帶狀皰疹患者皮損程度與血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平的相關(guān)性研究

張凱輝 段行武 陳曦 張潤田

[摘要]目的：探究帶狀皰疹（Herpes zoster，HZ）患者皮損程度與血清免疫球蛋白水平和NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NOD-like receptor pyrin domain containing 3，NLRP3）炎性小體水平的相關(guān)性。方法：選取2018年11月-2020年11月就診于筆者醫(yī)院的100例帶狀皰疹患者，根據(jù)皮損程度分為輕度組31例、中度組53例和重度組16例。檢測并比較各組免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）水平;NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（Cysteinyl aspartate specific proteinase-1，Caspase-1）信使核糖核酸（Messenger ribonucleic acid，mRNA）水平;Pearson相關(guān)系數(shù)分析皮損程度與IgA、IgG、IgM、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA相關(guān)性。結(jié)果：與輕度組比較，中度組和重度組IgA、IgG、IgM顯著降低，重度組顯著低于中度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;與輕度組比較，中度組和重度組NLRP3、Caspase-1 mRNA水平顯著升高，重度組顯著高于中度組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）?；颊咂p程度與IgA（r=-0.221、-0.253、-0.437，P<0.05）、IgG（r=-0.314、-0.361、-0.392，P<0.05）、IgM（r=-0.436、-0.504、-0.696，P<0.05）呈負相關(guān)，與NLRP3 mRNA（r=0.231、0.261、0.514，P<0.05）、Caspase-1 mRNA（r=0.601、0.371、0.324，P<0.05）呈正相關(guān)。結(jié)論：帶狀皰疹患者皮損程度與血清免疫球蛋白和NLRP3炎性小體具有密切的相關(guān)性，對臨床診治帶狀皰疹有著一定的參考價值。

[關(guān)鍵詞]帶狀皰疹;皮損程度;免疫球蛋白;NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3炎性小體;相關(guān)性

[中圖分類號]R752.1+2? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2021）05-0052-04

Correlation between the Skin Damage and Serum Immunoglobulin and NLRP3 Inflammasome Levels in Patients with Herpes Zoster

ZHANG Kai-hui1，DUAN Xing-wu2，CHEN Xi2，ZHANG Run-tian2

（1.Department of Dermatology，F(xiàn)irst Clinical Medical College，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 101100，China;2.Department of Dermatology，Dongzhimen Hospital，Beijing University of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100700，China）

Abstract： Objective? To explore the correlation between skin damage and serum immunoglobulin level and NOD-like receptor pyrin domain containing 3 （NLRP3） inflammasome in herpes zoster patients. Methods? A total of 100 patients with herpes zoster admitted to our hospital from November 2018 to November 2020 were selected and divided into the mild group 31 cases， the moderate group 53 cases and the severe group 16 cases according to the degree of skin lesions. The levels of immunoglobulin A （IGA）， immunoglobulin G （IgG）， immunoglobulin M （IgM）， NLRP3 and Caspase-1 messenger RNA （mRNA） were detected and compared in each group. Pearson correlation coefficient was used to analyze the correlation between the degree of skin lesions and IgA， IgG， IgM， NLRP3 mRNA and Caspase-1 mRNA. Results? IgA， IgG and IgM in the moderate group and the severe group were significantly lower than those in the mild group， the severe group was significantly lower than in the moderate group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The NLRP3、Caspase-1 mRNA level of the moderate group and the severe group was significantly higher than those in the mild group， the severe group was significantly higher than in the moderate group （P<0.05）. The degree of skin lesions was negatively correlated with IgA （r=-0.221， -0.253， -0.437， P<0.05）， IgG （r=-0.314， -0.361， -0.392， P<0.05）， IgM （r=-0.436， -0.504， -0.696， P<0.05）， and positively correlated with NLRP3 mRNA （r=0.231， 0.261， 0.514， P<0.05）， Caspase-1 mRNA （r=0.601， 0.371， 0.324， P<0.05）. Conclusion? Herpes zoster patients have close correlation with serum immunoglobulin and NLRP3 inflammatory corpuscles， which has certain reference value for clinical diagnosis and treatment of herpes zoster.

Key words： herpes zoster; lesion degree; immunoglobulin; NOD-like receptor heat protein domain associated protein 3 inflammatory corpuscle; correlation

帶狀皰疹是由帶狀皰疹病毒（Varicella zoster virus，VZV）感染所引起的一種常見臨床皮膚病，在中老年群體中的發(fā)病率更高[1]。VZV有親神經(jīng)性的特點，能夠長期潛伏在脊髓神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元中，一旦機體出現(xiàn)感冒、勞累以及抵抗力下降等，VZV則大量生長繁殖，由神經(jīng)纖維遷移到皮膚，進而引起嚴重炎癥反應(yīng)，嚴重影響了患者的生存質(zhì)量[2]。針對帶狀皰疹的治療，目前臨床多通過減輕患者疼痛改善其生存質(zhì)量，但仍有部分患者治療療效不甚理想[3]。根據(jù)疾病發(fā)病機制進行針對性治療可取得較好的臨床效果，但目前關(guān)于帶狀皰疹的發(fā)病機制并未完全明確[4]。近年來有研究發(fā)現(xiàn)，機體發(fā)生VZV后，其體液免疫應(yīng)答發(fā)生紊亂，進而引起了免疫球蛋白的分泌異常和炎癥反應(yīng)，因此血清免疫球蛋白水平和炎癥反應(yīng)與帶狀皰疹的發(fā)生存在密切聯(lián)系[5-6]。NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NOD-like receptor pyrin domain containing 3，NLRP3）炎性小體是炎癥反應(yīng)中重要的組成部分之一，參與了與炎癥相關(guān)的一系列的神經(jīng)系統(tǒng)疾病[7-8]。但目前很少有研究探究血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平與帶狀皰疹患者的相關(guān)性，值得深入研究。因此本研究主要是探究帶狀皰疹患者皮損程度與血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平的相關(guān)性，旨在為臨床治療帶狀皰疹提供一定的參考。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：選取2018年11月-2020年11月就診于筆者醫(yī)院的100例帶狀皰疹患者作為研究對象，根據(jù)皮損程度[9]將其分為輕度組（皮損面積<100cm2、皰壁不緊張、水皰小、輕微紅斑）31例、中度組（皮損面積100～200cm2、皰壁稍緊張、水皰較大、紅斑較重）53例和重度組（皮損面積>200cm2、皰壁緊張、水皰大而密集、重度紅斑）16例。輕度組：男16例，女15例;年齡22～74歲，平均（51.24±2.33）歲;發(fā)病時間2～16周，平均（8.26±2.14）周;皮損部位：軀干22例，四肢6例，頭面部3例。中度組：男27例，女26例;年齡22～72歲，平均（50.83±2.40）歲;發(fā)病時間2～15周，平均（8.11±2.07）周;皮損部位：軀干38例，四肢10例，頭面部5例。重度組：男8例，女8例;年齡20～75歲，平均（51.54±2.23）歲;發(fā)病時間2～16周，平均（8.16±2.05）周;皮損部位：軀干11例，四肢4例，頭面部1例。三組性別、年齡、發(fā)病時間、皮損部位比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入和排除標準：納入標準：①參照《臨床皮膚病學(xué)》[10]中帶狀皰疹診斷標準，所有患者均確診為帶狀皰疹;②入院前未接受過激素、鎮(zhèn)痛、抗病毒等治療的患者;③心、肝、腎等功能正常的患者;④首次發(fā)病的患者;⑤患者或其家屬簽訂知情同意書。排除標準：①合并其他引起皮溫改變疾病的患者;②合并其他引起疼痛疾病的患者;③妊娠或哺乳期女性;④合并其他感染性疾病的患者。

1.3 檢測方法

1.3.1 血清免疫球蛋白水平：在患者被納入研究后的第2天清晨抽取其空腹肘靜脈血2ml，置于EP管內(nèi)，在常溫下靜置1h后采用離心法分離出血清，置于干燥試管內(nèi)于零下80℃保存待測。采用速率散射比濁法對免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin，IgG）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin，IgM）水平進行檢測，所用試劑盒由上海藍基生物科技有限公司提供。

1.3.2 NLRP3炎性小體水平：在患者被納入研究后的第2天清晨抽取其空腹肘靜脈血5ml置于EDTA抗凝管，采用人外周血淋巴細胞分離液（深圳市達科為生物工程有限公司）與其1：1混勻后即進行離心處理，將外周血單抗細胞分離出來后加入1ml Trizo（武漢科昊佳生物科技有限公司）混勻備用。通過Trizo法提取出患者外周血單抗細胞的總核糖核酸（Ribonucleic acid，RNA），對RNA濃度進行測定，隨后即采用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（北京華大蛋白質(zhì)研發(fā)中心有限公司）逆轉(zhuǎn)錄。實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，qPCR）的引物設(shè)計合成公司為上海生工公司，NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1（Cysteinyl aspartate specific proteinase-1，Caspase-1）、內(nèi)參甘油醛-3-磷酸脫氫酶（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）引物見表1。擴增條件為：93℃下變形5min，55℃退火30s，72℃延伸40s，連續(xù)循環(huán)40次，并于72℃終末延伸7min。其中陰性對照為未逆轉(zhuǎn)錄模板，繪制NLRP3、Caspase-1熒光曲線，得到其熒光域值的循環(huán)數(shù)（Cycle threshold，CT），再根據(jù)2-△△CT計算得到各基因相對表達量。

1.4 觀察指標：①比較各組患者血清IgA、IgG、IgM水平;②比較各組患者NLRP3、Caspase-1的信使核糖核酸（Messenger ribonucleic acid，mRNA）表達水平;③Pearson相關(guān)系數(shù)分析IgA、IgG、IgM、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA與帶狀皰疹皮損程度相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS 18.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用均數(shù)±標準差（x?±s）進行表示;計數(shù)資料采用例（n）或百分比（%）進行表示;三組間比較采用F檢驗;采用Pearson相關(guān)系數(shù)分析帶狀皰疹患者皮損程度與血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平的相關(guān)性;P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1 各組血清IgA、IgG、IgM水平比較：各組患者血清IgA、IgG、IgM水平差異顯著，中度組和重度組患者血清IgA、IgG、IgM水平顯著低于輕度組，而重度組又顯著低于中度組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

2.2 各組NLRP3、Caspase-1的mRNA表達水平比較：各組患者NLRP3、Caspase-1的mRNA表達水平差異顯著，中度組和重度組患者NLRP3、Caspase-1的mRNA表達水平顯著高于輕度組，而重度組又顯著高于中度組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

2.3 血清IgA、IgG、IgM、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA與皮損程度相關(guān)性分析：根據(jù)Pearson相關(guān)系數(shù)分析結(jié)果可知，IgA、IgG、IgM與皮損程度呈負相關(guān)，NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA與皮損程度呈正相關(guān)，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

3? 討論

近年來，帶狀皰疹發(fā)病率呈上升趨勢，主要表現(xiàn)為成簇的水皰，嚴重會遺留神經(jīng)痛，嚴重威脅了患者的生活質(zhì)量和身體健康[11]。相關(guān)研究顯示，機體被VZV感染后，一般會潛伏在感覺神經(jīng)元中，當機體受到外界刺激后即會使其免疫功能顯著降低，進而激活VZV并由感覺神經(jīng)下行，引起侵犯神經(jīng)的皮損、疼痛等[12]，但其具體的發(fā)病機制尚未闡明。免疫球蛋白和NLRP3炎性小體在帶狀皰疹患者的免疫反應(yīng)中發(fā)揮著重要的作用[13-14]，但目前關(guān)于其與帶狀皰疹皮損程度相關(guān)性的研究較少。

相關(guān)研究表明，當機體發(fā)生帶狀皰疹后，血清免疫球蛋白水平明顯降低[15-16];帶狀皰疹的發(fā)生與年齡、感染、環(huán)境等有關(guān)，且體液免疫功能的紊亂也參與了其發(fā)生與發(fā)展[17]。而免疫球蛋白是機體體液免疫功能的常用檢測方法之一，當發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平顯著降低時，則可判定機體體液免疫發(fā)生缺陷[18-19]。張虹等[20]研究顯示，經(jīng)有效干預(yù)后，神經(jīng)病理痛小鼠NLRP3表達明顯下調(diào);何子凡等[21]研究結(jié)果表明，隨著患者病情及炎癥反應(yīng)的加重，機體NLRP3 mRNA水平明顯升高;經(jīng)過一系列的炎癥刺激，機體的星形細胞、小膠質(zhì)細胞以及巨噬細胞能夠使胞質(zhì)中NLRP3炎癥小體啟動，通過核因子κB（Nuclear factor-κB，NF-κB）通路，產(chǎn)生NLRP3、Caspase-1等前體成分，之后又經(jīng)第二信號作用，該類蛋白所組成的NLRP3炎癥小體被激活，刺激Caspase-1前體裂解為活性Caspase-1，加速了白介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白介素-18（Interleukin-18，IL-18）的成熟與分泌，進而募集了更多炎癥因子及炎癥細胞，促進了疾病的發(fā)生與發(fā)展[22-23];同時NLRP3炎性小體可促進炎癥和免疫反應(yīng)的發(fā)生[24-25]。

本研究結(jié)果表明，帶狀皰疹患者皮損程度越嚴重，血清IgA、IgG、IgM水平越低，NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA水平越高，其原因可能是隨著皮損程度增加，機體免疫應(yīng)答不足時，所分泌的免疫球蛋白無法完全清除病毒，引起帶狀皰疹后遺神經(jīng)痛（Post herpetic neuralgia，PHN），繼而加重了帶狀皰疹患者疼痛程度，使病情加重。NLRP3炎性小體作為固有免疫重要組分，當其過度活化時則會引起IL-1β等各種促炎因子大量釋放，從而介導(dǎo)炎癥和免疫反應(yīng)，輕度組和中度組機體免疫調(diào)控尚處于起始應(yīng)答階段，相關(guān)抗體尚未大量合成分泌且免疫球蛋白相關(guān)調(diào)控，隨著皮損程度加重，血清IgA、IgG、IgM水平越低，血清NLRP3、Caspase-1的mRNA表達水平差異增大，提示臨床可通過提高血清IgA、IgG、IgM水平治療帶狀皰疹患者。帶狀皰疹皮損程度與血清IgA、IgG、IgM水平呈負相關(guān)，與NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA水平呈正相關(guān)，臨床可通過調(diào)節(jié)機體血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平緩解帶狀皰疹患者病情，甚至治愈患者。

綜上所述，帶狀皰疹皮損程度越高，患者血清IgA、IgG、IgM水平越低，NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA水平越高;帶狀皰疹患者皮損程度于血清免疫球蛋白水平和NLRP3小體水平具有密切相關(guān)性，對臨床診治帶狀皰疹有著積極的意義，值得臨床參考。

[參考文獻]

[1]Lee YC，Hung CC，Tsai MS，et al.Incidence and risk factors of herpes zoster in human immunodeficiency virus-positive patients initiating combination antiretroviral therapy in Taiwan[J].J Microbiol Immunol Infect，2018，51（1）：38-44.

[2]Min-Chul K，Sung-Cheol Y，Sang-Oh L，et al.Statins increase the risk of herpes zoster： A propensity score-matched analysis[J].PLoS One，2018，13（6）：263-266.

[3]Shimizu K，Kawasaki J，Maruo T，et al.A study on the treatment of the acute phase of herpes zoster for prevention： A retrospective study of 140 cases treated during the last 3 years and 10 months[J].J Saitama Med Univ，2018，44（2）：67-75.

[4]Koshy E，Mengting L，Kumar H，et al.Epidemiology， treatment and prevention of herpes zoster： A comprehensive review[J].Indian J Dermatol Venereol Leprol，2018，84（3）：251-262.

[5]Tian Q，Xue JJ，Gao TY，et al.The correlation between clinical severity and lymphocyte subsets or immunoglobulin subtypes in patients with herpes zoster[J].Chin J Dermatovenereol，2018，32（9）：1013-1017.

[6]Pi ZB，Zhang JK，Peng Y，et al.The efficacy of ultrasound-guided spinal nerve posterior ramus pulsed radiofrequency treatment for aged lower back post-herpetic neuralgia[J].Natl Med J Chin，2018，98（10）：733-737.

[7]Chen FQ，Wei GZ，Xu J，et al.Naringin ameliorates the high glucose-induced rat mesangial cell inflammatory reaction by modulating the NLRP3 inflammasome[J].BMC Complement Altern Med，2018，18（1）：192-196.

[8]周琳，石磊，石焱.NLRP3炎性小體在顱內(nèi)出血神經(jīng)炎癥中的作用研究進展[J].人民軍醫(yī)，2018，61（5）：463-465，469.

[9]周乃慧，錢齊宏，楊子良，等.207例帶狀皰疹臨床特征及預(yù)后因素分析[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2017，37（11）：1481-1484.

[10]趙辨.臨床皮膚病學(xué)[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2001：300.

[11]Shalom G，Naldi L，Lebwohl M，et al.Biological treatment for psoriasis and the risk of herpes zoster： Results from the Psoriasis Longitudinal Assessment and Registry （PSOLAR）[J].J Dermatolog Treat，2018，30（6）：534-539.

[12]Cao S，Qin B，Zhang Y，et al.Herpes zoster chronification to postherpetic neuralgia induces brain activity and grey matter volume change[J].Am J Transl Res，2018，10（1）：184-199.

[13]Bilska A，Kusio-Kobiaka M，Krawczyk PS，et al.Immunoglobulin expression and the humoral immune response is regulated by the non-canonical poly（A） polymerase TENT5C[J].Nat Commun，2020，11（1）：2032-2035.

[14]Li S，Kang P，Zhang W，et al.910 TRPM2-dependent NLRP3 inflammasome activation exacerbates the oxidative stress-driven immune response in patients with vitiligo[J].J Invest Dermatol，2018，138（5）：155-158.

[15]田秘，陳韓，王敏健.帶狀皰疹患者血漿S100α蛋白、NSE、免疫球蛋白及病毒載量與病情嚴重程度的相關(guān)性研究[J].中國免疫學(xué)雜志，2018，34（8）：1242-1246，1250.DOI：10.3969/j.issn.1000-484X.2018.08.023.

[16]趙文娜，惠先，楊鑫，等.苦木水提物外用對變應(yīng)性接觸性皮炎模型小鼠的改善作用研究[J].中國藥房，2019，30（1）：64-68.

[17]Tricco AC，Zarin W，Cardoso R，et al.Efficacy， effectiveness， and safety of herpes zoster vaccines in adults aged 50 and older： systematic review and network meta-analysis[J].BMJ，2018，349（1）：5459-5462.

[18]段紅光，周愛靜，程崇勇，等.人免疫球蛋白對終末期肝病合并感染患者肝功能、免疫功能及凝血功能的干預(yù)作用[J].分子診斷與治療雜志，2019，11（1）：49-53，67.

[19]Wu QQ，Chen LJ，Chen LD.Effect of arabinosine monophosphate combined with mannan peptide on herpes zoster and inflammatory[J].Med Sci J Centr South Chin，2019，47（1）：68-70.

[20]張虹，向宏春，賈珉，等.CB2受體參與電針抑制NLRP3炎性小體活化緩解紫杉醇化療后神經(jīng)病理痛機制[J].中華中醫(yī)藥雜志，2018，33（5）：2103-2107.

[21]何子凡，高巖，王曉玲，等.NLRP3炎性小體在慢性阻塞性肺疾病患者機體炎癥反應(yīng)中作用的研究[J].中國呼吸與危重監(jiān)護雜志，2018，17（2）：119-123.

[22]Fang RD，Du HH，Lei GH，et al.NLRP3 inflammasome plays an important role in Caspase-1 activation and IL-1β secretion in macrophages infected with Pasteurella multocida[J].Vet Microbiol，2019，231（5）：207-213.

[23]Zhang TJ，Du HH，F(xiàn)eng SW，et al.NLRP3/ASC/Caspase-1 axis and serine protease activity are involved in neutrophil IL-1β processing during Streptococcus pneumoniae infection[J].Biochem Biophys Res Commun，2019，513（3）：675-680.

[24]何濤，黃華武，曾永龍，等.固有免疫分子NLRP3炎性小體在慢性細菌性前列腺炎中的作用[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2019，16（10）：157-161.

[25]柴廣睿，劉姝，陳曉隆.核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3）炎癥體在眼科疾病中的研究進展[J].眼科新進展，2018，38（9）： 892-897.

[收稿日期]2021-02-07

本文引用格式：張凱輝，段行武，陳曦，等.帶狀皰疹患者皮損程度與血清免疫球蛋白水平和NLRP3炎性小體水平的相關(guān)性研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2021，30（5）：52-55.