葡萄渣粉對(duì)高溫期蛋雞生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化能力的影響

周業(yè)飛，周梅仙，王祥雷

（1.南京曉莊學(xué)院食品科學(xué)學(xué)院，江蘇南京 211171；2.南京市溧水區(qū)春神養(yǎng)雞專業(yè)合作社，江蘇南京 211299）

高溫是引起蛋雞機(jī)體應(yīng)激的主要因素之一，可引起蛋雞直腸溫度升高、血漿肌酸激酶活性升高、血漿三碘甲狀腺素水平降低等一系列生理代謝變化，嚴(yán)重影響蛋雞采食量和飼料轉(zhuǎn)化效率，降低產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋量、蛋品質(zhì)和蛋殼強(qiáng)度[1]。此外，高溫還可導(dǎo)致蛋雞血漿中丙二醛（MDA）水平升高，引起氧化應(yīng)激，進(jìn)而引起脂質(zhì)過(guò)氧化和細(xì)胞膜氧化損傷，從而導(dǎo)致雞蛋品質(zhì)明顯受損[2]。因此，如何避免和改善高溫對(duì)蛋雞的有害影響成為動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)工作者重要的任務(wù)。在實(shí)際生產(chǎn)中，除了改善蛋雞飼養(yǎng)管理環(huán)境，在蛋雞日糧中添加維生素、植物提取物和益生菌等功能性飼料添加劑來(lái)部分減輕高溫對(duì)蛋雞的損傷也是常用策略。

葡萄渣粉（Grape Pomace Flour，GPF）是葡萄皮、籽、莖等提取加工后的副產(chǎn)品，富含酚類、黃酮類、花青素和兒茶素等有益成分，還含有白藜蘆醇、木犀草素、槲皮素和山柰醇等高抗氧化物質(zhì)，具有抗氧化、抑菌、抗腫瘤等作用[3-4]。研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加適量的GPF 可顯著降低肉雞脂質(zhì)氧化，提高回腸有益菌群數(shù)量[5]。在蛋雞日糧中添加白藜蘆醇可顯著提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能和抗氧化防御系統(tǒng)相關(guān)的酶活性[6]。因此，本研究旨在評(píng)價(jià)高溫時(shí)蛋雞日糧中添加GPF 對(duì)蛋雞的產(chǎn)蛋性能、蛋品質(zhì)和抗氧化能力產(chǎn)生的影響，為GPF 在蛋雞養(yǎng)殖中應(yīng)用及研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 選取576 只58 周齡、平均產(chǎn)蛋率（84.13±1.56）%、平均體重（1.96±0.74）kg 商品代海蘭褐蛋雞，由南京市溧水區(qū)春神養(yǎng)雞專業(yè)合作社提供。動(dòng)物經(jīng)過(guò)14 d 的適應(yīng)期后，采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將動(dòng)物分為4 個(gè)處理組，每個(gè)處理12 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12 只。對(duì)照組飼喂產(chǎn)蛋期基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加1%、1.5% 和2% GPF（GPF 由南京澤朗生物科技有限公司加工制作，主要營(yíng)養(yǎng)成分為干物質(zhì) 35.49%，粗蛋白質(zhì) 8.13%，粗灰分 9.61%，粗脂肪 7.29%，中性洗滌纖維 45.24%，酸性洗滌纖維 35.04%））。采用層疊籠飼養(yǎng)方式，每天日光燈照明16 h。每天08:00、17:00 各飼喂1 次，試驗(yàn)蛋雞等量給食，自由采食、飲水。每天觀察各組試驗(yàn)雞采食、排糞、發(fā)病及死亡情況。試驗(yàn)期間溫度變化范圍為32～ 37℃，預(yù)試期2 周，正試試驗(yàn)期8 周。基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1，試驗(yàn)期日糧中不添加任何生長(zhǎng)促進(jìn)劑或抗生素。

表1 產(chǎn)蛋期蛋雞基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分

1.2 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.2.1 產(chǎn)蛋性能 在60～68 周試驗(yàn)期間每天定時(shí)撿蛋，以重復(fù)為單位，記錄每天喂料量、產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破軟蛋數(shù)和死亡數(shù)，計(jì)算每重復(fù)產(chǎn)蛋率、平均蛋重、破軟蛋率和死淘率，日產(chǎn)雞蛋重量是通過(guò)平均雞蛋重量乘以產(chǎn)蛋率計(jì)算。每隔7 d記錄一次飼料消耗量并計(jì)算飼料轉(zhuǎn)化率，飼料轉(zhuǎn)化率以每產(chǎn)1 g 雞蛋所消耗的飼料克數(shù)表示。

1.2.2 雞蛋品質(zhì) 分別在第64 周和第68 周，從每個(gè)試驗(yàn)處理隨機(jī)收集36 個(gè)雞蛋（每個(gè)重復(fù)3 個(gè)雞蛋）測(cè)定雞蛋質(zhì)量指數(shù)來(lái)確定雞蛋品質(zhì)參數(shù)。蛋形指數(shù)和蛋殼強(qiáng)度分別用蛋形測(cè)定儀和蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀測(cè)定；用游標(biāo)卡尺分別測(cè)量蛋殼厚度以及蛋黃高度和蛋黃直徑，精確至0.02 mm，計(jì)算蛋黃系數(shù)，蛋黃系數(shù)=蛋黃高度/蛋黃直徑×100%。將蛋清和蛋黃完全分離，將蛋黃放到濾紙上吸去多余蛋清后收集蛋黃稱取重量，計(jì)算蛋黃相對(duì)重，蛋黃相對(duì)重=蛋黃重/全蛋重×100%；多功能蛋品質(zhì)自動(dòng)分析儀測(cè)定哈氏單位。

1.2.3 血清生化指標(biāo) 分別在64 周和第68 周，每個(gè)處理隨機(jī)選擇24 只雞（每個(gè)重復(fù)2 只），用消毒過(guò)的針頭和注射器從翅靜脈抽取血液，室溫下4 000×g 離心10 min。收集血清-20℃保存，備用檢測(cè)。采用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定總蛋白含量、白蛋白、球蛋白、尿酸、總膽固醇和甘油三酯。按試劑盒（南京建成生物工程研究所）操作步驟進(jìn)行測(cè)定。

1.2.4 抗氧化水平和活性 抗氧化水平指標(biāo)包括血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性、總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過(guò)氧化氫酶（CAT）和丙二醛（MDA）含量，并嚴(yán)格按照試劑盒（南京建成生物工程研究所）操作規(guī)程進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)處理和顯著性分析采用SPSS 17.0 軟件中ANOVA 模型進(jìn)行單因素方差分析，采用LSD 法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加GPF 對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可見(jiàn)，在試驗(yàn)期的大部分時(shí)間里，蛋雞表現(xiàn)出兩喙張開(kāi)，伸頸呼吸，飲水量增加，雞群不夠活躍等熱應(yīng)激的行為。試驗(yàn)處理組蛋雞生產(chǎn)性能各項(xiàng)指標(biāo)雖呈一定的變化趨勢(shì)，但差異不顯著。在試驗(yàn)1～4 周和5～8 周，1.5%和2% GPF 組的雞蛋破損率顯著低于對(duì)照組。

表2 日糧中添加GPF 對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 日糧中添加GPF 對(duì)雞蛋品質(zhì)的影響 從表3 中看出，在蛋雞第64 周和第68 周時(shí)，1.5% 和2% GPF 組蛋殼強(qiáng)度和蛋黃系數(shù)顯著高于對(duì)照組和1% GPF 組。在蛋雞日糧中添加GPF 后雖然蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋黃相對(duì)重和哈氏單位在數(shù)值上呈增加趨勢(shì)，但與對(duì)照組無(wú)顯著差異。

表3 日糧中添加GPF 對(duì)雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 葡萄渣粉對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響 從表4 可看出，在蛋雞第68 周時(shí)，與對(duì)照組和1% GPF 組相比，1.5%和2% GPF 組血清總蛋白、球蛋白、尿酸和總膽固醇顯著降低。但各處理組血清白蛋白和甘油三酯差異不顯著。

表4 日糧中添加GPF 對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

2.4 葡萄渣粉對(duì)蛋雞血清抗氧化能力的影響 從表5 可看出，在蛋雞第68 周時(shí)，GPF 組血清GSH-Px 和T-AOC活性均顯著高于對(duì)照組；第64 周時(shí)，1.5%和2% GPF組血清T-AOC 顯著高于對(duì)照組；第68 周，1.5%和2% GPF 組血清SOD 和CAT 活性顯著高于對(duì)照組和1% GPF 組，血清MDA 水平顯著低于對(duì)照組和1% GPF 組。各處理組間血清GST 活性差異不顯著。

表5 日糧中添加葡萄渣粉對(duì)蛋雞血清抗氧化能力的影響

3 討 論

本研究中，高溫期內(nèi)，雖然在蛋雞日糧中添加GPF 后蛋形指數(shù)、蛋殼厚度、蛋黃相對(duì)重和哈氏單位在數(shù)值無(wú)顯著差異，但顯著降低了雞蛋的破損率，推測(cè)飼喂了GPF 后能通過(guò)調(diào)節(jié)蛋雞體內(nèi)代謝，提高血漿鈣水平，增強(qiáng)蛋殼強(qiáng)度[7]，具體機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。本研究中蛋黃系數(shù)增加也進(jìn)一步證實(shí)了飼喂GPF 提高了蛋雞機(jī)體的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝，有效促進(jìn)了卵泡發(fā)育[8]。

本試驗(yàn)中，在蛋雞日糧中添加GPF 可顯著降低血清總蛋白和球蛋白水平，這與Magbolah 等[9]用白葡萄籽飼喂大鼠的試驗(yàn)結(jié)果相似。由于球蛋白含量降低，GPF 處理組蛋雞血清總蛋白水平均較低。這些結(jié)果可能與GPF 中含有的白藜蘆醇改善了免疫和抗炎反應(yīng)有關(guān)，因?yàn)檠迩虻鞍姿降奶岣咄ǔ０l(fā)生在對(duì)損害免疫系統(tǒng)的病原體和應(yīng)激條件的反應(yīng)中。從這個(gè)意義上說(shuō)，F(xiàn)u等[10]報(bào)道，使用白藜蘆醇14 d 能顯著提高仔豬的免疫和抗炎反應(yīng)，白藜蘆醇不僅可以作為疫苗佐劑來(lái)增強(qiáng)疫苗抗原的免疫反應(yīng)，還可以作為飼料添加劑增強(qiáng)動(dòng)物體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)。

高溫期間，在蛋雞日糧中使用GPF 后可以顯著增強(qiáng)蛋雞的抗氧化反應(yīng)和降低血清中的氧化劑MDA 水平，這與Kara 等[11]在蛋雞中試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道相一致。眾多學(xué)者研究表明，葡萄和葡萄產(chǎn)品（葡萄汁、葡萄酒和糖蜜等）及其副產(chǎn)品（葡萄果渣和種子等）的抗氧化特性可能與它們含有的酚類化合物有關(guān)，在體內(nèi)可清除自由基，與金屬離子形成螯合物，從而防止或減少單態(tài)氧的產(chǎn)生[12-13]。在飼喂GPF 后，蛋雞血清中GSH-Px、T-AOC和SOD 活性顯著性提高，表明機(jī)體抗氧化防御機(jī)制體系得到顯著改善，這可能與存在多酚類物質(zhì)（如白藜蘆醇）有很大聯(lián)系，其作用機(jī)理主要是清除體內(nèi)自由基、過(guò)氧化氫等氧化劑，啟動(dòng)過(guò)氧化反應(yīng)，減少過(guò)量O2濃度和抑制過(guò)氧化形成[14]。此外，增加血清抗氧化物水平有助于降低蛋黃脂質(zhì)過(guò)氧化，因?yàn)榇罅窟^(guò)氧化反應(yīng)會(huì)使抗氧化劑大量積累到蛋黃中，從而導(dǎo)致雞蛋的味道發(fā)臭，降低雞蛋的感官和營(yíng)養(yǎng)質(zhì)量。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，在高溫期間，在蛋雞日糧中使用GPF 具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，不僅可以生產(chǎn)出品質(zhì)更好的雞蛋，而且可以刺激蛋雞提高抗氧化防御體系，對(duì)動(dòng)物健康具有保護(hù)作用；GPF 還可以降低雞蛋的脂質(zhì)過(guò)氧化，提高抗氧化水平，有助于改善雞蛋質(zhì)量。