柬埔寨雙瓣茉莉全封閉緊貼覆膜扦插繁殖技術(shù)研究

李先民，卜朝陽，李春牛*，盧家仕，黃展文，唐美嬋

1. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院 花卉研究所，廣西 南寧 530007；2. 橫縣茉莉花研究所，廣西 橫縣 530300

茉莉花（Jasminum sambac（L.）Aiton），系木犀科（Oleaceae）素馨屬（Jasminum）常綠植物，原產(chǎn)于印度，于漢代傳入我國，在我國種植已有2000多年的歷史[1]?，F(xiàn)在我國廣西、福建、四川及云南等地規(guī)模種植，是重要的“一帶一路”經(jīng)濟(jì)植物[2]。茉莉花花量大，花期長，花香持久，被譽(yù)為“天下第一香”[3]，是著名的花茶和香精原料[4]，也具有較高的觀賞和藥用價值。目前，有關(guān)茉莉花的研究主要涉及種質(zhì)資源收集評價[5]、種苗繁育[6-7]、生理生化[8]、解剖學(xué)[9]、化學(xué)成分鑒定[10]、分子生物學(xué)[11]、誘變育種[12]、花茶加工[13-14]、產(chǎn)業(yè)發(fā)展[15]等方面。

柬埔寨雙瓣茉莉（Jasminum sambac），由廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所從柬埔寨引進(jìn)，屬觀賞型茉莉花，也可窨制花茶。其根莖粗壯；葉對生，深綠，質(zhì)較厚，呈卵型，葉片邊緣褶皺；聚傘花序，頂生或腋生1 ～ 4朵花；花苞緊結(jié)，花苞大而尖；花冠潔白，2 ～ 3層且直徑較大，花冠裂片細(xì)長；花芳香；花期4月中旬至10月上旬，由初夏到深秋花開不絕，具有極高的觀賞價值[16]。柬埔寨雙瓣茉莉結(jié)實率較高，是理想的茉莉花雜交育種材料。柬埔寨雙瓣茉莉以扦插繁殖為主，但在自然條件下扦插效果并不理想。目前，已有許多探索簡單高效的扦插育苗技術(shù)的報導(dǎo)[17-18]，國內(nèi)外涉及茉莉花等素馨屬植物扦插繁殖技術(shù)的研究也有報道[19]，但尚未見針對柬埔寨雙瓣茉莉這個品種扦插繁殖技術(shù)的。為提高繁育效率、擴(kuò)大柬埔寨雙瓣茉莉可利用資源，本試驗研究探索了扦插后全封閉覆膜以及插穗留芽數(shù)、留葉片數(shù)、促根劑應(yīng)用等對柬埔寨雙瓣茉莉扦插繁殖的影響，以期為其資源的擴(kuò)繁和推廣應(yīng)用提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

試驗在廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研發(fā)中心溫室內(nèi)進(jìn)行，溫室外蓋一層遮光率為75%的遮陽網(wǎng)，溫室內(nèi)溫度控制在25℃ ～ 32℃。試驗地海拔 73 m，屬南亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)（22°48′N、108°22′E）[20]，年平均氣溫 21.6℃，年均降雨量1304.2 mm，平均相對空氣濕度79%，無霜期334 d[21]。

1.2 試驗材料

試驗材料均采自廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院科研基地茉莉花種質(zhì)資源圃，母本3 ～ 4 a生、健康無病蟲害。采集當(dāng)年生半木質(zhì)化健康飽滿的枝條剪制插穗，采用多菌靈浸泡插穗殺菌消毒5 min。扦插基質(zhì)采用品氏（PINDSTRUP）泥炭土，將泥炭土填充于32孔育苗穴盤（單孔長4 cm*寬4 cm*高10 cm），扦插前三天用多菌靈對扦插基質(zhì)進(jìn)行殺菌消毒，扦插前將基質(zhì)澆透水，每穴扦插一根插穗，扦插時插穗葉片展開方向一致，盡量避免葉片重疊。

1.3 試驗方法

1.3.1 覆膜試驗

試驗于2019年9月21日進(jìn)行。插穗長度控制在9 ～ 15 cm。設(shè)置全封閉緊貼覆膜扦插（T1）和不覆膜扦插（T2）兩種處理。全封閉緊貼覆膜扦插處理：扦插后，向葉片及插穗均勻噴施促根劑，用量為 250 ～ 350 mL/育苗穴盤，之后用塑料薄膜（厚度0.1 ～ 0.3 mm）緊貼插穗上切口，薄膜四周壓在育苗穴盤底部將育苗穴盤完全封閉，封閉后不再澆水；不覆膜扦插處理：扦插前先用促根劑浸泡處理插穗3 h，扦插過程采用間歇噴霧及時保持扦插基質(zhì)濕潤。促根劑統(tǒng)一采用200 mg/L IBA。每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)樣本數(shù)64株。于扦插25 d后分別調(diào)查生根率、根系數(shù)量、根系長度（每次各處理隨機(jī)選取20株插穗進(jìn)行統(tǒng)計求平均）與新梢率。

1.3.2 插穗類型及促根劑試驗

試驗于2019年9月21日進(jìn)行。插穗長度控制在9 ～ 15 cm。扦插方式采用上述全封閉緊貼覆膜扦插方式。采用L9（34）正交設(shè)計方案（表1 ～ 表2），設(shè)置插穗留芽數(shù)、插穗留葉片數(shù)、IBA濃度和NAA濃度等4個因素，各因素設(shè)置3個水平共9個處理，每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)樣本數(shù)64株。于扦插25 d后分別調(diào)查生根率、根系數(shù)量、根系長度（每次各處理隨機(jī)選取20株插穗進(jìn)行統(tǒng)計求平均）與新梢率。

表1 插穗類型及促根劑效應(yīng)試驗因素水平Table 1 Factor levels of cutting type and root growth regulator effect test

表2 插穗類型及促根劑效應(yīng)L9（34）正交試驗設(shè)計方案Table 2 L9（34）orthogonal design for cuttings type and root growth regulator effect test

1.3.3 插穗生根部位試驗

試驗于2019年9月21日進(jìn)行。插穗長度控制在 9 ～ 15 cm。扦插方式采用上述全封閉緊貼覆膜扦插方式，促根劑統(tǒng)一采用300 mg/L IBA＋300 mg/L NAA。插穗規(guī)格設(shè)置3個處理：含一個芽、含二個芽和含三個芽，每處理重復(fù)3次，每次重復(fù)樣本數(shù)64株。于扦插25 d后分別調(diào)查各處理生根率和生根插穗中各部位生根占比。

1.4 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計用Excel 2010軟件，方差分析和顯著性檢驗（Duncan 新復(fù)極差法）用SPSS 21.0軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 全封閉緊貼覆膜扦插對柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根及生長的影響

由表3可知，兩種扦插方式對柬埔寨雙瓣茉莉插穗的生根率、根系數(shù)量、最長根系長度及新梢率的影響均達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。其中采用全封閉緊貼覆膜方式扦插插穗的生根率、根系數(shù)量及根系長度均最高，分別為93.84%、12.82條和7.57 cm，顯著高于不覆膜扦插處理；但采用不覆膜扦插方式，插穗新梢率（73.07%）顯著高于全封閉緊貼覆膜扦插（28.61%）。

表3 不同扦插方式對柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根及生長的影響Table 3 Effects of different cutting methods on rooting and growth of Cambodian Jasminum sambac cuttings

2.2 插穗類型及促根劑對柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根的影響

由表4可知，柬埔寨雙瓣茉莉扦插的生根率、根系數(shù)量、最長根系長度及插穗新梢率在各處理組合間的差異均達(dá)到顯著水平（P＜0.05）。生根率最高及根系數(shù)量最多的處理為組合3，即留一個芽+留兩片全葉+ IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L），生根率達(dá)97.92%，根系數(shù)量達(dá)27.72條；在生根率方面與組合2、5、6、8、9相比差異不顯著（P＞0.05），顯著高于組合1、4、7；在根系數(shù)量方面顯著高于其他處理組合。根系長度最長的處理為組合2，即留一個芽 + 留單片全葉 + IBA（100 mg/L）+ NAA（40 mg/L），最長根系長度達(dá)8.66 cm，與組合3、5、6、8相比最長根系長度差異不顯著，顯著高于其他處理組合。插穗新梢率最高的處理為組合1，即留一個芽+留單片半葉+ IBA（50 mg/L）+ NAA（20 mg/L），新梢率達(dá)85.42%，與組合7相比新梢率差異不顯著，顯著高于其他處理組合。

由表5可知，插穗留芽數(shù)對柬埔寨雙瓣茉莉扦插插穗的根系數(shù)量、根系長度及新梢率的影響達(dá)到顯著水平（P＜0.05），但對扦插生根率的影響未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）；插穗留葉片數(shù)對柬埔寨雙瓣茉莉扦插生根率、根系數(shù)量、根系長度及新梢率的影響均達(dá)到顯著水平；IBA及NAA濃度對柬埔寨雙瓣茉莉扦插插穗根系數(shù)量和新梢率的影響達(dá)到顯著水平，但對生根率及根系長度的影響未達(dá)到顯著水平。本試驗中的4個因素對生根率影響由大到小排列為留葉片數(shù)＞NAA濃度＞留芽數(shù)＞IBA濃度，對根系數(shù)量影響由大到小排列為留葉片數(shù)＞NAA濃度＞留芽數(shù)＞IBA濃度，對根系長度影響從大到小排列為留葉片數(shù)＞留芽數(shù)＞IBA濃度＞NAA濃度，對插穗新梢率影響從大到小排列為留葉片數(shù)＞NAA濃度＞IBA濃度＞留芽數(shù)。多重比較顯示（表4），就生根率而言A2B3C2D3組合為最佳組合，即留兩個芽+留兩片全葉+ IBA（100 mg/L）+ NAA（80 mg/L）； 就 根 系數(shù)量而言A1B3C3D3組合為最佳組合，即留一個芽+留兩片全葉+IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L）；就根系長度而言A1B2C1D2組合為最佳組合，即留一個芽+留一片全葉+ IBA（50 mg/L）+ NAA（40 mg/L）；就插穗新梢率而言A1B1C3D1組合為最佳組合，即留一個芽+留一片半葉 +IBA（200 mg/L）+NAA（20 mg/L）。

表4 插穗類型及促根劑對柬埔寨雙瓣茉莉扦插生根及生長的影響Table 4 Effects of cuttings type and root growth regulator on cutting rooting and growth of Cambodian Jasminum sambac

表5 留芽數(shù)、留葉片數(shù)、IBA濃度及NAA濃度對柬埔寨雙瓣茉莉扦插生根及生長指標(biāo)的多重比較Table 5 Multiple comparison of the number of bud-retention, leaf-retention, IBA concentration, NAA concentration on cutting rooting and growth indicators of Cambodian Jasminum sambac

2.3 留芽數(shù)對生根部位的影響

由表6可知，柬埔寨雙瓣茉莉插穗不同留芽處理對其扦插生根率的影響未達(dá)到顯著水平（P＞0.05），生根率最高的為留兩個芽，生根率達(dá)89.88%，與留一個芽和留三個芽相比差異不顯著（P＞0.05）。不同留芽處理間相比，除插穗下部生根占比達(dá)到顯著水平外（P＜0.05），其他各部位生根占比均未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。從各留芽處理來看，留一個芽的插穗其各部位生根比例差異顯著（P＜0.05），其生根部位主要集中在插穗上部、中部及切口處，以插穗上部生根比例最高，占50.36%，顯著高于其他部位（P＜0.05）；留二個芽的插穗其各部位生根比例差異不顯著（P＞0.05），以插穗下部生根比例最高，占39.7%，與上部相比差異不顯著（P＞0.05），但顯著高于插穗切口和中部（P＜0.05）；留三個芽的插穗其各部位生根比例差異顯著（P＜0.05），以插穗下部生根比例最高，占39.39%，顯著高于其他部位（P＜0.05）。

表6 留芽數(shù)對柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根部位及生根率的影響Table 6 Effect of bud-retention number on rooting site and rooting rate of Cambodian Jasminum sambac cuttings

3 討論

扦插繁殖速度快，便于規(guī)模生產(chǎn)，能較好保持母本性狀[22]。扦插繁殖研究的重點(diǎn)是探索最佳的外部環(huán)境條件及內(nèi)部因素提高插穗成活率和成苗質(zhì)量[23]。本試驗結(jié)果表明采用全封閉緊貼覆膜扦插方式對柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根有顯著促進(jìn)作用，主要是采用全封閉緊貼覆膜方式使插穗及扦插基質(zhì)包裹于密閉空間，能較好地維持扦插環(huán)境中空氣濕度與基質(zhì)濕度恒定，進(jìn)而維持插穗內(nèi)水分平衡；泥炭為黑色扦插基質(zhì)，有較好吸熱作用，全封閉緊貼覆膜，能有效減少扦插基質(zhì)溫度的散失，使扦插基質(zhì)的溫度長時間略高于空氣溫度，有助于插穗營養(yǎng)物質(zhì)運(yùn)移、分解與合成，對根的分化有益[24]。此外，全封閉緊貼覆膜扦插方式膜內(nèi)空氣濕度維持在90%以上，基質(zhì)濕度維持在36% ～ 40%；而扦插不覆膜處理扦插床周圍的空氣濕度在60% ～ 70%，基質(zhì)濕度維持在22% ～ 27%，適宜的扦插基質(zhì)濕度和空氣濕度是確保扦插生根的重要條件[25]，全封閉緊貼覆膜扦插方式營造了適宜柬埔寨雙瓣茉莉插穗生根的溫濕環(huán)境，因此有利于插穗生根及不定根生長。而全封閉緊貼覆膜扦插方式不利于柬埔寨雙瓣茉莉插穗新梢抽梢，主要是不覆膜處理的插穗上部切口容易干枯，保留葉片容易干枯脫落，不利于保留葉片進(jìn)行光合作用以產(chǎn)生養(yǎng)分供給插穗根原基的誘導(dǎo)，插穗只能通過養(yǎng)分供給促進(jìn)抽梢展葉的方式來進(jìn)行光合作用，這同時也會加大插穗中內(nèi)含營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，不利于養(yǎng)分供給插穗根原基的誘導(dǎo)[22]。而對比全封閉緊貼覆膜方式，插穗保留葉片的葉形及葉色保持完好，能良好地進(jìn)行光合作用產(chǎn)生養(yǎng)分，與插穗內(nèi)部養(yǎng)分形成協(xié)同作用，促進(jìn)生根及根系生長。采用全封閉緊貼覆膜方式可有效縮短柬埔寨雙瓣茉莉扦插移栽時間，扦插25 d后側(cè)根已分化形成較為完整的根系，可以進(jìn)行移栽。

本試驗結(jié)果還表明，全封閉緊貼覆膜扦插條件下柬埔寨雙瓣茉莉插穗留芽數(shù)對其扦插根系數(shù)量、根系長度及新梢率有顯著影響，但對扦插生根率的影響不顯著；插穗留葉片數(shù)對扦插生根率、根系數(shù)量、根系長度及新梢率均有顯著影響；IBA及NAA濃度對柬埔寨雙瓣茉莉扦插插穗根系數(shù)量和新梢率有顯著影響，但對生根率及根系長度的影響不顯著。生根率最高及根系數(shù)量最多的為組合3，即留一個芽+留兩片全葉 + IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L），該處理組合與根系長度最長的組合2相比在根系長度指標(biāo)方面差異不顯著，與插穗新梢率最高的組合1相比在插穗新梢率指標(biāo)方面差異顯著；從生根及根系伸長來看，采用留一個芽+留兩片全葉 + IBA（200 mg/L）+ NAA（80 mg/L）的處理組合效果最好。從多重比較的結(jié)果看出，就生根率而言理論上的最佳組合為留兩個芽 + 留兩片全葉 + IBA（100 mg/L）+ NAA（80 mg/L），結(jié)合其他扦插指標(biāo)綜合分析，留兩片全葉及80 mg/L的NAA濃度對插穗的根系數(shù)量和根系長度均有一定的促進(jìn)作用，插穗僅保留一個芽及更高濃度的IBA誘導(dǎo)更利于插穗的根系數(shù)量及抽梢。究其原因，采用全封閉緊貼覆膜扦插方式能較好保持插穗葉片的葉形及葉色，而保留插穗上較多的葉片數(shù)量有利于光合作用產(chǎn)生光合同化產(chǎn)物供給插穗生根及抽梢[26]；采用枝條上部剪制的插穗，芽數(shù)為1 ～ 2個；枝條中部剪制的插穗，芽數(shù)為2個左右；枝條下部剪制的插穗，芽數(shù)為3個左右；枝條下部剪制的插穗較中上部木質(zhì)化程度高，可能內(nèi)源激素含量相對較少且細(xì)胞分生能力低[25]，進(jìn)而影響插穗生根；插穗的抽芽展葉及根原基誘導(dǎo)均會消耗插穗中的養(yǎng)分[27]。有研究表明，插穗上芽點(diǎn)周圍富集了較多的養(yǎng)分[28]及內(nèi)源激素[29]，插穗留芽數(shù)過少也不利于內(nèi)源激素調(diào)節(jié)誘導(dǎo)根原基的形成。本試驗所設(shè)置的促根劑濃度對生根率的影響不顯著，可能是設(shè)置的促根劑濃度較低或者柬埔寨雙瓣茉莉插穗對低濃度的外源促根劑處理響應(yīng)不明顯。

本試驗發(fā)現(xiàn)柬埔寨雙瓣茉莉扦插生根以皮部生根方式為主，即根原基的形成是在插穗皮下組織內(nèi)發(fā)生，與同種的菊花茉莉生根類型相似[1]。不同的留芽數(shù)量對扦插生根部位有一定影響，留一個芽的插穗以插穗上部生根比例最高，留二個芽的插穗其各部位生根比例差異不顯著，而留三個芽的插穗以插穗下部生根比例最高；從單個插穗來看，生根部位主要集中在插穗芽體及下切口附近。究其原因，剪制插穗時留一個芽的插穗芽體位置均在插穗上部，留兩個芽的插穗芽體位置分布在插穗的上部和下部，留三個芽的插穗芽體位置分布在插穗的上、中、下部，插穗芽點(diǎn)周圍富集較多的養(yǎng)分及內(nèi)源激素，更利于皮部開裂及不定根發(fā)生。在下一步的研究中可結(jié)合生根解剖學(xué)觀察，進(jìn)一步探索柬埔寨雙瓣茉莉插穗根原基誘導(dǎo)發(fā)生的具體部位及不定根發(fā)育過程。