輕度胃腸炎伴嬰幼兒良性驚厥患兒細(xì)胞炎癥因子、免疫水平及腦脊液中髓鞘堿性蛋白、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平變化與臨床意義

王紅芳, 李樹(shù)華, 張潤(rùn)春, 張彥博

(1.河北省唐山市婦幼保健院 小兒內(nèi)科, 河北 唐山, 063000;2.河北省秦皇島市第二醫(yī)院 小兒內(nèi)科, 河北 秦皇島, 066000)

輕度胃腸炎伴良性嬰幼兒驚厥(BICE)在1982年被首次報(bào)道[1], 主要發(fā)生在6個(gè)月～3歲嬰幼兒，輕度胃腸炎癥狀并伴隨無(wú)熱驚厥，發(fā)作期間腦部影像無(wú)明顯變化，腦電圖正常，有較輕的脫水現(xiàn)象，水電解質(zhì)及酸堿平衡保持穩(wěn)定，但會(huì)出現(xiàn)腹瀉、嘔吐等癥狀[2]。發(fā)病原因及機(jī)制尚不完全清楚，可能與病毒感染有關(guān)，如諾如病毒、輪狀病毒等感染最為常見(jiàn)[3], 也有可能與腦部發(fā)育不成熟有關(guān)，大腦異常放電導(dǎo)致驚厥[4]。研究[5]顯示, BICE具有明顯的地域差異性，近年來(lái)BICE發(fā)病率逐漸上升。本研究探討細(xì)胞炎癥因子、免疫水平及腦脊液中髓鞘堿性蛋白(MBP)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)水平變化對(duì)BICE患兒的臨床意義，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年7月—2020年6月來(lái)本院治療的42例BICE患兒作為觀察組，并將觀察組患兒按照發(fā)生驚厥次數(shù)分為A組和B組, A組18例患兒為驚厥發(fā)生<2次, B組24例為驚厥發(fā)生≥2次，同期選取42例輕度胃腸炎但不伴有驚厥發(fā)作患兒作為對(duì)照組。觀察組男24例，女18例，年齡10～30個(gè)月，平均(21.47±2.49)個(gè)月; 脫水情況: 無(wú)脫水12例，輕度脫水30例。對(duì)照組男22例，女20例，年齡8～28個(gè)月，平均(21.52±2.13)個(gè)月; 脫水情況: 無(wú)脫水15例，輕度脫水27例。2組患兒性別、年齡及脫水情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，患兒家屬已知情并簽署同意書(shū)。

觀察組患兒均符合BICE診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]: ① 臨床癥狀多數(shù)表現(xiàn)為無(wú)熱驚厥，少數(shù)患兒為低熱驚厥，體溫<38 ℃; ② 大部分患兒既往身體健康，既往無(wú)驚厥等相關(guān)疾病; ③ 在患有輕度腸胃炎期間出現(xiàn)驚厥，伴有輕度缺水癥狀者; ④ 大部分患兒預(yù)后表現(xiàn)良好; ⑤ 驚厥次數(shù)≥1次，發(fā)作期間檢查腦電圖無(wú)異常者; ⑥糞便能夠檢查到致病原者。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 年齡均≤3歲; ② 所有患兒均有嘔吐、腹瀉等癥狀; ③ 存在輕度腸胃炎癥狀，并伴有輕度缺水者; ④ 所有患兒發(fā)育良好，既往無(wú)早產(chǎn)、癲癇病和驚厥史; ⑤ 所有患兒血液葡萄糖、血清電解質(zhì)和生化檢查均無(wú)異常; ⑥ 觀察組患兒驚厥發(fā)作前、后6 h內(nèi)體溫<38 ℃, 發(fā)作期間檢查腦電圖無(wú)異常。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 體溫≥38 ℃者; ②腦發(fā)育異常、腦外傷、顱內(nèi)感染、熱性驚厥患兒; ③ 有驚厥、癲癇家族遺傳史者; ④ 精神疾病或智力低下患兒; ⑤ 臨床資料不齊全或無(wú)法配合研究的患兒。

1.2 方法

所有患兒均在就診當(dāng)天抽取外周血2 mL進(jìn)行檢測(cè)，血液標(biāo)本在送達(dá)檢驗(yàn)中心后立即做離心處理，在24 h內(nèi)完成炎癥因子及T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)，并低溫保存血液標(biāo)本。采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司生產(chǎn))檢測(cè)炎癥因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(INF-γ)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)。選用自動(dòng)計(jì)數(shù)儀和CD系列細(xì)胞檢測(cè)玻璃片檢測(cè)CD4+/CD8+、CD8+、CD4+、CD3+，儀器為上海匯中細(xì)胞生物科技有限公司生產(chǎn)，操作步驟嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)執(zhí)行。

觀察組患兒就診時(shí)另外再抽取腦脊液1.5 mL, 選用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA), 檢測(cè)腦脊液S-100β、MBP及NSE水平。S-100β試劑盒由美國(guó)Cygnus公司提供; MBP試劑盒由上海通蔚公司提供; NSE試劑盒由羅氏診斷產(chǎn)品有限公司提供，所有步驟均按照使用說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格執(zhí)行。所有患兒均給予補(bǔ)液等治療，待脫水癥狀得到良好恢復(fù)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 2組患兒血清炎癥因子及T淋巴細(xì)胞水平比較

觀察組患兒TNF-α、IL-6、INF-γ水平高于對(duì)照組患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 觀察組患兒CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見(jiàn)表1。

表1 2組患兒血清炎癥因子及T淋巴細(xì)胞水平比較

2.2 觀察A、B 組患兒血清炎癥因子及T淋巴細(xì)胞水平比較

觀察B組患兒TNF-α、IL-6、INF-γ水平高于觀察A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 觀察B組患兒CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平低于觀察A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見(jiàn)表2。

表2 觀察A、B組患兒血清炎癥因子及T淋巴細(xì)胞水平比較

2.3 觀察A、B組患兒腦脊液S-100β、MBP及NSE水平比較

觀察B組患兒腦脊液S-100β、NSE水平高于觀察A組患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 觀察A、B組腦脊液MBP水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

表3 觀察A、B組患兒腦脊液S-100β、MBP及NSE水平比較 μg/L

3 討 論

BICE既往預(yù)后良好[7], 陳豪等[8]研究顯示, BICE患兒存在約8.1%的復(fù)發(fā)率，約有5.4%的概率轉(zhuǎn)化為癲癇。臨床研究[9]表明，大部分BICE患兒為首次發(fā)作，驚厥發(fā)作時(shí)間范圍一般在5 min內(nèi)，偶爾呈現(xiàn)持續(xù)性，發(fā)作特點(diǎn)表現(xiàn)為集叢性，驚厥發(fā)作時(shí)有不同的狀態(tài)，多數(shù)是全身發(fā)作，少數(shù)是運(yùn)動(dòng)性發(fā)作，而后繼發(fā)全身性發(fā)作。因BICE的發(fā)病原因和機(jī)制尚不明確，暫無(wú)統(tǒng)一治療措施來(lái)控制和預(yù)防BICE發(fā)生。

小兒胃腸炎發(fā)作與人體免疫功能失調(diào)密切相關(guān)，驚厥發(fā)生時(shí)患兒體內(nèi)免疫功能異常程度要大于無(wú)驚厥患兒，促進(jìn)T細(xì)胞分泌更多的細(xì)胞因子，大量的細(xì)胞因子結(jié)合免疫功能失調(diào)可對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)造成損害，提升神經(jīng)元的興奮性[10]。輔助性T細(xì)胞(Th)在受到刺激后可增殖、分解出細(xì)胞因子，大致分為T(mén)h1、Th2這2種細(xì)胞[11]。機(jī)體在正常情況下, Th1、Th2細(xì)胞功效始終保持動(dòng)態(tài)均衡形態(tài)，當(dāng)被病原體感染后，可造成機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能異常，進(jìn)而發(fā)生疾病[12]。TNF-α和INF-γ是由Th1細(xì)胞分泌產(chǎn)生，在細(xì)胞免疫應(yīng)答中起介導(dǎo)作用，在機(jī)體發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，炎性細(xì)胞因子TNF-α的分泌量增加，一方面可介入機(jī)體免疫病理?yè)p傷中，另一方面可作為一種重要介質(zhì)對(duì)機(jī)體免疫進(jìn)行有效防護(hù)[13]。INF-γ的主要作用是進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)，可以對(duì)基因表達(dá)、細(xì)胞生長(zhǎng)進(jìn)行有效調(diào)控，是多效應(yīng)炎性介質(zhì)的一種，此外也具備抗感染以及阻撓病毒復(fù)制的作用[14]。IL-6具有發(fā)揮防御以及調(diào)節(jié)肌體損傷的作用，是一種多功能細(xì)胞因子，能夠聯(lián)合IFN-γ、TNF-α共同促使T淋巴細(xì)胞分化增殖，產(chǎn)生抑制性T淋巴細(xì)胞，從而形成大量的相關(guān)抗體，引發(fā)病變[15]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患兒TNF-α、IL-6、IFN-γ水平顯著高于對(duì)照組患兒，并隨著患兒驚厥發(fā)作次數(shù)增多，TNF-α、IL-6、IFN-γ水平呈逐漸上升趨勢(shì)，提示TNF-α、IL-6、IFN-γ參與了免疫應(yīng)答，而過(guò)表達(dá)能夠起到保護(hù)神經(jīng)的作用，但也觸發(fā)神經(jīng)細(xì)胞的病理過(guò)程產(chǎn)生驚厥。

T淋巴細(xì)胞在人體免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)中具有十分重要的影響，可調(diào)節(jié)人體免疫反應(yīng)[16]。檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群是分析人體細(xì)胞免疫水平的主要方式，對(duì)血液系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)等疾病的診治、預(yù)防具有重要意義。文獻(xiàn)[17]報(bào)道，免疫系統(tǒng)與BICE發(fā)生密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，超過(guò)60%的BICE患兒外周血 CD8+細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，反而CD4+/CD8+值升高。評(píng)估T淋巴細(xì)胞狀態(tài)主要來(lái)源于T 淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)水平，其水平高低可表明淋巴細(xì)胞是否被免疫原抑制[18]。CD25和HLA-DR的抗原表達(dá)能夠反應(yīng)出CD4+細(xì)胞的活化狀態(tài)，在T淋巴細(xì)胞分化、增殖中CD25起著重要作用[19]。本研究中，患兒T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)與活化抗原表達(dá)均存在降低現(xiàn)象，可使CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)下降，使其分泌的IFN-γ水平降低，進(jìn)而引發(fā)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞活化程度降低[20]。本研究結(jié)果表明，對(duì)照組患兒的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平顯著高于觀察組患兒(P<0.05), 且觀察A組患兒的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平顯著高于觀察B組患兒(P<0.05)。

神經(jīng)系統(tǒng)中S-100β蛋白、MBP和NSE是非常重要的細(xì)胞因子，主要影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷修復(fù)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)星形膠質(zhì)細(xì)胞能夠分泌S-100β蛋白，被激活后具備特征性標(biāo)志，主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)當(dāng)中，倘若中樞神經(jīng)系統(tǒng)被感染、損傷時(shí)，膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元遭到破壞，釋放S-100β蛋白，然后進(jìn)入血液和腦脊液中，故S-100β蛋白又被作為細(xì)胞受損時(shí)的標(biāo)志物[21]。MBP能夠促進(jìn)神經(jīng)信號(hào)迅速傳達(dá)及信號(hào)絕緣，可以維持髓鞘結(jié)構(gòu)和相關(guān)功能的穩(wěn)定性，當(dāng)髓鞘結(jié)構(gòu)受到損傷時(shí)，腦脊液中的含量會(huì)隨之增加[22]。在神經(jīng)元細(xì)胞的能量代謝和分化階段中NSE起到關(guān)鍵性作用。當(dāng)神經(jīng)元細(xì)胞受到病變累及損傷后，細(xì)胞內(nèi)會(huì)釋放NSE進(jìn)入腦脊液，在類似疾病中, NSE水平可以作為鑒別有無(wú)神經(jīng)元損傷及損傷程度的重要標(biāo)志[23]。陳俊國(guó)等[24]研究發(fā)現(xiàn)，驚厥發(fā)生≥2次患兒腦脊液中S-100β蛋白、NSE水平明顯高于驚厥發(fā)生<2次患兒，盡管MBP水平有所增高，但與其他組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 與本研究結(jié)果一致，表明BICE沒(méi)有影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的髓鞘結(jié)構(gòu)。

綜述所述, BICE患兒在發(fā)生驚厥過(guò)程中，細(xì)胞炎癥因子、免疫水平及腦脊液中MBP、NSE水平變化具有重要的臨床價(jià)值。觀察上述指標(biāo)可有效了解患兒的身體狀況，有利于醫(yī)務(wù)人員篩查高風(fēng)險(xiǎn)患兒和制定相關(guān)防治措施。