精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”受精率、孵化率及出苗率的影響

程景顥，李 杰，付東勇，儲(chǔ)明旭，張 凱，王 濤，尹紹武，唐忠林，茆健強(qiáng)，周?chē)?guó)勤

（1.南京師范大學(xué)海洋科學(xué)與工程學(xué)院，江蘇省特色水產(chǎn)育種與綠色高效養(yǎng)殖技術(shù)工程研究中心，南京 210023；2.南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所，南京 210029）

黃顙魚(yú)（Pelteobagrusfulvidraco）別名黃辣丁、黃姑子、黃沙古、昂刺魚(yú)等，隸屬于鲇形目（Siluriformes），鲿科（Bagridae），黃顙魚(yú)屬，在我國(guó)廣泛分布于長(zhǎng)江、黃河、珠江及黑龍江等各水系［1］。黃顙魚(yú)屬魚(yú)類(lèi)種類(lèi)較多，目前我國(guó)已報(bào)道的有5種，分別為黃顙魚(yú)、瓦氏黃顙魚(yú)（P.vachelli）、長(zhǎng)須黃顙魚(yú)（P.eupogon）、中間黃顙魚(yú)（P.intermedius）和光澤黃顙魚(yú)（P.nitidus）［2］。本研究所選的雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”是以二代選育的瓦氏黃顙魚(yú)為父本，三代選育的黃顙魚(yú)為母本，所獲得的雜交子代。其生長(zhǎng)速度和成活率均高于母本黃顙魚(yú)，抗病性強(qiáng)；與父本瓦氏黃顙魚(yú)相比，可食用部分多，營(yíng)養(yǎng)豐富，更耐運(yùn)輸，深受廣大養(yǎng)殖戶(hù)和消費(fèi)者的歡迎，目前已成為我國(guó)重要的優(yōu)質(zhì)水產(chǎn)養(yǎng)殖品種［3］。

人工授精是魚(yú)類(lèi)人工繁殖的重要環(huán)節(jié)，高質(zhì)量的精子是保證授精成功的重要因素之一。精子密度是評(píng)價(jià)精子質(zhì)量的重要指標(biāo)，不僅可以用來(lái)判斷精液質(zhì)量的好壞，還直接關(guān)系到人工授精的效果。在授精過(guò)程中，精子密度過(guò)低會(huì)降低受精率，過(guò)高則會(huì)引起多精入卵，導(dǎo)致胚胎發(fā)育后期畸形率增加。因此，魚(yú)類(lèi)人工授精時(shí)采用適宜的精子密度是提高受精率與孵化率的關(guān)鍵［4］。目前，國(guó)內(nèi)外關(guān)于魚(yú)類(lèi)精子密度對(duì)人工授精效果影 響 的 報(bào) 道 較 多，如 黃 顙 魚(yú)［5］、虹 鱒（Oncorhynchusmykiss）［6］、美 洲 擬 鰈（Pseudopleuronectesamericanus）［7］、斑 點(diǎn) 叉 尾 鮰（Ictaluruspunctatus）［8］等。迄今為止，針對(duì)雜交黃顙魚(yú)的研究主要集中在雌雄差異判別［9］、核型分析［10］、分子標(biāo)記［11］和精子冷凍保存［12］等方面，而關(guān)于精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)授精結(jié)果影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。

目前，我國(guó)雜交黃顙魚(yú)已經(jīng)開(kāi)展規(guī)?；斯し庇谌斯し敝尺^(guò)程中，由于雌、雄魚(yú)發(fā)情期不同步且需要?dú)⑺栏副疽垣@取精子，從而導(dǎo)致雄魚(yú)使用率和子代受精率低［13］。此外，由于瓦氏黃顙魚(yú)的市場(chǎng)效益不高，其養(yǎng)殖產(chǎn)量較低，加上近年來(lái)過(guò)度捕撈，導(dǎo)致瓦氏黃顙魚(yú)野生資源日益減少。作為雜交黃顙魚(yú)的父本，瓦氏黃顙魚(yú)種質(zhì)資源的衰退對(duì)雜交黃顙魚(yú)的規(guī)?；品N造成了不利影響。因此，確定雜交黃顙魚(yú)人工授精的最佳精子密度，將有利于提高瓦氏黃顙魚(yú)精子利用率、減少雄魚(yú)宰殺量和優(yōu)化冷凍保存精子的條件。本研究采用8組不同精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)開(kāi)展人工授精實(shí)驗(yàn)，并對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和比較，旨在篩選出最適宜的雜交黃顙魚(yú)人工授精精子密度，為雜交黃顙魚(yú)規(guī)?；咝е品N提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 親魚(yú)的選擇

雜交黃顙魚(yú)親本均為江蘇省南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所祿口基地自行培育，雄魚(yú)瓦氏黃顙魚(yú)規(guī)格（300±20）g，雌魚(yú)黃顙魚(yú)規(guī)格（150±30）g，親魚(yú)體質(zhì)健壯、無(wú)傷無(wú)病，性腺發(fā)育情況良好。

1.2 精子保存液的制備

本實(shí)驗(yàn)所采用的精子保存液為黃顙魚(yú)精子保存專(zhuān)用液［14］，配方如下：NaCl 7.68 g、KCl 0.22 g、NaHCO30.25 g、Na2CO30.21 g、葡萄糖2.0 g、蒸餾水1 L。

1.3 催產(chǎn)藥物及用具

催產(chǎn)藥物選用寧波三生生物科技有限公司生產(chǎn)的促黃體素釋放激素A2（LHRH-A2）、絨促性素（HCG）、馬來(lái)酸地歐酮（DOM），開(kāi)展人工授精實(shí)驗(yàn)時(shí)用配制好的保存液對(duì)精液進(jìn)行稀釋。

實(shí)驗(yàn)器具：5 mL連續(xù)注射器、1.5 mL離心管、移液槍、培養(yǎng)皿、奧林巴斯顯微鏡、血球計(jì)數(shù)板等。

1.4 孵化室及孵化條件

實(shí)驗(yàn)于2020年7月在南京市水產(chǎn)科學(xué)研究所祿口基地進(jìn)行，該基地配備有齊全的設(shè)施、專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室和孵化室。孵化室內(nèi)有72個(gè)長(zhǎng)0.8 m、寬0.5 m的長(zhǎng)方形孵化池，并配有完善的充氧設(shè)備，每平方米放一個(gè)氣石，保證池水中的氧氣供應(yīng)充足；另設(shè)有專(zhuān)用的流水孵化箱，水源為深井水，理化條件穩(wěn)定，pH值7.5～8.0。水源經(jīng)過(guò)晾曬曝氣后加入到孵化池，水溫為（27±1）℃。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

根據(jù)前期的預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，初步優(yōu)化了精卵比例（1粒卵子對(duì)應(yīng)的精子數(shù)量，即精子密度），本研究一共設(shè)置8個(gè)密度梯度：1.0×103、5.0×103、1.0×104、2.5×104、5.0×104、1.0×105、5.0×105、1.0×106個(gè)·mL－1，每個(gè)梯度設(shè)3個(gè)重復(fù)。每個(gè)梯度卵子數(shù)量固定為200粒，根據(jù)卵子數(shù)將每個(gè)密度梯度對(duì)應(yīng)數(shù)量的精子事先轉(zhuǎn)入到1.5 mL離心管中，并加入0.9%生理鹽水定容至1 mL。

1.5.2 精液采集與計(jì)數(shù)

實(shí)驗(yàn)用魚(yú)親本捕撈后暫養(yǎng)在水泥池，精液收集采用殺魚(yú)取精的辦法。采集精子時(shí)剖開(kāi)雄魚(yú)腹腔，用鑷子取出精巢，挑出血絲，在干凈的培養(yǎng)皿中剪碎，用80目的聚乙烯絹布過(guò)濾，并用保存液沖洗絹布，將過(guò)濾后的精液收集到精子保存液中。

用移液槍取上述精液25μL置于血球細(xì)胞計(jì)數(shù)板，蓋上蓋玻片置于顯微鏡下計(jì)數(shù)。精子計(jì)數(shù)的結(jié)果為：計(jì)數(shù)板上半部和下半部計(jì)數(shù)室中個(gè)數(shù)的平均值×稀釋倍數(shù)［15］，重復(fù)計(jì)數(shù)3次，取其平均值。經(jīng)計(jì)算，瓦氏黃顙魚(yú)新鮮精液的精子密度為（1.625±0.589）×1011個(gè)·mL－1。經(jīng)鏡檢，精子活力均在95%以上。

1.5.3 卵子采集

在人工授精前24 h對(duì)雌魚(yú)注射漁用HCG、LHRH-A2和DOM混合藥物，以促使其卵子成熟。雌魚(yú)取卵時(shí)，左手抓住黃顙魚(yú)，魚(yú)頭向內(nèi)、魚(yú)腹向上，用右手大拇指用力擠壓雌魚(yú)的腹部，避免魚(yú)卵與水接觸［16］。卵子收集后對(duì)其活力進(jìn)行評(píng)估，CHATAKONDI和TORRANS［17］認(rèn)為卵液的pH值與其質(zhì)量正相關(guān)，卵液的pH＞7.4即可以判斷卵子質(zhì)量合格，經(jīng)測(cè)定實(shí)驗(yàn)卵液pH為7.8。

1.5.4 人工授精及孵化

首先將裁剪好的網(wǎng)片平鋪于紙杯底部，紙杯內(nèi)襯薄層為植物油脂提取物。實(shí)驗(yàn)前統(tǒng)計(jì)黃顙魚(yú)卵子密度為（400±15）?！－1，在每個(gè)網(wǎng)片上加入0.5 g的卵液；之后將每個(gè)密度梯度對(duì)應(yīng)的精子數(shù)量用移液槍加入到卵子上面，并輕輕搖晃杯底5 s；然后每個(gè)網(wǎng)片加入5 mL的曝氣水（27.5～28.5℃），輕輕搖晃杯底2 min使其充分受精；將網(wǎng)片轉(zhuǎn)移到孵化池中進(jìn)行后續(xù)孵化。

孵化方式采用流水孵化，本實(shí)驗(yàn)孵化用水符合《中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)（GB11607-1989）》的規(guī)定［18］。受精卵孵化至原腸晚期時(shí)，未受精的卵可通過(guò)其顏色發(fā)白、不透明的特征進(jìn)行肉眼辨認(rèn)，并及時(shí)剔除，避免真菌和細(xì)菌的感染。此時(shí)計(jì)數(shù)受精卵數(shù)，然后繼續(xù)孵化，魚(yú)苗出膜后計(jì)數(shù)出膜魚(yú)苗數(shù)，之后，等待出膜魚(yú)苗發(fā)育至平游期開(kāi)口攝食，計(jì)數(shù)開(kāi)口攝食魚(yú)苗數(shù)，每個(gè)梯度測(cè)算的3個(gè)樣取其平均數(shù)，計(jì)算公式如下：

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

各組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）”表示。使用Excel 2019和SPSS 24.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，分別用方差 分 析（ANOVA）、LSD（least significant difference）多重比較和Duncan法檢驗(yàn)顯著性差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”受精率的關(guān)系

在受精卵處于原腸中期時(shí)觀(guān)察并記數(shù)，統(tǒng)計(jì)受精率。受精率隨著精子密度的增高呈現(xiàn)先顯著上升后略有下降的趨勢(shì)；當(dāng)精子密度從1.0×103個(gè)·mL－1提高到2.5×104個(gè)·mL－1時(shí)，受精率顯著上升（P＜0.05）；當(dāng)精子密度為5.0×104時(shí)，受精率達(dá)到最大值為88.8%；此后，受精率開(kāi)始下降，但各組之間差異并不顯著（P＞0.05）（圖1）。對(duì)8組不同濃度的精子密度與其相應(yīng)的受精率采用線(xiàn)性函數(shù)、對(duì)數(shù)函數(shù)、指數(shù)函數(shù)、二項(xiàng)式函數(shù)和冪函數(shù)5種方程進(jìn)行擬合，并回歸分析，以相關(guān)性（R2）最緊密的作為選取型式。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，二項(xiàng)式函數(shù)擬合效果最好：Y＝－2.26X2＋27.29X＋5.49（R2＝0.90）。其中，X代表精子密度，Y代表受精率（圖2）。

圖1 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”受精率的影響Fig.1 Effect of sperm density of P.vachelli on fertilization rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

圖2 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”受精率回歸曲線(xiàn)Fig.2 Regression curve between sperm density of P.vachelli and fertilization rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

綜上可知，精子密度的高低直接影響到雜交黃顙魚(yú)的受精率：當(dāng)精子密度過(guò)低時(shí)，受精率也往往偏低；精子密度過(guò)高時(shí)，受精率并不會(huì)隨之一直升高，還造成了雄魚(yú)配子資源的浪費(fèi)。當(dāng)精子密度在2.5×104～1.0×105個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，受精率最理想。

2.2 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”孵化率的關(guān)系

當(dāng)精子密度從1.0×103個(gè)·mL－1提高到2.5×104個(gè)·mL－1時(shí)，孵化率顯著上升（P＜0.05），從35.3%提高到83.4%，并在精子密度為2.5×104個(gè)·mL－1時(shí)達(dá)到最大值；而當(dāng)精子密度從2.5×104個(gè)·mL－1提高到1.0×106個(gè)·mL－1時(shí)，孵化率則隨之下降，在精子密度為1.0×106個(gè)·mL－1時(shí)，孵化率僅為68.1%（圖3）。由于數(shù)據(jù)的非線(xiàn)性，采用曲線(xiàn)回歸分析精子密度與孵化率的關(guān)系，其中二項(xiàng)式函數(shù)擬合效果最好，其方程為：Y＝－2.42X2＋26.73X＋7.90（R2＝0.91）。其中，X代表精子密度，Y代表孵化率（圖4）。

圖3 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”孵化率的影響Fig.3 Effect of sperm density of P.vachelli on hatching rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

圖4 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”孵化率回歸曲線(xiàn)Fig.4 Regression curve between sperm density of P.vachelli and hatching rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

綜上可知，精子密度的大小直接影響到孵化率的高低，但精子密度過(guò)高和過(guò)低均不能使孵化率達(dá)到最大值。當(dāng)精子密度在2.5×104～5.0×104個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，孵化率最高。

2.3 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”出苗率的關(guān)系

由圖5可見(jiàn)，當(dāng)精子密度從5.0×103個(gè)·mL－1提高到2.5×104個(gè)·mL－1，出苗率顯著上升（P＜0.05），并在精子密度為2.5×104個(gè)·mL－1時(shí)，出苗率達(dá)到最大值（79.4%）。當(dāng)精子密度繼續(xù)提高，出苗率不再增加。對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，發(fā)現(xiàn)二項(xiàng)式R2值最高，擬合效果最好，其方程為：Y＝－1.92X2＋22.18X＋9.42（R2＝0.79）。其中，X代表精子密度，Y代表出苗率（圖6）。當(dāng)精子密度在2.5×104～1.0×105范圍內(nèi)時(shí)，出苗率最高。

圖5 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度對(duì)雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”出苗率的影響Fig.5 Effect of sperm density of P.vachelli on emergence rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

圖6 瓦氏黃顙魚(yú)精子密度與雜交黃顙魚(yú)“黃優(yōu)1號(hào)”出苗率回歸曲線(xiàn)Fig.6 Regression curve between sperm density of P.vachelli and emergence rate of hybrid yellow catfish“Huangyou-1”

3 討論

在水產(chǎn)動(dòng)物人工授精時(shí)，受精率受到精子密度、卵子質(zhì)量、授精技術(shù)及繁殖環(huán)境等各種因素的影響，但最適宜的精子密度仍是提高受精卵受精率與孵化率的關(guān)鍵［19］。BUTTS等［7］認(rèn)為，當(dāng)精子密度為3.4×104個(gè)·mL－1時(shí)，美洲擬鰈卵子的受精率達(dá)81.3%；高緒生等［20］在對(duì)皺紋盤(pán)鮑（Haliotisdiscushannai）的研究中發(fā)現(xiàn)，精子密度在1×105～1×106個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，受精率隨精子密度的增加而提高；SUQUET等［21］認(rèn)為，精子密度為6×103個(gè)·mL－1時(shí)，大菱鲆（Scophthalmusmaximus）的孵化率最高；隋錫林等［22］在對(duì)刺參（Stichopusjaponicus）的研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精子密度為2×105個(gè)·mL－1時(shí)，受精率接近100%；BUTTS等［23］研究精子密度對(duì)鱈（Gadus morhua）受精的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精子密度為1×105個(gè)·mL－1時(shí)，其受精率和孵化率達(dá)到最大；BART和DUNHAM［8］發(fā)現(xiàn)，在斑點(diǎn)叉尾鮰人工授精過(guò)程中，當(dāng)一個(gè)卵子周?chē)木訑?shù)量低于5×104個(gè)時(shí)，會(huì)導(dǎo)致受精成功率顯著降低；IANAE等［24］發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精子密度為1×106個(gè)·mL－1時(shí)，歐洲鰻（Anguillajaponica）的受精率達(dá)到最大；LINHART等［25］對(duì)鯉（Cyprinuscarpio）的研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)一個(gè)卵子周?chē)訑?shù)量超過(guò)2.4×105個(gè)時(shí)，其受精率將不再增加。由此可知，精子密度對(duì)受精率和孵化率均具有重要影響。

本實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)精子密度在2.5×104～1.0×105個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，受精率最高（可達(dá)88.8%）；當(dāng)精子密度在2.5×104～5.0×104個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，孵化率最高（可達(dá)83.4%）；當(dāng)精子密度在2.5×104～1.0×105個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，出苗率最高（可達(dá)79.4%）。由此可見(jiàn)，在雜交黃顙魚(yú)實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，父本瓦氏黃顙魚(yú)精子密度在2.5×104～5.0×104個(gè)·mL－1范圍內(nèi)時(shí)，可實(shí)現(xiàn)生產(chǎn)效率和經(jīng)濟(jì)效益的最大化。ZHANG等［5］對(duì)黃顙魚(yú)研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精卵比為3×104∶1時(shí)，黃顙魚(yú)受精率最高為84.1%，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其大致吻合。此外，魯大椿等［26］認(rèn)為，魚(yú)類(lèi)人工授精適宜采用的精卵比為（3～4）×105∶1，這一結(jié)果表明，不同魚(yú)類(lèi)授精的最適精子密度存在差異，在雜交黃顙魚(yú)繁殖生產(chǎn)中，可以使用相對(duì)較低的精子密度來(lái)提高生產(chǎn)效率，從而節(jié)約雄魚(yú)親本資源，降低生產(chǎn)成本。

成熟的瓦氏黃顙魚(yú)精巢呈現(xiàn)櫛狀分支，每一分支的內(nèi)部結(jié)構(gòu)呈樹(shù)葉型，而精巢小葉又由許多壺腹?fàn)畹木∧医M成。成熟的黃顙魚(yú)卵呈圓形，且卵子表面僅有1個(gè)受精孔，卵膜上有以受精孔為中心分布的輻射狀溝嵴，卵徑為1.0～1.2 mm［27－28］。對(duì)于淡水物種，精子自激活后的活躍時(shí)間通常只有不到1 min［29］。黃顙魚(yú)授精時(shí)受精孔區(qū)會(huì)出現(xiàn)環(huán)狀隆起，起到一個(gè)緩沖作用，只允許少數(shù)活性高的精子越過(guò)隆起進(jìn)入精孔管，而大多數(shù)活力弱的精子則被阻擋在外面，從而保證授精的質(zhì)量［30］。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，精子密度為1×103個(gè)·mL－1時(shí)，雜交黃顙魚(yú)的受精率、孵化率和出苗率均偏低，而隨著精子數(shù)量的增加，其受精率、孵化率和出苗率均相應(yīng)的提高。在雜交黃顙魚(yú)人工授精過(guò)程中，當(dāng)精子密度過(guò)低時(shí)，活力高的精子穿過(guò)卵膜孔進(jìn)入精孔管的幾率更小，導(dǎo)致較低的受精率和孵化率；而隨著精子密度的提高，活力高的精子進(jìn)入精孔管的幾率也大大增加，從而導(dǎo)致受精率的提高。另外，在實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)精子密度超過(guò)一定的閾值，精子數(shù)量增加將不再導(dǎo)致生殖力的提高。具體來(lái)講，當(dāng)精子密度超過(guò)5.0×104個(gè)·mL－1時(shí)，受精率將不再提高（圖1）；當(dāng)精子密度超過(guò)2.5×104個(gè)·mL－1時(shí)，孵化率和出苗率均開(kāi)始下降（圖3，圖5）。這與對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰的研究結(jié)果相類(lèi)似［31］。這可能是由于其受精方式為單精入卵，當(dāng)精子密度達(dá)到一定閾值后，隨著精子密度的提高，活力高的精子進(jìn)入精孔管的優(yōu)勢(shì)不再明顯增加。ROSENTHAL等［32］認(rèn)為，受精卵在卵裂、受精及孵化變態(tài)過(guò)程中耗氧量激增，且精子密度的增加會(huì)造成局部溶氧不足，引起孵化水的腐敗，從而影響卵的正常受精與孵化。

本實(shí)驗(yàn)設(shè)置8組不同的精子密度（1.0×103～1.0×106個(gè)·mL－1）對(duì)雜交黃顙魚(yú)進(jìn)行人工授精，并確定了最佳授精精子密度。建議實(shí)際生產(chǎn)中宜采用2.5×104～5.0×104個(gè)·mL－1的精子密度范圍進(jìn)行人工授精，該密度使用的精子數(shù)量比之前實(shí)際生產(chǎn)中使用的要少，可以有效節(jié)約雄魚(yú)配子資源，減少人工制種過(guò)程中對(duì)冷凍保存精子的需求。本實(shí)驗(yàn)篩選出的最適精子密度可作為雜交黃顙魚(yú)規(guī)模化生產(chǎn)中的最優(yōu)選擇，也可為黃顙魚(yú)屬魚(yú)類(lèi)人工授精和雜交育種提供一定的參考和借鑒。