黨參多糖對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸上皮NF-κB 信號(hào)通路的影響

劉雪楓喬 婧高建德 陳正君劉 雄*

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，甘肅 蘭州 730000；2.甘肅省中藏藥化學(xué)與質(zhì)量研究省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅蘭州 730000；3.甘肅省中藥質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 蘭州 730000）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種多因素導(dǎo)致的原因不明的慢性炎性腸病之一，以腹瀉、腹痛、血便為主要臨床癥狀，近年來(lái)發(fā)病率明顯升高、發(fā)病人群趨于年輕化［1-2]，是世界衛(wèi)生組織公認(rèn)的難治性疾病之一，易反復(fù)發(fā)作［3]。目前常用治療藥物包括水楊酸類、皮質(zhì)激素類、免疫抑制劑等，但均不能根治UC 的發(fā)作，且不良反應(yīng)較多。近年來(lái)，中藥以多靶點(diǎn)、多組分的特點(diǎn)，已成為UC 的重要治療藥物。

黨參為桔?？泣h參 Codonopsis pilosula（Franeh.）Nannf.、素花黨參 Codonopsis pilosula Nannf.Var.modesta（Nannf.）L.T.Shen 或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.的干燥根，主要有效成分為黨參皂苷、黨參多糖等，具有補(bǔ)中益氣、健脾益肺的功效，臨床上常用于治療脾肺氣虛、咳嗽虛喘、內(nèi)熱消渴等癥［4]，相關(guān)方劑廣泛應(yīng)用于發(fā)作期、緩解期潰瘍性結(jié)腸炎的治療［5]。研究表明，黨參多糖具有明顯的抗氧化、免疫調(diào)節(jié)作用［6]。本實(shí)驗(yàn)探討黨參多糖對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的保護(hù)作用，并通過(guò)NF-κB 信號(hào)通路探討其可能作用機(jī)制，為該成分利用提供一定理論依據(jù)。

1 材料

1.1 動(dòng)物 SPF 級(jí)雄性Wistar 大鼠50 只，體質(zhì)量（220±10）g，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)NO.62001000000208，使用許可證號(hào)SYXK（甘）2015-0005，在溫度22～24 ℃、相對(duì)濕度40%～60%下以普通飼料喂養(yǎng)。

1.2 試劑與藥物 黨參購(gòu)于蘭州復(fù)興厚中藥飲片有限公司，批號(hào)20180319，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)王明偉副教授鑒定為桔?？浦参稂h參Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.的根。柳氮磺胺吡啶（SASP，上海信誼天平制藥廠，批號(hào)180625）；2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS，天津大茂化學(xué)試劑廠，批號(hào)180402）；超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號(hào)分別為20180514、20180522）；白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、腫瘤壞死因子（TNF-α）酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)試劑盒（江蘇酶免生物科技公司，批號(hào)分別為0190R2、0195R2、0180R2）；RNA 提取試劑盒、cDNA 反轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)試劑盒（德國(guó)Qiagen 公司，批號(hào)分別為157042224、160017598、157056248）；小鼠SP試劑盒、兔SP試劑盒、DAB 顯色試劑盒（北京中杉金橋科技有限公司，批號(hào)分別為SP-9002、SP-9001、ZLI-9018）；NFκB 一抗（美國(guó)Genetex 公司，批號(hào)GTX107678）；IL-6、IL-10、TNF-α 引物序列均由上海生工生物公司合成，見表1。水合氯醛（鄭州市德眾化學(xué)試劑廠，批號(hào)181204505）；多聚甲醛、中性樹膠、伊紅、蘇木素（北京索萊寶科技有限公司，批號(hào)分別為G7301、G8590、G070、G080）。

表1 引物序列Tab.1 Primer sequences

1.3 儀器 Primo 高速離心機(jī)（德國(guó)Heraeus 公司）；5424R 高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf 公司）；KD-BM 包埋機(jī)（浙江省金華市科迪儀器有限公司）；切片機(jī)（德國(guó)徠卡公司）；iMark 酶標(biāo)儀（美國(guó)Bio-Rad 公司）；NanoDrop 核酸濃度測(cè)量?jī)x（美國(guó)Thermo 公司）；DM7500 實(shí)時(shí)定量PCR 儀（美國(guó)Agilent 公司）；ImageQuant 400 凝膠成像系統(tǒng)（英國(guó)GE Healthcare 公司）；RX50 顯微鏡（寧波舜宇儀器有限公司）；AE-240 電子天平［梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]。

2 方法

2.1 藥物制備 取粉碎藥材500 g，加3 倍體積石油醚回流脫脂2 次，加入3 倍體積95%乙醇，回流提取6 h，棄去提取液，重復(fù)3 次，濾渣60 ℃恒溫干燥，加入蒸餾水，以固液比1∶10 提取3 次，每次1 h，合并提取液，并加入無(wú)水乙醇使其含醇量達(dá)到80%，低溫靜置24 h，沉淀真空干燥，即得黨參多糖，得率為16.39%。經(jīng)Savage 法脫蛋白后，以苯酚-硫酸法測(cè)得多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90.21%。

2.2 分組、建模及給藥 50 只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)后，按體質(zhì)量隨機(jī)分為5 組，每組10 只，分別為正常組，模型組，SASP 陽(yáng)性對(duì)照組（0.3 g/kg）及黨參多糖高、低劑量組（9、3 g/kg，按生藥量計(jì)算，為成人臨床劑量的30、10 倍），正常組和模型組灌胃等體積蒸餾水，其余各組給予相應(yīng)藥物灌胃，每天1 次，連續(xù)5 d。大鼠禁食36 h，水合氯醛麻醉，正常組以生理鹽水灌腸，其余各組均以TNBS/乙醇溶液灌腸，具體方法參考文獻(xiàn)［7]。造模后，連續(xù)3 d 監(jiān)測(cè)疾病活動(dòng)指數(shù)（DAI），DAI＞0.5 表明造模成功，繼續(xù)給藥21 d。

2.3 一般行為及DAI 評(píng)分 給藥期間，觀察大鼠精神狀態(tài)、進(jìn)食情況、毛色光澤、腹瀉、黏液便、血便等一般情況，進(jìn)行DAI 評(píng)分，見表2，計(jì)算公式為DAI=（體質(zhì)量下降評(píng)分+糞便性狀評(píng)分+大便隱血評(píng)分）/3。

表2 DAI 評(píng)分Tab.2 DAI scores

2.4 結(jié)腸黏膜損傷指數(shù)（CMDI）評(píng)分 末次給藥30 min 后，大鼠禁食不禁水36 h，水合氯醛麻醉后解剖，取從肛門向上至8 cm 處的結(jié)腸組織，縱向剖開，生理鹽水洗凈，平鋪固定觀察結(jié)腸黏膜大體形態(tài)改變：0 分，無(wú)損傷；1 分，輕度充血，水腫，表面光滑，無(wú)糜爛或潰瘍；2 分，充血水腫，黏膜粗糙呈顆粒狀，有糜爛或腸粘連；3 分，高度充血水腫，黏膜表面有壞死及潰瘍形成，潰瘍最大縱徑小于1.0 cm，腸壁增厚或表面有壞死及炎癥；4 分，在3 分基礎(chǔ)上潰瘍最大縱徑大于1.0 cm或大鼠死亡。

2.5 蘇木精-伊紅（HE）染色 將1 cm 大鼠結(jié)腸組織，PBS 漂洗干凈后4%多聚甲醛固定，梯度酒精脫水，常規(guī)石蠟包埋切片，HE 染色，光鏡下觀察組織病理學(xué)形態(tài)變化。

2.6 結(jié)腸組織中生化指標(biāo)檢測(cè) 取適量大鼠結(jié)腸組織，生理鹽水制成10% 勻漿，離心取上清后，按照試劑盒方法檢測(cè)SOD 活性和MDA 水平。

2.7 ELISA 法檢測(cè)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、IL-10、TNF-α 水平 取適量大鼠結(jié)腸組織，加入生理鹽水制成10%勻漿，離心取上清，按照ELISA 試劑盒使用書測(cè)定IL-6、IL-10、TNF-α 水平。

2.8 實(shí)時(shí)熒光定量-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）法測(cè)定IL-6、IL-10、TNF-α mRNA 表達(dá) 取適量大鼠結(jié)腸組織，加入液氮研磨，按照RNA 提取試劑盒說(shuō)明書提取RNA，采用多功能酶標(biāo)儀測(cè)定樣品濃度。在PCR 擴(kuò)增儀上將RNA 逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，之后進(jìn)行RT-PCR 反應(yīng)，反應(yīng)條件為95 ℃預(yù)變性10 min，95 ℃變性15 s，60 ℃退火60 s，72 ℃延伸5 min，共40 個(gè)循環(huán)。應(yīng)用2-ΔΔCT方法計(jì)算各基因相對(duì)表達(dá)，重復(fù)3 次。

2.9 免疫組化法觀察結(jié)腸組織中NF-κB 表達(dá) 切取3 mm 大鼠結(jié)腸組織，石蠟包埋后切制成5 μm切片，常規(guī)脫蠟，梯度70% 乙醇水化，檸檬酸鈉熱修復(fù)2 次，3% 過(guò)氧化氫封閉內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，山羊血清封閉液封閉30 min，每張切片滴加一抗NF-κB（1∶200），4 ℃冰箱過(guò)夜，PBS 沖洗后滴加聚合HRP 標(biāo)記抗兔IgG，37 ℃孵育30 min，PBS沖洗后DAB 顯色10 min 左右，室溫下蘇木素復(fù)染90 s，自來(lái)水沖洗，梯度乙醇脫水，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各反應(yīng)25 min，中性樹膠封片。顯微鏡觀察結(jié)腸組織中NF-κB 表達(dá)情況，Image J 軟件統(tǒng)計(jì)蛋白表達(dá)量。

2.10 蛋白免疫印跡法（Western blot）測(cè)定結(jié)腸組織中NF-κB 蛋白表達(dá) 取適量大鼠結(jié)腸組織，加入適量蛋白裂解液勻漿，3 500 r/min 離心15 min，取上清，BCA 法檢測(cè)蛋白濃度，并將其調(diào)整為4 μg/μL，加熱變性后-80 ℃保存。在制膠、上樣10 μL、電泳、濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜、5% 脫脂奶粉封閉、一抗4 ℃過(guò)夜、二抗孵育1 h 后，加入ECL 化學(xué)發(fā)光液，立即進(jìn)行蛋白化學(xué)發(fā)光并獲取圖像，以β-actin 為內(nèi)參，Image J 軟件計(jì)算灰度值。

2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 通過(guò)SPSS 19.0 軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)以（）表示，組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），方差齊者用LSD 法，不齊者用Games-Howell 法檢驗(yàn)。 P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 黨參多糖對(duì)UC 大鼠一般行為及DAI 評(píng)分的影響 造模后，除正常組外，其余大鼠均出現(xiàn)體質(zhì)量下降、懶動(dòng)、豎毛、厭食癥狀，有明顯腹瀉，甚至出現(xiàn)便血，DAI 評(píng)分升高（P＜0.01）。給藥后，正常組大鼠一般情況良好，自主活動(dòng)正常，飲食正常，毛色有光澤，無(wú)腹瀉便血發(fā)生；模型組大鼠出現(xiàn)懶動(dòng)，豎毛，厭食癥狀，有腹瀉發(fā)生，甚至出現(xiàn)便血，體質(zhì)量降低；黨參多糖高、低劑量組大鼠一般情況較模型組好，毛色有光澤，自主活動(dòng)增加，腹瀉發(fā)生率低于模型組，同時(shí)各給藥組DAI 評(píng)分下降（P＜0.05，P＜0.01），見表3。

3.2 黨參多糖對(duì)UC 大鼠CMDI 評(píng)分的影響 正常組大鼠結(jié)腸顏色淡紅，表面光滑，腸壁厚薄適中，黏膜皺襞清晰完整；模型組大鼠腸壁紅腫充血，潰瘍明顯，潰瘍面積較對(duì)照組擴(kuò)大（P＜0.01）；黨參多糖組大鼠亦可見結(jié)腸水腫、充血或黏膜粗糙，但較模型組有明顯改善（P＜0.05，P＜0.01）。CMDI評(píng)分見表3。

表3 UC 大鼠DAI、CMDI 評(píng)分（，n=10）Tab.3 DAI and CMDI scores for UC rats（，n=10）

表3 UC 大鼠DAI、CMDI 評(píng)分（，n=10）Tab.3 DAI and CMDI scores for UC rats（，n=10）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01。

3.3 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)的影響圖1 顯示，正常組大鼠染色均勻，細(xì)胞核形態(tài)正常，腸黏膜及基層清晰可見；與正常組比較，模型組大鼠有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，黏膜層損傷嚴(yán)重，基層分界線消失；與模型組比較，SASP 組大鼠炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少，黏膜損傷較輕；與模型組比較，黨參多糖組大鼠炎性細(xì)胞減少，黏膜層損傷較輕，基層較清晰。

圖1 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織形態(tài)學(xué)的影響（HE，×200）Fig.1 Effect of CPPs on the colonic histomorphology of UC rats（HE，×200）

3.4 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中SOD 活性和MDA 水平的影響 如表4 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸黏膜組織SOD 活性降低（P ＜0.01），MDA 水平升高（P ＜0.01）；與模型組比較，SASP 組大鼠結(jié)腸黏膜組織SOD 活性升高，MDA 水平下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.01）；與模型組比較，黨參多糖組可提高大鼠結(jié)腸黏膜中SOD 活性（P＜0.01），降低MDA 水平（P＜0.01），高劑量組效果略優(yōu)于SASP 組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表4 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中SOD 活性、MDA水平的影響（，n=10）Tab.4 Effects of CPPs on colonic SOD activity and MDAlevel of UC rats（，n=10）

表4 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中SOD 活性、MDA水平的影響（，n=10）Tab.4 Effects of CPPs on colonic SOD activity and MDAlevel of UC rats（，n=10）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，＃＃P＜0.01。

3.5 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、IL-10、TNF-α 水平的影響如表5 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織中IL-6、TNF-α 水平升高（P＜0.01），IL-10 水平降低（P＜0.01）；與模型組比較，SASP 組和黨參多糖高、低劑量組大鼠結(jié)腸組織中IL-6、TNF-α 水平降低（P ＜0.05，P ＜0.01），IL-10 水平升高（P＜0.01），高劑量組效果優(yōu)于SASP 組和黨參多糖低劑量組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表5 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、IL-10、TNFα 水平的影響（，n=10）Tab.5 Effects of CPPs on the levels of IL-6，IL-10 and TNF-α in colon tissue of UC rats（，n=10）

表5 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、IL-10、TNFα 水平的影響（，n=10）Tab.5 Effects of CPPs on the levels of IL-6，IL-10 and TNF-α in colon tissue of UC rats（，n=10）

注：與正常組比較，** P ＜0.01；與模型組比較，＃ P ＜0.05，＃＃P＜0.01。

3.6 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、IL-10、TNF-α mRNA 表達(dá)的影響如表6所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織IL-6、TNF-α mRNA 表達(dá)升高（P ＜0.01），IL-10 mRNA 表達(dá)降低（P ＜0.01）；SASP 組較模型組抑制 了IL-6、TNF-α mRNA 表達(dá)，提高了IL-10 mRNA 表達(dá)（P＜0.05）；給予黨參多糖高、低劑量組干預(yù)后，IL-6、TNF-α mRNA 表達(dá)較模型組降低（P＜0.01），IL-10 mRNA表達(dá)升高（P＜0.01）。

表6 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、 IL-10、 TNFα mRNA 表達(dá)的影響（，n=10）Tab.6 Effects of CPPs on the mRNA expressions of IL-6，IL-10 and TNF-α in the colon tissue of UC rats（，n=10）

表6 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中IL-6、 IL-10、 TNFα mRNA 表達(dá)的影響（，n=10）Tab.6 Effects of CPPs on the mRNA expressions of IL-6，IL-10 and TNF-α in the colon tissue of UC rats（，n=10）

注：與正常組比較，** P ＜0.01；與模型組比較，＃ P ＜0.05，＃＃P＜0.01。

3.7 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中NF-κB 表達(dá)的影響 如圖2、表7 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸黏膜中NF-кB 表達(dá)升高（P ＜0.01），SASP 組較模型組減少（P＜0.05）；與模型組比較，黨參多糖高、低劑量組均能減少NF-кB 表達(dá)（P＜0.01），并與給藥劑量呈正相關(guān)；黨參多糖高劑量組作用比SASP 組更顯著（P ＜0.01）。如圖3 所示，與正常組比較，模型組大鼠結(jié)腸組織中NF-кB p65 蛋白表達(dá)升高（P＜0.01）；SASP 組NF-кB p65蛋白表達(dá)降低（P＜0.05），黨參多糖高、劑量組抑制了NF-кB p65 蛋白表達(dá)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與免疫組化結(jié)果一致。

表7 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中NF-κB 蛋白表達(dá)的影響（，n=3）Tab.7 Effect of CPPs on the expression of NF-κB protein in the colon tissue of UC rats（，n=3）

表7 黨參多糖對(duì)UC 大鼠結(jié)腸組織中NF-κB 蛋白表達(dá)的影響（，n=3）Tab.7 Effect of CPPs on the expression of NF-κB protein in the colon tissue of UC rats（，n=3）

注：與正常組比較，**P＜0.01；與模型組比較，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與SASP 組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

圖2 各組大鼠結(jié)腸組織中NF-κB 蛋白表達(dá)（×200）Fig.2 NF-κB protein expressions in rat colon tissue in various groups（×200）

圖3 各組大鼠結(jié)腸組織中NF-κB p65 蛋白表達(dá)Fig.3 NF-κB p65 protein expressions in rat colon tissue in various groups

4 討論

UC 發(fā)病機(jī)制是多因素的，包括遺傳易感性、上皮屏障缺陷、免疫反應(yīng)失調(diào)、環(huán)境等［1]，其病程發(fā)展可導(dǎo)致纖維化的形成，甚至出現(xiàn)癌變，因此，尋找UC 的有效治療藥物愈來(lái)愈受到關(guān)注。中藥因其作用靶點(diǎn)多、安全性高等特點(diǎn)，在臨床治療UC 中體現(xiàn)出了獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，裴銀奇等［7]對(duì)治療潰瘍性結(jié)腸炎的處方進(jìn)行統(tǒng)計(jì)后發(fā)現(xiàn)，黨參出現(xiàn)頻次在100 次以上。黨參是傳統(tǒng)的補(bǔ)益中藥，也是甘肅省道地藥材，具有健脾益肺、養(yǎng)血生津之效［8]，黨參多糖是采用水提醇沉法從黨參中提取出的有效部位，可調(diào)整微生態(tài)失調(diào)，促進(jìn)腸道有益菌的生長(zhǎng)增殖并抑制腸道潛在致病菌［9-10]，能顯著緩解葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎，且效果明顯優(yōu)于復(fù)方四君子湯［11]。

人類潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜中氧化應(yīng)激失衡，產(chǎn)生的大量自由基損傷機(jī)體自身組織或激活炎癥介質(zhì)，可使結(jié)腸炎癥的損傷加?。?2-13]。MDA 是由自由基引起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，其量與自由基含有量和脂質(zhì)過(guò)氧化程度成正比［14]；SOD 是體內(nèi)消除超氧陰離子的抗氧化酶系，具有清除自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的作用，同時(shí)能修復(fù)受損細(xì)胞［14]。當(dāng)多種危險(xiǎn)因素刺激腸道黏膜時(shí)，造成腸道功能失調(diào)、機(jī)體氧化應(yīng)激失衡，產(chǎn)生的大量自由基引起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)MDA 水平的升高，SOD的耗竭；同時(shí)大量自由基的產(chǎn)生又會(huì)導(dǎo)致炎癥介質(zhì)的釋放，從而進(jìn)一步造成結(jié)腸組織損傷而發(fā)生UC。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，黨參多糖能顯著降低UC 大鼠結(jié)腸組織中MDA 水平，提高SOD 活性，說(shuō)明它能抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生，改善結(jié)腸黏膜損傷。

腸道炎性細(xì)胞因子異常表達(dá)是UC 的重要機(jī)制之一［15]，而UC 炎癥因子的產(chǎn)生又與TLRs/NF-κB通路有密切關(guān)系［16]。核因子κB（NF-κB）是炎癥反應(yīng)期間被激活的主要轉(zhuǎn)錄因子之一，當(dāng)炎癥或免疫反應(yīng)發(fā)生時(shí)，NF-κB 從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，調(diào)控炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，包括IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α 等［17-18]。IL-6 是由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及T細(xì)胞分泌的一種輔助型T 細(xì)胞（Th）Ⅰ型細(xì)胞因子，能夠誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞的分泌和增殖，是具有廣泛生物活性的促炎細(xì)胞因子，能直接介入急性期炎癥損傷過(guò)程，在UC 的發(fā)病過(guò)程中扮演重要角色［19]。TNF-α 是一類由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種肽類物質(zhì)，能刺激中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞等合成IL-1、IL-6、IL-8 等細(xì)胞因子，在IL-6 的參與下，還可激活磷脂酶，繼而生成白三烯和氧自由基等［20]。IL-10 又名細(xì)胞因子合成抑制因子，能抑制中性粒細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子和趨化因子，抑制IL-6、TNF-α 等的產(chǎn)生［19]。本研究結(jié)果顯示，用TNBS 聯(lián)合乙醇造模后，模型組大鼠結(jié)腸組織中NF-κB 蛋白表達(dá)顯著升高，IL-6、TNF-α 水平及mRNA 表達(dá)升高，IL-10 水平 及mRNA 表達(dá)降低；給予黨參多糖后，NF-κB 蛋白表達(dá)明顯降低，IL-6、TNF-α 水平及mRNA 表達(dá)下降，而IL-10 水平及mRNA 表達(dá)升高。說(shuō)明黨參多糖能抑制NF-κB 信號(hào)通路，減少促炎因子IL-6、TNF-α 的釋放，增加抑炎因子IL-10 的釋放。

綜上所述，黨參多糖對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠腸黏膜具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能抑制NF-κB 信號(hào)通路的活化，減少IL-6 和TNF-α 等炎性因子的釋放，并增強(qiáng)IL-10 的抗炎作用有關(guān)。