不同植物提取物替代抗生素對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化功能及脛部著色的影響

■吳大偉 潘金露 朱昊鵬 陳 健 盧永勝

（和盛食品集團(tuán)有限公司，江蘇泰州225504）

近年來(lái)，由于抗生素殘留和細(xì)菌耐藥性問(wèn)題日益嚴(yán)重，為保障動(dòng)物源性食品安全和公共衛(wèi)生安全，各國(guó)紛紛頒布了相關(guān)法律法規(guī)以控制細(xì)菌耐藥性。我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第194號(hào)公告規(guī)定，自2020年1月1日起，退出除中藥外的所有促生長(zhǎng)類藥物飼料添加劑的使用。作為抗生素重要替代物之一的植物提取物飼料添加劑，在動(dòng)物飼料生產(chǎn)和畜禽養(yǎng)殖中備受關(guān)注。植物提取物飼料添加劑是指從植物中提取（非化工合成），活性成分明確、含量穩(wěn)定并且可以測(cè)定，對(duì)動(dòng)物和人類沒(méi)有任何毒副作用，并已通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)證明可以提高動(dòng)物生產(chǎn)性能的飼料添加劑[1]。植物提取物中常見(jiàn)的活性物質(zhì)有單寧酸、綠原酸、黃酮類、植物精油、生物堿、黃芩苷、皂苷和多糖等，這些活性物質(zhì)在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)具有調(diào)節(jié)采食、抗氧化、刺激內(nèi)源消化酶分泌及抗菌等多種生理功能[2-5]。黃羽肉雞是我國(guó)特有的地方品種肉雞，因其皮薄、肌間脂肪適量、肉味鮮美、風(fēng)味獨(dú)特等特點(diǎn)而深受廣大消費(fèi)者青睞。據(jù)統(tǒng)計(jì)，2019年我國(guó)黃羽肉雞出欄量已超45億只，比2018年同期增長(zhǎng)約15%，約占我國(guó)肉雞總上市量的一半。目前有關(guān)植物提取物在豬、白羽肉雞上的應(yīng)用研究較多[6-8]，但在黃羽肉雞上的報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)以黃羽肉雞為研究對(duì)象，研究不同植物提取物替代阿維拉霉素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、抗氧化功能及脛部著色的影響，以期為篩選黃羽肉雞日糧中合理的抗生素替代品提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用阿維拉霉素（10%含量）由禮藍(lán)(上海)動(dòng)物保健有限公司提供；水解單寧酸（含水解單寧酸50%）由意大利某公司提供；博落回提取物（含血根堿0.15%）由湖南某公司提供；山花黃芩提取物（含綠原酸2.4 mg/g，黃芩苷24 mg/g）由北京某公司提供；止痢草提取物（含香芹酚≥2.75%，百里香酚≥0.075%）由廣東某公司提供。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與日糧

試驗(yàn)在和盛食品集團(tuán)有限公司研發(fā)農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行，試驗(yàn)雞苗由和盛集團(tuán)泰州分公司朱宣種雞場(chǎng)提供。試驗(yàn)選取健康1日齡黃羽肉雞（矮腳黃）公雛雞2 400只，隨機(jī)分為6組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100只雞。6組分別為空白對(duì)照組、抗生素組即阿維拉霉素添加組和4組植物提取物添加組。試驗(yàn)設(shè)計(jì)及處理見(jiàn)表1。飼養(yǎng)時(shí)間為79 d，其中1～15日齡飼喂開(kāi)口料；16～35日齡飼喂小雞料；36～60日齡飼喂大雞料；61～79日齡飼喂上市料?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及處理（mg/kg）

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

肉雞在密閉雞舍內(nèi)地面平養(yǎng)，自由采食和飲水，24 h光照，第1周室溫控制在32～34℃，然后每周降低2～3℃，飼養(yǎng)管理和免疫程序參照和盛集團(tuán)養(yǎng)戶管理部作業(yè)指導(dǎo)書進(jìn)行。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

在試驗(yàn)第35 d和79 d，進(jìn)行全群空腹稱重（供水禁食12 h）。記錄試驗(yàn)期間采食量，計(jì)算1～35日齡、36～79日齡、1～79日齡階段的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（FCR）及死淘率。

1.4.2 抗氧化指標(biāo)

在試驗(yàn)第35 d時(shí)，每重復(fù)中隨機(jī)選2只體重相近的肉雞進(jìn)行采樣，采樣前空腹12 h。肉雞稱重后從頸動(dòng)脈處放血，用干凈離心管收集血液，待析出血清后，4℃條件下離心10 min（4 000 r/min），取血清分裝，并置于-20℃下保存。待肉雞死亡后立即解剖分離肝臟，在同一側(cè)相同部位取部分肝臟，于-20℃下保存。準(zhǔn)確稱取約0.3 g肝臟，加入9倍體積（V/W）的生理鹽水后在冰浴中勻漿至無(wú)明顯塊狀物，將勻漿液在4℃條件下離心15 min（4 000 r/min），取上清液分裝，-20℃下保存。

測(cè)定肉雞血清和肝臟總超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量，測(cè)定使用試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.4.3 肉雞脛部黃度值的測(cè)定

試驗(yàn)第79 d每重復(fù)隨機(jī)選取5只（每組20只）體重相近的公雞，用羅氏比色扇對(duì)肉雞脛部黃度進(jìn)行比色評(píng)分，每組測(cè)定均由同一操作人員進(jìn)行，每只雞均測(cè)定右側(cè)脛部同一部位。

1.5 統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2019初步整理后，采用SPSS 22.0軟件中單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，Duncan’s法進(jìn)行多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SEM）”表示，設(shè)定P＜0.05為差異顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同植物提取物對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響（見(jiàn)表3）

表3 不同植物提取物替代抗生素對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表3可見(jiàn)，MCE、SMF、OEO組肉雞35日齡體重顯著低于NC、ANT及TA組（P＜0.05），同時(shí)OEO組35日齡體重亦顯著低于SMF組（P＜0.05），NC、ANT及TA組間35日齡體重?zé)o顯著差異（P＞0.05），各組間79日齡體重差異均不顯著（P＞0.05）；1～35日齡，MCE、SMF、OEO組肉雞ADG、ADFI均顯著低于NC、ANT組及TA組（P＜0.05），且OEO組肉雞ADG、ADFI亦顯著低于SMF組（P＜0.05），與NC組相比，ANT、TA、MCE、SMF及OEO組肉雞FCR分別降低3.79%、1.90%、3.32%、3.79%及2.84%（P＜0.05）；36～79日齡，各組間ADG、ADFI及死淘率差異均不顯著（P＞0.05），ANT和OEO組FCR較NC組分別降低2.00%（P＞0.05）和3.67%（P＜0.05）；1～79日齡，OEO組ADFI較NC組顯著降低（P＜0.05），與NC組相比，ANT、TA、MCE、SMF及OEO組肉雞FCR分別降低2.91%（P＜0.05）、1.10%（P＞0.05）、0.73%（P＞0.05）、1.10%（P＞0.05）、2.91%（P＜0.05）。

2.2 不同植物提取物對(duì)黃羽肉雞血清和肝臟抗氧化功能的影響(見(jiàn)表4)

表4 不同植物提取物對(duì)35日齡黃羽肉雞血清和肝臟抗氧化功能的影響

從表4數(shù)據(jù)可以看出，各組間肉雞血清SOD、GSH-Px活性及MDA含量差異均不顯著（P＞0.05），TA組肉雞血清CAT活性較NC、ANT及OEO組顯著提高（P＜0.05）；不同植物提取物對(duì)肉雞肝臟SOD、GSHPx、CAT活性及MDA含量均無(wú)明顯影響（P＞0.05）。

2.3 不同植物提取物對(duì)黃羽肉雞脛部著色的影響（見(jiàn)圖1）

圖1 不同植物提取物對(duì)黃羽肉雞脛部著色的影響

圖1可見(jiàn)，與NC組相比，ANT、TA、MCE及SMF對(duì)黃羽肉雞脛部著色均無(wú)顯著影響（P＞0.05），OEO組肉雞脛部黃度值明顯低于NC組（P＜0.05），但與其他各組差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 植物提取物對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

單寧酸是一種植物源水溶性多酚化合物，由于能夠結(jié)合蛋白質(zhì)并抑制消化酶活性，降低動(dòng)物機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的消化和吸收，通常被認(rèn)為是一種抗?fàn)I養(yǎng)因子。但日糧中單寧的來(lái)源、含量以及結(jié)構(gòu)均會(huì)影響其營(yíng)養(yǎng)和抗?fàn)I養(yǎng)特性[9]。根據(jù)結(jié)構(gòu)與活性可將單寧酸分為2種類型，即水解單寧酸和縮合單寧酸。縮合單寧酸是單胃動(dòng)物部分植物性飼料原料中存在的抗?fàn)I養(yǎng)因子，而水解單寧酸可作為飼料添加劑應(yīng)用到畜禽日糧中，其水解產(chǎn)物沒(méi)食子酸和葡萄糖對(duì)單胃動(dòng)物的生長(zhǎng)性能和腸道健康具有改善作用[10]。Liu等[11]研究證實(shí)，日糧添加1 000 mg/kg栗木單寧，對(duì)肉雞全期生長(zhǎng)性能無(wú)影響。這與Jamroz等[12]的研究結(jié)果一致，其在日糧中添加250 mg/kg或500 mg/kg栗木單寧對(duì)肉雞增重和飼料轉(zhuǎn)化率均無(wú)明顯影響。本試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，日糧添加TA對(duì)黃羽肉雞全期生長(zhǎng)性能無(wú)影響，與以往研究結(jié)果一致。另外，本試驗(yàn)中肉雞前期添加TA可顯著改善FCR，這與Tonda等[13]的研究結(jié)果相似，其在接種球蟲(chóng)疫苗的肉雞日糧中添加500 mg/kg（以有效成分計(jì)100 mg/kg）單寧提取物顯著改善1～21日齡FCR。試驗(yàn)雞群在第3 d全群免疫球蟲(chóng)疫苗，肉雞生長(zhǎng)前期胃腸道發(fā)育尚不健全，接種球蟲(chóng)疫苗不可避免地會(huì)對(duì)腸道造成損傷，因此水解單寧酸對(duì)肉雞生長(zhǎng)前期FCR的改善作用可能歸因于其不僅減輕球蟲(chóng)疫苗接種造成的腸道損傷，還能幫助機(jī)體建立潛在免疫力并增強(qiáng)抗病力[13-14]。亦有研究表明，日糧添加水解單寧酸可通過(guò)降低肉雞腸蠕動(dòng)和食糜通過(guò)小腸的速率來(lái)提高飼料轉(zhuǎn)化率[15]。

SMF是將山銀花和黃芩提取物按照一定比例組合而成，主要活性成分為綠原酸和黃芩苷。MCE是從博落回果莢中提取的生物堿制劑，其主要生物活性成分為異喹啉類生物堿，包括血根堿、白屈菜紅堿。SMF和MCE同屬中藥類植物提取物，是我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)使用的綠色飼料添加劑，二者均具有抑菌、抗炎、抗氧化、增強(qiáng)免疫力等功能[16-17]。梁英等[18]研究表明，在日糧中添加不同水平的黃芩黃酮對(duì)肉雞體重、日增重、飼料轉(zhuǎn)化率均無(wú)明顯影響。呂慧源[19]等報(bào)道，添加500 mg/kg SMF對(duì)肉雞各階段ADG、ADFI及FCR均無(wú)顯著影響，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。最近的研究報(bào)道，日糧添加150 mg/kg MCE對(duì)1～15日齡白羽肉雞采食量和增重?zé)o明顯影響，但顯著降低了FCR[20]。本試驗(yàn)中日糧添加SMF和MCE均顯著降低肉雞前期FCR，對(duì)后期亦有改善作用，與Liu等[17]的研究結(jié)果一致。進(jìn)一步的試驗(yàn)證實(shí)，MCE通過(guò)提高盲腸有益菌數(shù)量和短鏈脂肪酸濃度、促進(jìn)腸道發(fā)育、提升腸道屏障功能等途徑，改善黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率[21]。另外，本試驗(yàn)前期添加SMF和MCE對(duì)肉雞采食量均有明顯抑制作用，進(jìn)而對(duì)增重造成了負(fù)面影響，且在肉雞生長(zhǎng)后期并未得到補(bǔ)償。綜合以往研究和本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧添加SMF和MCE對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)無(wú)促進(jìn)作用，但飼料轉(zhuǎn)化率得到一定改善。

止痢草又名牛至、土香薷、小葉薄荷，含有30多種抗菌物質(zhì)，是一種潛在的天然抗生素和藥物生長(zhǎng)促進(jìn)劑。香芹酚和百里香酚為止痢草提取物的主要活性成分，具有多種生物特性，如抗氧化性、抗菌性、抗炎、促消化、調(diào)節(jié)免疫等[22]。較早的一項(xiàng)研究表明[23]，日糧添加200 mg/kg香芹酚明顯降低了1～28日齡肉雞的ADFI、ADG及FCR；而添加200 mg/kg百里香酚則對(duì)生產(chǎn)性能無(wú)影響。與對(duì)照組相比，日糧分別添加125、250、500 mg/kg的OEO均不同程度降低了白羽肉雞1～21日齡ADFI和ADG，但差異不顯著[24]。日糧分別添加50、100 mg/kg和200 mg/kg植物提取物（牛至和茴香復(fù)合物）均不同程度的抑制了白羽肉雞全期的ADFI，其中100 mg/kg和200 mg/kg組FCR顯著降低[25]。本試驗(yàn)中黃羽肉雞日糧添加OEO對(duì)促生長(zhǎng)無(wú)益，但顯著降低全期ADFI和FCR，這與以往報(bào)道相似，說(shuō)明OEO對(duì)肉雞采食量確實(shí)存在一定的抑制作用，但同時(shí)也改善了飼料轉(zhuǎn)化率。OEO對(duì)采食量的抑制作用可能是由于植物提取物中某些刺激性成分影響了飼料的適口性，進(jìn)而導(dǎo)致采食量的降低[26]。另一方面，植物提取物通過(guò)刺激腸道消化酶的分泌、增加腸道絨毛吸收面積來(lái)提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收，進(jìn)而改善飼料轉(zhuǎn)化率[27-28]。有關(guān)植物提取物對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能影響的研究結(jié)果并不完全一致，這可能歸因于不同植物提取物的組分、有效成分濃度以及生物活性的差異。另外，肉雞對(duì)植物提取物的響應(yīng)還受到其他因素的影響，例如肉雞品種、日齡、衛(wèi)生及環(huán)境等因素。

3.2 植物提取物對(duì)黃羽肉雞抗氧化功能的影響

植物提取物中含有的多酚類化合物具有抗氧化作用，是因?yàn)槠浞踊倌軋F(tuán)具有氧化還原特性，可以作為還原劑、供氫體來(lái)淬滅單氧自由基[29]。在動(dòng)物體內(nèi)，植物提取物通過(guò)提高抗氧化酶的活力，增加抗氧化物質(zhì)的含量，減少過(guò)氧化物的產(chǎn)生來(lái)提高動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力[1]。水解單寧酸分子中的鄰位酚羥基是一種優(yōu)良的供氫體，可直接通過(guò)調(diào)控類似核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)等氧化還原敏感元件的信號(hào)通路來(lái)上調(diào)體內(nèi)抗氧化酶活性及表達(dá)量，進(jìn)而降低機(jī)體氧化損傷[15]。最新的一項(xiàng)研究表明，日糧添加TA對(duì)肝臟中CAT活性無(wú)明顯影響，但顯著提高了血清中CAT活性[10]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。Liu等[11]研究證實(shí)，日糧添加1 000 mg/kg單寧酸（單寧含量75%以上）顯著提高肉雞血清、胸肌及腿肌中SOD、GSH-Px活性，但對(duì)MDA含量無(wú)影響。其另一項(xiàng)試驗(yàn)表明，添加2 000 mg/kg單寧酸可明顯提高熱應(yīng)激狀態(tài)下肉雞回腸黏膜SOD活性，并降低了MDA含量[30]。本試驗(yàn)中TA對(duì)肉雞血清和肝臟SOD、GSH-Px活性及MAD含量無(wú)影響，與以往研究結(jié)果不完全一致，其差異性可能是本試驗(yàn)中TA的添加水平較低所致。另外，本試驗(yàn)中日糧添加MCE、SMF及OEO對(duì)肉雞血清和肝臟抗氧化酶活性和MDA含量均無(wú)顯著影響。研究表明，日糧添加125 mg/kg和250 mg/kg山銀花和黃芩苷提取物對(duì)肉雞血清SOD、CAT、GSH-Px酶活及MDA含量均無(wú)明顯影響，而500 mg/kg添加組顯著提高了42日齡肉雞血清CAT和GSH-Px酶活并降低了MDA含量[19]。提示，植物提取物對(duì)肉雞抗氧化狀態(tài)研究結(jié)果的差異性，不僅與提取物種類、有效成分含量相關(guān)，還與動(dòng)物類別、添加量及其使用時(shí)間密切相關(guān)。

3.3 植物提取物對(duì)黃羽肉雞脛部著色的影響

受傳統(tǒng)消費(fèi)習(xí)慣的影響，黃羽肉雞脛部和皮膚的色度成為衡量黃羽肉雞商品質(zhì)量的重要指標(biāo)，直接影響其市場(chǎng)價(jià)格和需求。肉雞自身不能合成起主要著色作用的葉黃素類物質(zhì)，必須從體外攝取，因此，實(shí)際生產(chǎn)中會(huì)在飼料中添加天然葉黃素來(lái)提高肉雞皮膚、脛部、喙等部位的色澤。在本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，肉雞后期日糧添加150 mg/kg OEO明顯降低了脛部黃度值。有關(guān)飼料中添加植物提取物對(duì)黃羽肉雞脛部著色效果的報(bào)道較少，本試驗(yàn)中OEO組肉雞脛部黃度的降低可能是由于OEO抑制了肉雞的采食量，肉雞所攝入的葉黃素絕對(duì)量較少所致。提示，在黃羽肉雞日糧中應(yīng)用植物提取物作為抗生素替代物時(shí)，還應(yīng)關(guān)注肉雞采食量及葉黃素的絕對(duì)攝入量。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加抗生素或不同植物提取物對(duì)黃羽肉雞均沒(méi)有明顯促生長(zhǎng)作用，但對(duì)FCR具有不同程度的改善。