非綜合征型唇腭裂易感基因的研究進(jìn)展＊

文/梁軍榮，葉宇

根據(jù)是否存在其他先天畸形，將唇腭裂分為：非綜合征型唇腭裂和綜合征型唇腭裂。以某綜合征的表型之一出現(xiàn)的稱為綜合征型唇腭裂,多為單個(gè)基因突變引起，符合孟德爾遺傳模式；而非綜合征型唇腭裂（NSCL/P）臨床中所指其唇裂、唇裂合并腭裂發(fā)生時(shí)不伴隨他類系統(tǒng)的畸形，同時(shí)也不屬于任何綜合征，其中大多數(shù)病理特征不符合孟德爾遺傳模式。研究表明NSCL/P的發(fā)病與遺傳和環(huán)境因素共具有很大的相關(guān)性，唇腭部發(fā)育受到多種因子的影響，參與的調(diào)控的因子，在任何過程中其作用都會(huì)受到干擾，都是可能導(dǎo)致唇腭裂的發(fā)生。目前已發(fā)現(xiàn)有四類導(dǎo)致NSCL/P的易感基因。第一類：為葉酸代謝相關(guān)基因,包括：FR-1（葉酸受體）、MTHFR、Folbp1（folic acid-binding protein one gene）、CBS及經(jīng)SHH基因介導(dǎo)的甲硫氨酸合成酶還原酶（MSR gene）；第二類：為細(xì)胞代謝調(diào)控及信號(hào)傳導(dǎo)的相關(guān)基因,包括：EPHX1、SHH、BCL3、GABRB3、IRF6 等；第三類：為生長(zhǎng)因子及甾類/視黃酸超家族相關(guān)的調(diào)控基因,包括：TGFA、TGFB3、TGFB2、RARA、EGF 等；第四類：為綜合征型唇腭裂的相關(guān)致病基因。此類基因數(shù)量眾多,當(dāng)下已知的約250種，在總唇腭裂中約占 9%-25%，數(shù)量眾多的基因類型也帶來了明顯的影響，此類型大部分均表現(xiàn)出染色體上單個(gè)基因突變，從而致病誘發(fā)綜合征型唇腭裂,具有明確的特征，易于分辨。如：Van der Woude Syndrome（1q32，IRF6），Treacher Collins （5q32）等[1]?，F(xiàn)就與NSCL/P相關(guān)的第一類基因進(jìn)行簡(jiǎn)要介紹。

MTHFR基因位于1 號(hào)染色體的1p36 區(qū)域。Tolarova等[2]首次于1995年展開報(bào)道中提出，即阿根廷人群中的MTHFR基因與NSCL/P的發(fā)生存在一定關(guān)聯(lián)。MTHFR為葉酸代謝中所需的關(guān)鍵酶，同時(shí)也是葉酸在體內(nèi)的主要活性形式，即可對(duì)5,10-亞甲基四氫葉酸形成催化，令其還原為5-亞甲基四氫葉酸。后者屬于體內(nèi)主要的甲基供體，當(dāng)MTHFR基因發(fā)生突變時(shí),將改變?nèi)~酸的生成能力，又能影響DNA的合成，造成包括NSCL/P在內(nèi)的多種出生缺陷問題發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)增高,不僅增加了臨床負(fù)擔(dān),還給臨床疾病研究帶來了較大的影響[3-4]。

國(guó)外學(xué)者針對(duì)編碼MTHFR基因的兩個(gè)功能性突變位點(diǎn)在不同人群中進(jìn)行了大量研究，但對(duì)這些易感基因的分析與研究結(jié)果顯示,不同學(xué)者得出的結(jié)論并不完全一致，很多結(jié)論之間存在關(guān)聯(lián),又相互影響,甚至有的相互對(duì)立。

Passos-Bueno等[5]通過針對(duì)MTHFR基因的C677T多態(tài)性展開分析，T等位基因頻數(shù)的表現(xiàn)，作為NSCL/P患者會(huì)比正常人高，但對(duì)比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但Jugessur等[6]研究證實(shí),發(fā)生CL/P與CL/P患兒表現(xiàn)出MTHFR基因的C667T或A1298C多態(tài)性，兩者之間并無風(fēng)險(xiǎn)影響，但若患者目前存在C677T突變，該后代會(huì)存在NSCL/P發(fā)生率；患兒CPO的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)率增加與MTHFR基因的C677T多態(tài)性相關(guān)，其母親的基因型不會(huì)對(duì)CPO發(fā)生率形成影響；在單體型傳遞不平衡試驗(yàn)中，677T/及1298A外，其余存在的單體型不會(huì)過多向后代進(jìn)行傳遞。在針對(duì)中國(guó)人群的研究中，趙如冰等[7]對(duì)29個(gè)核心家庭實(shí)施PCR-RFLP方法檢測(cè)MTHFR熱敏感性基因型，經(jīng)證實(shí),NSCL/P基因的遺傳易感因素與多態(tài)性無明顯關(guān)聯(lián)。而在萬偉東等[8]的研究中,通過對(duì)中國(guó)安徽/江蘇兩地區(qū)人群展開調(diào)查分析,研究發(fā)現(xiàn)C677T多態(tài)性的傳遞并未出現(xiàn)不平衡，而NSCL/P患者中T等位基因的頻率高于對(duì)照組，認(rèn)為NSCL/P與C677T多態(tài)性之間密切相關(guān)。這與趙如冰的研究相悖。也有學(xué)者展開研究發(fā)現(xiàn)，在NSCL/P患者的母親存在MTHFR的突變頻率會(huì)明顯增高，認(rèn)為NSCL/P發(fā)生過程中有明顯的變化，葉酸循環(huán)起到了作用，分析原因可能：母親的基因型帶來了一定的影響，對(duì)NSCL/P的發(fā)生起到了促進(jìn)作用，但其發(fā)生機(jī)制并不是只與胚胎基因型有關(guān)。NSCL/P作為一種多基因疾病，是在多對(duì)微效基因協(xié)同作用下產(chǎn)生，并且與環(huán)境因素的影響關(guān)系密切，其易感基因的定位克隆非常困難。但截至目前，臨床對(duì)該疾病只停留于分子遺傳學(xué)研究中，因此從功能角度不能對(duì)其關(guān)系進(jìn)行進(jìn)一步探究，從而其相互作用與NSCL/P發(fā)病相關(guān)的機(jī)制有待解釋。

另外營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)也與NSCL/P的發(fā)生也有關(guān)系。Hall等[9]指出母體中葉酸的缺乏，會(huì)令胎胚的宮內(nèi)生長(zhǎng)受到影響，甚至胎盤出現(xiàn)斷裂與梗死。高劑量的葉酸（如，6mg/d）在原發(fā)腭與繼發(fā)腭形成的特定時(shí)期攝入，可能降低唇腭裂發(fā)生的可能性。而圍產(chǎn)期常規(guī)量（低于lmg/d）攝入葉酸對(duì)發(fā)病率并無顯著影響。Pezzetti等分別對(duì)患兒母親與對(duì)照組母親進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)患兒母親MTHFR基因的變異率更高，并揭示了母親的基因型比胎兒的基因型作用更大。

總之，NSCL/P 是一種復(fù)雜的遺傳性疾病，截至目前，對(duì)于該疾病發(fā)生機(jī)制尚未存在明確答案。神經(jīng)峭細(xì)胞的發(fā)育和遷移決定了面部胚胎發(fā)育，以及鰓弓、面突的形成等幾個(gè)融合且連續(xù)的過程，同時(shí)在其發(fā)展過程中，細(xì)胞增殖和遷移、分化、外基質(zhì)的產(chǎn)生等都會(huì)存在相關(guān)性，而這一系列復(fù)雜的過程同時(shí)會(huì)被多種因子的調(diào)控所影響。近年，隨著分子遺傳學(xué)的快速發(fā)展，該疾病的基因研究在臨床已獲得初步進(jìn)展，且目前仍在不斷探索中。但是由于該疾病存在一定的復(fù)雜性，以及患者自身遺傳方式不確定，與結(jié)果重復(fù)性差，不同地區(qū)甚至不同表型 NSCL/P 的候選基因座差異性，在遺傳模式研究結(jié)果中出現(xiàn)了較多分歧，甚至背離該研究。截至目前，臨床對(duì)于唇腭裂發(fā)病機(jī)制研究的關(guān)鍵，將眼光放在基因表達(dá)調(diào)控所呈現(xiàn)的細(xì)胞因子、受體和信號(hào)傳導(dǎo)中，對(duì)其進(jìn)行正確分析，才可了解該疾病的發(fā)病機(jī)理。為進(jìn)一步對(duì)其基因進(jìn)行認(rèn)識(shí)、了解，臨床仍需進(jìn)行大量實(shí)驗(yàn)與研究，以便對(duì)其發(fā)病機(jī)制的研究更加完善，實(shí)現(xiàn)對(duì)疾病的準(zhǔn)確判斷、預(yù)防等目的。