黑茶品質(zhì)形成與功效研究進(jìn)展

戴宇樵 潘科 李琴 冉乾松 楊婷 劉亞兵 劉忠英 方仕茂 谷文軍

摘要：黑茶為六大茶類(lèi)之一，是一種具有特殊風(fēng)味特征的發(fā)酵茶。目前已經(jīng)有大量研究關(guān)注于黑茶品質(zhì)的形成機(jī)理，主要圍繞黑茶的色澤、香氣、滋味3個(gè)方面，也有大量研究關(guān)注于黑茶的保健功效，主要圍繞黑茶的減肥降脂、改善腸道免疫、抗氧化、抗癌等作用機(jī)制，這些成果為黑茶加工與改善預(yù)防疾病方面提供理論指導(dǎo)，為黑茶產(chǎn)業(yè)助力。

關(guān)鍵詞：黑茶;工藝;微生物;香氣;降脂

中圖分類(lèi)號(hào)：TS272 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號(hào)：1002-1302（2021）10-0024-06

黑茶是一種在加工過(guò)程中有微生物參與品質(zhì)形成的發(fā)酵茶[1]。隨著人們生活水平提高，“富貴病”的發(fā)病率也越來(lái)越高，因此黑茶獨(dú)特的風(fēng)味屬性與其明顯的減脂降壓功效吸引了大量消費(fèi)者的關(guān)注[2-3]。關(guān)于黑茶風(fēng)味形成機(jī)理與功效影響機(jī)制已經(jīng)成為眾多學(xué)者關(guān)注的重點(diǎn)，新型的科研技術(shù)手段與更加深入全面的研究方向使黑茶產(chǎn)業(yè)得到了較大的推進(jìn)[4]。

1 黑茶品質(zhì)特征

黑茶是一種后發(fā)酵茶，原料大都來(lái)源于外形粗老的鮮葉制成的毛茶，經(jīng)過(guò)黑茶特有的渥堆發(fā)酵工藝，使其由毛茶的色澤轉(zhuǎn)變?yōu)榘岛稚蛏詈稚哂歇?dú)特的風(fēng)味[5]。

1.1 黑茶加工工藝

目前，云南、湖南、四川、廣西、湖北等地都是黑茶的主產(chǎn)區(qū)，不同地區(qū)的加工工藝也有所區(qū)別[6]，如湖北和云南黑茶均是將鮮葉制成曬青毛茶，作為后發(fā)酵原料，經(jīng)過(guò)渥堆、精制、壓制、干燥制成黑茶[7-8]，而湖南、四川、廣西地區(qū)的黑茶均是將鮮葉經(jīng)過(guò)殺青、初揉后進(jìn)行渥堆或堆悶，再以干燥制得黑毛茶為原料，進(jìn)行“發(fā)花”或者渥堆、壓制、干燥制成黑茶[9-11]。如表1所示，不同的地區(qū)因氣候地理?xiàng)l件的不同，原料品質(zhì)與工藝具有差異明顯，故而形成了各個(gè)產(chǎn)區(qū)黑茶的獨(dú)特品質(zhì)。

1.2 黑茶微生物分類(lèi)

微生物與黑茶品質(zhì)的形成密切相關(guān)，黑茶的渥堆過(guò)程涉及一系列的微生物作用，在胞外酶、微生物熱與微生物自身代謝綜合作用下形成了黑茶的特征性風(fēng)味[14]。研究發(fā)現(xiàn)，黑曲霉、青霉屬、酵母屬、根霉屬均是黑茶渥堆中的優(yōu)勢(shì)菌群，乳酸桿菌也在渥堆過(guò)程中對(duì)黑茶品質(zhì)形成作用明顯，且冠突散囊菌更是茯磚茶“發(fā)花”工藝的關(guān)鍵微生物[15-16]。這些菌群主要通過(guò)產(chǎn)生纖維素酶、果膠酶、糖苷酶、葡萄糖淀粉酶、乳酸酶等多種水解酶影響黑茶風(fēng)味;在這些酶作用下，茶葉中的多糖、蛋白質(zhì)、果膠、脂肪、纖維和部分不可溶性化合物等有機(jī)物發(fā)生氧化、聚合、水解、轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生多種有機(jī)酸，且不同菌種水解酶對(duì)茶葉中的成分具有選擇性，正是不同酶的協(xié)同性塑造了黑茶獨(dú)特的風(fēng)味[17-19]。

在普洱熟茶渥堆過(guò)程中，大量酵母的生長(zhǎng)對(duì)普洱熟茶甜醇滋味的形成有顯著作用，根霉屬能分泌酒化酶與有機(jī)酸，產(chǎn)生具有芳香的脂類(lèi)物質(zhì)[20]。在茯磚茶加工中，冠突散囊菌生長(zhǎng)過(guò)程產(chǎn)生的有機(jī)酸降低了茶氨酸和糖含量，從而使兒茶素氧化聚合形成大量茶褐素，產(chǎn)生濃郁的菌花香，起到改善茯磚茶風(fēng)味的作用[21-22]。在六堡茶的加工中，曲霉菌和青霉菌促進(jìn)其變色，在后發(fā)酵階段，也有少量產(chǎn)生“金花”的菌屬出現(xiàn)，在陳化階段，較多“金花”出現(xiàn)，促進(jìn)多酚類(lèi)物質(zhì)轉(zhuǎn)化，消除青氣，使滋味醇和[18]。目前在實(shí)際生產(chǎn)中，更有通過(guò)人為控制菌群生長(zhǎng)來(lái)調(diào)控最終的黑茶品質(zhì)，由此可見(jiàn)，微生物作用是黑茶品質(zhì)形成的決定性因素[23]。

1.3 黑茶色素物質(zhì)研究

黑茶渥堆的過(guò)程中，在濕熱作用下，由于黑茶中大量的兒茶素轉(zhuǎn)化為茶褐素，大量的葉綠素降解為脫鎂葉綠素a、脫鎂葉綠素b、脫鎂葉綠素酸酯a與脫鎂葉綠素酸酯b，類(lèi)胡蘿卜素中葉黃素和 β-胡蘿卜素含量也呈明顯增加趨勢(shì)，這些色素的形成與積累形成了黑茶區(qū)別于其他茶類(lèi)的首要特征——干茶色澤褐黑，湯色紅褐[24-25]。同時(shí)，通過(guò)高效薄層色譜分析發(fā)現(xiàn)，在不同的黑茶中，脂溶性色素的組成及含量差別較大[26]，且色澤也是判斷黑茶加工程度的重要依據(jù)，如在普洱熟茶渥堆過(guò)程中多酚類(lèi)物質(zhì)與脂溶性色素的變化對(duì)最后湯色的形成起到?jīng)Q定性影響[27-28]。黑茶色素的形成與微生物的作用也分不開(kāi)，隨著茯磚茶加工中色素變化，脫鎂葉綠素a、脫鎂葉綠素b、脫鎂葉綠素酸酯a、脫鎂葉綠素酸酯b及其部分類(lèi)胡蘿卜素的含量在“發(fā)花”期間均有所增加。優(yōu)勢(shì)菌種冠突散囊菌的閉囊殼呈現(xiàn)鮮艷的金黃色，這正與葉黃素和β-胡蘿卜素的色澤相近，前人通過(guò)對(duì)1個(gè)純“金花”樣品進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其中葉黃素與β-胡蘿卜素含量較高[29-31]。同時(shí)也有研究表明，在普洱熟茶、六堡茶等黑茶渥堆過(guò)程中添加果膠酶、纖維素酶、蛋白酶等外源酶，會(huì)對(duì)其色素的轉(zhuǎn)化產(chǎn)生顯著影響[32-33]。

1.4 黑茶香氣成分研究

黑茶的獨(dú)特香氣源于其加工環(huán)節(jié)中多方面的影響，在渥堆、干燥以及后期儲(chǔ)存過(guò)程中，其香氣成分都在發(fā)生變化[34]。加工中醇類(lèi)、醛類(lèi)、萜烯醇類(lèi)和酮類(lèi)等化合物是黑茶香氣成分的主要組成物質(zhì)[35]。不同類(lèi)型的黑茶具有各自獨(dú)特的香氣，在普洱熟茶的香氣研究中，前人采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）技術(shù)與頂空固相微萃?。℉S-SPME）技術(shù)結(jié)合，結(jié)果顯示，3，4，5-三甲氧基-苯甲醛、2-乙基-丁酸-2-丙烯基酯、亞甲基-丁酸-二甲酯、3，4-二甲氧基甲苯和5-甲基-1，2，3-三甲氧基-苯、十六烷酸、橙花叔醇、橙花醇等物質(zhì)成分對(duì)普洱熟茶香氣品質(zhì)得分的貢獻(xiàn)率較高，表明它們是影響普洱熟茶香氣品質(zhì)的關(guān)鍵香氣成分[36]，且不同的溫度與萃取頭對(duì)其揮發(fā)性成分的檢測(cè)也有影響，通過(guò)優(yōu)化頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用的萃取條件使普洱熟茶香氣的檢測(cè)方法更加精準(zhǔn)[37]。在茯磚茶的香氣研究中，采用固相微萃取優(yōu)化湖南茯磚茶中的香氣成分，結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用儀，分離鑒定出主要由碳?xì)漕?lèi)、酯類(lèi)、醇類(lèi)、含氮類(lèi)、雜氧類(lèi)、酮類(lèi)、醛類(lèi)、酸類(lèi)8類(lèi)化合物組成的93種香氣成分，其中含量較高的組分有3，5-辛二烯-2-酮（E，E）、2-戊基呋喃、（E，E）-2，4-庚二烯醛、6-甲基-3，5-庚二烯-2-酮等[38]。此外，還比較分析了同時(shí)采用蒸餾萃取法（simultaneous distillation extraction，SDE）和頂空固相微萃取法提取茯磚茶揮發(fā)性成分的效果，優(yōu)化茯磚茶香氣檢測(cè)技術(shù)手段[39]。在六堡茶的香氣研究中，采用全二維氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，共鑒定出以烯酮類(lèi)、芳香烴化合物、氮雜環(huán)化合物、烯醇類(lèi)、烯類(lèi)、胺類(lèi)、酸酐類(lèi)、烷烴類(lèi)、醛類(lèi)、烯醛類(lèi)、醚類(lèi)、醇類(lèi)、酯類(lèi)、烯酯類(lèi)、內(nèi)酯類(lèi)、酚類(lèi)、酮類(lèi)、含硫化合物、有機(jī)酸類(lèi)、氧雜環(huán)化合物、炔類(lèi)共21類(lèi)化合物307種香氣成分，表明烯酮類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、醚類(lèi)、醛類(lèi)、芳香烴類(lèi)等香氣成分可能對(duì)六堡茶的香氣品質(zhì)具有重要影響[40-42]。對(duì)青磚茶的香氣成分同樣采用氣質(zhì)聯(lián)用方法進(jìn)檢測(cè)[43]。越來(lái)越多的研究將普洱茶“越陳越香”、茯磚茶“菊花香”、六堡茶“檳榔香”的特征更加清晰化[44-46]。

1.5 黑茶滋味物質(zhì)研究

茶葉中的呈味物質(zhì)種類(lèi)較多，其中澀味主要來(lái)源于多酚類(lèi)物質(zhì)，以?xún)翰杷睾忘S酮為主體，苦味主要是來(lái)源于咖啡堿、花青素等物質(zhì)，鮮爽味主要來(lái)自于游離氨基酸[47-48]。與其他茶類(lèi)不同的是，在黑茶渥堆過(guò)程中，呈味物質(zhì)在微生物分泌胞外酶的酶促作用以及濕熱作用下發(fā)生變化，使酯型兒茶素總含量減少，有機(jī)酸含量增加，蛋白質(zhì)分解形成多種氨基酸，大分子糖類(lèi)形成可溶性的糖，這些協(xié)同作用下形成了黑茶醇和的口感[49-50]。利用電子舌技術(shù)與感官審評(píng)相結(jié)合的方法發(fā)現(xiàn)，普洱熟茶中的總游離氨基酸、總兒茶素、DL-兒茶素、沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯、總有機(jī)酸、檸檬酸和酒石酸等物質(zhì)相對(duì)含量對(duì)普洱茶滋味影響較大。同時(shí)發(fā)現(xiàn)茶多糖與茶褐素對(duì)普洱熟茶的滋味也有顯著影響，在普洱熟茶渥堆過(guò)程中，由于茶黃素含量先增加后減少，茶紅素含量逐漸減少，茶褐素含量逐漸增高，使茶滋味發(fā)生很大改變[51-52]。渥堆過(guò)程中促進(jìn)黃酮醇苷的降解，使黑茶滋味趨于醇和，咖啡堿含量上升，使黑茶苦味也有所增加[53]。利用高效液相色譜與電子舌技術(shù)結(jié)合感官審評(píng)對(duì)不同儲(chǔ)藏時(shí)間的普洱熟茶、茯磚茶進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其茶湯的滋味隨著時(shí)間的延長(zhǎng)愈發(fā)醇和，該結(jié)論為提升黑茶的收藏價(jià)值提供了理論依據(jù)[50，54-55]。

2 黑茶功效

黑茶之所以受到消費(fèi)者的廣泛喜愛(ài)，除了其特殊的風(fēng)味特征外還具有保健功效，目前關(guān)于黑茶功效的研究主要關(guān)注點(diǎn)有以下方面。

2.1 降脂減肥

肥胖已經(jīng)是全人類(lèi)所面臨的難題，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的健康，所帶來(lái)的危害除了血脂血糖的升高，還會(huì)使人體的器官產(chǎn)生病變[56]，因此，如何降低體內(nèi)脂質(zhì)含量，已經(jīng)成為人們?nèi)找骊P(guān)注的健康問(wèn)題。

大量動(dòng)物試驗(yàn)表明，黑茶具有顯著的降血脂、減肥功效[57-61]。熊昌云等通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，普洱熟茶對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠具有顯著的降脂減肥效果，且效果優(yōu)于綠茶，并且還發(fā)現(xiàn)普洱熟茶的降脂減肥效果與儲(chǔ)存年份呈正相關(guān)[62-63]。在茯磚茶的降脂減肥研究中，傅冬和等在早期就利用了高通量藥物篩選技術(shù)，以與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、糖代謝有關(guān)的過(guò)氧化物酶增殖體活化受體（PPARα、PPARγ、PPARδ）、肝X受體（LXR）、法尼酯衍生物X受體（FXR）及前脂肪細(xì)胞（3T3-L1）建立模型，研究茯磚茶的降脂減肥作用及其有效部位[64-68]。通過(guò)長(zhǎng)年研究發(fā)現(xiàn)[69]，茯磚茶中分離得到3，4-二羥基苯甲酸（DBA）、沒(méi)食子酸（GA）、沒(méi)食子兒茶素（GC）、3-甲氧基-4，5-二羥基苯甲酸（MDBA）、表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（EGCG）及表兒茶素沒(méi)食子酸酯（ECG）6個(gè)單體化合物，均表現(xiàn)出對(duì)上述模型的刺激作用，表明此6種化合物均為與茯磚茶降脂減肥功效有關(guān)的活性物質(zhì)。彭靜靜通過(guò)建立小鼠的急性高脂血模型，經(jīng)六堡茶灌胃處理，經(jīng)層析色譜（分離純化）后和核磁技術(shù)鑒定發(fā)現(xiàn)六堡茶中槲皮素、咖啡堿、沒(méi)食子酸等物質(zhì)可能具有重要的降血脂功能性[70]。劉仲華等以多種黑茶為原料，建立營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型和高脂血癥大鼠模型、3T3-L1 前脂肪細(xì)胞模型和 Hep G2 細(xì)胞模型，從生化代謝、細(xì)胞學(xué)、基因表達(dá)和蛋白質(zhì)組學(xué)水平上證實(shí)黑茶具有顯著的減肥和降血脂功效，通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因，經(jīng)實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）分析發(fā)現(xiàn)，黑茶可促使與脂肪生成相關(guān)的脂肪酸合成酶（FAS）和REBP-1c基因的表達(dá)顯著下調(diào)，抑制肝臟中脂肪酸的合成;相反，促使與脂肪分解相關(guān)的PPAR-α和CPT-1a基因及調(diào)降血液中膽固醇含量的LDLR基因的表達(dá)顯著上調(diào)，促進(jìn)脂肪酸 β-氧化，減輕體質(zhì)量，以此來(lái)深入探究黑茶的降脂減肥作用機(jī)理[56]。

2.2 抗癌

茶葉的抗癌作用一直是茶葉功效中的研究熱點(diǎn)，黑茶中所具有的茶多酚、茶多糖、茶紅素、茶黃素等單體物質(zhì)均能夠抑制癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)癌細(xì)胞的凋亡[71]。在早期研究中，宋魯彬等以體外培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞株SGC-7901和結(jié)腸癌細(xì)胞系 HCT-8 為試驗(yàn)對(duì)象，采用高通量篩選技術(shù)證實(shí)黑茶提取物能抑制消化道腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[72]。霍雪蓮?fù)ㄟ^(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR與Wsetern blot等分子生物學(xué)試驗(yàn)技術(shù)驗(yàn)證了安化黑茶提取物抑制直腸癌細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡機(jī)理，且濃度與抑制作用呈協(xié)同作用，同時(shí)確定了安化黑茶提取物對(duì)與癌細(xì)胞的增殖和凋亡密切相關(guān)的癌細(xì)胞中異?；罨慕z裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路具有影響，可促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡[73]。

2.3 調(diào)節(jié)腸道免疫功能

腸道功能關(guān)系著人體代謝健康，早期研究已表明，黑茶可以調(diào)節(jié)腸道菌群，改善腸道健康狀態(tài)。大腸桿菌0157：H7是一種可嚴(yán)重致病的菌，劉平以感染該菌小鼠為模型進(jìn)行茯磚茶灌胃10 d的試驗(yàn)，檢測(cè)小鼠的血液學(xué)、組織病理學(xué)、免疫學(xué)等指標(biāo)后，發(fā)現(xiàn)其胃腸道等器官受損的黏膜得到一定的修復(fù)，炎癥減輕，結(jié)腸內(nèi)的乳酸桿菌、類(lèi)桿菌種群多樣性增加，證實(shí)了茯磚茶能夠?qū)勾竽c桿菌感染引發(fā)的炎癥，同時(shí)提高機(jī)體免疫功能，調(diào)整腸道菌群[74]。除致病菌外，黑茶也能夠通調(diào)節(jié)腸道菌群數(shù)量改善抗生素引起的腸道菌群紊亂的現(xiàn)象[75]。

Mo等通過(guò)高通量篩選技術(shù)與超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC-MS/MS）技術(shù)鑒定廣西瑤族黑茶中對(duì)腹瀉具有預(yù)防作用的12種代謝物，為探究廣西瑤族黑茶防腹瀉機(jī)理奠定了理論基礎(chǔ)[76]。唐飛也通過(guò)小鼠動(dòng)物試驗(yàn)證實(shí)了青磚茶對(duì)小鼠胃腸道菌群及功能有積極影響[77]。李丹發(fā)現(xiàn)，普洱熟茶和茯磚茶在一定的劑量下均能夠幫助腸道菌群失調(diào)的小鼠恢復(fù)腸道內(nèi)乳酸桿菌和雙歧桿菌的菌群數(shù)量，證實(shí)黑茶能使腸道內(nèi)的腸球菌等益生乳酸菌增多，并使大腸桿菌減少，從而優(yōu)化調(diào)節(jié)腸道內(nèi)的菌群結(jié)構(gòu)[78]。

陳欣利用普洱茶茶褐素進(jìn)行離體腸道菌群代謝試驗(yàn)，運(yùn)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)分析茶褐素在大鼠腸道菌群作用下的代謝產(chǎn)物，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物中有對(duì)羥基苯丙酸、可可堿、沒(méi)食子酸、3-O-甲基沒(méi)食子酸或 4-O-甲基沒(méi)食子酸、兒茶素等，從而推測(cè)黑茶能夠調(diào)節(jié)腸道菌群的原因可能與以上化合物的功效有關(guān)[79]。

2.4 抗氧化

醫(yī)學(xué)研究表明，大部分的臨床病變和人體衰老均與氧自由基對(duì)細(xì)胞的影響有關(guān)[80-83]，抗氧化已成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)關(guān)注熱點(diǎn)，黑茶抗氧化機(jī)制近年來(lái)也引起學(xué)者們的深入關(guān)注。

Lv等采用清除DPPH自由基（DPPH·）、清除ABTS自由基（ABTS+·）、鐵還原抗氧化能力（FRAP）法、細(xì)胞抗氧化活性（CAA）法（HepG2細(xì)胞）對(duì)普洱茶、茯磚茶、六堡茶等44個(gè)黑茶樣品進(jìn)行抗氧化能力評(píng)價(jià)，對(duì)這些黑茶的抗氧化活性進(jìn)行分析，證實(shí)不同品種的黑茶具有不同的抗氧化活性，且差異顯著[84]。

采用同樣的測(cè)定指標(biāo)，F(xiàn)an等從發(fā)酵的紫娟普洱茶中提取了乙醇溶性色素，發(fā)現(xiàn)該提取物使細(xì)胞超氧化物歧化酶（SOD）活性增強(qiáng)397.3%，證實(shí)紫娟普洱茶具有良好的抗氧化活性[85];楊新河等初步探明其體外抗氧化作用及活性部位，證實(shí)青磚茶具有體外抗氧化作用，并發(fā)現(xiàn)其提取物不同極性部位的抗氧化活性以乙酸乙酯層和正丁醇層較強(qiáng)[86-87]。也有研究表明，廣西六堡茶、四川康磚茶、雅安藏茶等其他幾類(lèi)黑茶同樣具有較好的抗氧化能力[83，88-89]。

隨著科技的進(jìn)步，檢測(cè)抗氧化性方法更加精細(xì)化，周卿意駿等用基于高效液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)（HPLC-Q-TOF-MS/MS）的安化黑茶抗氧化活性成分快速篩選和鑒別的方法，依據(jù)質(zhì)譜裂解規(guī)律及文獻(xiàn)檢索，從安化黑茶乙酸乙酯與正丁醇提取部位中分別鑒定出 32、28 個(gè)抗氧化活性成分，從熟茶中分別鑒定出 31、26 個(gè)抗氧化活性成分[90];王貞睿等建立模型，利用黑茶可還原三價(jià)鐵離子性質(zhì)，采用三價(jià)鐵離子介導(dǎo)的“關(guān)-開(kāi)”法，建立新的熒光分析法[91-92]。

3 展望

目前為止，國(guó)內(nèi)外關(guān)于黑茶研究主要分為2個(gè)方面，一是黑茶品質(zhì)形成的機(jī)制研究，主要關(guān)注在在黑茶加工過(guò)程中化學(xué)物質(zhì)的變化規(guī)律，探究微生物作用在黑茶渥堆過(guò)程對(duì)其品質(zhì)形成產(chǎn)生的影響，并關(guān)注微生物作用對(duì)單體物質(zhì)的影響，以此進(jìn)行工藝優(yōu)化，產(chǎn)品開(kāi)發(fā);二是黑茶保健功效的研究，主要通過(guò)建立活體模型、活體受體模型，運(yùn)用組學(xué)技術(shù)探究黑茶微生物、基因、代謝物及酶對(duì)于模型各項(xiàng)生理指標(biāo)的影響。從近年來(lái)國(guó)內(nèi)外研究趨勢(shì)可看出，目前相關(guān)領(lǐng)域中尚待探究的問(wèn)題及未來(lái)可深入的研究方向有：（1）不同黑茶加工過(guò)程中，其優(yōu)勢(shì)微生物菌群對(duì)于黑茶不同香氣、滋味物質(zhì)的變化影響，更精準(zhǔn)地探究黑茶品質(zhì)形成機(jī)制。（2）將多組學(xué)技術(shù)以其多方面受體模型建立等應(yīng)用到茶葉功能成分的研究中，深入關(guān)注黑茶中物質(zhì)單體成分的作用機(jī)制，加強(qiáng)對(duì)黑茶健康功能的研究。（3）整合目前研究已掌握的渥堆調(diào)控技術(shù)手段與參數(shù)，以促進(jìn)黑茶風(fēng)味形成與提升黑茶保健功能為指標(biāo)，研發(fā)出不同風(fēng)味和保健功效的黑茶新產(chǎn)品，促進(jìn)黑茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]夏 濤. 制茶學(xué)[M]. 3 版. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2016：227.

[2]邵靜娜，葛國(guó)平，何衛(wèi)中，等. 渥堆過(guò)程中黑茶生化成分變化及其影響因子研究進(jìn)展[J]. 茶葉，2015，41（3）：137-141.

[3]吳朝比，黃建安，劉仲華，等. 黑茶調(diào)節(jié)高脂血癥作用及機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)，2011，32（19）：307-311.

[4]諶 瀅，李 適，劉仲華，等. 黑茶陳化機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016（12）：118-122.

[5]何華鋒，朱宏凱，董春旺，等. 黑茶香氣化學(xué)研究進(jìn)展[J]. 茶葉科學(xué)，2015，35（2）：121-129.

[6]胡 燕. 不同產(chǎn)地黑茶的化學(xué)指紋圖譜研究[D]. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2014：108.

[7]何建剛，郭曉園，陳學(xué)禮，等. 湖北青磚茶產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及發(fā)展對(duì)策[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2019（10）：241-243.

[8]蔣金星，何華鋒，桂安輝，等. 中國(guó)黑茶的起源與加工工藝[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2017，33（25）：70-75.

[9]王婧昀. 湖南安化黑茶產(chǎn)業(yè)化發(fā)展問(wèn)題及對(duì)策研究[D]. 長(zhǎng)沙：中南林業(yè)科技大學(xué)，2018：51.

[10]鐘曉雪. 四川黑磚茶和茯磚茶的加工技術(shù)及品質(zhì)評(píng)價(jià)[D]. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017：98.

[11]龍志榮，邱瑞瑾，馬士成，等. 六堡茶研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)茶葉加工，2017（1）：40-45.

[12]趙 熙，黃 浩，鐘 妮，等. 湖南黑毛茶加工工藝及清潔化生產(chǎn)趨勢(shì)[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017（11）：65-68.

[13]龔意成，李昊彬. 不同產(chǎn)地安化黑茶品質(zhì)差異研究[J]. 現(xiàn)代食品，2019（19）：158-162.

[14]徐正剛，吳 良，劉石泉，等. 黑茶發(fā)酵過(guò)程中微生物多樣性研究進(jìn)展[J]. 生物學(xué)雜志，2019，36（3）：92-95.

[15]吳志超. 黑茶發(fā)酵優(yōu)勢(shì)菌株的胞外酶檢測(cè)及蛋白組學(xué)初探[D]. 福州：福建師范大學(xué)，2018：84.

[16]熊元元. 四川黑茶渥堆微生物多樣性及空氣微生物研究[D]. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017：69.

[17]李若曦，方洪楓，王國(guó)紅，等. 黑茶曲霉屬和散囊菌屬真菌產(chǎn)胞外水解酶能力的比較分析[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，46（1）：108-114.

[18]劉石泉，雷存喜，趙運(yùn)林. 黑茶中微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性研究方法思考[J]. 茶葉科學(xué)技術(shù)，2010（1）：9-11，38.

[19]許姍姍，寧井銘，姜 浩，等. 青磚茶品質(zhì)與保健功效的研究進(jìn)展[J]. 茶業(yè)通報(bào)，2017，39（3）：108-111.

[20]文杰宇，李宗軍，王遠(yuǎn)亮，等. 黑茶中微生物及其相關(guān)保健功能研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)，2010，31（9）：329-332.

[21]曾 斌，向 陽(yáng)，梁敏敏，等. 安化黑茶加工過(guò)程中的微生物關(guān)系及保健功能研究進(jìn)展[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2015，6（5）：1536-1541.

[22]周楊艷，李雨楓，白 雪，等. 茯磚茶中優(yōu)勢(shì)微生物在不同培養(yǎng)基的差異性比較[J]. 中國(guó)釀造，2014，33（9）：75-80.

[23]諶 瀅. 黑茶陳化過(guò)程中品質(zhì)轉(zhuǎn)化研究[D]. 長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：9-33.

[24]劉仲華，王增盛，黃建安，等. 黑茶初制中主要色素物質(zhì)的變化與色澤品質(zhì)的形成[J]. 茶葉科學(xué)，1991（增刊1）：34-41.

[25]肅力爭(zhēng). 黑茶加工過(guò)程中色澤的形成機(jī)理[J]. 中國(guó)茶葉，1994（1）：2-3.

[26]宋魯彬，黃建安，劉仲華，等. 采用高效薄層色譜測(cè)定黑茶脂溶性色素[J]. 茶葉通訊，2008（2）：7-9，15.

[27]楊 希，陳 杰，張春枝，等. 普洱茶發(fā)酵過(guò)程中茶多酚和茶色素的變化[J]. 農(nóng)業(yè)機(jī)械，2012（12）：118-120.

[28]楊新河，李 勤，黃建安，等. 普洱茶茶色素提取工藝條件的響應(yīng)面分析及其抗氧化性活性研究[J]. 食品科學(xué)，2011，32（6）：1-6.

[29]劉仲華，黃建安，王增盛，等. 茯磚茶加工中色素物質(zhì)的變化與色澤品質(zhì)的形成[J]. 茶葉科學(xué)，1991（S1）：76-80.

[30]盧恒謙. 冠突散囊菌液態(tài)發(fā)酵制備速溶黑茶及其功能研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué). 2016：62.

[31]李擁軍，王美玲，顏鴻飛，等. 基于分類(lèi)回歸樹(shù)CART的湖南黑茶湯色品質(zhì)的表征研究[J]. 食品工業(yè)科技，2015，36（5）：78-81，86.

[32]唐海芹，甘春萍，王 磊，等. 桂綠1號(hào)等茶樹(shù)新品種開(kāi)發(fā)六堡茶主要生化成分及茶色素分析[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，38（24）：71-73.

[33]張 芬，溫立香，黃欣欣，等. 外源酶對(duì)六堡茶渥堆過(guò)程中色素轉(zhuǎn)化規(guī)律影響[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā)，2017，38（20）：70-74.

[34]鄭鵬程，劉盼盼，王勝鵬，等. 5種黑茶香氣成分的比較分析[J]. 食品工業(yè)科技，2018，39（22）：82-86，143.

[35]鄭淑娟，盛 耀，歐小群，等. 渥堆黑茶香氣和主要功效研究進(jìn)展[J]. 食品工業(yè)科技，2016，37（20）：366-370，376.

[36]呂海鵬，張 悅，楊 停，等. 影響普洱熟茶香氣品質(zhì)的關(guān)鍵香氣成分分析[J]. 現(xiàn)代食品科技，2015，31（12）：394-399.

[37]郭衛(wèi)華，劉順航，王秋月，等. 普洱熟茶香氣成分的頂空固相微萃取條件優(yōu)化[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2019，10（13）：4266-4271.

[38]顏鴻飛，彭爭(zhēng)光，李蓉娟，等. GC-TOF MS結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)用于安化黑茶的識(shí)別[J]. 食品與機(jī)械，2017，33（8）：34-37，65.

[39]李永迪，黃 燕，劉杏益，等. 同時(shí)蒸餾萃取法和頂空固相微萃取法提取茯磚茶揮發(fā)性成分的比較分析[J]. 食品工業(yè)科技，2018，39（24）：246-252.

[40]張 芬，溫立香，彭靖茹，等. 六堡茶渥堆過(guò)程中主要生化成分和茶湯色澤變化及其相關(guān)性研究[J]. 食品科技，2019，44（2）：83-87.

[41]穆 兵，朱 蔭，馬士成，等. 六堡茶香氣成分的全二維氣相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜分析[J]. 食品科學(xué)，2017，38（22）：169-177.

[42]黃林杰，羅達(dá)龍，鐘家良. 六堡茶中檳榔香氣主要成分的研究[J]. 農(nóng)業(yè)與技術(shù)，2018，38（8）：12-14.

[43]楊新河，李銀花，劉仲華，等. 青磚茶的香氣分析[J]. 食品科技，2015，40（12）：68-72.

[44]黃懷生，趙 熙，粟本文，等. 不同年份安化茯磚茶香氣物質(zhì)分析[J]. 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015（12）：62-65.

[45]韋柳花，蘇 敏，陳三弟，等. 不同貯存時(shí)間六堡茶品質(zhì)變化研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2015，28（1）：376-380.

[46]謝吉林，張 偎，陳孝權(quán)，等. 普洱熟茶貯藏過(guò)程中香氣變化分析[J]. 食品科學(xué)，2015，36（10）：154-157.

[47]岳翠男. 綠茶滋味物質(zhì)研究及審評(píng)參考物模型的建立[D]. 重慶：西南大學(xué)，2017：1-7.

[48]Zhuang J H，Dai X L，Zhu M Q，et al. Evaluation of astringent taste of green tea through mass spectrometry-based targeted metabolic profiling of polyphenols[J]. Food Chemistry，2020，305：125507.

[49]馮玲然，王 強(qiáng)，羅瑋對(duì). 普洱茶中功能性微生物的篩選及其對(duì)普洱茶感官品質(zhì)的影響[J]. 生物加工過(guò)程，2015，13（2）：93-97，102.

[50]雷 雨. 我國(guó)不同類(lèi)別黑茶品質(zhì)差異的研究[D]. 長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010：85.

[51]唐 平. 普洱茶主要滋味物質(zhì)分析及發(fā)酵過(guò)程變化研究[D].天津：天津科技大學(xué)，2018：83.

[52]呂海鵬，張 悅，楊 停，等. 普洱茶滋味品質(zhì)化學(xué)成分分析[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2016，42（2）：178-183.

[53]閆列娟，肖 斌，索羅丹，等. 陜南黑毛茶加工工藝研究[J]. 北方園藝，2012（10）：172-176.

[54]吳 平，溫志杰，郭維深，等. 六堡茶之檳榔香味溯源和辨析[J]. 茶葉，2010，36（2）：71-76.

[55]李向波，劉順航，賈黎暉，等. 普洱茶感官品質(zhì)分析及風(fēng)味輪構(gòu)建[J]. 中國(guó)茶葉，2017，39（11）：32-34，37.

[56]劉仲華. 黑茶化學(xué)物質(zhì)組學(xué)與降脂減肥作用機(jī)理研究[D].北京：清華大學(xué)，2014：153.

[57]湯 艷. 黑茶對(duì)高脂血癥大鼠動(dòng)脈炎癥因子及核因子-κB的影響[D].長(zhǎng)沙：湖南中醫(yī)藥大學(xué)，2016：47.

[58]謝春生，謝知音. 黑茶類(lèi)降脂成分他汀化合物的新發(fā)現(xiàn)[J]. 食品安全導(dǎo)刊，2016（30）：95-96.

[59]吳朝比，黃建安，劉仲華，等. 黑茶調(diào)節(jié)高脂血癥作用及機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)，2011，32（19）：307-311.

[60]陳智雄，齊桂年，鄒 瑤，等. 黑茶調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 茶葉科學(xué)，2013，33（3）：242-252..

[61]朱強(qiáng)強(qiáng)，張肖娟，黃業(yè)偉. 黑茶藥理活性及其作用機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 海峽科技與產(chǎn)業(yè)，2019（2）：179-180.

[62]熊昌云. 普洱茶降脂減肥功效及作用機(jī)理研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2012：119.

[63]熊昌云，楊 彬，彭遠(yuǎn)菊，等. 普洱茶抑肥降脂作用比較研究[J]. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2018，31（5）：1058-1062.

[64]傅冬和，劉仲華，黃建安，等. 茯磚茶對(duì)FXR作用的高通量篩選研究[C]//任 鵬. 第四屆海峽兩岸茶業(yè)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集. 蒲江：中國(guó)茶葉學(xué)會(huì)，臺(tái)灣茶協(xié)會(huì)，2006：314-319.

[65]傅冬和，劉仲華，黃建安，等. 茯磚茶降脂功能成分研究[J]. 茶葉科學(xué)，2012，32（3）：217-223.

[66]傅冬和，劉仲華，黃建安，等. 高通量篩選研究茯磚茶單體成分的功效[C]//湖南省茶葉學(xué)會(huì)，益陽(yáng)市人民政府.湖南省茶葉學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集. 益陽(yáng)，2007：306-310.

[67]傅冬和，劉仲華，黃建安，等. 高通量篩選研究茯磚茶對(duì)FXR的作用[C]//湖南省茶葉學(xué)會(huì)，益陽(yáng)市人民政府.湖南省茶葉學(xué)會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集. 益陽(yáng)，2007：359-364.

[68]傅冬和，劉仲華，黃建安，等. 高通量篩選研究茯磚茶降脂功效[J]. 茶葉科學(xué)，2006（3）：209-214.

[69]韓卓瀟，黃亞亞，梁 艷，等. 茯磚茶降脂功能及主要降脂活性物質(zhì)研究進(jìn)展[J]. 廣東茶業(yè)，2017（4）：6-11.

[70]彭靜靜. 六堡茶的降血脂功能性研究[D].西寧：廣西大學(xué)，2012：68.

[71]劉賽文，羅 斌，陳佳煜. 黑茶抗癌作用的研究進(jìn)展[J]. 廣東化工，2019. 46（13）：81-82.

[72]宋魯彬，黃建安，劉仲華，等. 中國(guó)黑茶對(duì)消化道腫瘤的作用[J]. 茶葉科學(xué)，2009，29（3）：191-195.

[73]霍雪蓮. 安化黑茶提取物抗癌功能的初步分子機(jī)理研究[D].長(zhǎng)沙：中南林業(yè)科技大學(xué)，2017：70.

[74]劉 平. 茯磚茶水提物對(duì)大腸桿菌O157：H7感染小鼠的治療作用[D].長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)2011：82.

[75]吳香蘭. 黑茶改善小鼠胃腸道功能的實(shí)驗(yàn)研究[D].長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013：63.

[76]Mo L，Zeng Z，Li Y，et al. Animal study of the anti-diarrhea effect and microbial diversity of dark tea produced by the Yao population of Guangxi[J]. Food Funct， 2019，10（4）：1999-2009.

[77]唐 飛. 青磚茶改善小鼠胃腸道功能的研究[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017：24.

[78]李 丹. 黑茶對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)作用研究[D]. 廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016：18.

[79]陳 欣. 普洱茶茶褐素與EGCG在大鼠腸道菌群作用下代謝產(chǎn)物分析[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016：53.

[80]韋獻(xiàn)雅，殷麗琴，鐘 成，等. DPPH法評(píng)價(jià)抗氧化活性研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué)，2014，35（9）：317-322.

[81]向麗敏，劉雅瓊，賴(lài)幸菲，等. 不同茶類(lèi)陳年茶的生化成分分析及其抗氧化活性[J]. 現(xiàn)代食品科技，2018，34（4）：56-62.

[82]王 振. 不同茶類(lèi)抗UVB致表皮細(xì)胞衰老作用研究[D]. 長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018：77.

[83]陳紅艷，李雨浩，岑浩彬. 黑茶茶多酚類(lèi)物質(zhì)的提取及其抗氧化性能研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017. 22（9）：101-107.

[84]Lv H P，Zhang Y，Shi J，et al. Phytochemical profiles and antioxidant activities of Chinese dark teas obtained by different processing technologies[J]. Food Research International，2017，100：486-493.

[85]Fan J P，F(xiàn)an C，Dong W M，et al. Free radical scavenging and anti-oxidative activities of an ethanol-soluble pigment extract prepared from fermented Zijuan Pu-erh tea[J]. Food and Chemical Toxicology，2013，59：527-533.

[86]楊新河，呂幫玉，黃明軍，等. 青磚茶清除DPPH·能力及其多酚和黃酮含量研究[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā)，2016，37（23）：1-5.

[87]楊新河，陳夢(mèng)圓，彭 洋，等. 青磚茶提取物不同極性部位的體外抗氧化作用研究[J]. 食品科技，2016，41（7）：207-211.

[88]林 玲，龔志華，袁冬寅，等. 相同加工原料下的6類(lèi)茶體外抗氧化性能比較[J]. 中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2018，34（2）：107-112.

[89]胡 燕. 雅安藏茶的主要活性成分及保健功能研究進(jìn)展[J]. 食品工業(yè)科技，2019，40（5）：316-321.

[90]周卿意駿，賀 煒，張水寒. 基于DPPH-HPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)的安化黑茶發(fā)酵前后抗氧化活性物質(zhì)基礎(chǔ)研究[J]. 湖南中醫(yī)雜志，2019，35（8）：146-151，170.

[91]王貞睿，齊風(fēng)佩，羅 苗，等. “關(guān)-開(kāi)”型近紅外熒光探針用于鐵離子和黑茶抗氧化活性測(cè)定[J]. 分析化學(xué)，2019，47（1）：112-118.

[92]許 超，汪 楠，夏 婷，等. “關(guān)-開(kāi)”型半花菁類(lèi)熒光探針對(duì)黑茶抗氧化活性的測(cè)定[J]. 湖南城市學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2019，28（3）：69-73.