白肉靈芝化學(xué)成分及體外抗氧化活性分析

潘 俊，劉秀嶶，石萍萍，周繼偉，曲 媛，田 浩, ，李 宏,

(1.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，云南昆明 650223；2.昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650504)

靈芝(Ganoderma lucidum)屬多孔菌科靈芝屬大型真菌，為我國名貴中藥材[1]。靈芝品種豐富，目前已鑒定的有80余種，其中紫芝Ganoderma sinenseZhao，Xu et Zhang和赤芝Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.) Karst.收錄于2015版《中國藥典》，具有補(bǔ)氣安神、止咳平喘的功效。靈芝產(chǎn)地分布于全國各地，包括浙江省、山東省、黑龍江省、云南省等地。靈芝主要活性成分為多糖、三萜等[2]。除此之外，靈芝還含有蛋白質(zhì)、氨基酸、多肽等成分[3-4]?，F(xiàn)代藥理研究表明，靈芝具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、延緩衰老、保護(hù)肝臟、調(diào)節(jié)心血管等作用[5-9]。

白肉靈芝(Ganoderma leucocontextum)作為我國西南地區(qū)靈芝屬的一個重要種類，主要分布于云南、西藏等地，已經(jīng)實(shí)現(xiàn)人工栽培。目前，對于紫芝、赤芝的研究較為廣泛、深入，而對于白肉靈芝的研究較少，主要集中于生物學(xué)鑒定[10]、化學(xué)成分[11]及神經(jīng)保護(hù)作用[12]等研究。Zhao等[11]從白肉靈芝子實(shí)體中分離得到18個三萜類化合物，但這些成分均為微量成分，未對白肉靈芝的主要成分進(jìn)行研究。據(jù)報道，靈芝具有顯著的延緩衰老的作用，具有潛在的抗氧化應(yīng)激的作用[13]，但白肉靈芝抗氧化作用尚屬空白。

因此，本研究以白肉靈芝為對象，赤芝、紫芝為參考，對比分析白肉靈芝中化學(xué)成分及抗氧化活性，為白肉靈芝的綜合開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

白肉靈芝、赤芝及紫芝樣品 采自云南，樣品來源見表1，白肉靈芝、赤芝及紫芝樣品分別經(jīng)云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所張金渝研究員鑒定為多孔菌科真菌白肉靈芝Ganoderma leucocontextum、赤芝Ganoderma lucidum(Leyss. ex Fr.) Karst.、紫芝Ganoderma sinenseZhao, Xu et Zhang的干燥子實(shí)體；葡萄糖、齊墩果酸、靈芝酸A、人參皂苷Rb1純度98%以上 上海金穗生物科技有限公司；1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 分析純，上海麥克林生化科技有限公司；蒽酮、冰醋酸、香草醛、磷酸、硫酸亞鐵、雙氧水、水楊酸鈉 分析純，上海阿拉丁生化科技股份有限公司；乙腈 色譜純，美國Sigma公司。

表1 樣品的來源信息Table 1 The source of samples

UPT-I-20T優(yōu)普系列超純水器 成都超純科技有限公司；AX124ZH型電子分析天平 上海奧豪斯儀器有限公司；BL10-250A超聲波清洗機(jī) 上海比朗儀器有限公司；島津LC-20AB高效液相色譜儀 日本島津公司；TD25-WS臺式低速離心機(jī) 湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司；T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計 云南悅分環(huán)境檢測有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 靈芝中營養(yǎng)成分含量測定 水分含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.3-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定》[14]；灰分含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.4-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測定》[15]；粗蛋白含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.5-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》[16]；粗脂肪含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.6-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測定》[17]；總淀粉含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.9-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中淀粉的測定》[18]；粗纖維含量測定參照國標(biāo)《GB/T 5009.10-2003植物類食品中粗纖維的測定》[19]；氨基酸含量測定參照國標(biāo)《GB 5009.124-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中氨基酸的測定》[20]；礦質(zhì)元素鋅、鐵、錳、鎂、鈣、銅的測定參照國標(biāo)《GB 5009.268-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中多元素的測定》[21]。

1.2.2 靈芝中多糖含量測定 多糖含量測定參照《中華人民共和國藥典 2015年版 一部》中靈芝多糖的測定方法進(jìn)行測定[22]。按干品計算，含靈芝多糖以無水葡萄糖(C6H12O6)計。

1.2.3 靈芝中三萜及甾醇含量測定 三萜及甾醇含量測定參照《中華人民共和國藥典 2015年版 一部》中靈芝三萜及甾醇的測定方法進(jìn)行測定。按干品計算，含三萜及甾醇以齊墩果酸(C30H48O3)計[22]。

1.2.4 靈芝中總皂苷含量測定 總皂苷含量測定參考楊道強(qiáng)等[23]的測定方法。取人參皂苷Rb1適量，精密稱定，加50%乙醇制成濃度為0.2 mg/mL的人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取0.2、0.6、1.0、1.4、1.8 mL人參皂苷Rb1標(biāo)準(zhǔn)液至試管，水浴揮干溶劑，加入新配制的5%香草醛-冰醋酸0.2 mL，高氯酸0.8 mL，搖勻，于70 ℃水浴加熱20 min，取出置冰浴5 min，加入冰醋酸5 mL搖勻，以相應(yīng)試劑為空白，照紫外-可見分光光度法，在548 nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，對照品含量為橫坐標(biāo)。得到回歸方程Y=0.0039x-0.0044(R2=0.9995)。測定樣品時，取適量待測溶液1 mL，加入50%乙醇2 mL，取0.2 mL樣品溶液于試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“揮干”起，同法操作，測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Rb1的含量，計算，即得。

1.2.5 HPLC法測定靈芝中靈芝酸A含量 靈芝酸A的測定參考周丹英等[24]的測定方法。色譜條件：色譜柱(YMC-Tridrt C18，4.6 mm×250 mm，5 μm)，柱溫35 °C，流速1 mL/min，檢測波長252 nm，進(jìn)樣量20 μL。流動相A-0.05%磷酸水溶液，B-乙腈。梯度洗 脫 程 序：0～10 min，5%～20%B；10～15 min，20%～30%B；15～35 min，30%～40%B；35～55 min，40%～60%B；55～80 min，60%～80%B。取 靈 芝 酸A標(biāo)準(zhǔn)品5 mg，精密稱定，加甲醇配制成5 mg/mL靈芝酸A標(biāo)準(zhǔn)液。分別精密量取不同濃度靈芝酸A對照品溶液20 μL進(jìn)樣，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。靈芝酸A的回歸方程為Y=6000000X-10097(R2=0.9991)，靈芝酸A在10～500 μg/mL間與峰面積具有良好線性關(guān)系。取靈芝樣品粉末0.5 g于10 mL具塞錐形瓶中，加入5 mL甲醇，超聲提取30 min，離心，取上清液，濾渣再提取，合并上清液，并轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻，取續(xù)濾液，0.45 μL微孔濾膜濾過，作為供試液。精密量取供試品溶液20 μL進(jìn)樣測定，外標(biāo)法計算靈芝酸A的含量。

1.2.6 靈芝提取物抗氧化活性的測定 稱定不同品種不同產(chǎn)地靈芝樣品10 g，加入乙醇200 mL，超聲處理30 min，離心，濾渣再次提取，合并濾液，減壓濃縮干燥后，得靈芝甲醇提取物。分別將不同靈芝甲醇提取物、VC配成濃度為0.05、0.25、0.5、1.25、2.5和5 mg/mL 6個濃度的溶液進(jìn)行DPPH自由基及羥基自由基清除能力的測定。

分別取不同濃度靈芝、VC樣品2 mL，與0.1 mmol/L DPPH甲醇溶液按1∶1的體積比例混合均勻；室溫避光反應(yīng)30 min，照紫外-可見分光光度法，于517 nm波長下測定吸光值[25-26]，記為A樣品。空白組取2 mL甲醇加入2 mL 0.1 mmol/L DPPH甲醇溶液，以同樣方式操作得到的吸光值，記為A空白；本底組取2 mL待測品，加入2 mL甲醇溶液，以同樣方式操作得到的吸光值，記為A本底。DPPH自由基清除率公式如下：

DPPH自由基清除率(%)=(A空白-(A樣品-A本底))/A空白×100

式中：A空白表示空白組的吸光值；A樣品為樣品組的吸光值；A本底為本底組的吸光值。

分別取2 mL待測樣品與1.4 mL 6 mmol/L的H2O2混勻，再將0.6 mL 20 mmol/L水楊酸鈉和2 mL 1.5 mmol/L硫酸亞鐵加入其中，振蕩均勻，于37 ℃水浴反應(yīng)1 h。按照紫外-可見分光光度法，在562 nm測量其吸光值[27]，記為A樣品?？瞻捉M用等量的超純水代替樣品，以同樣方式操作得到的吸光值，記為A空白；本底組用等量的超純水代替H2O2，以同樣方式操作得到的吸光值，記為A本底。羥基自由基清除能力具體計算公式如下：

·OH清除能力(%)=(A空白-(A樣品-A本底))/A空白×100

式中：A空白表示空白組的吸光值；A樣品為樣品組的吸光值；A本底為本底組的吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS Statistics 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，每組重復(fù)3次，結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS Statistics 19.0進(jìn)行方差分析，P<0.05表明差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 白肉靈芝的營養(yǎng)成分分析

靈芝為食藥用真菌，不同品種靈芝營養(yǎng)成分和活性成分之間有較大的差異，可根據(jù)靈芝子實(shí)體中的主要活性成分和營養(yǎng)成分含量不同對其進(jìn)行全面的功能評價[28]。由表2可以看出，白肉靈芝的水分、灰分、粗纖維、粗脂肪、總淀粉的含量分別為4.37%～6.68%、2.50%～2.78%、14.30%～20.05%、4.25%～6.49%、1.65%～2.03%，與紫芝、赤芝相似。白肉靈芝中粗蛋白的含量為18.02%～19.02%，顯著高于赤芝(8.96%)、紫芝(13.47%)(P<0.05)，且與一些常見蘑菇中粗蛋白含量相當(dāng)，如香菇20.3%、杏鮑菇21.44%、美味蘑菇22.75%[29-30]。白肉靈芝中粗纖維的含量雖與紫芝、赤芝相似，但明顯高于美味蘑菇6.68%、香菇4.5%，略低于杏鮑菇34.03%[31-32]。不同產(chǎn)地的白肉靈芝中水分、粗纖維、粗脂肪、總淀粉含量差異顯著(P<0.05)，其中楚雄地區(qū)白肉靈芝的水分、灰分含量最低，分別為4.37%、2.50%，粗蛋白、粗纖維、粗脂肪、總淀粉含量最高，分別為19.02%、20.05%、6.49%、2.03%。因此，白肉靈芝具有高蛋白、高纖維的特性，是一種營養(yǎng)均衡的物質(zhì)，可以應(yīng)用于食品產(chǎn)品開發(fā)領(lǐng)域。

表2 白肉靈芝的一般營養(yǎng)成分含量(±s ，n=3)Table 2 Nutritional components of G. leucocontextum (±s , n=3)

表2 白肉靈芝的一般營養(yǎng)成分含量(±s ，n=3)Table 2 Nutritional components of G. leucocontextum (±s , n=3)

注：不同小寫字母表示不同品種不同產(chǎn)地靈芝間存在顯著差異(P<0.05)；表3～表5同。

編號 水分(%) 灰分(%) 粗蛋白(%) 粗纖維(%) 粗脂肪(%) 總淀粉(%)GLC-1 5.08±0.14b 2.78±0.08b 18.80±0.77a 17.02±0.68c 4.25±0.12c 1.79±0.06b GLC-2 4.37±0.16c 2.50±0.09c 19.02±0.68a 20.05±0.53b 6.49±0.08a 2.03±0.05a GLC-3 6.68±0.42a 2.68±0.06c 18.02±0.48a 14.30±0.28d 5.24±0.19b 1.65±0.03c GL-1 5.78±0.15a 3.78±0.05a 8.96±0.67c 22.47±0.78a 6.78±0.24a 1.85±0.02b GS-1 4.65±0.19b 2.96±0.06b 13.47±0.42b 15.48±0.44d 3.25±0.15d 1.96±0.05a

2.2 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量分析

靈芝化學(xué)成分復(fù)雜，其中多糖類、三萜類物質(zhì)是靈芝的主要活性成分。云南白肉靈芝中多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量如表3所示。從表3可以看出，白肉靈芝中三萜及靈芝酸A含量為1.22%～1.40%、0.069%～0.084%，顯著高于紫芝、赤芝(P<0.05)，與文獻(xiàn)報道一致[33-34]。楚雄和怒江地區(qū)的白肉靈芝多糖含量顯著高于其它靈芝(P<0.05)。而白肉靈芝中總皂苷含量與紫芝、赤芝差別不大。云南三個產(chǎn)地白肉靈芝三萜、靈芝酸A含量差異不顯著(P>0.05)，其中怒江地區(qū)的白肉靈芝多糖含量最高，為1.42%；楚雄地區(qū)的總皂苷、三萜及靈芝酸A含量最高，分別為2.83%、1.40%、0.084%。以上結(jié)果可以看出，云南三個產(chǎn)地白肉靈芝中多糖及總皂苷含量有一定差異，而三萜、靈芝酸A含量差異不大，這可能是栽培方式及多糖、三萜及皂苷的生物合成代謝途徑不同所致[35]。

表3 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量(±s ，n=3)Table 3 The contents of polysaccharides, total saponins, triterpenes and ganoderic acid A of G. leucocontextum (±s , n=3)

表3 白肉靈芝的多糖、總皂苷、三萜及靈芝酸A含量(±s ，n=3)Table 3 The contents of polysaccharides, total saponins, triterpenes and ganoderic acid A of G. leucocontextum (±s , n=3)

編號 多糖(%) 總皂苷(%) 三萜(%) 靈芝酸A(%)GLC-1 0.99±0.02b 2.72±0.63a 1.22±0.18a 0.069±0.02a GLC-2 1.24±0.08a 2.83±0.57a 1.40±0.09a 0.084±0.03a GLC-3 1.42±0.04a 2.30±0.28b 1.25±0.07a 0.072±0.02a GL-1 0.90±0.06b 2.84±0.61a 1.01±0.07b 0.054±0.04b GS-1 0.12±0.05c 2.19±0.21b 0.75±0.07c 0.032±0.03c

2.3 白肉靈芝的氨基酸成分分析

不同產(chǎn)地白肉靈芝中氨基酸含量如表4所示。由表4可以看出，不同產(chǎn)地的白肉靈芝中共檢出17種氨基酸，總氨基酸含量為113.61～163.51 mg/g，顯著高于赤芝76.45 mg/g、紫芝76.11 mg/g(P<0.05)。其中谷氨酸含量最高，變幅為16.12～22.62 mg/g，顯著高于赤芝4.82 mg/g、紫芝8.64 mg/g(P<0.05)；其次為天門冬氨酸，變幅為12.02～15.61 mg/g，顯著高于赤芝4.81 mg/g、紫芝6.51 mg/g(P<0.05)；含量最低的是胱氨酸和蛋氨酸，分別為0.68～1.25 mg/g、1.32～5.26 mg/g。3個產(chǎn)地的白肉靈芝中總氨基酸含量最高的是怒江地區(qū)，為163.51 mg/g，其含量為赤芝和紫芝的兩倍。不同產(chǎn)地的白肉靈芝中必需氨基酸與總氨基酸比值為0.34～0.41，與紫芝和赤芝比例相似，接近于FAO/WHO所提出的0.40的比值[36]，3個產(chǎn)地的白肉靈芝之間必需氨基酸與總氨基酸比值的差異不顯著，說明白肉靈芝中必需氨基酸組成比例相對均衡。

表4 白肉靈芝的氨基酸含量(±s ，n=3)Table 4 Amino acids contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

表4 白肉靈芝的氨基酸含量(±s ，n=3)Table 4 Amino acids contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

注：*為必需氨基酸。

氨基酸含量(mg/g)GLC-1 GLC-2 GLC-3 GL-1 GS-1天門冬氨酸 12.02±0.54b 14.92±1.45a 15.61±0.99a 4.81±0.59d 6.51±0.37c蘇氨酸* 5.82±0.24b 7.43±0.98a 7.84±0.36a 3.79±0.16c 4.03±0.26c絲氨酸 5.73±0.67c 7.28±0.68b 11.91±0.45a 5.45±0.49c 3.62±0.54d谷氨酸 16.12±1.57c 20.41±0.79b 22.62±0.68a 4.82±0.29e 8.64±0.48d甘氨酸 6.23±0.46b 7.73±0.85a 5.94±0.47b 3.53±0.38c 3.41±0.32c丙氨酸 7.87±0.35c 9.72±0.47b 11.38±0.35a 7.25±0.46c 4.75±0.27d胱氨酸 1.13±0.09a 1.25±0.58a 0.68±0.04b 0.48±0.05c 0.59±0.02b纈氨酸* 7.48±0.86b 8.21±0.37b 10.82±0.46a 6.71±0.77b 4.51±0.19c蛋氨酸* 1.32±0.36b 1.58±0.57b 5.26±0.79a 0.82±0.04c 0.81±0.06c異亮氨酸* 5.07±0.28c 5.73±0.68c 8.22±0.27b 3.71±0.36d 14.52±0.98a亮氨酸* 8.64±0.47c 10.17±0.25b 14.16±0.87a 5.79±0.26d 5.82±0.34d酪氨酸 2.34±0.24c 2.52±0.35c 6.94±0.45a 4.61±0.38b 3.61±0.28b苯丙氨酸* 5.27±0.25c 6.56±0.17b 8.98±0.26a 4.44±0.36d 3.62±0.88d組氨酸 8.32±0.35b 14.06±1.57a 5.16±0.37c 7.41±0.58b 1.82±0.36d賴氨酸* 6.51±0.32c 8.13±0.26b 11.52±0.27a 3.74±0.84d 3.61±0.26d精氨酸 7.75±0.45c 8.83±0.57b 10.44±0.19a 7.22±0.48c 3.62±0.57d脯氨酸 5.54±0.87b 6.69±0.36a 6.03±0.38a 1.87±0.28c 2.62±0.09c必需氨基酸總量 40.11±0.34c 47.81±0.51b 66.80±0.48a 29.00±0.33e 36.92±0.35d非必需氨基酸總量 73.05±0.56c 93.41±0.77b 96.71±0.44a 47.45±0.40d 39.19±0.33e氨基酸總量 113.16±0.47c 141.22±0.66b 163.51±0.46a 76.45±0.37d 76.11±0.34d藥用氨基酸 66.20±0.54c 80.85±0.66b 101.47±0.60a 39.78±0.35d 39.65±0.35d必需氨基酸/氨基酸總量 0.35 0.34 0.41 0.38 0.49

藥用氨基酸是由天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、酪氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、精氨酸組成，一般在植物中含量少，部分在人體不能合成，但又是維持機(jī)體氮平衡所必需的。不同產(chǎn)地白肉靈芝中藥用氨基酸含量具有顯著差異(P<0.05)，變幅為66.20～101.47 mg/g，顯著高于赤芝39.78 mg/g、紫芝39.65 mg/g(P<0.05)，其中怒江地區(qū)的白肉靈芝藥用氨基酸含量最高，為101.47 mg/g。白肉靈芝中藥用氨基酸含量占氨基酸總量均高于50%。其中天門冬氨酸和谷氨酸是白肉靈芝中含量較高的藥用氨基酸，也是其中重要的鮮味物質(zhì)[37-38]。天門冬氨酸有緩解疲勞，預(yù)防心臟病、高血壓等疾病的功能[39]。谷氨酸是一種重要的功能性氨基酸，具有調(diào)節(jié)神經(jīng)中樞及大腦皮質(zhì)功能[40]。這些說明白肉靈芝氨基酸含量豐富，營養(yǎng)和藥用價值高。

2.4 白肉靈芝的礦質(zhì)元素分析

礦物質(zhì)元素對人體的細(xì)胞代謝及生理功能起著重要的作用，鈣可參與新陳代謝，促進(jìn)骨骼發(fā)育[41]；鐵是血紅蛋白的重要部分，可以預(yù)防和治療缺鐵性貧血[42]。白肉靈芝中礦質(zhì)元素含量如表5所示。由表5可以看出，白肉靈芝中鎂、鈣、鐵含量豐富，分別為914.25～942.56、575.18～807.25、380.00～465.35 mg/kg，顯著高于赤芝(659.14、496.15、285.65 mg/kg)、紫芝(835.92、378.82、325.68 mg/kg)(P<0.05)，而不同品種靈芝中鋅、錳、銅含量差異不顯著(P>0.05)。不同產(chǎn)地白肉靈芝中鎂、鈣、鐵含量所有差異，其中昆明地區(qū)的白肉靈芝鎂、鈣含量最高，分別為942.56、807.25 mg/g；楚雄地區(qū)的白肉靈芝鐵含量最高，為465.35 mg/g。白肉靈芝具有高鈣、高鎂、高鐵的特點(diǎn)，營養(yǎng)價值豐富，可以作為食品進(jìn)行開發(fā)利用。

2.5 白肉靈芝的抗氧化活性

氧化應(yīng)激反應(yīng)對人體衰老和健康具有非常重大的影響，各種因素導(dǎo)致的過量自由基可以引發(fā)和加劇多種疾病，應(yīng)用抗氧化劑來維持人體健康具有廣泛的需求[43-44]。羥基自由基(·OH)作為最活潑、氧化性最大的自由基，會造成細(xì)胞的突變或壞死[45]。DPPH通?？梢杂脕頇z測活性物質(zhì)對自由基的清除能力[46]。白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基、羥基自由基清除率如圖1和圖2所示。由圖1可知，白肉靈芝、赤芝、紫芝均具有一定的清除DPPH自由基能力，其中在濃度低于2.5 mg/mL時，赤芝最強(qiáng)，白肉靈芝次之，紫芝最弱。當(dāng)靈芝提取物濃度在0.5 mg/mL時，不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基的清除率已經(jīng)達(dá)到65.02%～76.09%，高于紫芝(50.36%)，低于赤芝(87.40%)及VC(96.25%)，說明3個產(chǎn)地白肉靈芝對DPPH自由基具有很好的清除作用。經(jīng)計算得出不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基清除率的IC50值為0.13～0.19 mg/mL，其中楚雄地區(qū)的白肉靈芝的IC50值最低，為0.13 mg/mL；赤芝的IC50值為0.07 mg/mL；紫芝的IC50值為0.46 mg/mL；VC的IC50值為0.01 mg/mL。

由圖2可知，白肉靈芝對羥基自由基具有一定的清除能力，其活性強(qiáng)于紫芝，與赤芝相似，其清除能力與樣品濃度呈現(xiàn)良好的劑量關(guān)系。當(dāng)靈芝提取物濃度在1.25 mg/mL時，不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對羥基自由基的清除率已經(jīng)達(dá)到46.87%～59.98%，高于紫芝(39.86%)，低于VC(75.30%)。經(jīng)計算得出不同產(chǎn)地白肉靈芝甲醇提取物對羥基自由基清除率的IC50值為0.54～0.89 mg/mL；赤芝的IC50值為0.60 mg/mL；紫芝的IC50值為1.70 mg/mL；VC的IC50值為0.15 mg/mL。以上結(jié)果說明白肉靈芝具有一定的抗氧化活性，其活性與赤芝相似。

3 結(jié)論

白肉靈芝含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，通過成分分析得到其粗蛋白含量為18.02%～19.02%，粗纖維含量為14.30%～20.05%。白肉靈芝中主要活性成分多糖、三萜及靈芝酸A含量分別為0.99%～1.42%、1.22%～1.40%、0.069%～0.084%，明顯高于紫芝、赤芝。白肉靈芝中總氨基酸含量為113.61～163.51 mg/g，其中谷氨酸和天門冬氨酸的含量較高，分別為16.12～22.62 mg/g、12.02～15.61 mg/g。白肉靈芝中藥用氨基酸含量占氨基酸總量均高于50%。白肉靈芝具有高鈣、高鎂、高鐵的特點(diǎn)，營養(yǎng)價值豐富，其鎂、鈣、鐵含量分別為914.25～942.56、575.18～807.25、380.00～465.35 mg/kg。體外抗氧化活性實(shí)驗(yàn)表明，白肉靈芝甲醇提取物對DPPH自由基、羥基自由基清除率的IC50值分別為0.13～0.19和0.54～0.89 mg/mL，并呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系，其抗氧化活性高于紫芝。本研究為云南白肉靈芝食用價值提供了參考依據(jù)，為今后進(jìn)一步開發(fā)利用白肉靈芝提供了數(shù)據(jù)支持。

表5 白肉靈芝的礦質(zhì)元素含量(±s ，n=3)Table 5 Mineral elements contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

表5 白肉靈芝的礦質(zhì)元素含量(±s ，n=3)Table 5 Mineral elements contents of G. leucocontextum (±s , n=3)

微量元素含量(mg/kg)GLC-1 GLC-2 GLC-3 GL-1 GS-1 Zn 37.82±0.52b 29.20±0.51c 41.40±1.02a 29.85±0.69c 38.50±1.22b Fe 450.24±3.28b 465.35±3.75a 380.00±2.21c 285.65±1.67e 325.68±4.56d Mn 37.82±0.68b 37.42±0.77b 37.50±1.26b 42.57±0.93a 24.67±0.25c Mg 942.56±6.23a 914.25±4.45c 927.46±8.92b 659.14±6.55e 835.92±9.01d Ca 807.25±15.29a 575.18±7.97c 672.00±10.28b 496.15±13.74d 378.82±15.59e Cu 6.92±0.18b 7.28±0.39b 8.84±0.86a 5.68±0.67c 8.34±0.74a

圖1 白肉靈芝對DPPH自由基的清除能力Fig.1 DPPH free radical scavenging ability of Ganoderma leucocontextum

圖2 白肉靈芝對羥基自由基的清除能力Fig.2 Scavenging ability of hydroxyl radical in Ganoderma leucocontextum