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    響應(yīng)面法優(yōu)化桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料制備工藝及其抗氧化活性研究

    2021-06-11 09:03:14李大成韋巧艷舒萬鑫李英容蔡吉祥
    食品研究與開發(fā) 2021年9期
    關(guān)鍵詞:甘蔗汁茉莉花茶桑葚

    李大成,韋巧艷,舒萬鑫,李英容,蔡吉祥

    (廣西科技師范學(xué)院食品與生化工程學(xué)院,廣西 來賓 546199)

    甘蔗是喬本科的多年生草本植物,在我國廣西、廣東、云南等南方亞熱帶地區(qū)廣泛種植。甘蔗含糖量高,而且富含人體容易缺乏的多種微量元素,其中鐵元素的含量居水果之首,因此甘蔗常被人們稱作“補血果”和“鐵桿莊稼”[1-3]。隨著人們生活水平的提高及對健康生活的追求,人們對天然飲料的需求也日漸增加。甘蔗汁中含有豐富的多酚及黃酮類物質(zhì),具有較好的抗氧化、抗炎和抗突變能力[4-5]。但是目前國內(nèi)的甘蔗汁主要用于生產(chǎn)白砂糖,甘蔗制糖行業(yè)存在著產(chǎn)品單一的問題,限制了制糖行業(yè)的發(fā)展。

    桑葚(mulberry)又名桑葚子、桑果、烏椹等,是蕁麻目??粕僦参锷涞墓?。桑葚不僅含有人體所需的必需氨基酸和各類營養(yǎng)物質(zhì),而且具有抗氧化、預(yù)防心腦血管疾病、抑制癌細胞生長以及調(diào)節(jié)免疫等功效,被國家衛(wèi)生部列為“既是食品又是藥品”的“藥食同源”的農(nóng)產(chǎn)品之一[6-8]。但桑葚采摘期短、水分高、屬于漿果類。不耐壓、容易腐爛變質(zhì)、不易貯藏和運輸,一旦變質(zhì)就會造成極大的資源浪費和環(huán)境污染。目前以甘蔗汁和桑葚汁為原料進行調(diào)配制備具有保健功效的桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料鮮有報道。本試驗以甘蔗汁和桑葚汁為主要原料,加入茉莉花茶湯調(diào)節(jié)其風(fēng)味,制備出一種新型的綠色保健型飲料。該試驗不僅可以為甘蔗的綜合利用提供新的途徑,提高甘蔗及桑葚的附加值,同時可以有效地解決桑葚貯藏保鮮時間短的問題,為蔗汁復(fù)合飲料的研究開發(fā)提供必要的理論依據(jù)。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器與設(shè)備

    試驗所需儀器型號及生產(chǎn)廠家見表1。

    表1 儀器Table 1 The instrument

    1.2 材料與試劑

    試驗所用材料與試劑見表2。

    表2 試劑Table 2 Material

    1.3 試驗方法

    1.3.1 工藝流程

    1.3.2 操作要點

    1.3.2.1 甘蔗汁的制備

    取甘蔗濃縮汁25 g,定容到100 mL,混合均勻后備用。

    1.3.2.2 桑葚汁及茉莉花茶湯的制備

    取桑葚濃縮汁6.7 g,定容到100 mL,混合均勻后備用;取茉莉花茶3 g于燒杯中浸泡,按料液比1∶40(g/mL)加入蒸餾水,在85℃水浴鍋中浸提10 min,冷卻、過濾得到茉莉花茶湯[9]。

    1.3.3 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料單因素試驗

    以桑葚-甘蔗汁體積比3∶4、檸檬酸添加量1.5%、維生素C添加量4%、茉莉花茶湯添加量35%為固定工藝參數(shù),以感官評分為指標,考察桑葚-甘蔗汁體積比(1∶6、2∶5、3∶4、4∶3、5∶2、6∶1)、檸檬酸添加量(0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%)、維生素 C添加量(2%、3%、4%、5%、6%)、茉莉花茶湯添加量(20%、25%、30%、35%、40%)4個主要影響因素對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料口感的影響。

    1.4 感官評分標準

    根據(jù)GB/T 31121—2014《果蔬汁類及其飲料》的相關(guān)規(guī)定,總分以100分記,各項所占比例為色澤∶氣味∶口感∶組織狀態(tài)=2∶3∶3∶2,篩選出 10 名成員組成評價小組,制定感官評價標準如表3所示。根據(jù)感官評價標準對復(fù)合飲料進行評分,并嚴格按照標準設(shè)置評價環(huán)境。

    表3 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評價標準Table 3 Sensory evaluation criteria of mulberry-sugarcane juice complex beverage

    1.5 響應(yīng)面法優(yōu)化桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的配制

    依據(jù)單因素試驗確定不同因素的影響范圍,以桑葚-甘蔗汁體積比、檸檬酸添加量、維生素C添加量和茉莉花茶湯添加量為考察對象,感官評分作為響應(yīng)值,采用Design Expert8.0.6方法設(shè)計四因素三水平響應(yīng)面試驗,試驗因素水平表見表4。

    表4 響應(yīng)面因素水平Table 4 Response surface factor level

    1.6 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的抗氧化活性測定

    1.6.1 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對DPPH自由基清除能力的測定

    分別量取4 mL不同濃度梯度的桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料和0.2 mmol/L DPPH-乙醇溶液,充分混勻后放置在陰暗處靜置30 min,檢測其在517 nm波長時的吸光度值A(chǔ)1,同時用乙醇作空白對照組,吸光度值記為A0,取4 mL復(fù)合飲料和4 mL乙醇溶液混勻按上述方法測定吸光值記為A2[10-11]。以抗壞血酸作為對照組,無水乙醇調(diào)零,重復(fù)3次取平均值。DPPH自由基清除率的計算公式如下[12]。

    1.6.2 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對羥基自由基清除能力的測定

    準確量取不同濃度梯度的桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料1 mL,依次分別加入2 mL 9.9 mmol/L FeSO4·7H2O、9.9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液、8.8 mmol/L過氧化氫溶液于比色管中定容至10 mL,于37℃水浴反應(yīng)30 min,測定其在510 nm波長下的吸光度值A(chǔ)x1[13-15],以蒸餾水作參比,510 nm下測吸光值記為Ax0,量取不同濃度梯度的桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料1 mL,2 mL的9.9 mmol/L FeSO4·7H2O、9.9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液于比色管中定容至10 mL,按上述方法測定其吸光度值A(chǔ)x2。以抗壞血酸作為對照組,重復(fù)3次取平均值。羥基自由基清除率的計算公式[16]。

    1.7 數(shù)據(jù)處理

    試驗數(shù)據(jù)采用 Microsoft Excel 2016、Origin 2018和Design-Expert 8.0.6進行分析處理。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 桑葚-甘蔗汁體積比對復(fù)合飲料品質(zhì)的影響

    在檸檬酸添加量1.5%、維生素C添加量4%、茉莉花茶湯添加量35%的條件下,以蔗汁-桑葚體積比為變量,制備桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料,考察桑葚-甘蔗汁體積比對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評分的影響,結(jié)果見圖1。

    圖1 桑葚汁和甘蔗汁體積比對復(fù)合飲料感官評分的影響Fig.1 Effect of the volume ratio of mulberry juice to sugarcane juice on sensory evaluation of compound beverage

    由圖1可知,當(dāng)桑葚-甘蔗汁體積比在3∶4時,感官評分最高,為90.63分,口感酸甜適中,兼具兩者風(fēng)味,色澤透亮。甘蔗汁口感甜膩,桑葚汁口感偏酸澀,甘蔗汁比例較高時,甘蔗風(fēng)味濃郁,但糖分含量會偏高,口感過于甜膩;桑葚汁比例較高時,桑葚風(fēng)味過重,口感微甜偏酸澀,且顏色呈紫黑色,感官上不易被消費者接受,感官評分偏低。因此選擇最佳桑葚-甘蔗汁體積比為 3∶4。

    2.2 檸檬酸添加量對復(fù)合飲料品質(zhì)的影響

    在桑葚-甘蔗汁體積比3∶4、維生素C添加量4%、茉莉花茶湯添加量35%的條件下,以檸檬酸添加量為變量,制備桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料,考察檸檬酸添加量對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評分的影響,結(jié)果見圖2。

    圖2 檸檬酸添加量對復(fù)合飲料感官評分的影響Fig.2 Effect of citric acid on sensory evaluation of compound beverage

    檸檬酸作為抑菌劑和調(diào)節(jié)劑,具有降低飲料的pH值、抑制微生物繁殖,促進纖維素和鈣、磷等物質(zhì)溶解的作用[17],但是檸檬酸呈酸味,對飲料風(fēng)味和口感都有影響。由圖2可知,檸檬酸添加量為1.5%時感官評分最高達到89.97分,在大于1.5%時,其感官評分呈現(xiàn)下降趨勢。檸檬酸的添加量要達到一定量才具備抑菌和調(diào)節(jié)飲料口感的作用,但是添加量超過1.5%時,檸檬酸的酸味特性較為突顯,飲料口感偏酸,掩蓋甘蔗和桑葚的風(fēng)味,導(dǎo)致復(fù)合飲料風(fēng)味較差。因此選擇最佳檸檬酸添加量為1.5%。

    2.3 維生素C添加量對復(fù)合飲料品質(zhì)的影響

    在桑葚-甘蔗汁體積比3∶4、檸檬酸添加量1.5%、茉莉花茶湯添加量35%的條件下,以維生素C添加量為變量,制備桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料,考察維生素C添加量對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評分的影響,結(jié)果見圖3。

    圖3 維生素C添加量對復(fù)合飲料感官評分的影響Fig.3 Effects of vitamin C supplementation on sensory evaluation of compound beverages

    維生素C具有防止飲料發(fā)生褐變和營養(yǎng)成分損失的作用[18],由圖3可知,當(dāng)維生素C添加量增大到4%時,感官評分達到最高90.1分,當(dāng)維生素C小于4%時,復(fù)合飲料的顏色比較偏紫黑色,感官上不易被接受;而當(dāng)維生素C添加量超過4%后,則會導(dǎo)致飲料的pH值降低,不能夠遮蓋桑葚的苦澀味,還改變了飲料的風(fēng)味[19-21],導(dǎo)致復(fù)合飲料的感官評價值下降。因此選擇最佳維生素C添加量為4%。

    2.4 茉莉花茶湯添加量對復(fù)合飲料品質(zhì)的影響

    在桑葚-甘蔗汁體積比3∶4、檸檬酸添加量1.5%、維生素C添加量4%的條件下,以茉莉花茶湯添加量為變量,制備桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料,考察茉莉花茶湯添加量對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評分的影響,結(jié)果見圖4。

    圖4 茉莉花茶湯添加量對復(fù)合飲料感官評分的影響Fig.4 Effect of adding amount of jasmine tea soup on sensory evaluation of compound beverage

    由圖4可知,當(dāng)茉莉花茶添加量在20%~40%時,其感官評分呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢,當(dāng)茉莉花茶湯的添加量為35%時,感官評分最高達到91分,桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的酸甜口感適中,風(fēng)味香氣適宜。

    茉莉花茶湯可以賦予飲料清新的香氣,調(diào)節(jié)和掩蓋桑葚、甘蔗汁的苦澀味。茉莉花湯過多,茉莉花香氣完全掩蓋桑葚、甘蔗的特殊風(fēng)味,導(dǎo)致口感不適宜飲用;茉莉花茶湯過少,茉莉花香氣無法中和甘蔗汁的甜膩,也無法掩蓋桑葚汁的酸澀味,導(dǎo)致各種風(fēng)味無法融合,口感復(fù)雜,感官評價得分較低。因此選擇最佳茉莉花茶湯的添加量為35%。

    2.5 響應(yīng)面試驗

    利用Design-Expert 8.0.6軟件對響應(yīng)面試驗進行設(shè)計,結(jié)果如表5所示。

    表5 Box-Behnken試驗設(shè)計及結(jié)果Table 5 Design and results of Box-Behnken experiments

    對表5進行擬合回歸,得到桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料感官評分與各因素變量(A桑葚-甘蔗汁體積比、B檸檬酸添加量、C維生素C添加量、D茉莉花茶湯添加量、Y感官評分)之間的二元回歸方程:Y=91.4+2.947A-2.43B-0.8C-1.858D-9.888A2-9.25B2-4.925C2-7.463D2+2.275AC+2.875AD-0.725AB+2.125BC+2.9BD。

    進一步對表5試驗結(jié)果進行方差分析,結(jié)果如表6所示。

    表6 Box-Behnken試驗?zāi)P头讲罘治鯰able 6 Box-behnken experimental model analysis of variance

    由表6可知,該試驗?zāi)P头讲顦O顯著(p<0.01),失擬項不顯著(p=0.123 4>0.05),因此該模型可以反映各因素對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的影響。該回歸模型的決定系數(shù)R2=0.973 7,R2Adj=0.947 3,說明該回歸模型與試驗數(shù)值的擬合度程度較高,進一步說明該回歸方程可以對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的感官評價進行分析和預(yù)測。由F值可知各因素對響應(yīng)值影響的主次順序為:A桑葚-甘蔗汁體積比>B檸檬酸添加量>D茉莉花茶湯添加量>C維生素C添加量。影響感官評分的因素中,一次項 A、B,二次項 A2、B2、C2、D2都是極顯著水平(p<0.01),而一次項D以及交互項AD、BD是顯著水平(p<0.05),而其他結(jié)果影響不顯著(p>0.05)。

    各因素之間的交互作用可以由響應(yīng)面直接反映,橢圓形等高線表示兩個因素間的交互作用明顯,圓形表示兩因素間的交互作用不明顯[22]。根據(jù)二元回歸方程繪制三維響應(yīng)面圖和二維等高線圖,結(jié)果如圖5、圖6所示。

    圖5 茉莉花茶湯添加量與桑葚-甘蔗汁體積比對復(fù)合飲料感官評分的等高線及響應(yīng)值Fig.5 Contour line and response value of sensory score of compound beverage by adding amount of jasmine tea soup and mulberries-sugarcane juice volume ratio

    圖6 檸檬酸添加量與茉莉花茶湯添加量對復(fù)合飲料感官評分的等高線及響應(yīng)值Fig.6 Contour line and response value of adding amount of citric acid and jasmine tea soup to sensory score of compound beverage

    由圖5、圖6可以看出,AD、BD的交互作用對復(fù)合飲料的感官評價值具有顯著影響,而其他的交互作用都不顯著,且圖5、圖6的三維立體圖響應(yīng)面的開口朝下,表明響應(yīng)面具有最大值,在試驗范圍內(nèi)有最優(yōu)配方。

    應(yīng)用Design-Expert 8.0.6軟件對回歸方程分析,得到的最優(yōu)響應(yīng)面結(jié)果為:桑葚-甘蔗汁體積比為3:4,檸檬酸添加量1.4%,維生素C添加量4%,茉莉花茶湯添加量34.27%,對應(yīng)的感官評分為91.877 6分。根據(jù)實際情況調(diào)整茉莉花茶湯添加量為34%,在此條件下進行飲料復(fù)配得到的感官評分值的平均值為90.72分,與預(yù)測值相接近,故該響應(yīng)面優(yōu)化模型所得到的工藝參數(shù)的可靠性高。

    2.6 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對DPPH自由基清除能力分析

    以抗壞血酸作為對照組,考察桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對DPPH自由基清除能力,結(jié)果如圖7、圖8所示。

    圖7 復(fù)合飲料對DPPH自由基的清除效果Fig.7 Scavenging effect of compound beverage on DPPH free radical

    圖8 抗壞血酸對DPPH自由基的清除效果Fig.8 The scavenging effect of ascorbic acid on DPPH free radical

    由圖7可知,桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的濃度在0.2g/L~1.8g/L的范圍內(nèi),桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對DPPH自由基清除能力隨著溶液濃度增大而提高。通過線性擬合得到桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的溶液質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率的線性方程是:y=0.422 5x+0.041(R2=0.998 1),IC50=1.086 g/L。由圖8可知,抗壞血酸的溶液的質(zhì)量濃度與DPPH自由基清除率的線性方程為:y=31.75x-0.1099(R2=0.9929),IC50=0.019 g/L。桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的質(zhì)量濃度在料濃度在1.8 g/L時,DPPH自由基清除率達到78.93%,表明復(fù)合飲料具有抗氧化性,但其清除DPPH自由基的能力比抗壞血酸的弱。

    2.7 桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對羥基自由基清除能力分析

    以抗壞血酸作為對照組,考察桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對羥基自由基清除能力。結(jié)果如圖9、圖10所示。

    圖9 復(fù)合飲料對羥基自由基的清除效果Fig.9 The scavenging effect of compound beverage on hydroxyl radical

    圖10 抗壞血酸的羥基自由基的清除效果Fig.10 Scavenging effect of hydroxyl radical of ascorbic acid

    由圖9可知,桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的濃度在15g/L~75 g/L的范圍內(nèi),桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料對羥基自由基清除能力隨著溶液濃度增大而提高。通過線性擬合得到桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的溶液質(zhì)量濃度與羥基自由基清除率的線性方程是:y=0.011 2x+0.048 7(R2=0.986 1),IC50=40.29 g/L。由圖10可知,抗壞血酸的溶液濃度與羥基自由基清除率的線性方程是:y=0.349 3x-0.032 5(R2=0.996 6),IC50=1.52 g/L。桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的質(zhì)量濃度在料濃度在80 g/L時,羥基自由基清除率達到87.74%,表明復(fù)合飲料具有抗氧化性,但其清除羥基自由基的能力比抗壞血酸的弱。

    3 結(jié)論

    通過單因素試驗和響應(yīng)面法,對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料進行感官評價。結(jié)果表明最佳配方為:桑葚汁和甘蔗汁體積比為3∶4,檸檬酸添加量為1.4%,茉莉花茶湯添加量為34%,維生素C添加量為4%,在此條件下,桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料的感官評價得分為90.72分,此時復(fù)合飲料的色澤呈現(xiàn)紫紅色,酸甜適中,帶有濃濃的茉莉花茶的香氣。在此最優(yōu)條件下,對桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲料進行體外抗氧化試驗,結(jié)果表明桑葚-甘蔗汁復(fù)合飲對DPPH自由基和羥基自由基具有較強的清除能力。

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