基于中藥質(zhì)量常數(shù)的桂枝飲片等級評價

孫福仁 劉沙 張睿智 李雅倩 杜嬋博 李哲 張?zhí)乩?/p>

摘要：為了保證桂枝飲片的藥效、促進(jìn)市場高價值流通，依托質(zhì)量常數(shù)法對桂枝飲片的質(zhì)量等級進(jìn)行評價研究。以從藥材市場上收集的15批飲片為研究對象，測定其外在性狀指標(biāo)（飲片質(zhì)量及厚度）和內(nèi)在成分指標(biāo)（桂皮醛含量）;通過計算得到15批飲片的質(zhì)量常數(shù)（A）和百分質(zhì)量常數(shù)（A%），并根據(jù)結(jié)果對桂枝飲片進(jìn)行等級劃分。結(jié)果表明，15批桂枝飲片質(zhì)量常數(shù)為0.85～28.11，百分質(zhì)量常數(shù)為3.02%～100%，它們被劃分為3個等級，即A≥22.49為一等飲片，14.01≤A<22.49為二等飲片，A<14.01為三等飲片;選取桂皮醛作為桂枝等級評價的內(nèi)在成分指標(biāo)合理可行;與傳統(tǒng)等級評價方法相比，基于質(zhì)量常數(shù)建立的等級評價方法可以將性狀鑒別與成分含量相結(jié)合，綜合、客觀地對桂枝飲片進(jìn)行等級劃分，為中藥材的生產(chǎn)、流通和監(jiān)管提供參考。

關(guān)鍵詞：中藥鑒定學(xué);桂枝;質(zhì)量常數(shù);百分質(zhì)量常數(shù);桂皮醛;飲片

中圖分類號：R282.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼：ADOI： 10.7535/hbgykj.2021yx03003

Abstract：In order to ensure the efficacy of Cinnamomi Ramulus decoction pieces and promote high-value circulation in the market， the quality grade evaluation of Cinnamomi Ramulus decoction pieces was researched based on the quality constant method. Taking 15 batches of decoction pieces collected from the medicinal material market as the research objects， the external characteristic indicators （quality and thickness of decoction pieces） and the intrinsic quality indicators （content of cinnamaldehyde） were measured. Then，the quality constant（A） and percentage quality constant （A%）were calculated and the grades of Cinnamomi Ramulus were classified according to the results.The results show that the quality constants of 15 batches of the decoction pieces were 0.85～28.11，and the percentage quality constants were 3.02%～100%.The 15 batches of Cinnamomi Ramulus were divided into three levels： Grade Ⅰ（A≥22.49），Grade Ⅱ （14.01≤A<22.49），Grade Ⅲ（A<14.01）.It is reasonable and feasible to select cinnamaldehyde as the intrinsic quality indicators for the grade evaluation of Cinnamomi Ramulus decoction pieces. Compared with traditional grade evaluation methods， the grade evaluation method based on the quality constant can combine the identification of the traits with the content of the index components to classify Cinnamomi Ramulus decoction pieces comprehensively and objectively， which can provide a reference for the production， circulation and supervision of Chinese medicinal materials.

Keywords：identification of traditional Chinese medicine;Cinnamomi Ramulus; quality constant;percentage quality constant;cinnamaldehyde;decoction piece

桂枝為中藥常用解表藥，《本草綱目》記載：“治一切風(fēng)冷風(fēng)濕，解肌開腠理，抑肝氣，扶脾土” ，現(xiàn)載于《中華人民共和國藥典》（2020年版一部）（以下簡稱《中國藥典》）[1]。它主產(chǎn)于福建、海南、廣東、廣西、云南等熱帶及亞熱帶地區(qū);常生于闊葉林中，但多為栽培品;春、夏二季采收，除去葉，曬干，或切片曬干。臨床上，桂枝用于治療風(fēng)寒表證，脘腹冷痛，關(guān)節(jié)痹痛?，F(xiàn)代藥理作用顯示，桂枝具有解熱、擴(kuò)張皮膚血管、促進(jìn)血液循環(huán)、解表、發(fā)汗、鎮(zhèn)痛、抗真菌、抗腫瘤等作用[2]。

桂枝飲片質(zhì)量評價以指標(biāo)成分含量測定或性狀鑒別為主，有報道采用液相色譜法同時測定桂枝中桂皮醛、桂皮酸、桂皮醇、香豆素、原兒茶酸含量，控制桂枝飲片質(zhì)量[3]。劉彩霞等[4]通過考察桂枝飲片性狀特征，得出性狀與桂皮醛和桂皮酸含量的關(guān)系，從而通過外在性狀判斷飲片質(zhì)量。江大海等[5]以桂枝體外抗氧化活性及桂皮醛、肉桂酸等成分為指標(biāo)，通過Logistic回歸分析建立方程，對不同產(chǎn)地桂枝進(jìn)行等級劃分。上述文獻(xiàn)從含量測定、性狀特征、藥理活性等方面對桂枝飲片進(jìn)行等級劃分，但仍缺少一種以飲片性狀結(jié)合成分含量的綜合評價方法。中藥飲片質(zhì)量常數(shù)法是一種全新的分級方法，通過公式將性狀、含量參數(shù)量化，對飲片進(jìn)行等級劃分，目前，已成功應(yīng)用于首烏藤、甘草等飲片[6-7]，但尚未有以桂枝飲片為研究對象的報道。本文引入中藥質(zhì)量常數(shù)作為評價指標(biāo)，對不同產(chǎn)地桂枝飲片按照外在性狀指標(biāo)、內(nèi)在成分指標(biāo)進(jìn)行測定，通過數(shù)據(jù)分析，對桂枝飲片進(jìn)行分級，為桂枝飲片品質(zhì)分級提供了一種新的評價方式。第3期孫福仁，等：基于中藥質(zhì)量常數(shù)的桂枝飲片等級評價河北工業(yè)科技第38卷

1儀器與材料

1.1儀器

CPA225D電子分析天平，德國賽多利斯集團(tuán)提供;KH-7200E超聲清洗器，昆山禾創(chuàng)超聲儀器有限公司提供;Agilent 1260液相色譜儀，Phenomenex Luna（2） C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5.0 μm），安捷倫科技有限公司提供。

1.2試劑

桂皮醛對照品（批號為110710-201821，純度為99.6%），中國藥品生物制品檢定所提供;甲醇、乙腈均為HPLC級;其余試劑均為AR純。

1.3原材料

15批桂枝飲片分別采購于福建、海南、廣東、廣西、云南等5個不同省份，經(jīng)原河北省藥品檢驗所孫寶惠老師鑒定為樟科植物肉桂（Cinnamomum cassia Presl.）的干燥嫩枝，產(chǎn)地來源見表1。

2評價方法

2.1中藥質(zhì)量常數(shù)及百分質(zhì)量常數(shù)

中藥質(zhì)量常數(shù)的計算公式為A=M/H2。由于桂枝為莖類中藥材，飲片為斜片，斷面為類橢圓形，中藥質(zhì)量常數(shù)公式可按斜柱形體積V=Sh及橢圓形面積S=πab進(jìn)行簡化，A=M/H2=（ρVc）/H2=（ρπabhc）/H2;在密度一定的前提下，飲片質(zhì)量m與長、短半軸、垂直高度之積（abh）呈正比，公式簡化為A=（mc）/H2×100。式中：M為指標(biāo)成分含量;m為飲片的平均質(zhì)量，g;h為斜柱體垂直高;c為指標(biāo)成分的單位含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），%;ρ為飲片密度;a和 b分別為飲片的長、短半軸;S為飲片的橫截面積;H為單個飲片的平均厚度，mm。

百分質(zhì)量常數(shù)的公式為A%=Ai/Amax×100%（Ai為某批樣品的質(zhì)量常數(shù)，Amax為樣品中的最大質(zhì)量常數(shù)）。規(guī)定A%≥80%為一等飲片;50%≤A%<80%為二等飲片;剩余的均為三等飲片[6-7]。

2.2形態(tài)參數(shù)測定

15批桂枝飲片均為扁圓柱形（見圖1），按2.1項中公式要求，測定飲片質(zhì)量和厚度。為減少實驗誤差，使樣品具有代表性，每批樣品隨機(jī)選取3組，每組隨機(jī)選擇80個飲片作為測量對象，記錄其厚度和質(zhì)量，計算每批次單個飲片的平均厚度H和平均質(zhì)量m。

2.3指標(biāo)成分含量測定

1）色譜條件

色譜柱為Phenomenex Luna（2） C18 色譜柱（4.6 mm×250 mm，5.0 μm）;以乙腈-水（A∶B）為流動相（體積比為32∶68）等度洗脫;檢測波長為290 nm，柱溫為30 ℃;流速為1.0 mL/min，理論板數(shù)按桂皮醛峰計算應(yīng)不低于3 000。

2）參照物溶液的制備

取桂皮醛對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含桂皮醛 0.012 mg的溶液。

3）樣品溶液的制備

取桂枝樣品（過4號篩），精密稱定0.5 g，轉(zhuǎn)移至錐形瓶中，精密加入25 mL甲醇，稱重，超聲處理30 min（功率250 W，頻率40 kHz），取出放冷，甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，精密量取濾液1 mL，置于25 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

4）測定

分別吸取參照物溶液與樣品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，計算樣品含量，得到色譜圖（見圖2）。

3結(jié)果與分析

1）飲片形態(tài)參數(shù)測定

由桂枝飲片測定結(jié)果（見表2 ）可知，飲片單個質(zhì)量為0.09～0.23 g，最大和最小飲片的質(zhì)量比最高約為3倍。飲片平均厚度為0.96～4.06 mm，gz-12飲片厚度比gz-3飲片厚了近4.2倍，但外觀形態(tài)指標(biāo)的差異均在合理范圍內(nèi)。

2）飲片指標(biāo)成分含量

按2.3項中色譜條件分別測定15批桂枝飲片中桂皮醛的含量，結(jié)果表明15批樣品均符合《中國藥典》中的要求，即含桂皮醛質(zhì)量分?jǐn)?shù)不得少于1.0%，見表2和圖3。

3）飲片等級劃分

按2.1項中公式計算，15批桂枝飲片質(zhì)量常數(shù)和百分質(zhì)量常數(shù)，見表2。為了更加直觀地表示出等級差異，以百分質(zhì)量常數(shù)作圖，見圖3。結(jié)果發(fā)現(xiàn)gz-1，gz-3，gz-8飲片的百分質(zhì)量常數(shù)大于等于80%，為一等品;gz-4，gz-5批飲片介于50%～80%，為二等品;余下均為三等品。

4討論

4.1指標(biāo)成分選擇

桂枝為樟科植物肉桂的干燥嫩枝，功效為發(fā)汗解肌，溫通經(jīng)脈，助陽化氣，平?jīng)_降氣。桂枝中主要含有桂皮醛、桂皮醇、甲氧基桂皮醛、苯甲醛、α-胡椒烯、β-欖香烯、桉葉素-對傘花烴等揮發(fā)油成分[8-9];有機(jī)酸類成分以桂皮酸為主，尚含2-甲氧基肉桂酸、反式-鄰羥基桂皮酸、對羥基苯甲酸、肉桂醛、表兒茶酸等[10-12]。本研究選取桂皮醛為桂枝等級評價的內(nèi)在指標(biāo)成分主要考慮以下方面：1）桂皮醛為《中國藥典》對桂枝的法定指標(biāo)成分;2）桂皮醛為桂枝中的藥理活性物質(zhì)，具有擴(kuò)張血管、促進(jìn)發(fā)汗[13]、鎮(zhèn)靜、抗驚厥[14]、抗血小板聚集和體內(nèi)抗血栓作用[15]，是桂枝發(fā)揮解熱鎮(zhèn)痛作用的重要成分。由此說明選擇該成分作為內(nèi)在指標(biāo)較為合理。

4.2傳統(tǒng)評價與質(zhì)量常數(shù)評價

傳統(tǒng)觀點認(rèn)為“桂枝以幼枝、薄片、色紅，去凈葉及雜質(zhì)者為佳”，本研究收集到的樣品gz-13中的H=1.69 mm，m=0.23 g，單從外觀形狀上，較符合色紅、薄片的性狀鑒定特點，但內(nèi)在指標(biāo)成分含量低，因而被列為三等品?！吨袊幍洹饭鹬椣乱?guī)定：桂枝為肉桂的干燥嫩枝，飲片炮制方法為除去雜質(zhì)，洗凈，潤透，切厚片，干燥。而15批樣品中，厚度、直徑有較大差異，符合厚片性狀特征的直徑普遍小于薄片的直徑，究其原因，可能是15批樣品采收期存在差異。同時，薄片更容易干燥，而厚片則需要更長時間干燥，造成桂皮醛成分含量降低。說明單一的性狀鑒別無法全面反映飲片的內(nèi)在質(zhì)量。

本研究所論述的中藥質(zhì)量常數(shù)評價方法既兼顧了傳統(tǒng)鑒別時以外在性狀為主的特點，同時結(jié)合了指標(biāo)成分含量高即優(yōu)的觀點。最終分級結(jié)果顯示15批桂枝樣品中一等飲片的平均厚度與二等、三等飲片存在一定差異，也符合薄片為宜的鑒別特征。結(jié)果顯示該方法合理且可行。

5結(jié)語

本文豐富了桂枝飲片質(zhì)量評價方法，應(yīng)用質(zhì)量常數(shù)的桂枝飲片評價，能夠更加科學(xué)、準(zhǔn)確地體現(xiàn)飲片質(zhì)量，具有很大實用價值。研究發(fā)現(xiàn)，僅3批桂枝飲片符合一等品，2批桂枝飲片為二等品，其余10批均為三等品。以廣東產(chǎn)桂枝為例，廣東產(chǎn)區(qū)的gz-8為一等品，相同產(chǎn)區(qū)的gz-7，gz-9為三等品。說明飲片品質(zhì)不僅與產(chǎn)地有關(guān)，相同產(chǎn)地不同批次間也存在質(zhì)量差異。

《中國藥典》桂枝項下規(guī)定：桂枝飲片為“厚片”，而本次研究收集到的桂枝飲片多數(shù)為薄片，僅有2批（gz-12，gz-15）飲片符合厚片要求，但桂皮醛含量明顯低于其他批次，且與“薄片為宜”的傳統(tǒng)鑒別要點違背。通過質(zhì)量常數(shù)法分析判斷，gz-12和gz-15飲片處于三等品，因此，需要對標(biāo)準(zhǔn)中炮制品性狀進(jìn)行考證研究。

本文所應(yīng)用的質(zhì)量常數(shù)法對飲片品質(zhì)進(jìn)行了較好的分級評價，對桂枝飲片的市場監(jiān)督、流通有一定指導(dǎo)意義。本次研究中，由于受樣品批次的限制，并未收集到更多樣品，因此，今后的研究需要繼續(xù)豐富研究的樣品量，以完善該方法。

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