.3%膽酸鹽、60.7%標準飼料；生懷山藥（生鐵棍山藥） 福州市閩侯縣上街致誠醫(yī)藥商店；二甲雙胍片 格華止，0.85 g/片，國藥準字：H20023371；鏈脲佐菌素（STZ） Sigma公司；乙酸、丙酸、丁酸、2-乙基丁酸標準品 上海aladdin 生化科技有限公司；DNA 提取試劑盒 福州沃森生物技術有限公司；血糖試紙 福州貝爾曼生物科技有限公司；大鼠胰島素（INS）酶聯(lián)免疫分析試劑盒 酶聯(lián)生物科技有限公司。

羅氏血糖儀 德國拜耳公司；精密電子秤 上海精天電子儀器有限公司；ELX808 型酶聯(lián)免疫檢測儀 美國BIO-TEK 公司；氣相色譜-質譜聯(lián)用儀美國安捷倫公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 灌胃溶液的制備 薯蕷粥的制備：實驗所需山藥由同一人員在固定商家分兩次購買，放在冰箱內冷藏保存，每日取125 g 已去皮的山藥，切片后加水50 mL 放入料理機打成糊狀，取出后加250 mL 涼水，中火煮沸，30 s 后再文火煮沸，后再間隔30 s，連煮3 次，過程中輕輕攪拌，最后成粥狀，其濃度為0.5 g/mL，冷卻至37 ℃灌胃。二甲雙胍溶液制備：依據(jù)徐叔云《藥理實驗方法學》[12]的人鼠體表面積等效劑量換算（成人以60 kg 計算），每只大鼠灌胃100 mg/kg·d 二甲雙胍，根據(jù)大鼠體重計算出每日所需的二甲雙胍藥量，將所需二甲雙胍藥物研磨成粉，用5 mL 生理鹽水配制成二甲雙胍藥液，現(xiàn)配現(xiàn)用。聯(lián)合組灌胃溶液：將每只大鼠所需的二甲雙胍溶于5 mL 薯蕷粥內灌胃。

1.2.2 造模 將60 只雄性Wistar 大鼠稱重、編號，按數(shù)字表法隨機選取10 只作為空白組使用普通飼料喂養(yǎng)；剩余50 只大鼠為造模組，使用高脂高糖飼料喂養(yǎng)6 周后造模：腹部注射1% STZ 溶液（避光，現(xiàn)配現(xiàn)用，pH4.2～4.5），計量：25 mg/kg。空白組大鼠腹腔注射等容積的檸檬酸鈉緩沖液。注射后72 h 尾靜脈采血測量空腹血糖，并觀察大鼠飲食、尿量、體重的變化，以空腹血糖>11.1 mmol/L 判斷是否造模成功[13]。本次50 只大鼠進行造模，成功37 只，成模率為74%。

1.2.3 分組與給藥 將造模成功的37 只大鼠按照隨機數(shù)字表法分為模型組10 只，薯蕷粥組9 只，二甲雙胍組9 只，聯(lián)合組9 只。給藥方法：空白組和模型組每日使用生理鹽水灌胃5 mL，薯蕷粥組大鼠每日使用薯蕷粥灌胃5 mL，二甲雙胍組每日使用二甲雙胍溶液灌胃5 mL，聯(lián)合組大鼠每日計算所需的二甲雙胍藥量，溶于5 mL 薯蕷粥內灌胃。所有大鼠均以空白飼料喂養(yǎng)，正常飲水，共干預6 周。

根據(jù)前期臨床試驗中人體食用薯蕷粥的體積，結合人鼠體表面積計算得出大鼠的薯蕷粥灌胃量為5 mL，每5 mL 薯蕷粥中的山藥含量為5 mL×0.5 g/mL=2.5 g。

1.2.4 指標檢測 灌胃期間每周檢測空腹血糖。干預結束后，所有大鼠禁食12 h 后，檢測空腹血糖，之后使用2%戊巴比妥鈉腹腔麻醉注射，抽取腹主動脈血2 mL，結腸內糞便約5 g（分裝成兩份）。

1.2.4.1 腸道菌群相關指標 取材后，用干冰密封保存糞便樣本送至人和未來生物科技（長沙）有限公司檢驗部門進行16S-rDNA 測序。檢測合格的樣本使用Illumina Miseq/Hiseq 2500 雙端PE250 對V3-V4區(qū)域進行測序，測序得到的下機數(shù)據(jù)（Raw Data）將用于后期信息分析。

1.2.4.2 短鏈脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸） 取材后立即將分裝好的糞便標本用干冰密封保存送至福州市沃森生物科技有限公司，使用氣相色譜法檢測糞便內短鏈脂肪酸含量。

1.2.4.3 胰島素水平 取材后立即將抽取的血樣本送至武漢市塞維爾生物科技有限公司，使用ELISA法監(jiān)測血清內胰島素含量。使用公式計算胰島素抵抗水平：胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR)的計算公式為：胰島素抵抗指數(shù)=（空腹血糖×空腹胰島素）/22.5。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS20.0 軟件進行統(tǒng)計分析，描述性數(shù)據(jù)使用均數(shù)±標準差表示，計量資料符合正態(tài)分布時采用單因素方差分析，否則用秩和檢驗，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。使用Fastp 軟件對16S-rDNA測序得到微生物樣本的Raw reads 數(shù)據(jù)進行質量過濾，得到更準確可靠的Clean Reads，再對Clean Reads基于Overlap 進行拼接得到Clean Tags。然后基于有效數(shù)據(jù)進行OTUs（Operational Taxonomic Units）聚類和物種組成分析。

2 結果與分析

2.1 大鼠一般情況

實驗第一周，模型組死亡1 只，聯(lián)合組死亡2 只。最后納入統(tǒng)計分析的各組大鼠數(shù)量為：空白組10 只、模型組9 只、薯蕷粥組9 只、二甲雙胍組9 只，聯(lián)合組7 只。實驗過程中，模型組大鼠精神萎靡，毛發(fā)臟亂，攝食量、飲水量與尿量增加。

2.2 各組大鼠血糖水平比較

由表1可知，干預期間空白組大鼠的空腹血糖維持在正常范圍，模型組大鼠始終高于11.1 mmol/L，極顯著高于空白組（P<0.01）。從干預第4 周起直至干預結束，薯蕷粥組大鼠的空腹血糖極顯著低于模型組（P<0.01）；干預結束后，薯蕷粥組大鼠的空腹血糖和二甲雙胍組相比無統(tǒng)計學差異（P>0.05），薯蕷粥組大鼠的空腹血糖顯著高于聯(lián)合組（P<0.05）。

表1 各組大鼠干預期間FBG 比較（±s,mmol/L）Table 1 Comparison of FBG of rats in each group during intervention (±s,mmol/L)

表1 各組大鼠干預期間FBG 比較（±s,mmol/L）Table 1 Comparison of FBG of rats in each group during intervention (±s,mmol/L)

注：*：與空白組相比，P<0.01；#：與模型組相比，P<0.01；▲：與聯(lián)合組相比，P<0.05。

組別 第1周 第2周 第3周 第4周 第5周 干預后空白組 5.90±0.47 5.28±0.40 5.92±0.56 5.50±0.32 5.67±0.44 6.21±0.40模型組 22.89±4.39* 20.19±2.17* 21.75±2.22* 20.94±2.15* 20.40±2.10* 20.43±2.99*薯蕷粥組 22.98±4.01 21.76±3.03 19.78±2.36 17.07±2.32# 15.59±2.18# 13.50±1.40#▲二甲雙胍組 21.78±3.22 20.14±2.45 18.71±2.65# 17.34±1.89# 15.68±2.06# 14.64±1.49#▲聯(lián)合組 24.57±4.16 21.93±3.51 18.88±2.93# 16.56±2.44# 14.98±1.75# 12.40±0.86#

2.3 各組大鼠血清胰島素、胰島素抵抗指數(shù)比較

由表2可知，模型組大鼠的血清空腹胰島素水平、胰島素指數(shù)均顯著高于空白組（P<0.05）；薯蕷粥組與模型組相比，血清空腹胰島素、胰島素抵抗指數(shù)顯著下降（P<0.05），與二甲雙胍組、聯(lián)合組相比沒有統(tǒng)計學差異（P>0.05）。

表2 各組大鼠干預后胰島素、胰島素抵抗指數(shù)比較（±s)Table 2 Comparison of FINS and HOMA-IR of rats in each group after intervention

表2 各組大鼠干預后胰島素、胰島素抵抗指數(shù)比較（±s)Table 2 Comparison of FINS and HOMA-IR of rats in each group after intervention

注：*：與空白組相比，P<0.05；#：與模型組相比，P<0.05；表3同。

組別 n 空腹胰島素（mU/L） 胰島素抵抗指數(shù)空白組 10 40.23±2.47 12.85±1.66模型組 9 49.57±5.45* 43.65±7.82*薯蕷粥組 9 44.65±3.40# 24.20±5.07#二甲雙胍組 9 41.69±2.95# 24.67±2.93#聯(lián)合治療組 7 45.46±2.91# 26.14±2.22#

2.4 高通量測序結果

2.4.1 測序數(shù)據(jù) fastp 軟件分析得出所有樣本中Q20 值最小為96.32%，Q30 值最小為94.64%，表示測序的準確度較高。使用usesrch10.0 軟件進行相似度97%的OTU 聚類分析。分析共得到OTU 1511個，其中999（86.01%）個OTU 注釋到門。以樣本的OTUs 的排序編號為橫坐標，OTUs 中的相對豐度為縱坐標，繪制得到Rank Abundance 曲線（見圖1），Rank Abundance 曲線逐漸趨于平緩，說明測序數(shù)據(jù)量漸進合理，能夠進行后續(xù)分析。

圖1 Rank Abundance 曲線Fig.1 Rank Abundance curve

2.4.2 各組大鼠腸道菌群多樣性分析

2.4.2.1 Alpha 多樣性結果分析 由表3可知，模型組大鼠的OTUs、Chao1 指數(shù)（反應菌群豐富度）、Shannon 指數(shù)（反應菌群多樣性）均低于空白組（P<0.05）；薯蕷粥大鼠OTUs 指數(shù)高于模型組（P<0.05），與二甲雙胍組、聯(lián)合組相比沒有統(tǒng)計學差異（P>0.05）。

表3 各組大鼠干預后腸道菌群物種的多樣性比較Table 3 Comparison of species diversity of gut microflora of rats in each group after intervention

2.4.2.2 Beta 多樣性分析 bray-curtis 值反應不同樣本間的生物構成差異，越接近1 代表樣本間差異越大。進行同組之間樣本的對比見表4：模型組大鼠的bray-curtis 值極顯著高于空白組（F=32.595，P<0.01），表示模型組大鼠組內的菌群構成差異性大于空白組，具有統(tǒng)計學意義；不同組樣本之間的對比顯示：模型組和空白組樣本之間的bray-curtis 值均大于模型組與其他組樣本的bray-curtis 值（F=25.443，P<0.001），說明模型組與空白組之間的菌群構成差異較大。

表4 各組大鼠干預后bray-curtis 值比較（±s)Table 4 Comparison of bray-curti index of rats in each group after intervention

表4 各組大鼠干預后bray-curtis 值比較（±s)Table 4 Comparison of bray-curti index of rats in each group after intervention

注：*：與空白組相比，P<0.05；

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2.4.3 各組大鼠菌群物種組成分析

2.4.3.1 細菌門分類水平比較 厚壁菌門（Firmicutes）和擬桿菌門（Bacteroidetes）是五組大鼠在門水平上的主要細菌，占90%以上，見圖2。模型組中厚壁菌門的相對豐度（75.67%±8.22%）低于薯蕷粥組（88.37%±2.33%）和空白組（86.99%±2.76%）（F=5.432，P<0.001）。模型組中疣微菌門（Verrucomicrobia）的相對豐度（0.41%±0.34%）低于空白組（2.12%±0.47%）、薯蕷粥組（1.59%±0.53%，F(xiàn)=3.735，P=0.039）。模型組中變形菌門（Proteobacteria）的相對豐度（7.16%±3.05%）高于空白組（2.06%±1.54%），薯蕷粥組（1.99%±1.51%），二甲雙胍組（2.48%±1.02%），聯(lián)合組（2.32%±1.43%）（P<0.001）（F=10.618，P<0.001）。

圖2 各組大鼠門水平的細菌結構Fig.2 Bacterial structure at the level of phylum in each group

2.4.3.2 細菌屬水平分類比較 乳酸桿菌（p__Firmicutes，Lactobacillus）、顫螺菌（p__Firmicutes，Oscillospira）、胃瘤球菌（p__Firmicutes，Ruminococcus）、阿克曼氏菌（p__Verrucomicrobia，Akkermansia）是五組大鼠在屬水平上的主要細菌，見圖3。模型組的梭菌含量（1.05%±0.30%）低于空白組（2.97%±0.58%）、二甲雙胍組（2.78%±0.61%）、薯蕷粥組（2.66%±0.40%）、聯(lián)合組（2.39%±0.35%）（F=23.579，P<0.005）；模型組的顫螺菌（3.33%±1.52%）含量低于空白組（11.33%±5.33%，F(xiàn)=5.675，P=0.01）。模型組中阿克曼氏菌的相對豐度（0.41%±0.34%）低于空白組（2.12%±0.47%）、薯蕷粥組（1.59%±0.53%）（F=3.735，P=0.039）。

圖3 各組大鼠屬水平的細菌結構Fig.3 Bacterial structure at the genus level in each group

2.5 各組大鼠糞便內短鏈脂肪酸水平比較

由表5可知，模型組大鼠糞便中乙酸、丙酸、丁酸的含量均顯著低于空白組（P<0.05）；薯蕷粥組、二甲雙胍組、聯(lián)合組大鼠糞便中乙酸、丙酸、丁酸的含量均極顯著高于模型組（P<0.01）；聯(lián)合組大鼠糞便中丁酸的含量顯著高于薯蕷粥組、二甲雙胍組（P<0.05）。

表5 各組大鼠糞便中SCFAs 比較（±s,mg/L）Table 5 Comparison of SCFAs in feces of rats in each group (±s,mg/L)

表5 各組大鼠糞便中SCFAs 比較（±s,mg/L）Table 5 Comparison of SCFAs in feces of rats in each group (±s,mg/L)

注：# ：與模型組相比，P<0.01；▲：與聯(lián)合組相比，P<0.05。

組別 n 乙酸 丙酸 丁酸空白組 10 248.39±26.53# 255.49±41.51# 261.92±38.99#模型組 9 94.34±23.04 85.03.±31.55 82.85±25.44薯蕷粥組 9 157.57±23.17# 175.50±19.89# 188.58±10.48#▲二甲雙胍組 9 161.91±23.85# 176.38±24.33# 169.61±12.96#▲聯(lián)合組 7 181.62±33.56# 197.43±44.28# 214.26±26.55#

2.6 相關性分析

將腸道內主要細菌、胰島素抵抗指數(shù)、空腹血糖與SCFAs 進行相關性分析，如表6所示，結果發(fā)現(xiàn)：厚壁菌與乙酸、丙酸、丁酸的含量都呈正相關關系（P<0.01）；梭菌與丁酸的含量呈正相關（P=0.01）；胰島素抵抗指數(shù)與乙酸、丙酸、丁酸皆呈強負相關關系（P<0.001）；FBG與乙酸、丙酸、丁酸皆呈強負相關關系（P<0.001）。

表6 相關性分析Table 6 Correlation analysis

3 討論與結論

3.1 T2DM 大鼠腸道微生物變化

本研究發(fā)現(xiàn)，與正常大鼠相比，T2DM 大鼠腸道菌群的多樣性、豐富度降低，與其他研究結果一致[14?15]。分析大鼠菌群構成的差異性可知，模型組和空白組之間存在較為明顯的菌群構成差異，并且模型組組內的菌群構成差異也大于空白組，說明T2DM改變了大鼠的腸道菌群構成，與王瑾等[16]研究一致。具體分析菌群物種組成變化：在門水平上，T2DM增加了大鼠腸道內厚壁菌門的相對豐度，減少了變形菌門的相對豐度；在屬水平上，T2DM 減少了了大鼠腸道內顫螺菌、梭菌、阿克曼氏菌的相對豐度。有研究發(fā)現(xiàn)，T2DM 患者的梭菌（能促進丁酸產生）豐度下降，芽孢桿菌和變形桿菌豐度增加，而大部分芽孢桿菌和變形桿菌為機會致病菌[17?19]，由此可見，T2DM改變腸道菌群的多樣性和豐富性，增加機會致病菌，導致腸道微生態(tài)紊亂[20?21]。

3.2 薯蕷粥對T2DM 大鼠腸道微生物的影響

本研究發(fā)現(xiàn)，薯蕷粥、二甲雙胍、聯(lián)合治療均能降低變形菌的相對豐度，在此基礎上薯蕷粥還能夠上調厚壁菌、梭菌、阿克曼氏菌的相對豐度，增加OTUs。薯蕷粥與二甲雙胍、聯(lián)合治療相比，能夠調整更多的腸道菌群，改善腸道環(huán)境，由此可見，薯蕷粥在調節(jié)T2DM 腸道微生物上比單獨使用二甲雙胍、二甲雙胍與薯蕷粥聯(lián)用更具有優(yōu)勢。厚壁菌能夠促進丙酸、丁酸生長，梭菌能夠促進乙酸、丁酸生長，二者皆有利于SCFAs 產生，繼而改善T2DM[21]。阿克曼氏菌是疣微菌的一種，能夠影響機體的能量代謝，在腸道中的含量與肥胖、糖尿病等代謝性疾病呈負相關[22?24]。研究顯示，阿克曼氏菌在T2DM 中能夠發(fā)揮出色作用，補充滅活的阿克曼氏菌可顯著改善超重/肥胖的胰島素抵抗者的多項代謝指標，緩解胰島素抵抗，降低體重、血糖[25]；動物實驗中還發(fā)現(xiàn)，阿克曼氏菌能夠改善炎癥反應，減輕氧化應激、使宿主動物腸道菌群正?；?，從而改善T2DM[26]。

3.3 薯蕷粥對T2DM 大鼠SCFAs 的影響

表2可知，薯蕷粥能夠增加T2DM 大鼠腸道內乙酸、丁酸、丙酸的含量。SCFAs 由厭氧菌分解碳水化合物產生，包括乙酸、丙酸和丁酸，在控制體重，平衡葡萄糖穩(wěn)態(tài)、胰島素敏感性等方面發(fā)揮重要作用，對T2DM 的健康至關重要[27?28]。本研究顯示，薯蕷粥能增加厚壁菌、梭菌的相對豐度，厚壁菌與乙酸、丙酸、丁酸的含量都呈正相關，梭菌與丁酸的含量呈正相關，說明薯蕷粥通過增加梭菌、厚壁菌，促進SCFAs 產生，其他研究也認為，厚壁菌、梭菌能夠促進SCFAs 產生，與本研究結果一致[20,23]。推測薯蕷粥對腸道菌群、SCFAs 的作用與其富含山藥多糖有關，山藥多糖是山藥中的主要活性成分，具有調節(jié)胃腸道的功能，能夠緩解腸道微生態(tài)失調，以及通過調節(jié)免疫系統(tǒng)和炎癥反應維護腸道的屏障功能[9]。動物實驗顯示，山藥多糖能夠緩解抗生素誘導的菌群失調，增加梭菌含量，減少有害菌，調整腸道菌群的豐富性和多樣性，促進SCFAs 含量上升[29?30]。

3.4 薯蕷粥對T2DM 大鼠胰島素、血糖的影響

本研究中，T2DM 大鼠的空腹胰島素含量、胰島素抵抗指數(shù)較空白組均有明顯上升，經薯蕷粥干預后，空腹胰島素含量、胰島素抵抗指數(shù)均顯著下降（P<0.05），說明薯蕷粥能夠明顯降低T2DM 大鼠的胰島素水平，緩解高脂飲食所誘導的胰島素抵抗。李亞娟等[31]的研究也顯示，糖尿病患者服用含山藥的食療方后胰島素功能得到明顯改善，與本研究結果一致。在血糖方面，薯蕷粥組大鼠從第4 周起出現(xiàn)明顯的血糖下降；比較干預后的空腹血糖，聯(lián)合組的降糖效果優(yōu)于薯蕷粥組，二甲雙胍組、薯蕷粥組相比沒有統(tǒng)計學差異，表明薯蕷粥聯(lián)合二甲雙胍的降糖效果最優(yōu)，薯蕷粥的降糖作用雖比二甲雙胍起效遲，但降糖效果上差異不明顯。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)：胰島素抵抗指數(shù)和FBG 皆與乙酸、丙酸、丁酸呈強負相關關系，推測薯蕷粥通過增加SCFAs，可發(fā)揮緩解胰島素抵抗、降低血糖的作用。SCFAs 中的乙酸和丙酸都是糖脂代謝過程中的重要底物，能夠影響機體的物質、能量代謝，是維持葡萄糖、脂肪代謝的重要調節(jié)劑[4,22]。動物實驗顯示，通過調節(jié)腸道菌群，增加SCFAs 含量，能夠減輕機體炎癥反應，改善胰島素抵抗，降低T2DM 大鼠的血糖[32?33]。課題組前期研究證實，薯蕷粥能夠在一定程度上緩解T2DM 大鼠的炎癥反應，改善胰島細胞功能（尚未公開發(fā)表）；結合本研究的發(fā)現(xiàn)，推測薯蕷粥可能通過改善T2DM 大鼠腸道微生物失調，增加SCFAs 來發(fā)揮減輕炎癥反應、緩解胰島β 細胞損傷的作用，進而達到緩解胰島素抵抗、降低血糖的效果。本實驗發(fā)現(xiàn)SCFAs 與T2DM 大鼠的血糖密切相關，將在后續(xù)實驗中探討薯蕷粥對T2DM 大鼠腸道炎癥的影響，進一步明確SCFAs 的具體降糖機制。

3.5 局限性

山藥的生長環(huán)境、生長季節(jié)對山藥的品質存在一定影響，本研究進行灌胃干預的時間為6 周，所需要的鐵棍山藥無法一次性買齊使用，需要分多次購買。本研究雖無法保證所使用山藥的品質絕對一致，但盡量控制山藥的產地，品質統(tǒng)一；研究人員在同一商家購買6 周之內產自河南省焦作市溫縣的鐵棍山藥，使用標準：采用表皮光滑，斷層雪白，無斑點和霉點，含黏液較多的山藥做粥。后續(xù)實驗中也可比對不同季節(jié)、產地的山藥對T2DM 的治療效果。

3.6 結論

通過對T2DM 大鼠6 周的干預發(fā)現(xiàn)，使用薯蕷粥灌胃能緩解腸道微生物失調，增加短鏈脂肪酸含量，緩解胰島素抵抗，降低T2DM 大鼠血糖。本次研究未深入研究短鏈脂肪酸的降糖通路，未來將進一步探討薯蕷粥對T2DM 的降糖機制，為薯蕷粥的推廣和應用提供依據(jù)。