經(jīng)顱直流電刺激聯(lián)合丹紅注射液對(duì)腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)及HIF-1α、VEGF、BDNF表達(dá)的影響

李宇寧，張凱明，李 林，杜詩儀，吳春賢，鄭桃林，熊 鈺，張文華

腦卒中是臨床常見的急危重癥，主要是由于腦部血管突然破裂或因血管阻塞導(dǎo)致大腦血流供應(yīng)不足引起腦組織損傷的一類疾病[1]，病人常具有頭痛及運(yùn)動(dòng)功能障礙等臨床癥狀，甚至引起神經(jīng)功能和認(rèn)知障礙，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量[2]。經(jīng)顱直流電刺激(transcranial direct current stimulation，tDCS)是一種非侵入性腦刺激技術(shù)，利用低強(qiáng)度、恒定的微直流電作用于大腦皮質(zhì)，有利于腦卒中病人運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能恢復(fù)[3]。丹紅注射液主要用于治療心血管疾病和腦血管疾病(如腦卒中)，藥理作用包括抗炎、抗氧化、抗凝、降血脂、抗凋亡、血管擴(kuò)張和促進(jìn)血管生成等，對(duì)改善腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能障礙具有較好的臨床療效[4]。Hong等[5]研究顯示，腦血管疾病中低氧誘導(dǎo)因子-1(HIF-1)與其他促血管生成因子協(xié)同參與血管形成的過程。有研究顯示，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)及腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)通過影響血管生成因子的遷移、分泌、功能，從而調(diào)控血管生成，促進(jìn)腦卒中病人血流供應(yīng)恢復(fù)[6]。本研究觀察tDCS聯(lián)合丹紅注射液對(duì)腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)及血清低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、VEGF及BDNF水平的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2018年1月—2020年1月中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第九二一醫(yī)院收治的腦卒中病人107例，年齡(58.4±11.1)歲，男58例，女49例，體質(zhì)指數(shù)(24.1±4.1)kg/m2。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)；病程<3個(gè)月；未接受任何運(yùn)動(dòng)康復(fù)方面的治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：妊娠或哺乳期婦女；頭部外傷或手術(shù)史病人；存在其他嚴(yán)重器官功能不全；合并其他運(yùn)動(dòng)功能性障礙疾病病人。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，病人或家屬同意參與本研究，均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 tDCS 采用Neuroconn型經(jīng)顱直流電刺激儀(Neurocare公司生產(chǎn)，德國)，選擇單通道直流電流電極片，電流強(qiáng)度為1 000～2 000 μA。陽極電極置于病灶側(cè)中央前回運(yùn)動(dòng)皮層的顱骨表面，陰極電極置于顱骨對(duì)側(cè)。tDCS治療每日1次，每次30 min，每周5次，療程為4周。

1.2.2 丹紅注射液 丹紅注射液(菏澤步長制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字Z20026866)40 mL加入5%葡萄糖注射液500 mL中靜脈輸注，每日1次，療程為4周。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 運(yùn)動(dòng)功能評(píng)估 兩名神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師于研究前6個(gè)月接受系統(tǒng)培訓(xùn)，于研究開始時(shí)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示一致性較好(Kappa值=0.87)。由兩名醫(yī)師分別采用Fugl-Meyer評(píng)分(Fugl-Meyer Assessment，F(xiàn)MA)與改良Barthel指數(shù)量表(MBIS)評(píng)定腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能。

1.3.2 HIF-1α、VEGF及BNDF表達(dá) 分別于治療前、治療4周后抽取病人靜脈血5 mL，采用離心機(jī)(Optima XPN-100，BECNMAN，美國)，4 ℃條件下，以3 500 r/min離心10 min，取上清液。使用人HIF-1α酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)試劑盒(R&D Systems公司生產(chǎn)，美國)、人VEGF試劑盒(R&D Systems公司生產(chǎn)，美國)及人BNDF ELISA試劑盒(R&D Systems公司生產(chǎn)，美國)定量檢測外周血HIF-1α、VEGF及BNDF表達(dá)。

2 結(jié) 果

2.1 治療前后血清HIF-1 α、VEGF及BDNF表達(dá)比較 治療后，病人血清HIF-1α水平較治療前降低，VEGF及BDNF水平較治療前升高(P<0.01)。詳見表1。

表1 治療前后血清HIF-1 α、VEGF 及BDNF表達(dá)比較(±s) 單位：pg/mL

2.2 治療前后FMA及MBIS評(píng)分比較 治療后，病人FMA及MBIS評(píng)分較治療前升高(P<0.01)。詳見表 2。

表2 治療前后FMA及MBIS評(píng)分比較(±s) 單位：分

2.3 血清HIF-1α、VEGF和BDNF表達(dá)與FMA、MBIS評(píng)分的相關(guān)性分析 病人血清HIF-1α表達(dá)與FMA、MBIS評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.517，P<0.01；r=-0.494，P<0.01)；血清VEGF、BDNF表達(dá)與FMA評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.474，P<0.05；r=0.504，P<0.01)，與MBIS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.461，P<0.05；r=0.583，P<0.01)；VEGF表達(dá)與BDNF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.485，P<0.05)。詳見表 3。

表3 血清HIF-1α、VEGF和BDNF表達(dá)與FMA、MBIS相關(guān)性分析(r值)

3 討 論

腦卒中是神經(jīng)內(nèi)科的臨床常見病，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)生活的發(fā)展，近年來發(fā)病率逐年增高，發(fā)病年齡趨于年輕化，如何促進(jìn)腦卒中病人日常生活能力的恢復(fù)成為研究的重點(diǎn)[7]。tDCS具有操作簡便、便于攜帶等優(yōu)點(diǎn)，在腦卒中病人運(yùn)動(dòng)能力康復(fù)的過程中應(yīng)用廣泛[8]。

丹紅注射液主要是由丹參、紅花組成，具有活血化瘀、通脈舒絡(luò)的功能，可用于瘀血閉阻所致胸痹及中風(fēng)的治療[9]。有研究表明，病人發(fā)生腦卒中后，大腦因血流供應(yīng)不足，局部缺氧增加HIF-1α表達(dá)，上調(diào)VEGF表達(dá)從而促進(jìn)血管形成[10]。本研究納入的病人采用tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后血清HIF-1α水平較治療前降低，而VEGF及BDNF水平較治療前升高。血清HIF-1α水平降低提示采用tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后，病人大腦血供得到一定程度的改善；VEGF高水平提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療，可持續(xù)升高血清VEGF表達(dá)，促進(jìn)病人大腦血流供應(yīng)恢復(fù)；BDNF是體內(nèi)含量較多的營養(yǎng)因子，具有維持和促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)育分化與生長再生的作用[11]。病人血清BDNF水平較治療前提高，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后可升高BDNF水平，促進(jìn)病人神經(jīng)元修復(fù)。

FMA及MBIS是評(píng)估腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能的指標(biāo)[12]。本研究治療后運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)評(píng)分FMA及MBIS較治療前升高(P<0.05)，提示運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分較治療前好轉(zhuǎn)。血清HIF-1α含量與FMA、MBIS呈負(fù)相關(guān)，提示大腦缺氧狀態(tài)與腦卒中病人運(yùn)動(dòng)功能有關(guān)，大腦缺氧越嚴(yán)重，病人運(yùn)動(dòng)功能障礙越嚴(yán)重，可改善腦卒中病人大腦缺氧狀態(tài)，有利于運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)。VEGF與BDNF呈正相關(guān)，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療可有效提高腦卒中病人VEGF及BDNF表達(dá)水平，且VEGF與BDNF在一定的細(xì)胞通路下相互聯(lián)系。血清VEGF、BDNF含量與FMA、MBIS均呈正相關(guān)，提示tDCS聯(lián)合丹紅注射液治療后可能通過上調(diào)VEGF、BDNF表達(dá)促進(jìn)血管生成、營養(yǎng)神經(jīng)元，從而改善病人大腦缺氧狀態(tài)，加速運(yùn)動(dòng)功能康復(fù)。

綜上所述，tDCS聯(lián)合丹紅注射液可有效降低腦卒中病人HIF-1α水平，提高VEGF及BDNF表達(dá)，有助于緩解大腦缺氧狀態(tài)，并促進(jìn)病人運(yùn)動(dòng)功能的康復(fù)。tDCS聯(lián)合丹紅注射液的治療方式操作簡便、療效較好。