T淋巴細(xì)胞亞群、血清TNF-α、IgE水平在肺炎支原體合并哮喘患兒表達(dá)意義

蔡利超

鞏義市人民醫(yī)院輸血科，河南 鞏義 451200

肺炎支原體是引起小兒呼吸道疾病的重要病原體之一，其好發(fā)于學(xué)齡前兒童。相關(guān)研究表明，約有3.3%～50%的哮喘與肺炎支原體相關(guān)，多認(rèn)為肺炎支原感染促進(jìn)了小兒支氣管哮喘的發(fā)展，而哮喘合并肺炎支原體感染的患兒大多存在免疫系統(tǒng)紊亂［1-2］。因此本研究對(duì)各組患兒T淋巴細(xì)胞亞群、血清TNF-α和IgE水平進(jìn)行分析，探討其在哮喘合并肺炎支原體感染患兒中的表達(dá)意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取鞏義市人民醫(yī)院2018年5月—2019年10月期間收治的哮喘患兒70例（研究組），根據(jù)是否存在肺炎支原體感染又將研究組分為感染組（哮喘合并肺炎支原體感染）和非感染組（單純哮喘），其中感染組患兒37例，男25例，女12例；年齡1～12歲，平均年齡（4.77±1.57）歲；病程＜2周22例，病程≥2周15例；肺炎支原體感染輕癥（患兒血清檢測(cè)IgM抗體陽(yáng)性，熱程＜15 d，肺部體征較輕，無(wú)明顯肺外并發(fā)癥）25例，肺炎支原體感染重癥（患兒血清檢測(cè)IgM抗體陽(yáng)性，熱程≥15 d，肺部體征較嚴(yán)重，肺外并發(fā)癥≥2個(gè)）12例。非感染組33例，男22例，女11例；年齡1～13歲，平均年齡（4.80±1.60）歲；病程＜2周20例，病程≥2周13例。感染組與非感染組患兒在性別、年齡及病程方面比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）。另外選擇同期與研究組性別、年齡相匹配的健康體檢兒童35例作為對(duì)照組，其中男24例，女性11例；年齡1～14歲，平均年齡（4.85±1.62）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）感染組和非感染組患兒均符合《諸福棠實(shí)用兒科學(xué)》［3］中哮喘及肺炎支原體感染診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）年齡≤14歲；（3）無(wú)其他呼吸道疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有先天性心臟病史者；（2）有過(guò)敏史及其他變態(tài)反應(yīng)病史者；（3）存在免疫功能缺陷者；（4）智力發(fā)育障礙或不能配合完成實(shí)驗(yàn)者?；純杭覍賹?duì)本研究知情且同意參加，本研究以上報(bào)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)并獲得批準(zhǔn)。

1.2 方法

T淋巴細(xì)胞亞群水平檢測(cè)：抽取患兒空腹靜脈血2 ml，標(biāo)本檢測(cè)前使用乙二胺四乙酸二鉀抗凝進(jìn)行抗體標(biāo)記、細(xì)胞溶解處理，采用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)患兒血液中的CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)儀器采用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司提供的CytoFLEX流式細(xì)胞儀。

血清TNF-α、IgE水平檢測(cè)：抽取患兒靜脈空腹血3 ml，于3 000 r/min離心15 min后進(jìn)行血清分離，然后放置于-20℃的冰箱中備測(cè)。TNF-α水平采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行測(cè)定，試劑盒由南京信帆生物技術(shù)有限公司提供；IgE水平采用放射免疫法測(cè)定，試劑盒由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供。以上各項(xiàng)均按照試劑盒說(shuō)明書要求操作。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比各組患兒T淋巴細(xì)胞亞群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋）、血清TNF-α和IgE水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

與對(duì)照組相比，研究組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋較低，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平較高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 研究組與對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表1 研究組與對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

因素年齡性別手術(shù)時(shí)間糖尿病結(jié)石大小尿常規(guī)尿培養(yǎng)腎功能不全術(shù)中沖洗量術(shù)前抗菌藥物應(yīng)用泌尿系統(tǒng)感染β P 0.636 1.783-1.924 1.587 2.168 1.762 1.531-1.814-0.682 2.159 1.182 SE 0.64 0.725-1.121 0.623 1.813 0.831 0.613 0.249 0.734 1.538 0.521 Wald 3.341 3.632 3.264 3.276 15.298 14.689 3.487 53.139 12.047 20.272 3.824 OR 1.218 1.146 0.128 1.185 4.297 0.583 2.158 0.183 1.201 5.176 3.824 0.018 0.003 0.037 0.005 0.028 0.003 0.014 0.000 0.045 0.004 0.020 95%CI 0.896～2.512 1.084～3.485 0.096～1.182 1.074～1.476 2.151～11.079 0.342～0.820 1.736～3.931 0.087～0.269 0.524～5.613 2.231～9.124 1.220～9.038

2.2 感染組和非感染組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

感染組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋低于非感染組，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平高于非感染組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 感染組和非感染組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表2 感染組和非感染組T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

項(xiàng)目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）感染組（n=37）52.70±4.25 30.60±2.45 25.50±2.65 1.25±0.40 38.33±3.55 310.45±18.40非感染組（n=33）61.37±4.50 34.42±3.15 23.35±2.15 1.55±0.45 24.04±2.75 245.44±13.30 t P 8.287 5.695 3.698 2.953 18.659 16.758＜0.001＜0.001＜0.001 0.004＜0.001＜0.001

2.3 不同程度肺炎支原體感染患兒T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較

肺炎支原體感染輕癥CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋高于重癥，CD8＋及血清TNF-α、IgE水平低于重癥，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 肺炎支原體感染輕、重癥T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

表3 肺炎支原體感染輕、重癥T淋巴細(xì)胞亞群及血清TNF-α、IgE水平比較（±s）

項(xiàng)目CD3＋（%）CD4＋（%）CD8＋（%）CD4＋/CD8＋TNF-α（μg/L）IgE（g/L）輕癥（n=25）50.35±4.50 35.50±2.70 23.65±3.15 1.45±0.60 29.31±3.22 289.84±13.85重癥（n=12）45.75±4.05 28.83±2.12 26.89±2.95 1.04±0.43 50.26±3.65 428.45±20.70 t P 3.001 7.500 3.466 2.383 17.748 24.190 0.004＜0.001 0.001 0.022＜0.001＜0.001

3 討論

支氣管哮喘是由多種嚴(yán)重細(xì)胞及因子共同參與的氣道慢性變態(tài)反應(yīng)性疾病，其臨床表現(xiàn)主要為反復(fù)發(fā)作的氣急、喘息、咳嗽、胸悶等癥狀，常在清晨及夜間發(fā)作［4］。支原體是一種特異性抗原，可通過(guò)速發(fā)及遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)引起哮喘速發(fā)及遲發(fā)相反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致氣道發(fā)生變態(tài)反應(yīng)炎癥［5］。陳連保等［6］研究發(fā)現(xiàn)，支氣管哮喘與支原體感染的肺炎遺傳易感性相似，從基因角度來(lái)看，說(shuō)明支氣管哮喘的發(fā)展與支原體感染有著密切的聯(lián)系。

在機(jī)體諸多淋巴細(xì)胞中，T細(xì)胞具有參與和介導(dǎo)細(xì)胞免疫和調(diào)節(jié)機(jī)體免疫的功能，其主要分為CD4＋和CD8＋兩大亞群。其中CD4＋Th細(xì)胞可參與協(xié)助T、B細(xì)胞的免疫應(yīng)答，CD8＋Th細(xì)胞可抑制CD4＋Th細(xì)胞的活性，間接阻礙B細(xì)胞的分化［7］。Th細(xì)胞分為Th1型和Th2型，Th1型的特性為分泌TNF-B、IL-2、IFN-r等促炎因子，能增強(qiáng)CD8＋Th細(xì)胞的毒性作用；Th2型則可產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-10等細(xì)胞因子，參與體液免疫應(yīng)答的介導(dǎo)［8］。CD3＋分子可表達(dá)于成熟的T淋巴細(xì)胞表面，而CD4＋和CD8＋則不能同時(shí)表達(dá)于成熟T淋巴細(xì)胞的表面。CD3＋分子下降表示T淋巴細(xì)胞免疫功能降低；CD4＋減少表示B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白減少和細(xì)胞的免疫功能減弱；而CD3＋CD4＋/CD3＋CD8＋比值是機(jī)體免疫系統(tǒng)穩(wěn)定的重要指標(biāo)，該比值下降可導(dǎo)致免疫功能的下降［9-11］。本次研究結(jié)果中，研究組CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值低于對(duì)照組，感染組低于非感染組，感染輕癥低于感染重癥；而研究組CD8＋比值高于對(duì)照組，感染組高于非感染組，感染重癥高于感染輕癥；提示哮喘合并支肺炎原體感染患兒免疫功能處于抑制狀態(tài)，細(xì)胞免疫參與該病的發(fā)生和發(fā)展，原因可能在于支原體侵入后激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致免疫平衡被打破，相關(guān)免疫指標(biāo)發(fā)生異常改變，使免疫功能下降。

血清TNF-α主要調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，促進(jìn)細(xì)胞分化，其水平升高說(shuō)明局部炎癥反應(yīng)加重，通過(guò)機(jī)體的應(yīng)激產(chǎn)生IgE并參與I型變態(tài)反應(yīng)的介導(dǎo)，導(dǎo)致支氣管哮喘的癥狀加?。籌gE在參與哮喘的發(fā)生中有重要作用，其在嗜酸性細(xì)胞和肥大細(xì)胞表面均有受體，IgE高表達(dá)會(huì)促進(jìn)炎癥反應(yīng)［12-13］。本次研究發(fā)現(xiàn)，研究組血清TNF-α、IgE水平高于對(duì)照組，感染組高于非感染組，感染重癥高于感染輕癥，說(shuō)明哮喘的發(fā)生與血清TNF-α、IgE水平變化相關(guān)，肺炎支原體感染可激活炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致血清TNF-α、IgE水平升高，在哮喘的發(fā)病過(guò)程中起到重要作用。

綜上所述，T淋巴細(xì)胞亞群、血清TNF-α、IgE水平變化對(duì)哮喘合并肺炎支原體感染患兒有重要的評(píng)估意義。哮喘患兒在感染肺炎支原體時(shí)CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋比值會(huì)降低，CD8＋比值及血清TNF-α、IgE水平會(huì)增高，其異常程度與肺炎支原體感染程度有關(guān)。