三七總皂苷對(duì)移植型肝癌大鼠AFP、AIF、FucAFP影響研究＊

文/張曉麗

我國(guó)是肝癌的高發(fā)區(qū)，其死亡率上升為癌癥死亡的第二位。動(dòng)物疾病模型的復(fù)制為肝癌研究提供了平臺(tái)，在肝癌的研究中占有十分重要的地位。在復(fù)制動(dòng)物疾病模型時(shí)，主要是采用人為的方法，這就會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物組織和器官出現(xiàn)了損害，嚴(yán)重影響到了人的代謝和身體功能。在為了避免發(fā)生疾病，要從掌握疾病發(fā)展規(guī)律做起，從預(yù)防做起，提供疾病的科學(xué)治療手段。由于肝癌的診治十分重要，為了更好地保障人的健康，以動(dòng)物疾病模型復(fù)制的方式，來研究肝癌發(fā)生的機(jī)制，并觀察肝癌的血供情況與治療效果，并給出最科學(xué)的治療手段[1-3]。對(duì)此，本研究對(duì)三七總皂苷對(duì)移植型肝癌大鼠AFP、AIF、FucAFP的影響進(jìn)行研究，有了一定的價(jià)值發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下：

1 資料和方法

1.1 一般資料

把80只移植型肝癌大鼠看作是研究對(duì)象，然后分別分為兩組，對(duì)照組和觀察組中各有40只，兩組大鼠的生長(zhǎng)周期、體重等資料進(jìn)行比較，P＞0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[4]。

1.2 方法

首先，把大鼠心肌缺血模型搭建好，然后把水合氯醛注射在大鼠的腹腔，最后在大鼠的左下肢和右下肢位置，將心電圖電極針置入，并記錄II導(dǎo)聯(lián)形態(tài)。在穿線時(shí)，是在大鼠左冠脈前支起的3cm位置開始，并觀察大鼠的心電圖變化情況。對(duì)照組中的大鼠進(jìn)行生理鹽水灌胃，觀察組中的40只大鼠進(jìn)行三七總皂苷進(jìn)行灌服，血清生化學(xué)指標(biāo)檢測(cè):造模成功后24h，在麻醉后大鼠的腹腔中把10%的水合氯醛注射，于大鼠的腹主動(dòng)脈進(jìn)行取血6ml，然后經(jīng)過15min的靜置，進(jìn)行10min離心，把上清液取走，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)。觀察分析兩組大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平[5]。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，用t檢驗(yàn)計(jì)量資料，用x2檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，P＜0.05，表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[6]。

2 結(jié)果

如表1所示，和對(duì)照組比較，觀察組中的移植型肝癌大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平均有所降低，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩組大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平比較

3 討論

一般來說，腫瘤主要是因?yàn)榫植拷M織上的細(xì)胞基因水平異常，并導(dǎo)致組織細(xì)胞生長(zhǎng)異常，進(jìn)而表現(xiàn)為局部腫塊。醫(yī)學(xué)研究中心通過對(duì)無(wú)毛無(wú)胸腺小鼠為研究對(duì)象，進(jìn)行了肝癌移植，有了新的研究?jī)r(jià)值，研究中心發(fā)現(xiàn)人體的腫瘤實(shí)質(zhì)上和小鼠的染色體含量、腫瘤細(xì)胞形態(tài)等是一樣的。同時(shí)，小鼠的生物化學(xué)與細(xì)胞動(dòng)力學(xué)也沒有發(fā)生特征變化，這就說明在對(duì)肝癌的研究中心選擇小鼠作為模型，是可行的操作。在大鼠移植型肝癌模型中，肝癌的介入治療實(shí)驗(yàn)得到了開展，并在研究中心能以實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)展開。邵成偉等采用了兩種不同的方法：瘤塊嵌插法和直接注射法，在對(duì)腫塊大小、陽(yáng)性率及生長(zhǎng)速度進(jìn)行觀察時(shí)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)直接注射法的陽(yáng)性率為85%，瘤塊嵌插法接種陽(yáng)性率為75%，這說明，采用這兩種方法都可行，然而直接注射法更行得通[7]。

在實(shí)驗(yàn)誘發(fā)性肝癌模型中，其致癌物的誘癌過程需要較長(zhǎng)的時(shí)間，成功率也難以達(dá)到百分百，更何況腫瘤發(fā)生的潛伏期會(huì)出現(xiàn)部分個(gè)體變異較大，不能夠支持同時(shí)獲得病程或癌塊大小較均一的動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)治療提供幫助，又因?yàn)槟[瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征多樣化，致癌多瘤病毒往往會(huì)誘發(fā)多部位腫瘤，一般來說就不常用藥物進(jìn)行篩選。從病因?qū)W角度看，它和人體腫瘤有一定的相似度，所以這個(gè)模型可以展開深入研究。現(xiàn)實(shí)中，因?yàn)樵擃愋湍[瘤生長(zhǎng)相當(dāng)?shù)穆?，瘤?xì)胞增殖又有很低的速度，這就會(huì)被用于綜合化療或腫瘤預(yù)防方面的研究[8]。大鼠移植型肝癌模型，采用直接注射法不僅僅制作上方便，同時(shí)還有很短的成瘤時(shí)間。具體來說，經(jīng)過濃縮的癌性腹水就會(huì)進(jìn)入到擬接種肝葉注射，有非常簡(jiǎn)便的操作。瘤塊嵌插法就十分的復(fù)雜了，只要有不合理的操作，就會(huì)導(dǎo)致肝包膜捅破口過大過深，出血明顯，最后出現(xiàn)了致接種失敗的后果。瘤塊嵌插法的優(yōu)點(diǎn)在于不易引起鄰近臟器浸潤(rùn)或轉(zhuǎn)移。

如果用SD大鼠來接種肝癌，盡量用Wistar大鼠進(jìn)行傳代。究其原因，主要是同種系大鼠傳代后接種，使得瘤自行消退或生長(zhǎng)停滯，難以有效判定介入治療的療效。傳代用Wistar鼠不宜偏大，50～70g最適宜。傳代鼠大，抵抗力強(qiáng)，易致瘤株失傳[9]。Walker2256或VX2瘤株種植于大鼠以建立肝腫瘤模型，不可否認(rèn)，該模型在對(duì)轉(zhuǎn)移性肝癌的實(shí)驗(yàn)研究中具有重要價(jià)值，但將此模型運(yùn)用于對(duì)原發(fā)性肝癌血流動(dòng)力學(xué)及介入治療學(xué)的探討方面仍缺乏足夠的說服力。且腫瘤均為肉瘤[9]，與肝細(xì)胞癌的組織學(xué)特征，血供特點(diǎn)，轉(zhuǎn)移途徑，治療后反應(yīng)等均不完全相同。在這種模型上介入治療肝癌的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有極強(qiáng)的說服力，同時(shí)也對(duì)臨床介入治療肝癌帶來了指導(dǎo)性價(jià)值。

本研究以80只移植型肝癌大鼠為研究對(duì)象，對(duì)照組中的大鼠進(jìn)行生理鹽水灌胃，觀察組中的40只大鼠進(jìn)行三七總皂苷進(jìn)行灌服。結(jié)果表明，觀察組中的移植型肝癌大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平有所改善，和對(duì)照組比較，P＜0.05。這說明，三七總皂苷可以改善移植型肝癌大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平。三七總皂苷能使培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞92%受到抑制，其對(duì)培養(yǎng)的瘤細(xì)胞也有明顯抑制作用。皂甙Rhl可抑制小鼠黑色素瘤(B16)的生長(zhǎng)，使癌細(xì)胞再分化誘導(dǎo)逆轉(zhuǎn)成非癌細(xì)胞。三七煎劑在體內(nèi)對(duì)JYC26有抑制作用；三七中的多糖體在體內(nèi)能明顯抑制小鼠肉瘤-180；三七還有抗噬菌體活性。三七總皂苷可提高小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能和體液免疫功能。三七中對(duì)免疫功能有影響的成分，主要是三七總皂甙和三七多糖。 此外，三七水浸液能縮短家兔凝血時(shí)間，并使血小板數(shù)增加而有止血作用； 對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎有明顯的預(yù)防和治療作用；對(duì)中樞神經(jīng)有興奮、抑制作用，還有鎮(zhèn)痛作用；能明顯增加冠狀動(dòng)脈血流量，減少心肌耗氧量；還有抗炎、增強(qiáng)腎上腺皮質(zhì)功能等作用。

綜上所述，三七總皂苷可以改善移植型肝癌大鼠的AFP、AIF、FucAFP指標(biāo)水平，值得推廣應(yīng)用。