李 利, 李澤健
(1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)理工學(xué)院,河北滄州061100;2.河北省黃驊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,河北黃驊061100)
鯉魚(yú)隸屬于鯉科,又稱(chēng)為鯉拐子,是我國(guó)魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖中常見(jiàn)品種之一,該品種具有生長(zhǎng)速度快、易存活、易捕撈、肉質(zhì)鮮美、含肉率高等多種優(yōu)點(diǎn),在我國(guó)大部分地區(qū)的養(yǎng)殖環(huán)境和方式下都可以飼養(yǎng)(鐘小群,2018)。隨著漁業(yè)養(yǎng)殖發(fā)展,臨床中抗生素在漁業(yè)養(yǎng)殖過(guò)程中的不合理使用,出現(xiàn)嚴(yán)重弊端,由于抗生素的不合理使用導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)抗應(yīng)激能力和抗病力下降,其死亡率增加,給魚(yú)、蝦等水產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重的危害,同時(shí)給魚(yú)類(lèi)的養(yǎng)殖造成嚴(yán)重影響(郭振,2019;楊雨生,2018;姜光麗,2015)。相關(guān)研究表明,益生菌中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及多種消化酶類(lèi),可以抑制腸道中有害菌的生長(zhǎng),促進(jìn)有益菌生長(zhǎng),調(diào)整其腸道內(nèi)菌群平衡,益生菌中富含多種消化酶類(lèi)可以促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化與吸收,因而提高飼料轉(zhuǎn)化率及動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和生產(chǎn)性能,所含的生物活性物質(zhì)可以刺激機(jī)體免疫系統(tǒng),誘導(dǎo)產(chǎn)生其體液免疫和細(xì)胞免疫,益生菌制劑同時(shí)具有無(wú)污染、無(wú)耐藥性的優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中(陳柯源,2019;褚素喬,2019;何佳,2017)。臨床中以酵母菌類(lèi)、乳酸菌類(lèi)、腸球菌類(lèi)、芽孢桿菌類(lèi)等較為常見(jiàn),乳酸菌類(lèi)廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中,但在魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖中很少見(jiàn)(劉政,2020)。本試驗(yàn)以乳酸菌為研究對(duì)象,以不同的比例添加在鯉魚(yú)基礎(chǔ)餌料中,研究其對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能、魚(yú)體組成及腸道酶活性的影響,為進(jìn)一步臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
1.1 試驗(yàn)材料 乳酸菌制劑活菌含量≥100萬(wàn)cf u/g;消化道酶活性試劑盒(蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶),購(gòu)自南京建成生物工程研究所;全自動(dòng)凱氏定氮儀(FOSS KT260型),購(gòu)自瑞士FOSS公司;氧彈測(cè)熱儀 (Parr 1281型),購(gòu)自美國(guó)PARR公司。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理 采用單因素設(shè)計(jì)試驗(yàn),選擇初始體質(zhì)量為(26.5±0.5)g、健康的鯉魚(yú)幼苗240尾,隨機(jī)分為4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20尾,1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)餌料,試驗(yàn)2、3、4組在基礎(chǔ)餌料中分別添加0.2%、0.4%、0.8%乳酸菌制劑,試驗(yàn)期為60 d,在試驗(yàn)期間,以每個(gè)重復(fù)組為一個(gè)單位,單獨(dú)給料網(wǎng)箱(規(guī)格為1.0 m×1.0 m×1.5 m)飼養(yǎng),每天投喂3次,試驗(yàn)期間平均水溫25.0~35.0℃,溶氧5.0~8.5 mg/L,pH 7.0~7.5?;A(chǔ)餌料根據(jù)NRC(2008)魚(yú)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制,其成分組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平 %
1.3 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定 以重復(fù)組為單位對(duì)試驗(yàn)鯉魚(yú)逐條稱(chēng)重,記錄其試驗(yàn)開(kāi)始、結(jié)束的體重、餌料消耗量及剩余量,參考孫樹(shù)奎(2020)和李少覲(2019)報(bào)道的方法,計(jì)算鯉魚(yú)的生長(zhǎng)性能指標(biāo)增重率、存活率、餌料系數(shù)等。
1.4 魚(yú)體組成的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)抽取5尾魚(yú),將魚(yú)體稱(chēng)質(zhì)量后置于培養(yǎng)皿中,在105℃的烘箱中烘至恒質(zhì)量,測(cè)定魚(yú)體組成成分。按照鐘小群(2018)報(bào)道方法對(duì)水分含量、蛋白質(zhì)含量、脂肪含量、灰分含量、能量水平進(jìn)行測(cè)定。
1.5 腸道消化酶活性的測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)抽取5尾魚(yú)稱(chēng)重放血處死后取腸道樣品,在冰浴條件下勻漿,制成10%的勻漿液,離心后取上清液。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定其蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性。
1.6 數(shù)據(jù)處理分析 試驗(yàn)結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì),以每個(gè)重復(fù)為單位進(jìn)行單因素多重比較,分析其差異顯著性,用P<0.05表示差異顯著性。
2.1 飼糧中添加乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響由表2可知,試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的增重率、存活率均高于1組,但是未達(dá)到差異性顯著水平(P>0.05),試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的特定生長(zhǎng)率均高于1組,試驗(yàn)2組高于1組,但差異性不顯著(P>0.05),試驗(yàn)3、4組鯉魚(yú)的特定生長(zhǎng)率較1組比提高10.7%、10.1%,差異性顯著(P<0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05),試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的餌料系數(shù)均低于1組,試驗(yàn)2組鯉魚(yú)的餌料系數(shù)低于1組,差異性不顯著(P>0.05),試驗(yàn)3、4組鯉魚(yú)餌料系數(shù)較1組比分別降低12.2%、10.7%,差異性顯著(P<0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05)。
表2 乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果
2.2 飼糧中添加乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)魚(yú)體組成的影響由表3可知,試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的水分含量、脂肪含量、灰分含量均高于1組,差異性不顯著(P>0.05);試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的蛋白質(zhì)含量、能量水平均高于1組,其中試驗(yàn)2組高于1組,差異性不顯著(P>0.05),試驗(yàn)3、4組鯉魚(yú)的蛋白質(zhì)含量、能量水平較1組比分別提高34.0%、33.7%、24.0%、23.2%,差異性顯著(P<0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05)。
表3 乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)魚(yú)體組成的檢測(cè)結(jié)果
2.3 飼糧中添加乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)腸道酶活性的影響 由表4可知,試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的淀粉酶活性均高于1組,差異性不顯著(P>0.05);試驗(yàn)2、3、4組鯉魚(yú)的蛋白酶活性、脂肪酶活性高于1組,其中試驗(yàn)2組高于1組,差異性不顯著(P>0.05);試驗(yàn)3、4組的蛋白酶活性、脂肪酶活性較1組比分別提高17.9%、17.8%、21.8%、25.8%,差異性顯著(P<0.05),試驗(yàn)2、3、4組之間相比,差異性不顯著(P>0.05)。
表4 乳酸菌對(duì)鯉魚(yú)腸道酶活性的檢測(cè)結(jié)果
研究表明,益生菌制劑中因含有蛋白質(zhì)、氨基酸及多種消化酶類(lèi),可以促進(jìn)飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)的利用率,提高其生長(zhǎng)性能,而被廣泛應(yīng)用(周金影,2020;韓戰(zhàn)強(qiáng),2020)。本試驗(yàn)研究表明,試驗(yàn)2、3、4組的增重率、存活率均高于1組(P>0.05),試驗(yàn)3、4組的特定生長(zhǎng)率顯著高于1組(P<0.05),餌料系數(shù)顯著低于1組(P<0.05);試驗(yàn)2、3、4組的水分含量、脂肪含量、灰分含量均高于1組(P>0.05),試驗(yàn)3、4組的蛋白質(zhì)含量、能量水平顯著高于1組(P<0.05),說(shuō)明乳酸菌制劑的添加對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能和魚(yú)體組成有一定促進(jìn)作用。由于乳酸菌制劑所含活性物質(zhì)通過(guò)胃腸黏膜的吸收,可以刺激胃腸黏膜分泌多種消化酶,體內(nèi)消化酶的分泌可以將飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)直接降解為易吸收的小分子蛋白、小肽和氨基酸等物質(zhì),因而促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收,同時(shí)提高其飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,改善其魚(yú)體組織組成,同時(shí)增加其鯉魚(yú)的食欲,降低餌料系數(shù)。從而改善機(jī)體的生長(zhǎng)性能,改善其魚(yú)體組成。
魚(yú)類(lèi)對(duì)食物消化與吸收主要靠腸道消化酶進(jìn)行化學(xué)性消化,消化酶在消化過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用,因此,魚(yú)類(lèi)腸道消化酶活性可以在一定程度上反映其消化能力(周金影,2020;李晉南,2020;馬德英,2019;何英霞,2019)。本試驗(yàn)研究表明,試驗(yàn)2、3、4組的淀粉酶活性均高于1組(P>0.05);試驗(yàn)3、4組的蛋白酶活性、脂肪酶活性顯著高于1組(P<0.05),說(shuō)明乳酸菌制劑的添加可以提高魚(yú)類(lèi)消化酶的活性。其原因可能由于乳酸菌制劑的添加可抑制腸道內(nèi)致病菌的生長(zhǎng),促進(jìn)有益菌生長(zhǎng),調(diào)節(jié)魚(yú)腸道內(nèi)致病菌和益生菌的平衡,有效改善魚(yú)的消化道微生態(tài)環(huán)境平衡,同時(shí)益生菌內(nèi)所含的生物活性物質(zhì)可以刺激消化道黏膜,促進(jìn)消化酶分泌,因而提高其腸道內(nèi)蛋白酶活性、脂肪酶活性,進(jìn)而提高其飼料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率。益生菌在動(dòng)物腸道定植后,其在增殖過(guò)程中可以向腸道分泌一定的酶類(lèi),增加其腸道內(nèi)酶的含量,對(duì)腸道內(nèi)源性酶進(jìn)行一定補(bǔ)充,從而提高機(jī)體的腸道消化酶活性。其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。
不同水平乳酸菌制劑的添加可以提高鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能和腸道酶活性,改善魚(yú)體組成,本試驗(yàn)條件下,以0.4%添加較適宜。