濕疹病情與患者血清Th1/Th2細(xì)胞因子的關(guān)系研究

王修勇 常 遠(yuǎn) 高 明 張 帆

鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院，河南省洛陽市 471000

濕疹是皮膚科常見的皮膚疾病之一，主要表現(xiàn)為強烈的皮膚瘙癢，其在老年人群中有較高的發(fā)病率?；颊咄捎谄つw瘙癢反復(fù)搔抓而引起皮膚組織損傷，增加了細(xì)菌感染和各種并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險。濕疹的病因復(fù)雜，目前還存在較大分歧。研究表明，輔助型T細(xì)胞1(Th1)/Th2失衡是導(dǎo)致皮膚出現(xiàn)濕疹類炎癥反應(yīng)的重要機制[1]，但目前有關(guān)Th1/Th2細(xì)胞因子分泌障礙與濕疹間的關(guān)系的報道較少。本文對86例濕疹患者進行Th1/Th2細(xì)胞因子水平進行檢測，分析不同病情狀態(tài)下Th1/Th2細(xì)胞因子水平的差異，以探討濕疹病情與Th1/Th2細(xì)胞因子的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 一般資料 收集2016年12月—2018年12月在我院皮膚科門診就診的濕疹患者86例，納入病例組，其中男44例，女42例；年齡34～82(42.7±5.8)歲，病程3～60(45.1±16.2)個月；急性期45例，慢性期41例；泛發(fā)性濕疹35例，局限性濕疹51例。選擇標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《皮膚性病學(xué)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]；(2)入組前4周內(nèi)未曾用抗生素、糖皮質(zhì)激素治療者；(3)簽署知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并感染患者；(2)合并風(fēng)濕、類風(fēng)濕性疾病的患者；(3)入組前4周內(nèi)曾用抗生素、糖皮質(zhì)激素治療者。另外收集同期在我院門診進行體格檢查的志愿者50例作為對照組，其中男24例，女26例；年齡32～84(43.2±6.0)歲。兩組性別、年齡對比差異無顯著性(P>0.05)，符合科研的隨機對照性原則。本研究經(jīng)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集：采集待測者晨起空腹肘部靜脈血5ml，裝入含肝素的抗凝管中，用即用型淋巴細(xì)胞分離液分離淋巴細(xì)胞，將獲得的淋巴細(xì)胞清洗后，加入含胎牛血清的RPMI-1640液，使細(xì)胞密度調(diào)整為1×109/L，再加0.05g/L的刀豆球蛋白A誘導(dǎo)，置于75%CO2、37℃、飽和濕度的培養(yǎng)箱中孵育48h，取出細(xì)胞在離心機上以3 200r/min離心5min,分離上層清液置于-70℃低溫冰箱中保存待用。

1.2.2 Th1/Th2細(xì)胞因子的檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、腫瘤壞死因子-ɑ(TNF-α)及γ干擾素(IFN-γ)表達(dá)水平，IL-2、IL-4、IL-5、IL-6試劑盒均由上海博谷生物科技有限公司提供，TNF-α、IFN-γ試劑盒由上?？道噬锟萍加邢薰咎峁?，操作均嚴(yán)格按試劑盒說明書進行。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察比較兩組IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 與對照組相比，病例組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量均明顯升高(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

2.2 急性期與慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 與慢性期患者相比，急性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量均明顯升高(P<0.05)，急性期患者的IL-6、TNF-α含量與慢性期患者相近(P>0.05)，見表2。

表2 急性期與慢性期患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

2.3 泛發(fā)性與局限性濕疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比 泛發(fā)性患者的血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量與局限性濕疹相近(P>0.05)，見表3。

表3 泛發(fā)性與局限性濕疹患者血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量對比

3 討論

濕疹是臨床常見的一種接觸性皮膚過敏疾病，其發(fā)病可能是致敏性因素引起機體Th1/Th2功能失衡，導(dǎo)致相應(yīng)的細(xì)胞因子分泌障礙所致。Th1細(xì)胞主要分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ并形成細(xì)胞免疫系統(tǒng)；Th2細(xì)胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6而形成體液免疫系統(tǒng)[3]。本文中，病例組血清IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ含量較正常人群明顯升高(P<0.05)，提示濕疹患者存在Th1/Th2細(xì)胞亞群活性升高及相關(guān)細(xì)胞因子過量分泌情況，這些細(xì)胞因子在皮膚炎癥反應(yīng)和損傷修復(fù)中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。TNF-α、IFN-γ可上調(diào)表皮中的郎格罕細(xì)胞及角朊細(xì)胞的HLA-DR和黏附因子的表達(dá)[4]，使細(xì)胞免疫反應(yīng)和體液反應(yīng)的強度增加，進而調(diào)控T細(xì)胞的分化，使Th1向Th2偏移，導(dǎo)致Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-5、IL-6的量增多，而這些細(xì)胞因子會促進 Th1細(xì)胞成熟，促使Th1細(xì)胞分泌IL-2、TNF-α、IFN-γ[5]。本文中，急性期患者的IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ含量較慢性期患者明顯升高(P<0.05)，提示濕疹急性期患者機體的細(xì)胞免疫和體液免疫均處于強烈的應(yīng)激反應(yīng)狀態(tài)，致使Th1、Th2細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子來應(yīng)對皮膚炎性反應(yīng)，而慢性濕疹患者因病情緩和，從而使免疫應(yīng)激反應(yīng)較輕，致使相應(yīng)的細(xì)胞因子分泌量相對較少，這也說明Th1/Th2失衡程度和細(xì)胞因子表達(dá)會隨著濕疹病情加重而加劇。但本文發(fā)現(xiàn)，急性期患者IL-6、TNF-α含量與慢性期患者比較并無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，提示濕疹引起的免疫反應(yīng)激活的機制較為復(fù)雜，IL-6、TNF-α在誘導(dǎo)Th1細(xì)胞成熟過程中被消耗較多，致使其表達(dá)水平未因炎癥加劇而明顯升高，而且，本文所收集的很多患者病程較長，使其機體IL-6、TNF-α的表達(dá)量在疾病治療后期或病情反復(fù)時由于其他類型相關(guān)細(xì)胞因子反調(diào)節(jié)作用而逐漸消耗，進而引起急性期、慢性期患者血清IL-6、TNF-α表達(dá)量無明顯差異。本文發(fā)現(xiàn)泛發(fā)性和局限性濕疹患者血清細(xì)胞因子水平相近(P>0.05)，提示濕疹引起的免疫反應(yīng)而導(dǎo)致細(xì)胞因子大量分泌有普遍性和全身性特點，故在各類皮膚濕疹患者中可通過檢測血清細(xì)胞因子水平來評估患者病情及機體免疫應(yīng)答狀態(tài)。

總之，濕疹患者存在Th1/Th2細(xì)胞因子水平異常變化，這種變化與病情密切相關(guān)，因此可通過檢測此類細(xì)胞因子水平來評估其病情，具有一定的臨床參考價值。