基于網(wǎng)絡藥理學的雷公藤治療干燥綜合征作用機制研究

楊少寧 孫倩 李姍姍 于小勇

摘要 目的：基于網(wǎng)絡藥理學探討雷公藤與干燥綜合征的關(guān)聯(lián)關(guān)系及潛在作用機制。方法：通過檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫，結(jié)合口服生物利用度和類藥性分析，篩選出雷公藤中的主要活性成分及作用靶點;檢索GEO數(shù)據(jù)庫篩選干燥綜合征的預測靶點，并將有效化合物和疾病靶點進行映射;采用Cytoscape軟件構(gòu)建雷公藤化合物-干燥綜合征靶點相互作用網(wǎng)絡;通過Bisogenet包進行蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡的構(gòu)建;再使用Bioconductor平臺和R軟件進行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。結(jié)果：篩選得到雷公藤有效成分共22個，作用靶點413個，從GEO數(shù)據(jù)庫確定干燥綜合征差異基因466個;有效化合物-干燥綜合征網(wǎng)絡總共包括28個節(jié)點和41條相互作用關(guān)系，關(guān)鍵活性化合物有山柰酚、川陳皮素、β-谷甾醇、雷公藤內(nèi)酯醇、浙貝素等;通過蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡得到11個核心蛋白;GO富集分析主要涉及共獲得生物過程（BP）295個，細胞組成（CC）3個，分子功能（MF）46個;相關(guān)條目主要涉及花生四烯酸代謝、類二十烷酸、脂肪酸、前列腺素等生物的合成與代謝過程、氧化應激以及多種酶的活性等;KEGG通路富集篩選得到19條信號通路，主要包括為花生四烯酸代謝、血清素能突觸、TNF信號通路、多種細胞凋亡、VEGF信號通路、IL-17信號通路、核因子-κB信號通路等。結(jié)論：本研究應用網(wǎng)絡藥理學方法，對雷公藤治療干燥綜合征的活性成分、作用靶點和信號通路進行了探索性研究，發(fā)現(xiàn)雷公藤中的山柰酚、川陳皮素、β-谷甾醇等活性成分可參與調(diào)節(jié)花生四烯酸、類二十烷酸、脂肪酸、前列腺素等生物的合成與代謝過程、氧化應激以及多種酶的活性，并通過血清素能突觸、TNF信號通路、多種細胞凋亡通路、VEGF信號通路、IL-17信號通路、核因子-κB信號通路等信號通路進行綜合靶向調(diào)控，從而發(fā)揮治療作用。

關(guān)鍵詞 雷公藤;干燥綜合征;作用機制;靶點;網(wǎng)絡藥理學;有效成分;富集分析;信號通路

Mechanism Study of Tripterygium Wilfordii on Sjogren′s Syndrome Based on Network Pharmacology

YANG Shaoning1，SUN Qian1，LI Shanshan1，YU Xiaoyong2

（1 Shaanxi University of Traditional Chinese Medicine，Xianyang 712046，China; 2 Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine，Xi′an 710003，China）

Abstract Objective：To explore the association and potential mechanism of Tripterygium wilfordii and Sjogren′s syndrome based on network pharmacology.Methods：By searching the TCMSP database，combined with oral bioavailability and drug-like analysis，the main active ingredients and action targets in Tripterygium wilfordii were screened; the GEO database was searched to screen for predicted targets for Sjogren′s syndrome，and effective compounds were mapped to disease targets; Cytoscape software was used to construct the target interaction network of Tripterygium compound-Sjogren′s syndrome; PPI protein interaction network was constructed through Bisogenet package; Bioconductor platform and R software were used to perform GO function enrichment analysis and KEGG pathway enrichment analysis.Results：A total of 22 active ingredients of Tripterygium wilfordii were screened and 413 targets were identified.466 differential genes for Sjogren′s syndrome were identified from the GEO database; the effective compound-Sjogren′s syndrome network includes a total of 28 nodes and 41 interactions.The key active compounds are kaempferol，ligandrin，β-sitosterol，triptolide，and zhebein; 11 core proteins were obtained through the PPI network; GO enrichment analysis mainly involved a total of 295 biological processes （BP），3 cell compositions （CC），and 46 molecular functions （MF）; relevant entries mainly involve arachidonic acid metabolism，eicosanoid acid，fatty acids，prostaglandins and other organisms，oxidative stress，and the activities of various enzymes，etc; KEGG pathway was enriched and screened to obtain 19 signaling pathways，including arachidonic acid metabolism，serotonergic synapses，TNF signaling pathway，a variety of apoptosis，VEGF signaling pathway，IL-17 signaling pathway，NF-κB signaling Pathways，etc.Conclusion：This study used the network pharmacology method to preliminarily analyze the multi-component，multi-target，and multi-path characteristics of Tripterygium wilfordii in treating Sjogren′s syndrome，providing a reference for the implementation of subsequent clinical and scientific research-related work.

Keywords Tripterygium wilfordii; Sjogren′s syndrome; Mechanism of action; Target; Network pharmacology; Effective constituents; Enrichment analysis; Signaling pathway

中圖分類號：R285;R284文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.01.010

干燥綜合征（Sjogren′s Syndrome，SS）是一種與外分泌腺有關(guān)的自身免疫性疾病，多見于絕經(jīng)后的女性，其主要特點是唾液腺和（或）淚腺功能的缺失，導致口干和眼干的癥狀[1]。本病可單獨發(fā)病，也可繼發(fā)于類風濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等其他自身免疫性疾病，全身受累會導致包括腎臟和周圍神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的多個器官和組織的病理變化[2-3]。西醫(yī)治療主要包括局部用藥以保濕和減少炎性反應，系統(tǒng)治療包括使用類固醇激素、免疫抑制劑和細胞毒藥物等維持治療[4]。長期使用此類藥物不僅不良反應大，而且費用昂貴，因此，探索新的治療方式具有實際意義。干燥綜合征在中醫(yī)上屬于“燥證”范疇[5]，陰虛致燥為其根本原因。雷公藤因其具有免疫調(diào)節(jié)等多種功效而被臨床應用于干燥綜合征的治療，并取得了良好的效果[6-7]，但其具體作用機制尚不清楚。

本研究通過TCMSP數(shù)據(jù)庫、GEO數(shù)據(jù)庫，挖掘雷公藤和SS相關(guān)基因，采用Cytoscape構(gòu)建雷公藤治療SS的特異性靶點網(wǎng)絡，借助R語言分析相關(guān)基因，構(gòu)建兩者蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡圖，并進行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，旨在探討雷公藤治療SS的關(guān)鍵靶點及作用機制，為深入開展雷公藤的基礎實驗研究及臨床合理應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 雷公藤成分及作用靶點

使用中藥系統(tǒng)藥理學數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP，http：//tcmspw.com

/tcmsp.php）篩選雷公藤化學成分和相關(guān)靶點[8]，該數(shù)據(jù)庫中包含約500種《中華人民共和國藥典》中收載的藥物，提供了多種與ADME相關(guān)的重要特性，即吸收（Absorption）、分布（Distribution）、代謝（Metabolism）及排泄（Excretion）。本研究根據(jù)口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）>30%和類藥性（Drug Likeness，DL）>0.18篩選出主要有效活性成分，并在該數(shù)據(jù)庫中查詢主要有效活性成分的相關(guān)靶點。

1.2 方法

1.2.1 SS疾病靶點預測

在GEO數(shù)據(jù)庫（https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）中搜索“Sjogren′s Syndrome”，得到與SS相關(guān)的差異基因，作為疾病的候選靶點基因。獲得芯片基因注釋文件：GPL570，芯片數(shù)據(jù)原始文件：GSM2252121-GSM2252180。該數(shù)據(jù)的原始文件共60個樣本，包含SS患者30例，健康志愿者30例，包括全血轉(zhuǎn)錄、血清蛋白質(zhì)和外周免疫表型等多種生物信息。使用R語言對芯片原始數(shù)據(jù)進行分析，利用limma包分析芯片數(shù)據(jù)的差異基因[9]，以P<0.05和差異倍數(shù)|logFC|>1的基因被認為具有顯著差異表達的相關(guān)基因;運用plot包繪制芯片原始的差異基因火山圖。

1.2.2 構(gòu)建雷公藤化合物與SS靶點相互作用網(wǎng)絡

將篩選得到的雷公藤化合物與SS靶點基因相映射，獲得二者交集靶點基因，然后使用Cytoscape3.7.2軟件進行“中藥化合物-作用靶點”網(wǎng)絡構(gòu)建。其中用“節(jié)點”（Node）表示分子、靶蛋白，用“邊”（Edge）表示成分與靶點之間的關(guān)系;然后采用network analyzer插件進行網(wǎng)絡特征分析[10]，根據(jù)等級值（Degree）較大的節(jié)點進行篩選，節(jié)點的度數(shù)與節(jié)點相連邊的數(shù)量、度數(shù)越大，說明網(wǎng)絡中該節(jié)點直接相關(guān)的節(jié)點數(shù)越多，表明該節(jié)點在網(wǎng)絡中越重要，從而得到雷公藤中關(guān)鍵的成分和靶點。

1.2.3 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡的構(gòu)建

使用Cytoscape3.7.2軟件中Bisogenet包進行PPI（Protein-protein Interaction）蛋白互作網(wǎng)絡的構(gòu)建，選擇數(shù)據(jù)庫來源為DIP、BIOGRID、HPRD、INTACT、MINT、BIND，使用CytoNCA包進行網(wǎng)絡拓撲分析[11]，對網(wǎng)絡中所有點的度中心性（Degree Centrality，DC）進行分析進行分析，根據(jù)Degree（度）的大小，選擇具有數(shù)據(jù)支持的靶點為SS的關(guān)鍵靶標蛋白。

1.2.4 GO功能富集分析

采用R軟件對雷公藤的成分作用靶點進行基因本體（Gene Ontology，GO）功能富集分析，獲得分析中生物過程（Biological Process，BP）、細胞組成（Cellular Component，CC）、分子功能（Molecular Function，MF）富集分析結(jié)果，并將其結(jié)果繪制成柱狀圖進行可視化。

1.2.5 KEGG通路富集分析

使用R軟件ggplot2包對PPI網(wǎng)絡中的蛋白進行京都基因與基因組百科全書（KEGG）的通路富集分析，并繪制氣泡圖，信號通路的顯著性用氣泡的大小和顏色表示，氣泡越大代表信號通路的基因數(shù)目越高，說明該通路的重要性越高。

2 結(jié)果

2.1 雷公藤有效成分和相關(guān)作用靶點篩選

通過TCMSP數(shù)據(jù)庫，按照OB>30%和DL>0.18的篩選條件，檢索到雷公藤有效成分共51個，相關(guān)作用靶點共1 055個。其中，有29個有效成分未找到與干燥綜合征相關(guān)的對應靶點，其余22種有效成分共獲得CKD潛在靶點413個。見表1。

2.2 SS靶點預測

從GEO數(shù)據(jù)庫中得到干燥綜合征差異基因466個，其中56個下調(diào)基因和410個上調(diào)基因。通過R語言創(chuàng)建火山圖來顯示差異表達基因的分布，黑色代表沒有差異表達的基因，綠色、紅色代表差異基因。見圖1。

2.3 雷公藤化合物與SS靶點相互作用網(wǎng)絡

化合物與靶點網(wǎng)絡總共包括28個節(jié)點（22種化合物節(jié)點、6個靶點節(jié)點）和41條邊，平均節(jié)點2.929。見圖2所示，通過分析這個網(wǎng)絡圖的拓撲性質(zhì)及對中心度值、親中心度值、等級值3個值進行分析，得到排名前5位的化合物分別是山柰酚（Kaempferol）、川陳皮素（Nobiletin）、β-谷甾醇（Beta-sitosterol）、雷公藤內(nèi)酯醇（Triptolide）、浙貝素（Zhebeiresinol）;根據(jù)等級值（Degree）大小，得到排名靠前的靶點分別是PTGS2、PTGS1、CASP3、PLA2G4A、AKR1C3、BIRC3。因此，它們可能是雷公藤治療SS的關(guān)鍵活性化合物和靶點。見圖2。

2.4 PPI網(wǎng)絡的構(gòu)建與分析結(jié)果

使用Cytoscape3.7.2軟件中Bisogenet包進行PPI網(wǎng)絡的構(gòu)建，該網(wǎng)絡總共包含317個節(jié)點和3 116條相互作用關(guān)系，見圖3A，然后利用CytoNCA包對網(wǎng)絡中所有節(jié)點的度中心性（Degree Centrality，DC）進行分析，按照DC>61作為篩選條件進行過濾，得到含有11個節(jié)點，28條相互作用關(guān)系的網(wǎng)絡圖，見圖3B;最終確定了11個靶基因。分別是CASP3、TP53、UBC、BIRC3、CASP8、TRAF6、BIRC2、EGFR、CASP7、VCP、EP300，雷公藤的活性成分作用于多個靶點基因，且各個靶點之間相互協(xié)同作用。

2.5 GO功能富集分析結(jié)果

使用R軟件進行GO功能富集分析，根據(jù)矯正后的P值（P-adjust<0.05）為篩選條件，共獲得：生物過程（BP）295個，主要涉及花生四烯酸代謝過程、類二十烷酸生物合成過程、脂肪酸衍生物的生物合成過程、長鏈脂肪酸代謝過程、不飽和脂肪酸代謝過程、類二十烷酸代謝過程、前列腺素的生物合成過程、脂肪酸衍生物代謝過程、前列腺素代謝過程、不飽和脂肪酸的生物合成過程、脂肪酸代謝過程、對氧化應激的反應、羧酸生物合成過程、有機酸生物合成過程、對皮質(zhì)類固醇的反應等;細胞組成（CC）3個，主要涉及膜筏、膜微區(qū)、膜區(qū)等;分子功能（MF）46個，主要涉及氧化還原酶活性、抗氧化活性、雙加氧酶活性、血紅素結(jié)合、四吡咯結(jié)合、NADP-視黃醇脫氫酶活性、細胞周期蛋白依賴性蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑活性、磷脂酶激活劑活性等。并用柱狀圖分別列舉了各類排名靠前的條目。見圖4。

2.6 KEGG通路富集分析結(jié)果

使用R軟件對雷公藤與干燥綜合征的共同靶點進行KEGG通路富集分析，以矯正后的P值（P-adjust<0.05）為篩選條件，篩選出19條與SS關(guān)系密切的通路，主要涉及花生四烯酸代謝、血清素能突觸、卵巢類固醇生成、小細胞肺癌、TNF信號通路、多種細胞凋亡、脂肪細胞中脂解的調(diào)節(jié)、VEGF信號通路、鉑類藥物賴藥性、IL-17信號通路、核因子-κB信號通路、弓形蟲病、血小板活化、細胞凋亡、催產(chǎn)素信號通路、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、沙門菌感染、人巨細胞病毒感染等。見圖5。

3 討論

目前SS的發(fā)病機制仍不清楚，研究認為其發(fā)病過程是多因素的，與先天免疫系統(tǒng)、自身抗體、細胞因子、上皮細胞、內(nèi)皮細胞、代謝紊亂和環(huán)境等因素相關(guān)[1，12]。雷公藤功效的最早記載見于明代蘭茂所著的《滇南本草》，書中稱其“味辛，性溫，有毒。入肝脾十二經(jīng)，行十二經(jīng)絡”，具有“治筋骨疼痛，風寒濕痹，麻木不仁，癱瘓痿軟，濕氣流痰”等功效。迄今為止，已從雷公藤中分離得到生物堿類、二萜類、三萜類及多糖等100多種成分[13]。近年來，研究證實了雷公藤的多種成分具有免疫抑制、抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)痛及神經(jīng)保護等作用，但雷公藤活性成分改善SS理化指標的潛在機制研究較少，不足以系統(tǒng)闡述其生物過程及代謝通路[14-15]。

網(wǎng)絡藥理學從多靶點的研究出發(fā)，為我們提供了一種研究中藥的新策略[16]。本研究通過采用該方法結(jié)果顯示，雷公藤中共有22種有效成分和413個潛在靶點與SS相關(guān)，綜合分析化合物與SS網(wǎng)絡，發(fā)現(xiàn)雷公藤治療SS的關(guān)鍵化合物有山柰酚、川陳皮素、β-谷甾醇、雷公藤內(nèi)酯醇和浙貝素;根據(jù)等級值大小，得到排名靠前的靶點分別是PTGS2、PTGS1、CASP3、PLA2G4A、AKR1C3、BIRC3，表示它們可能是雷公藤治療SS的關(guān)鍵靶點。通過分析PPI網(wǎng)絡，按照DC值大小最終確定了11個相互作用的靶點基因，顯示雷公藤的活性成分作用于多個靶點基因，且各個基因之間相互協(xié)同的作用。研究發(fā)現(xiàn)，山柰酚能夠促進AMPK/Nrf2/HO-1信號通路的激活，緩解ox-LDL誘導的內(nèi)皮損傷[17];β-谷甾醇具有廣泛的藥理活性，包括抗菌、抗炎、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)等[18];雷公藤內(nèi)酯醇可能通過抑制TLR4/核因子-κB信號通路的信號因子表達，從而降低炎性反應遞質(zhì)的產(chǎn)生，減少炎性反應[19];本研究發(fā)現(xiàn)大部分成分均能直接作用于PTGS2這個靶點上而發(fā)揮關(guān)鍵作用，同時也與其他靶點相互作用共同干預SS進展。PTGS2環(huán)氧合酶2（COX-2）已被證實，受多種炎性細胞調(diào)控而高表達[20]?；谏鲜鼋Y(jié)果可知，雷公藤的有效成分之間存在協(xié)同作用，并可能通過降低炎性反應遞質(zhì)水平、調(diào)節(jié)免疫等途徑發(fā)揮治療SS的作用。

GO功能富集分析結(jié)果顯示，雷公藤治療SS的生物學進程主要涵蓋花生四烯酸、類二十烷酸、脂肪酸、前列腺素等生物的合成與代謝過程?；ㄉ南┧崾且环N人體必需的多元不飽和脂肪酸，作為多種生物活性物質(zhì)的前體，可通過環(huán)氧合酶、脂質(zhì)氧化物和細胞色素P450三大代謝途徑生成多種代謝產(chǎn)物，在炎性反應、調(diào)控免疫、細胞增殖與凋亡等多方面發(fā)揮重要作用[21-22];細胞組成主要涉及膜筏、膜微區(qū)、膜區(qū)，這些細胞成分可能參與了炎性反應、氧化應激和免疫調(diào)節(jié)等過程;同時分子功能涉及氧化還原酶、抗氧化、雙加氧酶等多種酶的活性，研究發(fā)現(xiàn)，多種活性酶可能在SS的進展中發(fā)揮作用，其中，組織蛋白酶S（CTSS）活性在SS患者中顯著增加，而通過補充蛋白聚糖4可能對SS患者有益[23]。另一項研究發(fā)現(xiàn)，胱天蛋白酶3在SS患者的唾液功能障礙中扮演重要角色[24]。

KEGG通路富集分析結(jié)果顯示，雷公藤治療SS的信號通路主要為花生四烯酸代謝、血清素能受體、TNF信號通路、多種細胞凋亡、VEGF信號通路、IL-17信號通路、核因子-κB信號通路等。血清素又名5-羥色胺，是一種由色氨酸衍生而來的自體活性物質(zhì)，作為一種神經(jīng)遞質(zhì)，通過結(jié)合相應受體參與痛覺、體溫等生理功能的調(diào)節(jié)。同時還可作為免疫調(diào)節(jié)因子在機體神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡中發(fā)揮作用。目前發(fā)現(xiàn)，有多種血清素受體表達于免疫細胞，血清素通過結(jié)合不同的受體，可發(fā)揮相應的免疫調(diào)節(jié)功能[25]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在SS患者外周血及唾液腺組織中表達顯著增加[26]，提示腫瘤壞死因子參與了SS的疾病活動。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）信號通路是作用最強的正性調(diào)控通路之一[27]，在誘導血管新生，促使血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移，提高血管的通透性等方面，發(fā)揮了不可替代的作用。研究發(fā)現(xiàn)，SS發(fā)病之初可能涉及血管內(nèi)皮細胞、腺上皮細胞或其潛在的基質(zhì)細胞和樹突狀細胞功能的改變[1]。并且在干燥綜合征動物模型中證實，即使在沒有功能性淋巴細胞的情況下，上皮細胞和局部內(nèi)皮小靜脈也會發(fā)生變化。白細胞介素-17（IL-17）是自身免疫性疾病的一個有效治療靶點[28]，研究發(fā)現(xiàn)，在SS早期通過抑制IL-17能夠減少淋巴細胞對唾液腺的浸潤，維持正常的唾液量，阻止SS的進一步發(fā)展[29]。許多炎性反應遞質(zhì)均受核因子-κB調(diào)控，在炎性反應中，游離的核因子-κB被釋放并轉(zhuǎn)移到細胞核以轉(zhuǎn)錄炎性反應遞質(zhì)，核因子-κB的激活伴隨著炎性反應遞質(zhì)的上調(diào)和抗氧化系統(tǒng)的下調(diào)[30]。此外，有報道稱，SS也與感染有關(guān)[31]。

綜上所述，本研究應用網(wǎng)絡藥理學方法，對雷公藤治療干燥綜合征的活性成分、作用靶點和信號通路進行了探索性研究，發(fā)現(xiàn)雷公藤中的多種活性成分可參與調(diào)節(jié)花生四烯酸、類二十烷酸、脂肪酸、前列腺素等生物的合成與代謝過程、氧化應激以及多種酶的活性，并通過血清素能突觸、TNF信號通路、多種細胞凋亡通路、VEGF信號通路、IL-17信號通路、核因子-κB信號通路等信號通路進行綜合靶向調(diào)控，從而發(fā)揮治療作用。本研究初步探討了雷公藤治療干燥綜合征的作用機制，也為雷公藤的深入研究提供了新的思路和參考。

參考文獻

[1]Fox RI.Sjgren′s syndrome[J].Lancet，2005，366（9482）：321-331.

[2]Witte T.Sjgren′s syndrome[J].Z Rheumatol，2019，78（6）：511-517.

[3]Peck AB，Nguyen CQ.What can Sjgren′s syndrome-like disease in mice contribute to human Sjgren′s syndrome？[J].Clin Immunol，2017，182：14-23.

[4]Thorne I，Sutcliffe N.Sjogren′s syndrome[J].Br J Hosp Med（Lond），2017，78（8）：438-442.

[5]吳侗，張晶，蘇江，等.雷公藤多苷聯(lián)合白芍總苷與單用雷公藤多苷在干燥綜合癥治療療效[J].中藥藥理與臨床，2017，33（1）：178-180.

[6]蔣毅，張唸.雷公藤多甙聯(lián)合白芍總甙對干燥綜合征患者血清Th17/Treg平衡及免疫功能的影響[J].貴州醫(yī)藥，2018，42（12）：1446-1447.

[7]李金全，運乃茹，溫學紅.雷公藤多苷在常見自身免疫性疾病中的臨床應用及安全性[J].醫(yī)學綜述，2016，22（19）：3850-3853，3854.

[8]Ru J，Li P，Wang J，et al.TCMSP：a database of systems pharmacology for drug discovery from herbal medicines[J].J Cheminform，2014，6：13.

[9]房偉.葛根藥理作用研究進展[J].中國藥物經(jīng)濟學，2017，12（11）：159-160.

[10]李剛，許波，梁學振，等.基于網(wǎng)絡藥理學研究淫羊藿抗骨質(zhì)疏松的分子機制[J].中國藥理學通報，2018，34（2）：267-273.

[11]Tang Y，Li M，Wang J，et al.CytoNCA：a cytoscape plugin for centrality analysis and evaluation of protein interaction networks[J].Biosystems，2015，127：67-72.

[12]Ambrus JL Jr.Sjogren′s syndrome：New paradigms and areas for future research[J].Clin Immunol，2017，182：1-3.

[13]農(nóng)程，王欣之，江振洲，等.雷公藤對免疫系統(tǒng)作用及機制研究進展[J].中國中藥雜志，2019，44（16）：3374-3383.

[14]周俊，徐艷，臧銀善.雷公藤的抗炎抗免疫作用研究進展[J].醫(yī)學綜述，2019，25（24）：4855-4859.

[15]劉莉，閆君，舒積成，等.雷公藤生物堿類成分及其藥理活性研究進展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2019，31（12）：2170-2181.

[16]Luo TT，Lu Y，Yan SK，et al.net work Pharmacology in Research of Chinese Medicine Formula：Methodology，Application and Prospective[J].Chin J Integr Med，2020，26（1）：72-80.

[17]康桂蘭，景增秀.山奈酚通過調(diào)控AMPK/Nrf2/HO-1信號通路緩解ox-LDL介導的內(nèi)皮細胞損傷[J].中國免疫學雜志，2018，34（4）：525-530.

[18]肖志彬，賈韓學，劉小雷.β-谷甾醇藥理活性的研究現(xiàn)狀[J].世界最新醫(yī)學信息文摘（連續(xù)型電子期刊），2015，15（8）：66-67，68.

[19]陳穎婷，何柯新，王云秀，等.雷公藤內(nèi)酯醇對類風濕關(guān)節(jié)炎大鼠TLR4/NF-κB信號通路的調(diào)控作用研究[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2019，40（17）：2053-2057.

[20]李楊，周嵐，汪典，等.不同劑量活血、破血中藥對動脈粥樣硬化小鼠主動脈PTGS2、PADI4、ITGAM基因表達的影響[J].疑難病雜志，2016，15（11）：1182-1186.

[21]宋一萌，李明真，馬潞林.花生四烯酸代謝產(chǎn)物與腫瘤發(fā)生和發(fā)展的研究進展[J].臨床泌尿外科雜志，2017，32（3）：236-240.

[22]Meng H，Liu Y，Lai L.Diverse ways of perturbing the human arachidonic acid metabolic network to control inflammation[J].Acc Chem Res，2015，48（8）：2242-2250.

[23]Regmi SC，Samsom ML，Heynen ML，et al.Degradation of proteoglycan 4/lubricin by cathepsin S：Potential mechanism for diminished ocular surface lubrication in Sjgren′s syndrome[J].Exp Eye Res，2017，161：1-9.

[24]Jimenez F，Aiba-Masago S，Al Hashimi I，et al.Activated caspase 3 and cleaved poly（ADP-ribose）polymerase in salivary epithelium suggest a pathogenetic mechanism for Sjgren′s syndrome[J].Rheumatology（Oxford），2002，41（3）：338-342.

[25]魏偉，隋秉東，劉潔瑋，等.5-羥色胺與免疫系統(tǒng)的關(guān)系及其在免疫相關(guān)疾病中的作用[J].細胞與分子免疫學雜志，2012，28（9）：999-1001.

[26]陳家麗，金月波，李靜，等.原發(fā)性干燥綜合征患者臨床和血清學性別差異分析及其發(fā)病機制研究[J].中華風濕病學雜志，2018，22（8）：526-531.

[27]陳東，馮林森，王羽豐.VEGF/VEGFR2信號通路調(diào)控機制的研究進展[J].癌癥進展，2019，17（7）：748-751，775.

[28]Hu Y，Shen F，Crellin NK，et al.The IL-17 pathway as a major therapeutic target in autoimmune diseases[J].Ann N Y Acad Sci，2011，1217：60-76.

[29]Nguyen CQ，Yin H，Lee BH，et al.IL17：potential therapeutic target in Sjgren′s syndrome using adenovirus-mediated gene transfer[J].Lab Invest，2011，91（1）：54-62.

[30]Kim HJ，Kang CH，Jayasooriya R，et al.Hydrangenol inhibits lipopolysaccharide-induced nitric oxide production in BV2 microglial cells by suppressing the NF-κB pathway and activating the Nrf2-mediated HO-1 pathway[J].Int Immunopharmacol，2016，35：61-69.

[31]Nakamura H，Kawakami A，Tominaga M，et al.Relationship between Sjgren′s syndrome and human T-lymphotropic virus type I infection：follow-up study of 83 patients[J].J Lab Clin Med，2000，135（2）：139-144.

（2020-03-11收稿 責任編輯：楊覺雄）

基金項目：陜西省科學技術(shù)廳項目（2017SF-298）;西安市科技計劃項目[2019114613YX001SF044（9）]

作者簡介：楊少寧（1992.12—），男，碩士研究生在讀，住院醫(yī)師，研究方向：腎臟病基礎與臨床研究，E-mail：218020621271@email.sntcm.edu.cn通信作者：于小勇（1969.10—），男，碩士，主任醫(yī)師，碩士研究生導師，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合防治慢性腎臟病和血液透析，E-mail：gub70725@126.com