冷凍切片與“冷對”石蠟切片技術(shù)常見問題與對策

吳杉杉，徐偉銘

術(shù)中快速病理診斷技術(shù)可在短時間內(nèi)確定病變性質(zhì)，為確定手術(shù)范圍及治療方案提供有力的科學(xué)依據(jù)，因此越來越受到臨床的重視和依賴。本科室在實際工作中發(fā)現(xiàn)冷凍切片和相對應(yīng)的“冷對”石蠟切片(不包括冷剩切片)在顯微鏡下有一定比例的差異，本實驗收集1 948例標本為分析對象，探討冷凍切片與“冷對”石蠟切片的影響因素及對策，現(xiàn)介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料收集2019年1～5月浙江省臺州醫(yī)院病理科1 948例行術(shù)中快速病理診斷病例的原始冷凍切片和“冷對”石蠟切片，男性734例，女性1 214例，年齡20～83歲。

1.2 方法調(diào)閱2019年1～5月病理標本的申請單，調(diào)出相應(yīng)的原始冷凍切片和“冷對”石蠟切片，鏡下觀察，將兩者的診斷結(jié)果進行比較，計算冷凍切片診斷與“冷對”石蠟切片診斷的符合率，分析兩者不符合的主要因素。

1.3 評判標準參考冷凍切片與常規(guī)石蠟切片診斷符合率的評定標準[1]：(1)符合：包括兩者的診斷結(jié)果完全相同及病變組織的良惡性符合，但分類、分型有差異；(2)不符合：包括冷凍病理診斷結(jié)果未給出明確診斷，僅向手術(shù)醫(yī)師提供病變?nèi)庋叟c鏡下所見或傾向性的意見及冷凍病理診斷結(jié)果出現(xiàn)良惡性診斷錯誤。

2 結(jié)果

1 948例行術(shù)中快速病理診斷標本組織來源分布廣泛(表1)，送檢組織以乳腺組織最多，其次為肺、甲狀腺、卵巢+附件。冷凍切片診斷與“冷對”石蠟切片診斷符合者占98.82%(表2)，不符合者占1.18%。不符合者主要為乳腺、肺、甲狀腺以及腋窩淋巴結(jié)組織。

表1 術(shù)中冷凍切片組織來源分布

表2 冷凍切片與“冷對”石蠟切片診斷對照

3 討論

術(shù)中冷凍制片技術(shù)是術(shù)中快速病理診斷技術(shù)的主要工作之一，有助于明確病變性質(zhì)、觀察惡性腫瘤的浸潤情況以及決定患者的治療方案[1]。術(shù)中冷凍切片與石蠟切片的診斷對照已有明確的評判標準，術(shù)中冷凍切片延遲診斷和誤診的主要原因已被多次報道且已摸索出一些有效的規(guī)避方法[1-7]。但關(guān)于冷凍切片與“冷對”石蠟切片的符合率情況鮮有報道。

作者通過回顧分析得到本組冷凍切片與“冷對”石蠟切片診斷符合率為98.82%，不符合率為1.18%。對不符合病例進行分析，總結(jié)主要的原因：(1)冷凍切片自身局限，1例甲狀腺疾病由于該原因漏診甲狀腺微小乳頭狀癌，冷凍切片細胞核不易出現(xiàn)異型重疊、核溝、毛玻璃樣改變等診斷特點，且人為假象多，故甲狀腺微小乳頭狀癌行術(shù)中快速病理診斷存在一定挑戰(zhàn)[5]。(2)冷凍切片制片原因，本組1例甲狀腺和2例淋巴結(jié)組織因修片過度或不足而誤診或漏診，如甲狀腺微小乳頭狀癌是指腫瘤直徑≤1.0 cm的甲狀腺乳頭狀癌，一旦粗修過度就易漏診。(3)冷凍切片診斷水平欠缺，3例乳腺疾病為早期癌，均因診斷醫(yī)師經(jīng)驗不足而過低診斷為良性病變。(4)“冷對”石蠟切片制片原因，4例乳腺、9例肺部疾病和3例甲狀腺均因常規(guī)制片不良導(dǎo)致不符。組織病變較小，病變組織因行冷凍切片而暴露，后續(xù)石蠟修片過度或者修片不全，導(dǎo)致切片中病變消失，尤其是甲狀腺微小乳頭狀癌等，也會改變病變性質(zhì)，如肺部、乳腺微浸潤性癌變成原位癌等等。同時無法為后續(xù)原位雜交、免疫組化、分子檢測、藥物分析等檢測提供有效切片，將影響確定腫瘤分類分型或制定治療方案。

為解決以上問題，作者提出如下建議：(1)冷凍切片機、冷凍染色機性能需穩(wěn)定，試劑需專人配制，減少客觀因素，提高冷凍切片的穩(wěn)定性。(2)提高冷凍切片質(zhì)量[2]和診斷水平，切片技術(shù)員需定期考核，病理醫(yī)師要充分了解患者病史與癥狀，且最好由兩位病理醫(yī)師共同閱片，避免誤診和漏診。(3)改善“冷對”石蠟切片流程?！袄鋵Α睒吮救〔臅r，包埋盒標記“冷對”字樣方便后續(xù)操作時重點關(guān)注，在包埋時使用不銹鋼包埋底模，盡量使組織切片包埋平整，然后切片時切忌過多粗修。Vilcea等[6]和錢立宇等[7]已通過實驗證實，連續(xù)切片技術(shù)可應(yīng)用于冷凍切片和“冷對”石蠟切片，連續(xù)切片技術(shù)可更有效地發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞浸潤情況和淋巴結(jié)中存在的“微轉(zhuǎn)移”，提高診斷準確性。

綜上所述，在術(shù)中冷凍切片工作中，我們要從技術(shù)和診斷兩方面的更多細節(jié)入手，提高冷凍切片與“冷對”石蠟切片的診斷符合率，有利于患者疾病的診斷和后續(xù)的治療，避免患者承受不必要的痛苦，減少醫(yī)患糾紛。