血液分析儀日常室內(nèi)質(zhì)量控制中新鮮血比對(duì)方案的建立

鄭翠玲，王 力，程 焱，崔 巍

（國(guó)家癌癥中心 國(guó)家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100021）

目前，臨床實(shí)驗(yàn)室血常規(guī)檢測(cè)工作需要同時(shí)使用數(shù)臺(tái)血液分析儀才能夠完成，由于不同儀器檢測(cè)原理、內(nèi)部構(gòu)造及其他因素的影響，同一臨床標(biāo)本在不同儀器上的檢測(cè)結(jié)果可能存在一定的差異。因此，保證不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性，不僅是檢驗(yàn)工作的重點(diǎn)，也是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織（the International Organization for Standardization，ISO）15189標(biāo)準(zhǔn)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果可比性的要求[1]。為了有效保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、一致性和可比性，進(jìn)行高效的室內(nèi)質(zhì)量控制（internal quality control，IQC）是必要措施，臨床實(shí)驗(yàn)室一般使用儀器配套質(zhì)控品來(lái)進(jìn)行IQC，但配套質(zhì)控品成本高、有效期短、多次重復(fù)混勻后會(huì)導(dǎo)致部分檢測(cè)數(shù)據(jù)出現(xiàn)漂移。為解決這一問(wèn)題，本研究建立了一套利用新鮮全血標(biāo)本進(jìn)行日常IQC的方案，截至目前，運(yùn)行良好。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

實(shí)驗(yàn)室每天在完成IQC后，按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）EP9-A2[2]文件的要求，從測(cè)定當(dāng)天的乙二胺四乙酸二鉀抗凝標(biāo)本中選擇新鮮血比對(duì)標(biāo)本，該標(biāo)本各項(xiàng)指標(biāo)均在參考區(qū)間內(nèi)，無(wú)異常警示，標(biāo)本量約2 mL。新鮮血比對(duì)標(biāo)本盡可能在6 h內(nèi)完成[3-4]比對(duì)。

1.2 儀器與試劑

日本Sysmex公司XN-9000血液分析儀（包含5個(gè)模塊）和XS-800i血液分析儀（2臺(tái)），共7臺(tái)儀器。以性能良好、規(guī)范化操作、定期參加我國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，且結(jié)果為優(yōu)秀的血液分析儀作為靶機(jī)，以其他血液分析儀作為比對(duì)儀器。所有儀器均使用配套質(zhì)控品和試劑。

1.3 評(píng)價(jià)項(xiàng)目

評(píng)價(jià)項(xiàng)目包括白細(xì)胞（white blood cell，WBC）計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞（red blood cell，RBC）計(jì)數(shù)、血紅蛋白（hemoglobin，Hb）、血細(xì)胞比容（hematocrit，HCT）、血小板（platelet，PLT）計(jì)數(shù)。

1.4 方法

1.4.1 新鮮血比對(duì) 根據(jù)北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院血常規(guī)檢測(cè)標(biāo)本量分布情況，實(shí)驗(yàn)室每日完成IQC后，在盡可能短的時(shí)間內(nèi)挑選新鮮血標(biāo)本，在靶機(jī)上進(jìn)行檢測(cè)，將測(cè)定結(jié)果（5001）傳輸至實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（laboratory information system，LIS），作為后續(xù)比對(duì)的基準(zhǔn)值；約9：00時(shí)將新鮮血標(biāo)本在XN-9000血液分析儀的5個(gè)模塊上進(jìn)行檢測(cè)，將第1次比對(duì)儀器測(cè)定結(jié)果（5011、5021、5031、5051）和靶機(jī)測(cè)定結(jié)果（5041）傳輸至LIS；約10：30將新鮮血標(biāo)本在所有血液分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，將第2次比對(duì)儀器測(cè)定結(jié)果（5012、5022、5032、5052、5072、5082）和靶機(jī)測(cè)定結(jié)果（5042）傳輸至LIS；若標(biāo)本量無(wú)法滿足后續(xù)檢測(cè)或檢測(cè)時(shí)間超過(guò)6 h，在第2次新鮮血比對(duì)后，重新挑選1份新鮮血標(biāo)本，在靶機(jī)上進(jìn)行測(cè)定，并將結(jié)果（5003）傳輸至LIS，作為關(guān)機(jī)前比對(duì)的基準(zhǔn)值；約15：30時(shí)，將新鮮血標(biāo)本在所有血液分析儀上進(jìn)行關(guān)機(jī)前比對(duì)，將關(guān)機(jī)前比對(duì)結(jié)果（5013、5023、5033、5053、5073、5083）和靶機(jī)測(cè)定結(jié)果（5043）傳輸至LIS。在LIS中自動(dòng)按照公式計(jì)算相對(duì)偏差，并判斷是否超出相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)，如果超出標(biāo)準(zhǔn)，用紅色（比對(duì)儀器測(cè)定結(jié)果高于基準(zhǔn)值）或藍(lán)色（比對(duì)儀器測(cè)定結(jié)果低于基準(zhǔn)值）顯示。儀器間相對(duì)偏差的計(jì)算公式為：相對(duì)比對(duì)偏差（%）=（第1次比對(duì)結(jié)果-5041）/5041×100%；靶機(jī)運(yùn)行過(guò)程中相對(duì)偏差的計(jì)算公式為：相對(duì)比對(duì)偏差（%）=（5041-5001）/5001×100%；比對(duì)儀器運(yùn)行過(guò)程中相對(duì)偏差的計(jì)算公式為：相對(duì)偏差（%）=（第2次比對(duì)結(jié)果-第1次比對(duì)結(jié)果）/ 第1次比對(duì)結(jié)果×100% 。

1.4.2 判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照1988年美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)法案（the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988，CLIA'88）允許誤差（WBC計(jì)數(shù)為±15%、RBC計(jì)數(shù)為±6.0%、Hb為±7.0%、HCT為±6.0%、PLT計(jì)數(shù)為±25.0%），以1/2 CLIA'88允許誤差的作為儀器間相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)，以1/3 CLIA'88允許誤差的作為同一儀器運(yùn)行過(guò)程中的相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)。以相對(duì)偏差（%）≤相應(yīng)的比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)為合格，否則為不合格。

2 結(jié)果

2.1 儀器間新鮮血標(biāo)本比對(duì)結(jié)果

在確定儀器IQC在控后，選取1份新鮮全血標(biāo)本，用所建立的方法比較比對(duì)儀器與靶機(jī)的測(cè)定結(jié)果，LIS自動(dòng)采集、計(jì)算比對(duì)數(shù)據(jù)，并自動(dòng)提示異常情況，針對(duì)不同原因引起的異常情況采取相應(yīng)措施，確保儀器運(yùn)行正常，以便有效監(jiān)控儀器穩(wěn)定性。儀器間比對(duì)的原始數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。

表1 儀器間新鮮血標(biāo)本比對(duì)原始數(shù)據(jù)

2.2 儀器間新鮮血標(biāo)本比對(duì)相對(duì)偏差

比較相對(duì)偏差與1/2 CLIA'88允許誤差（WBC計(jì)數(shù)為≤±7.50%、RBC計(jì)數(shù)為≤±3.00%，Hb為≤±3.50%、HCT為≤±3.00%、PLT計(jì)數(shù)為≤±12.50%），以超過(guò)80%的標(biāo)本的相對(duì)偏差在1/2 CLIA'88允許誤差范圍內(nèi)為比對(duì)合格，儀器間檢測(cè)結(jié)果具有可比性，一致性良好。儀器間新鮮血標(biāo)本比對(duì)數(shù)據(jù)相對(duì)偏差見(jiàn)表2。

表2 儀器間新鮮血標(biāo)本比對(duì)相對(duì)偏差 %

續(xù)表2 %

2.3 儀器運(yùn)行過(guò)程中新鮮血標(biāo)本比對(duì)結(jié)果

在儀器日常運(yùn)行過(guò)程中的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)所選取的比對(duì)標(biāo)本，及時(shí)評(píng)估儀器運(yùn)行過(guò)程中的性能。應(yīng)用所建立的方法對(duì)所有血液分析儀日常運(yùn)行過(guò)程的比對(duì)結(jié)果進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果顯示，儀器運(yùn)行穩(wěn)定時(shí)，新鮮血標(biāo)本比對(duì)結(jié)果具有可比性。儀器運(yùn)行過(guò)程中比對(duì)的原始數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。

表3 儀器運(yùn)行過(guò)程中新鮮血標(biāo)本比對(duì)結(jié)果

2.4 儀器運(yùn)行過(guò)程中新鮮血標(biāo)本比對(duì)相對(duì)偏差

將比對(duì)數(shù)據(jù)的相對(duì)偏差與1/3 CLIA'88允許誤差（WBC計(jì)數(shù)為≤±5.00%、RBC計(jì)數(shù)為≤±2.00%、Hb為≤±2.30%、HCT為≤±2.00%、PLT計(jì)數(shù)為≤±8.30%）進(jìn)行比較，有超過(guò)80%的比對(duì)數(shù)據(jù)的相對(duì)偏差滿足1/3 CLIA'88允許誤差的標(biāo)準(zhǔn)，儀器運(yùn)行穩(wěn)定。儀器運(yùn)行過(guò)程中新鮮血標(biāo)本比對(duì)相對(duì)偏差見(jiàn)表4。

表4 儀器運(yùn)行過(guò)程中新鮮血標(biāo)本比對(duì)相對(duì)偏差 %

3 討論

隨著血常規(guī)項(xiàng)目檢測(cè)量的逐漸增大，很多醫(yī)院都擁有多臺(tái)血液分析儀，為了減少檢驗(yàn)差異，提高檢測(cè)結(jié)果的一致性和準(zhǔn)確性，IQC是保證血液分析質(zhì)量的必要措施，而使用儀器配套質(zhì)控品是IQC最重要的條件之一。然而配套質(zhì)控品成本高、有效期短，在一定程度上增加了血液分析儀IQC的難度，為確保不同血液分析儀血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果的一致性，建立一個(gè)經(jīng)濟(jì)、便捷、有效的IQC方案非常必要。本研究建立的血液分析儀日常IQC中的新鮮血比對(duì)方案已經(jīng)應(yīng)用了26個(gè)月，通過(guò)不斷地對(duì)方案進(jìn)行改進(jìn)，現(xiàn)已趨于成熟。在方案運(yùn)行過(guò)程中，我們發(fā)現(xiàn)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下幾點(diǎn)：（1）靶機(jī)的選擇，應(yīng)選擇性能良好、規(guī)范化操作、使用配套試劑的血液分析儀，其室間質(zhì)量評(píng)價(jià)、校準(zhǔn)和IQC滿足要求，從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性；（2）新鮮血標(biāo)本比對(duì)的選擇，應(yīng)選擇無(wú)PLT聚集、大PLT、有核RBC、RBC碎片、脂濁等異常提示，檢測(cè)結(jié)果處于正常參考區(qū)間的患者新鮮血常規(guī)標(biāo)本，不建議選擇低值標(biāo)本，因?yàn)榈椭禈?biāo)本測(cè)定結(jié)果可導(dǎo)致相對(duì)偏差偏大，從而影響對(duì)儀器比對(duì)結(jié)果的正確判斷（臨床可接受）；（3）比對(duì)頻次的確定，應(yīng)考慮科室標(biāo)本量和新鮮血穩(wěn)定性這2個(gè)因素，標(biāo)本量大的時(shí)段應(yīng)增加比對(duì)次數(shù)，因此，我們?cè)跇?biāo)本量集中的上午安排了2次比對(duì)；此外，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[2-4]，在室溫（20 ℃～25 ℃）條件下6 h內(nèi)完成標(biāo)本的檢測(cè)可以保證新鮮血標(biāo)本的穩(wěn)定性，因此，我們最先建立了用關(guān)機(jī)前比對(duì)代替關(guān)機(jī)前質(zhì)控的方法，這不僅保證了全天檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，而且節(jié)約了成本；（4）比對(duì)相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)的建立，建立實(shí)驗(yàn)室自身的IQC新鮮血比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)較直接采用某個(gè)標(biāo)準(zhǔn)更能反映實(shí)驗(yàn)室儀器的質(zhì)量，我們?cè)诜桨附⒅鮾H將1/2 CLIA'88允許誤差作為儀器間比對(duì)的相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)，但是ISO 15189評(píng)審專家建議增加儀器運(yùn)行過(guò)程中的比對(duì)，于是我們首次建立了將儀器運(yùn)行過(guò)程中比對(duì)用于日常IQC的方法，其相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)為1/3 CLIA'88允許誤差；（5）比對(duì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本量，應(yīng)盡量選擇血量足夠（約2 mL）的標(biāo)本，如果比對(duì)的儀器數(shù)量多，可以選擇同血型檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的數(shù)個(gè)標(biāo)本配置成新鮮血比對(duì)標(biāo)本[5]；（6）比對(duì)結(jié)果觀察方式的選用，本研究在LIS中建立了每日新鮮血比對(duì)完成IQC的功能，自動(dòng)完成比對(duì)數(shù)據(jù)采集、計(jì)算和超過(guò)相對(duì)偏差標(biāo)準(zhǔn)的提示，克服了人工記錄數(shù)據(jù)和計(jì)算的不便，可實(shí)時(shí)監(jiān)控新鮮血比對(duì)標(biāo)本的檢測(cè)偏差，實(shí)時(shí)觀察、打印，從而便利地實(shí)施新鮮血比對(duì)的IQC。

本研究所建立的方案并不是一成不變的，它可以隨著實(shí)際條件的改變，不斷地進(jìn)行完善，如當(dāng)參加比對(duì)的血液分析儀多于10臺(tái)時(shí)，建議采用多臺(tái)儀器的平均值作為靶值，而不是選擇靶機(jī)檢測(cè)值作為靶值，這樣更能反映日常工作的真實(shí)水平，使儀器間相對(duì)偏差處于可接受范圍。

總之，新鮮血比對(duì)標(biāo)本無(wú)基質(zhì)效應(yīng)，將其應(yīng)用于血液分析儀IQC，不僅降低了IQC的成本，更保證了實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同儀器間檢測(cè)結(jié)果的一致性和可比性，還可有效監(jiān)測(cè)儀器運(yùn)行過(guò)程中的穩(wěn)定性，為實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證奠定了基礎(chǔ)，值得在臨床實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。