不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭消化酶活性與分布特點

劉永士，王建軍，朱建明，陸根海，施永海，劉建忠

(上海市水產(chǎn)研究所，上海市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，上海 200433)

魚類對食物的消化和吸收直接關(guān)系其生長、發(fā)育和繁殖等生命活動，且消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)決定了魚類的食性。對魚類消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及其相應(yīng)消化酶活性及分布的研究是認(rèn)識和探討魚類攝食、消化和吸收機制的基礎(chǔ)和重要途徑[1]。目前，已有關(guān)于翹嘴鲌（Culter alburnus）[2]、長鰭籃子魚（Siganus canaliculatus）[3]、西伯利亞鱘（Acipenser baerii）[4]、大黃魚（Pseudosciaena crocea）[5]等的消化道指數(shù)及各組織消化酶活性及分布的研究。鄧平平等[6]和施永海等[7]分別研究了鹽度和不同飼料對刀鱭幼魚胃、腸和幽門盲囊中消化酶活性的影響，但未涉及消化道指數(shù)和肝胰臟消化酶活性的研究。

刀鱭（Coilia nasus）， 屬于鯡形目（Clupeiformes），鳀科（Engraulidae），鱭屬（Coilia），為江海洄游性魚類，主要分布于我國黃渤海和東海一帶，凡通海的江河均有分布，以長江下游產(chǎn)量最高[8]，近年來，在江湖阻隔、水域污染加劇及長期高強度捕撈等多重影響下，長江刀鱭資源急劇衰退[9]，因此，開展刀鱭的人工養(yǎng)殖是解決刀鱭供求不平衡的重要手段。養(yǎng)殖密度是影響?zhàn)B殖水體生產(chǎn)力的關(guān)鍵因子之一，高密度養(yǎng)殖是提高養(yǎng)殖系統(tǒng)生產(chǎn)力最常用的手段，但目前，人工配合飼料的缺乏是刀鱭規(guī)?；B(yǎng)殖發(fā)展的關(guān)鍵瓶頸，從研究刀鱭的消化生理入手，是解決這一難題的重要途徑之一。當(dāng)前刀鱭的人工養(yǎng)殖嚴(yán)重依賴活體生物餌料[10-11]，通過培養(yǎng)基礎(chǔ)生物餌料以及接種外源生物，是常用的刀鱭養(yǎng)殖手段[10,12-13]，但生物餌料來源不穩(wěn)定，如果刀鱭養(yǎng)殖密度過高，會導(dǎo)致種內(nèi)對空間和餌料的競爭加劇，尤其在生物餌料來源不穩(wěn)定的情況下，勢必會導(dǎo)致刀鱭群體生長率和成活率的下降。本試驗用浮游動物（枝角類和橈足類等）和日本沼蝦作為餌料生物，研究了不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭的消化道指數(shù)（比腸長）和各組織的消化酶活性及分布特點，旨在了解刀鱭的消化生理特點及不同養(yǎng)殖密度下消化生理的適應(yīng)性變化，豐富了刀鱭的消化生理基礎(chǔ)資料，為二齡刀鱭配合飼料的研制及優(yōu)化養(yǎng)殖技術(shù)提供實踐與理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 池塘條件 養(yǎng)殖池塘位于上海市奉賢區(qū)星火農(nóng)場養(yǎng)殖區(qū)域（杭州灣北岸），為相鄰的3 口池塘（編號：8#北、8#南、9#北），每口池塘面積為4 畝，水深1.5 m，呈規(guī)整的長方形，東西走向，進(jìn)排水方便，進(jìn)水口用60 目篩絹網(wǎng)過濾，排水口網(wǎng)眼為2 mm×3 mm 的圍網(wǎng)和40 目的閘網(wǎng)。利用網(wǎng)片（網(wǎng)眼為2 mm×3mm）南北向固定于池塘中（底部封土固定，上部高出水面50 cm）將每口池塘均分為4 個圍隔，每個圍隔面積1 畝，每畝配備1.5 kW 葉輪式增氧機1 臺，池塘上方覆蓋尼龍網(wǎng)以防止鳥類偷食。池塘使用前，清塘消毒，池底浸泡消毒24 h 后，徹底排干曝曬待用。

1.1.2 試驗用魚和用水 試驗用二齡刀鱭為上海市水產(chǎn)研究所奉賢科研基地全人工繁育的刀鱭苗種，經(jīng)室內(nèi)強化培育、室外池塘培育、越冬養(yǎng)殖及室外池塘養(yǎng)殖后，于次年4 月份拉網(wǎng)取出，規(guī)格為體長（12.63±1.55）cm，體重（4.43±1.25） g，用于本試驗研究。試驗用水為當(dāng)?shù)睾铀?，水?8～33.9 ℃，pH 8.08～9.56。

1.2 方法

1.2.1 魚種放養(yǎng) 魚種放養(yǎng)前，池塘要提前培養(yǎng)基礎(chǔ)餌料生物，根據(jù)放養(yǎng)魚種時間，提前5～7 d 進(jìn)水，先進(jìn)水50 cm，后根據(jù)水色情況和餌料生物量等逐步添加水至1.5 m 水位，5～7 d 后水色變濃，水體中出現(xiàn)枝角類以及橈足類等餌料生物，待餌料生物量達(dá)到20～40 個·L-1，放養(yǎng)二齡刀鱭魚種。

選擇晴好天氣在池塘的上風(fēng)處放苗，提前開啟增氧機，使池水不分層，放養(yǎng)魚種要求規(guī)格整齊、鱗片完整且活力較好。

二齡刀鱭養(yǎng)殖設(shè)置3 個密度梯度，分別為500尾·畝-1（8#北，組別：A）、1 000 尾·畝-1（8#南，組別：B）、1 500 尾·畝-1（9#北，組別：C），每個養(yǎng)殖密度設(shè)3 個平行（即每個池塘僅用上述4 個圍隔中的3 個，剩下1 個空置），各密度組刀鱭放養(yǎng)后，暫養(yǎng)7 d，期間每天撈出死魚并記錄，7 d 后根據(jù)各試驗組死魚數(shù)補入同批二齡刀鱭，之后養(yǎng)殖試驗開始計時。

1.2.2 餌料生物投放與管理 除了魚種放養(yǎng)前培育餌料生物外，在刀鱭放入池塘的7 d 內(nèi)，陸續(xù)向每個試驗組中添加小型日本沼蝦（Macrobrachium nipponense）作為其餌料生物，后期根據(jù)養(yǎng)殖塘內(nèi)日本沼蝦數(shù)量，適當(dāng)補充，養(yǎng)殖周期內(nèi)，投放日本沼蝦的量分別為：A 組10 kg，B 組15 kg、C 組20 kg，每天投喂適量南美白對蝦配合飼料作為日本沼蝦的飼料。

1.2.3 日常管理 每天晚上開機8～10 h，晴好天氣中午開增氧機1 h，天氣惡劣時，增加開機時間；每天（8：00、16：00）測水溫2 次，養(yǎng)殖期間水溫為15.2～31.4 ℃；每14 d 注換水1/3。養(yǎng)殖從4 月份開始到10 月份結(jié)束，共189 d。

1.2.4 樣品采集、處理及酶液制備 養(yǎng)殖結(jié)束后，每個平行取刀鱭5 尾，饑餓24 h，測量體長與體質(zhì)量（見表1），放入-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。試驗前，從冰箱中取出刀鱭，放入0～4 ℃冰箱中解凍，置于冰盤中解剖，取出肝胰臟、胃、幽門盲囊和腸，量腸長與體長，用生理鹽水洗凈組織并用濾紙吸干，將組織分別在冰盤中剪碎，攪拌均勻，稱取適量組織樣本（0.1～0.2 g），放入已事先預(yù)冷的玻璃勻漿器中，加入9 倍體積的預(yù)冷生理鹽水，冰浴勻漿，冷凍離心（0～4 ℃，3 500 r·min-1，10 min），取上清液即刻測定各組織消化酶活性。

消化酶活性測定所用的試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，并按試劑盒說明書要求操作。

1.2.5 消化酶活性定義 胰蛋白酶活性定義：在pH 8.0，37 ℃條件下，每毫克蛋白中含有的胰蛋白酶每分鐘使吸光度變化0.003 即為一個酶活力單位，U·mg-1。

胃蛋白酶活性定義：在37 ℃，pH 3.8 條件下，每毫克組織蛋白每分鐘分解蛋白生成1 μg 氨基酸相當(dāng)于一個酶活力單位，U·mg-1。

淀粉酶活性定義：在37 ℃，pH 7.0 條件下，組織中每mg 蛋白與底物作用30 min 后水解10 mg淀粉定義為一個淀粉酶活力單位，U·mg-1。

脂肪酶活力定義：在37℃條件下，每g 組織蛋白在本反應(yīng)體系中與底物反應(yīng)1 min，每消耗1 μmol底物為一個酶活力單位，U·g-1。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS20 處理數(shù)據(jù)，用Oneway ANOVA 和Duncan 氏檢驗法對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性差異分析和多重比較，P＜0.05 視為差異顯著。利用Excel 2016作圖。

式中：L為體長（cm），Li為腸長（cm）。

2 結(jié)果與分析

2.1 消化道指數(shù)

由表1 可知，經(jīng)過189 d 的養(yǎng)殖，不同密度組二齡刀鱭的體長與體質(zhì)量存在顯著差異。A 組體長（20.26 cm）與體質(zhì)量（30.74 g）均高于B 組（18.18 cm、21.37 g）和C 組（17.16 cm、19.96 g）（P＜0.05）；3 個組比腸長不存在顯著差異。

2.2 胃蛋白酶

3 種養(yǎng)殖密度下刀鱭4 種組織（肝胰臟、胃、腸、幽門盲囊）的胃蛋白酶活性見圖1。A 組肝胰臟（2.23 U·mg-1）和胃（7.40 U·mg-1）中胃蛋白酶活性顯著高于B 組（0.92 U·mg-1、5.39 U·mg-1）和C 組（0.93 U·mg-1、5.95 U·mg-1）（P ＜0.05），3 個密度組刀鱭腸和幽門盲囊中胃蛋白酶活性差異不顯著。

3 種養(yǎng)殖密度下刀鱭胃蛋白酶活性均以胃中最高，且在4 種組織中分布存在差異（圖1）。根據(jù)顯著性檢驗結(jié)果可知，A 組：胃＞腸≈肝胰臟＞幽門盲囊；B 組：胃＞腸＞肝胰臟≈幽門盲囊；C 組：胃＞腸≈幽門盲囊≈肝胰臟。

表1 二齡刀鱭的消化道指數(shù)Table 1 The digestive tube index of two-year Coilia nasus

圖1 不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭各組織胃蛋白酶活性Figure 1 Pepsin activity in different tissues of 2-year-old Coilia nasus cultured at different densities

圖2 不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭各組織胰蛋白酶活性Figure 2 Trypsin activity in different tissues of 2-year-old Coilia nasus cultured at different densities

2.3 胰蛋白酶

3 種養(yǎng)殖密度下刀鱭肝胰臟和胃中胰蛋白酶活性差異不顯著，而A 組與B 組的腸和幽門盲囊中胰蛋白酶活性顯著高于C 組（P ＜0.05）（圖2）。

3 個密度組的刀鱭胰蛋白酶活性在4 種組織中分布存在差異（圖2）。A、B 組腸中胰蛋白酶活性最高，分別為5 353.77 和4 187.11 U·mg-1，C 組腸中胰蛋白酶活性（818.84 U·mg-1）較A、B 組分別降低84.7%和80.4%。根據(jù)顯著性檢驗結(jié)果可知，A組：腸＞幽門盲囊≈胃≈肝胰臟；B 組：腸＞幽門盲囊＞胃≈肝胰臟；C 組：幽門盲囊≈腸＞肝胰臟≈胃。

2.4 淀粉酶

3 種養(yǎng)殖密度對刀鱭肝胰臟、胃和幽門盲囊中淀粉酶活性影響不顯著，而A 組（1.32 U·mg-1）和B 組（1.43 U·mg-1）腸中淀粉酶活性顯著高于C 組（0.62 U·mg-1）（P＜0.05）（圖3）。

A、B 組刀鱭腸中淀粉酶活性最高，其次為幽門盲囊（0.79 和1.01 U·mg-1）；C 組幽門盲囊中淀粉酶活性最高（1.09 U·mg-1）（圖3）。根據(jù)顯著性檢驗結(jié)果可知，A 組：腸＞幽門盲囊≈肝胰臟≈胃；B組：腸＞幽門盲囊＞肝胰臟≈胃；C 組：幽門盲囊＞腸＞肝胰臟≈胃。

圖3 不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭各組織淀粉酶活性Figure 3 Amylase activity in different tissues of 2-year-old Coilia nasus cultured at different densities

圖4 不同養(yǎng)殖密度下二齡刀鱭各組織脂肪酶活性Figure 4 Lipase activity in different tissues of 2-year-old Coilia nasus cultured at different densities

2.5 脂肪酶

3 種養(yǎng)殖密度對刀鱭肝胰臟和胃中脂肪酶活性影響不顯著，而A 組腸中脂肪酶活性（11.10 U·g-1）顯著高于C 組（2.47 U·g-1）（P ＜0.05），C 組幽門盲囊中脂肪酶活性（4.87 U·g-1）顯著高于B 組（1.05 U·g-1）（P ＜0.05）（圖4）。

3 種養(yǎng)殖密度下均以肝胰臟中脂肪酶活性最高，分別為A 組：11.95 U·g-1、B 組：11.71 U·g-1、C 組：12.77 U·g-1（圖4）。根據(jù)顯著性檢驗結(jié)果可知，A 組肝胰臟、腸、胃和幽門盲囊中脂肪酶活性差異不顯著；B 組：肝胰臟＞腸≈胃≈幽門盲囊；C組：肝胰臟＞幽門盲囊≈胃≈腸。

3 討論

3.1 二齡刀鱭消化酶分布特點

魚類的蛋白酶有堿性蛋白酶和酸性蛋白酶2 種，且在消化道不同部位的活性不同。胃蛋白酶是一種酸性蛋白酶，是有胃魚類胃中作用最強的消化酶[14]，大量研究表明，胃蛋白酶在胃中的活性最高[4-5,14-18]，這與本試驗二齡刀鱭的研究結(jié)果相同。Einarsson等[19]用免疫定位技術(shù)研究大西洋鮭（Salmo salarL.）的酶分泌細(xì)胞時發(fā)現(xiàn)，在胃里有大量分泌胃蛋白酶的腺細(xì)胞。根據(jù)本試驗的結(jié)果，二齡刀鱭的胃極有可能是胃蛋白酶分泌的主要器官，但這一結(jié)果仍需結(jié)合免疫定位技術(shù)對二齡刀鱭胃中酶分泌細(xì)胞進(jìn)行研究來確定。胰蛋白酶是一種堿性蛋白酶，在黑鱸（Micropterussp.）、丁鱥（Phoxinus tinca）和鯉（Cyprinus carpio）研究發(fā)現(xiàn)，胰臟主要分泌蛋白酶原，肝胰臟中蛋白酶活性很微弱，進(jìn)入腸道在腸激酶作用下，不僅激活蛋白酶原，同時腸液還可增強蛋白酶的作用[20]；因此，主要依靠胰臟或肝胰臟分泌蛋白酶原的魚類，由于測定前對腸道進(jìn)行了清洗，其腸道中蛋白酶活性較低，如菊黃東方鲀（Takifugu flavidus）[21]，但在對翹嘴鲌[2]、條石鯛（Oplegnathus fasciatus）[17]、施氏鱘（Acipenser schrencki）[22]、長鰭籃子魚[3]、卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）[16]、西伯利亞鱘[4]等的研究表明，肝胰臟中蛋白酶活性較低，而腸道蛋白酶活性較強，或許說明腸道也具有分泌蛋白酶或者蛋白酶原的功能。通過對大西洋鮭的研究發(fā)現(xiàn)，其胰腺和腸道中均由大量分泌胰蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶原的腺細(xì)胞[19]，因此，部分魚類的腸道亦具有分泌胰蛋白酶原的功能，本試驗不同密度組二齡刀鱭肝胰臟和胃中的胰蛋白酶活性較低，而A、B 組腸胰蛋白酶活性顯著高于其余各組織（P＜0.05），幽門盲囊次之，C 組腸和幽門盲囊胰蛋白酶活性差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于肝胰臟和胃（P＜0.05）。鄧平平等[6]對長江刀鱭幼魚的研究亦表明，腸道中胰蛋白酶活性最高，幽門盲囊次之。說明刀鱭腸是胰蛋白酶分泌的重要器官，幽門盲囊作為魚類特有的消化器官，實質(zhì)上是腸道的分支[1]，在蛋白消化過程中發(fā)揮重要的輔助作用，肝胰臟在胰蛋白酶原分泌中發(fā)揮的作用尚需進(jìn)一步的研究。

有研究表明，胰臟或肝胰臟為淀粉酶生成的主要器官[23]，如大黃魚[5]、鲇（Silurus asotus）[24]、黑鯛（Sparus macrocephlus）[25]、銀鯧（Pampus argenteus）[15]等的肝胰臟中淀粉酶活性最高。而周景祥等[26]研究表明，大眼鰤鱸（Stizostedion vitreum）幽門盲囊是淀粉酶分泌重要器官；對西伯利亞鱘[4]的研究也發(fā)現(xiàn)，幽門盲囊中淀粉酶活性最高。在對其他一些魚類的研究發(fā)現(xiàn)[3,16-17]，腸中淀粉酶活性最高。上述研究表明，不同魚類淀粉酶分泌器官存在差異或同種魚類各組織器官分泌淀粉酶能力不同。本試驗研究表明刀鱭腸是淀粉酶分泌的重要器官，幽門盲囊在淀粉消化中發(fā)揮重要輔助作用，養(yǎng)殖條件的改變會影響刀鱭各組織淀粉酶分泌功能。肝胰臟是魚類重要的消化腺，多數(shù)魚類肝胰臟分泌的是淀粉酶原，其活性很低，進(jìn)入腸道被激活發(fā)揮作用[27-28]，因此，盡管二齡刀鱭肝胰臟中淀粉酶活性較低，并不能說明肝胰臟不是淀粉酶的主要分泌器官，這仍需進(jìn)一步的研究。

本試驗表明，不同密度組肝胰臟脂肪酶活性最高，且B、C 組存在顯著性差異，這與Das 等[20]認(rèn)為肝胰腺為脂肪酶生成的主要器官的觀點相符。肝胰腺分泌的酶液進(jìn)入腸道發(fā)揮作用，腸是脂肪消化的主要場所[2,17]。二齡刀鱭脂肪酶存在于消化系統(tǒng)各個部分，或許說明消化系統(tǒng)各組織均具有一定的脂肪酶分泌能力。研究指出，脂肪酶活性與攝食餌料脂肪含量呈正相關(guān)[2,15]，本試驗的低密度組餌料豐富，刀鱭攝食較多的生物餌料進(jìn)入腸，誘發(fā)腸產(chǎn)生活性較高的脂肪酶，因此A 組腸的脂肪酶活性高于其余兩組，并與C 組存在顯著差異。

3.2 二齡刀鱭消化系統(tǒng)特點

魚體消化酶組成與其食性密切相關(guān)，一般肉食性魚類消化道短，蛋白酶活性強，草食性魚類消化道長，淀粉酶活性強[4-5]。刀鱭為肉食性魚類，其幼魚的比腸長為0.241[29]，二齡刀鱭的比腸長為0.29～0.30，遠(yuǎn)低于其他一些肉食性魚類，如大黃魚（0.854）[5]、西伯利亞鱘（0.411）[4]、褐鯧鲉（Sebastiscus marmoratus）（0.54）[30]、軍曹魚（Rachycentron canadum）（0.43）[31]、波紋唇魚（Cheilinus undulatus）（0.43）[32]、蘭州鲇（Silurus lanzhouensis）（0.912）[33]等，而刀鱭腸道具有各主要消化酶，尤以胰蛋白酶和淀粉酶活性最高，彌補了腸道短的劣勢，而幽門盲囊也在餌料的消化過程中發(fā)揮重要作用。除此之外，刀鱭胃中具有各主要消化酶，且胃蛋白酶活性顯著高于其余各組織。有學(xué)者指出[34]胃發(fā)達(dá)的肉食性魚類，蛋白質(zhì)消化主要集中在胃，胃中蛋白酶活性顯著高于其他組織。本試驗中胃蛋白酶和胰蛋白酶定義不同，因此不能根據(jù)數(shù)值高低斷定孰強孰弱，但可以肯定刀鱭胃在餌料的最初消化中發(fā)揮重要作用，尤以蛋白質(zhì)消化最為明顯，這也降低了腸道消化負(fù)擔(dān)。因此，今后刀鱭飼料開發(fā)過程中，除了考慮飼料的適口性外，還需重視飼料的易消化性。

3.3 養(yǎng)殖密度對二齡刀鱭消化酶活性的影響

消化酶活性高低反映了魚體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收能力，受到多種因素影響：（1）個體發(fā)育[21,35-36]；（2）飼料營養(yǎng)成分[37-38]；（3）環(huán)境因子（溫度[24-25,39]、pH[25,39]、溶氧[40-41]、鹽度[6,42-43]、養(yǎng)殖密度[44-45]等）；（4）養(yǎng)殖模式[46-47]等。養(yǎng)殖密度是魚類養(yǎng)殖中重要的環(huán)境因子，與養(yǎng)殖魚類的生長、攝食及機體生理狀況關(guān)系密切[48-49]。一些研究表明，魚類在高密度養(yǎng)殖條件下其消化酶活性升高，如銀鯧幼魚高密度組的蛋白酶和淀粉酶活性顯著高于低密度組[44]；鰱魚（Hypophthalmichthys molitrix）高密度組淀粉酶活性顯著高于低密度組[50]；大菱鲆（Scophthalmus maximus）高密度組的蛋白酶和淀粉酶活性顯著高于中、低密度組[45]；這主要是因為魚類在高密度養(yǎng)殖環(huán)境下，受到空間擁擠脅迫，為了獲取更多食物和協(xié)調(diào)種間關(guān)系需要消耗更多的能量，導(dǎo)致耗能活動增多、代謝水平提高[45,51]，據(jù)此解釋，可知養(yǎng)殖密度過高導(dǎo)致養(yǎng)殖品種對有利生存空間和營養(yǎng)爭奪趨于激烈，進(jìn)而產(chǎn)生一系列應(yīng)激行為。本試驗二齡刀鱭養(yǎng)殖密度為500～1 500 尾·畝-1（約0.75～2.25尾·m-2，0.50～1.50 尾·m-3，2.21～6.64 g·m-3），遠(yuǎn)低于上述銀鯧（初始體質(zhì)量5.33 g，5～25 尾·m-3）[44]、鰱魚（21.2～42.4 g·m-3）[50]和大菱鲆（初始體質(zhì)量186 g，50～103 尾·m-2）[45]，這主要是因為刀鱭養(yǎng)殖主要依賴活體生物餌料[10,12-13,52-53]，適口生物餌料來源不穩(wěn)定，無法維持全年不間斷足量供應(yīng)，因此限制了刀鱭養(yǎng)殖密度提高，可見二齡刀鱭養(yǎng)殖空間相對寬裕，養(yǎng)殖密度對刀鱭影響主要體現(xiàn)在對適口活體生物餌料的爭奪。

餌料營養(yǎng)會影響消化酶的活性，王建等[38]的研究表明，肝臟和腸道蛋白酶活性隨飼料蛋白水平（20%～35%）升高而提高；付輝云等[54]研究發(fā)現(xiàn)，彭澤鯽（Carassius auratus var. Pengze）腸道脂肪酶和胰蛋白酶活性隨著飼料脂肪含量（5%～8%）的增加而逐步升高；孫學(xué)亮等[55]研究表明，淡水石斑魚（Cichlasoma managuense）腸道淀粉酶活性隨著飼料玉米淀粉含量（0%～11%）增加而逐步升高。由上可知，魚類消化系統(tǒng)會根據(jù)攝入營養(yǎng)情況改變消化酶分泌策略，提高機體的消化吸收能力。本試驗，低密度組二齡刀鱭各消化酶在其重要分泌器官中的活性均要高于或顯著高于高密度組，如A 組（500 尾·畝-1胃中胃蛋白酶活性顯著高于B 組（1 000 尾·畝-1）和C 組（1 500 尾·畝-1），A 組和B 組腸中胰蛋白酶和淀粉酶活性顯著高于C 組，A組腸中脂肪酶活性顯著高于C 組（P＜0.05），這主要是因為低密度條件下，餌料生物豐富，刀鱭攝食量增加誘導(dǎo)體內(nèi)相應(yīng)消化酶分泌和活性提高，加快了餌料的消化吸收效率。尤其值得注意的是高密度組（1 500 尾·畝-1）腸中胰蛋白酶活性急劇降低，這可能是因為試驗投喂的日本沼蝦蛋白含量較高（61.71%～64.68%）[56]，低密度組攝食較多，誘導(dǎo)腸中胰蛋白酶活性提高，而高密度組攝食較少，說明二齡刀鱭放養(yǎng)密度為1 500 尾·畝-1，添加小型日本沼蝦20 kg 無法滿足其攝食需求。因此，為了保證高密度組二齡刀鱭的生長，需在試驗基礎(chǔ)上進(jìn)一步增加適口生物餌料的投放，腸中胰蛋白酶活性對餌料攝入量較為敏感，可作為驗證養(yǎng)殖系統(tǒng)活體餌料生物是否滿足刀鱭攝食需求的重要指標(biāo)，此結(jié)果仍需進(jìn)一步的試驗驗證。